內(nèi)源抑制物對(duì)烏桕種子萌發(fā)的影響1)

李立君 趙婷婷 錢存夢(mèng) 李淑嫻

(南京林業(yè)大學(xué)，南京，210037)

翟金庭

( 鹽城林場(chǎng))

烏桕(Sapiumsebiferum)又名木子樹(shù)、蠟樹(shù)等，是大戟科(Euphorbiaceae)烏桕屬落葉喬木，在我國(guó)已有1 400多年的栽種歷史，是重要的秋色葉樹(shù)種[1-2]。烏桕葉、根、樹(shù)皮均可入藥，具有抑菌、抗炎、殺蟲等作用[3-4]。烏桕種子榨取的固體皮油和液體梓油可制作蠟燭、保護(hù)性涂料、生物柴油等[5-6]，是我國(guó)亞熱帶地區(qū)重要的工業(yè)木本油料樹(shù)種[7]，是國(guó)家林業(yè)和草原局重點(diǎn)倡導(dǎo)開(kāi)發(fā)的生物質(zhì)能源樹(shù)種之一[1]，具有較高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值。

生產(chǎn)上，烏桕以播種繁殖為主，但該種子具有明顯的休眠習(xí)性，休眠雖有利于烏桕的系統(tǒng)發(fā)育[8-9]，但卻給育苗生產(chǎn)帶來(lái)極大不便。李淑嫻等[10]認(rèn)為，內(nèi)源抑制物質(zhì)的存在是導(dǎo)致該種子休眠的重要原因，并且低溫層積和赤霉素(GA3)處理有利于打破種子的休眠。關(guān)于種子發(fā)芽的內(nèi)源抑制物已有較多研究[11-13]，并且不同種子中不僅內(nèi)源抑制物質(zhì)的種類差異較大，而且存在部位也有差異[14-15]。有研究表明，烏桕種子種皮及胚乳中均含有抑制物質(zhì)，但胚乳提取物的抑制活性顯著高于種皮[16-17]。盡管人們對(duì)內(nèi)源抑制物與烏桕種子休眠的關(guān)系開(kāi)展了一些研究，但對(duì)造成其休眠的抑制物質(zhì)的種類的研究較少。為此，本研究以烏桕種子為供試材料，用系統(tǒng)分離法對(duì)低溫層積不同階段種子胚乳的甲醇提取液進(jìn)行分離，并對(duì)各分離相進(jìn)行生物活性測(cè)定；采用氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用和高效液相色譜技術(shù)對(duì)胚乳各分離相組分進(jìn)行分析，篩選種子休眠的內(nèi)源抑制物，并對(duì)這些物質(zhì)的質(zhì)量濃度進(jìn)行動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)，分析內(nèi)源抑制物質(zhì)對(duì)烏桕種子萌發(fā)的影響。旨在為更好地解除烏桕種子的休眠、促進(jìn)育苗生產(chǎn)提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

2020年11月份，烏桕(Sapiumsebiferum)種子采集于江蘇省南京市情侶園。新采集的種子用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1%的NaOH溶液浸泡20 min，去除表面白色的蠟質(zhì)層，種子自然晾干后置于冰箱中4 ℃保存?zhèn)溆?。市售白菜矮腳黃(Brassicarapa)種子，純度≥95.0%，發(fā)芽率≥85%。

1.2 低溫層積處理過(guò)程中烏桕種子發(fā)芽能力的測(cè)定

將烏桕種子在清水中浸泡一定時(shí)間，待其充分吸脹后，將種子與濕潤(rùn)細(xì)沙(濕度以手握成團(tuán)，松開(kāi)即散為宜)按體積比V(種子)∶V(濕潤(rùn)細(xì)沙)為1∶3混勻，置于0～5 ℃層積0(未層積)、40、80、120 d；定期翻動(dòng)種子，保持良好的通氣條件。隨機(jī)數(shù)取層積不同階段的烏桕種子50粒，以濕沙作為發(fā)芽基質(zhì)，在培養(yǎng)箱中25 ℃光照培養(yǎng)，進(jìn)行發(fā)芽試驗(yàn)；以子葉展開(kāi)、胚根伸長(zhǎng)2 cm作為發(fā)芽標(biāo)準(zhǔn)，每天統(tǒng)計(jì)種子的發(fā)芽粒數(shù)，當(dāng)連續(xù)3 d每天的發(fā)芽率不超過(guò)重復(fù)粒數(shù)的1%時(shí)即認(rèn)為發(fā)芽結(jié)束，計(jì)算發(fā)芽率(發(fā)芽種子粒數(shù)與供試種子總數(shù)比值的百分?jǐn)?shù))；試驗(yàn)3個(gè)重復(fù)。發(fā)芽結(jié)束后，未萌發(fā)的種子按國(guó)際種子測(cè)試協(xié)會(huì)(ISTA)[18]的要求，采用四唑染色法測(cè)定其生活力。

1.3 不同層積時(shí)間烏桕種子浸提液生物活性測(cè)定

內(nèi)源抑制物的提?。弘S機(jī)數(shù)取各層積時(shí)間段的種子100粒，剝除種皮，取出胚乳，稱取胚乳5 g。將胚乳粉碎后置于錐形瓶中，再加入50 mL的甲醇溶液(分析純)，在0～4 ℃密閉浸提，每隔一定時(shí)間攪拌1次，使其充分浸提。24 h后，將浸提液置于離心機(jī)中，以5 000 r·min-1的轉(zhuǎn)速離心3 min。取上清液，在60 ℃減壓濃縮蒸餾，將濃縮液定容至5 mL。再以同樣轉(zhuǎn)速離心3 min，取上清液過(guò)0.45 μm微孔濾膜，所得濾液即浸提液。以上操作重復(fù)3次。

抑制物的初步分離：采用系統(tǒng)溶劑法[11-14]對(duì)“內(nèi)源抑制物的提取”中的浸提液進(jìn)行初步分離，將浸提液分離為5個(gè)組分(石油醚相、乙醚相、乙酸乙酯相、甲醇相、水相)。將胚乳各有機(jī)相溶液置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(RE-3000)中濃縮蒸餾，最后將4個(gè)有機(jī)相溶液(石油醚相、乙醚相、乙酸乙酯相、甲醇相)分別用定容瓶定容至100 mL，置于冰箱中4 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>

胚乳各分離相的生物活性測(cè)定：將“抑制物的初步分離”中各分離相的提取液進(jìn)行生物活性測(cè)定——在各培養(yǎng)皿中分別加入5 mL提取液，待有機(jī)相中的溶劑完全揮發(fā)后，再向各培養(yǎng)皿中加入5 mL蒸餾水(水相除外)，并以相同體積蒸餾水作為對(duì)照。隨機(jī)數(shù)取白菜種子100粒，3個(gè)重復(fù)，均勻放在培養(yǎng)皿中，將培養(yǎng)皿置于培養(yǎng)箱中，25 ℃光照培養(yǎng)，進(jìn)行發(fā)芽試驗(yàn)。當(dāng)子葉展開(kāi)、胚根伸長(zhǎng)1 cm時(shí)，認(rèn)為種子萌發(fā)。每8 h統(tǒng)計(jì)發(fā)芽種子數(shù)量，記錄發(fā)芽需要的時(shí)間，發(fā)芽時(shí)間以d為單位。發(fā)芽結(jié)束的標(biāo)準(zhǔn)、發(fā)芽率計(jì)算同上，參考Riis et al.[19]的方法計(jì)算發(fā)芽指數(shù)(Ig)，Ig=∑(Ng/tg)；tg為發(fā)芽時(shí)間；Ng為與tg相對(duì)應(yīng)的時(shí)間點(diǎn)正常發(fā)芽的種子數(shù)。

胚乳各分離相的氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀鑒定：取“抑制物的初步分離”中層積0 d時(shí)各有機(jī)相的濃縮液150 mL，置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中進(jìn)行減壓濃縮蒸餾，將濃縮得到的物質(zhì)用相應(yīng)的有機(jī)溶劑溶解定容至3 mL，得到4個(gè)有機(jī)相提取物的濃縮樣品。取濃縮樣品，在中國(guó)林業(yè)科學(xué)研究院林產(chǎn)化學(xué)工業(yè)研究所分析測(cè)試中心測(cè)試。采用氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀(美國(guó)Agelient 6890N/5973N GC-MS)進(jìn)行內(nèi)源抑制物的分離鑒定，氣相色譜條件——1NNOWAX石英毛細(xì)管柱30 m×250 μm×0.25 μm；柱溫50～280 ℃；升溫程序，50 ℃保持2 min，之后5 ℃·min-1升溫至280 ℃，保持20 min；載氣為氦氣，氣化室溫度325 ℃。質(zhì)譜條件——離子源為電子轟擊電離源(EI)；源溫200 ℃；電離電壓70 eV；收集電流300 μA；發(fā)射電流1 mA；儀器分離率為600。將各分離相萃取液進(jìn)行氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀分析后，得到各有機(jī)相的總離子流色譜圖，將總離子進(jìn)行積分，采用峰面積歸一化法，獲得各有機(jī)物占總質(zhì)量比例。

1.4 層積過(guò)程中烏桕種子部分內(nèi)源抑制物質(zhì)量濃度的測(cè)定

將“內(nèi)源抑制物的提取”中低溫層積不同階段的烏桕種子胚乳提取液樣品送至清華大學(xué)化學(xué)分析測(cè)試中心進(jìn)行測(cè)試。

采用高效液相色譜儀(美國(guó)Agelient HP1100)對(duì)層積不同階段種子胚乳中2,6-二叔丁基對(duì)甲酚、鄰苯二酚的質(zhì)量濃度進(jìn)行動(dòng)態(tài)檢測(cè)。2,6-二叔丁基對(duì)甲酚色譜條件——色譜柱為Discovery C18柱(4.6 mm×250.0 mm×5 μm)，柱溫35 ℃；流動(dòng)相為甲醇-水(梯度洗脫)，洗脫時(shí)間0～7 min時(shí)甲醇體積分?jǐn)?shù)為65%、7～13 min時(shí)甲醇體積分?jǐn)?shù)為65%～100%、13～25 min時(shí)甲醇體積分?jǐn)?shù)為65%，流速為1.0 mL·min-1；檢測(cè)波長(zhǎng)280 nm，進(jìn)樣量為10 μL。鄰苯二酚色譜條件——色譜柱為Discovery C18柱(4.6 mm×250.0 mm×5 μm)，柱溫35 ℃；流動(dòng)相為甲醇-水(40%甲醇+60%水)，等度洗脫，流速為1.0 mL·min-1；檢測(cè)波長(zhǎng)280 nm，進(jìn)樣量為10 μL。

采用氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀(美國(guó)Agelient 6890N/5973N)對(duì)層積不同階段種子胚乳中棕櫚酸、亞油酸的質(zhì)量分?jǐn)?shù)進(jìn)行動(dòng)態(tài)檢測(cè)。兩種脂肪酸的氣相色譜條件——TR-WAXMS(Thermo Scientific，30 m×250 μm×0.25 μm)石英毛細(xì)管柱；進(jìn)樣口250 ℃，載體為高純氮?dú)猓髁繛? mL·min-1，分流比10。升溫程序——80 ℃保持2.5 min，以15 ℃·min-1升溫至210 ℃，然后以2 ℃·min-1升至230 ℃，保持10 min。質(zhì)譜條件——離子源為電子轟擊電離源(EI)；源溫230 ℃；電離電壓70 eV；收集電流300 μA；發(fā)射電流1 mA；儀器分離率600；掃描范圍的質(zhì)荷比(m/z)為45～500。

2 結(jié)果與分析

2.1 層積時(shí)間對(duì)烏桕種子發(fā)芽的影響

由表1可見(jiàn)：層積0 d烏桕種子的發(fā)芽率為0，但采用四唑染色法發(fā)現(xiàn)，這些未萌發(fā)種子的生活力為85.0%；表明絕大部分未萌發(fā)種子仍有發(fā)芽能力，但因存在休眠而不能順利萌發(fā)。隨著層積時(shí)間的延長(zhǎng)，烏桕種子的發(fā)芽率逐漸提高。層積至80 d時(shí)，發(fā)芽率提高至45.0%，未萌發(fā)種子的生活力下降至38.2%，表明此時(shí)仍未能徹底解除烏桕種子的休眠。層積至120 d時(shí)，發(fā)芽率達(dá)到89.3%，已顯著高于前面幾個(gè)處理，且此時(shí)未萌發(fā)種子生活力僅為2.7%，表明種子休眠已全部解除。

表1 層積不同時(shí)間烏桕種子的發(fā)芽率

2.2 烏桕種子胚乳各分離相對(duì)白菜籽發(fā)芽的影響

由表2可見(jiàn)：與對(duì)照相比，各層積階段胚乳的石油醚相、乙酸乙酯相、水相提取液，對(duì)白菜籽的發(fā)芽率和發(fā)芽指數(shù)均無(wú)顯著影響，說(shuō)明這3個(gè)相的提取液對(duì)白菜籽發(fā)芽無(wú)抑制作用。而甲醇相、乙醚相的提取液對(duì)白菜籽發(fā)芽有一定的抑制作用：層積0 d時(shí)，甲醇相提取液處理的白菜籽，其發(fā)芽率為16.0%、發(fā)芽指數(shù)為0.7，與對(duì)照相比分別下降了82.4%、95.5%；此時(shí)的乙醚相中，白菜籽的發(fā)芽率為50.7%、發(fā)芽指數(shù)為4.4，雖比照也有較大的下降，但與甲醇相相比，分別提高了216.9%、528.6%。層積120 d時(shí)，甲醇相的發(fā)芽率為72.9%、發(fā)芽指數(shù)為3.1，比該相層積0 d時(shí)的結(jié)果分別上升了353.8%、342.8%，但仍比對(duì)照下降顯著，分別下降了44.1%、71.8%，說(shuō)明此時(shí)甲醇相的提取物對(duì)白菜籽發(fā)芽的抑制作用減弱，但仍有一定的影響。層積120 d時(shí)，乙醚相中白菜籽的發(fā)芽率為89.9%，略低于對(duì)照，但二者差異不顯著，發(fā)芽指數(shù)為9.6，與對(duì)照相比差異顯著，說(shuō)明此時(shí)乙醚相的提取物雖對(duì)白菜籽發(fā)芽率沒(méi)有影響，但卻使白菜籽的發(fā)芽速度有所下降。

表2 不同層積時(shí)間烏桕種子胚乳各分離相提取液處理的白菜籽發(fā)芽率和發(fā)芽指數(shù)

試驗(yàn)結(jié)果說(shuō)明，隨著層積時(shí)間的延長(zhǎng)，甲醇相和乙醚相的提取液對(duì)白菜籽發(fā)芽的抑制作用在逐漸減弱。在同一層積階段，甲醇相對(duì)白菜籽發(fā)芽的抑制作用較強(qiáng)，乙醚相次之，因此抑制烏桕種子萌發(fā)的物質(zhì)主要存在于甲醇相和乙醚相中。

2.3 層積不同階段各有機(jī)相氣相色譜質(zhì)譜鑒定結(jié)果

未層積的烏桕種子胚乳各分離相提取液，經(jīng)氣相質(zhì)譜鑒定得到總離子流色譜圖(見(jiàn)圖1)。石油醚相共分離出63個(gè)峰，乙醚相共分離出14個(gè)峰，乙酸乙酯相共分離出30個(gè)峰，甲醇相共分離出52個(gè)峰；通過(guò)質(zhì)譜系統(tǒng)檢索并與標(biāo)準(zhǔn)譜圖進(jìn)行比對(duì)，將得到的吻合性較好(相似度高于80)的物質(zhì)列于表3。

a為石油醚相；b為乙醚相；c為乙酸乙酯相；d為甲醇相。

表3 各分離相化合物的種類及占總質(zhì)量比例

從甲醇相鑒定出的有機(jī)化合物共19種，主要為亞油酸、棕櫚酸、鄰苯二酚，其占總質(zhì)量比例分別為9.48%、4.18%、2.80%。乙醚相中鑒定出的物質(zhì)共有9種，主要為2,6-二叔丁基對(duì)甲酚、棕櫚酸，其占總質(zhì)量比例分別為65.37%、4.18%。有許多研究表明，酚類化合物是種子中抑制作用較強(qiáng)的物質(zhì)[16，20-21]，這也是本研究生物測(cè)定中甲醇相、乙醚相的抑制作用較強(qiáng)的原因。石油醚相鑒定出的有機(jī)化合物有29種，主要為烷類、酯類物質(zhì)；乙酸乙酯相鑒定出的有機(jī)化合物有12種，主要為酰胺類物質(zhì)。有研究表明，酰胺類等物質(zhì)具有一定的發(fā)芽抑制作用[22]，但在烏桕胚乳中，它們的占總質(zhì)量比例較低，這是生物測(cè)定中石油醚相、乙酸乙酯相抑制作用較弱的原因。

2.4 解除休眠過(guò)程中4種內(nèi)源抑制物質(zhì)量濃度的動(dòng)態(tài)變化

已有研究表明，胚乳中2,6-二叔丁基對(duì)甲酚、鄰苯二酚、亞油酸、棕櫚酸4種物質(zhì)的發(fā)芽抑制物質(zhì)的有效抑制中質(zhì)量濃度(即半抑制質(zhì)量濃度)分別為54.8[23]、45.7[12]、915.8[24]、602.6 mg/L[25]。由表4可見(jiàn)：2,6-二叔丁基對(duì)甲酚在層積120 d時(shí)的質(zhì)量濃度比層積0 d時(shí)下降了68.5%；雖然質(zhì)量濃度下降明顯，但層積0 d時(shí)的質(zhì)量濃度已經(jīng)明顯低于其半抑制質(zhì)量濃度。鄰苯二酚在層積120 d時(shí)的質(zhì)量濃度比層積0 d時(shí)下降了82.6%，且層積0 d時(shí)的質(zhì)量濃度是其半抑制質(zhì)量濃度的1.3倍，層積120 d時(shí)的質(zhì)量濃度比半抑制質(zhì)量濃度低77.9%。亞油酸在層積120 d時(shí)的質(zhì)量濃度比層積0 d時(shí)下降54.4%，但質(zhì)量濃度始終高于半抑制質(zhì)量濃度。棕櫚酸在層積120 d時(shí)的質(zhì)量濃度比層積0d時(shí)下降了62.0%，層積0 d時(shí)的質(zhì)量濃度是其半抑制質(zhì)量濃度的1.8倍，層積120 d時(shí)的質(zhì)量濃度比半抑制質(zhì)量濃度低32.3%。

表4 休眠解除不同階段的烏桕種子中抑制物質(zhì)的質(zhì)量濃度

2.5 休眠解除過(guò)程中烏桕種子各項(xiàng)指標(biāo)相關(guān)性

由表5可見(jiàn)：層積時(shí)間，與發(fā)芽率之間呈顯著正相關(guān)，與未萌發(fā)種子生活力之間呈顯著負(fù)相關(guān)，說(shuō)明層積能解除種子休眠。層積時(shí)間和發(fā)芽率，與棕櫚酸、2,6-二叔丁基對(duì)甲酚、鄰苯二酚之間均呈顯著負(fù)相關(guān)，與亞油酸之間無(wú)顯著相關(guān)性；未萌發(fā)種子生活力，與棕櫚酸、2,6-二叔丁基對(duì)甲酚、鄰苯二酚之間呈顯著正相關(guān)，與亞油酸之間相關(guān)不顯著。

表5 休眠解除過(guò)程中烏桕種子各指標(biāo)間相關(guān)系數(shù)

3 討論與結(jié)論

許多種子休眠與內(nèi)源抑制物質(zhì)的存在有關(guān)[25-26]。以往對(duì)種子內(nèi)源抑制物的研究主要用系統(tǒng)溶劑法和生物測(cè)定法，鄒雨婷等[27]通過(guò)這兩種方法研究表明，綠山楂(CrataegusviridisL.)種子中抑制作用最強(qiáng)的是乙醚相，其次是甲醇相；李慶梅等[28]研究認(rèn)為，櫟屬(Quercusspp.)種子中對(duì)白菜籽發(fā)芽和生長(zhǎng)影響較大的是甲醇相、乙酸乙酯相。本研究結(jié)果表明，通過(guò)低溫層積解除種子休眠，在層積120 d時(shí)，種子休眠解除；然后采用上述兩種方法提取并分離抑制物，并根據(jù)低溫層積不同階段5個(gè)分離相的生物活性測(cè)定結(jié)果，表明對(duì)白菜籽發(fā)芽抑制作用最強(qiáng)的是甲醇相，其次是乙醚相，且隨著層積時(shí)間的延長(zhǎng)抑制效果逐漸減弱，在試驗(yàn)范圍內(nèi)發(fā)芽抑制物質(zhì)主要存在于甲醇相、乙醚相中。

內(nèi)源抑制物的種類較多，主要包括有機(jī)酸類、酚類、酯類、醛類等[29-30]。已有研究表明種子的休眠性和抑制物含量的變化有關(guān)，楊曉玲等[21]研究認(rèn)為，山楂(C.pinnatifidaBge.)種子休眠的解除與酚類物質(zhì)含量的下降有關(guān)；郝西等[31]研究認(rèn)為，花生(Arachishypogaea)種子休眠性強(qiáng)弱，與油酸含量表現(xiàn)為顯著的正相關(guān)，與亞油酸含量表現(xiàn)為顯著的負(fù)相關(guān)。為探索對(duì)烏桕種子萌發(fā)有影響的物質(zhì)種類，本研究采用氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)技術(shù)分析未層積種子各分離相的組分和占總質(zhì)量比例，同時(shí)借鑒已有的研究成果，從抑制作用較強(qiáng)的甲醇相、乙醚相中，篩選出占總質(zhì)量比例較高的2,6-二叔丁基對(duì)甲酚、鄰苯二酚、亞油酸、棕櫚酸4種對(duì)烏桕種子萌發(fā)有影響的物質(zhì)，并用高效液相色譜、氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)對(duì)休眠解除過(guò)程中上述4種物質(zhì)的質(zhì)量濃度進(jìn)行動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)；本研究結(jié)果表明，層積120 d時(shí)2,6-二叔丁基對(duì)甲酚、鄰苯二酚、亞油酸、棕櫚酸的質(zhì)量濃度比層積0 d時(shí)的質(zhì)量濃度下降幅度較大，分別下降68.5%、82.6%、54.4%、62.0%。雖然亞油酸的質(zhì)量濃度下降幅度也比較大，但變化規(guī)律為“下降-上升-下降”，并且與層積時(shí)間、發(fā)芽率之間無(wú)顯著相關(guān)性，因此亞油酸對(duì)烏桕種子萌發(fā)的影響相對(duì)較小。棕櫚酸、2,6-二叔丁基對(duì)甲酚、鄰苯二酚，與層積時(shí)間、發(fā)芽率之間呈顯著負(fù)相關(guān)；其中鄰苯二酚、棕櫚酸的質(zhì)量濃度，在未層積時(shí)分別比各自的半抑制質(zhì)量濃度高27.0%、78.3%，在層積120 d時(shí)比各自的半抑制質(zhì)量濃度又分別低77.9%、32.3%，可見(jiàn)鄰苯二酚、棕櫚酸的存在是導(dǎo)致烏桕種子休眠的主要原因。2,6-二叔丁基對(duì)甲酚的質(zhì)量濃度在未層積前(36.3 mg/L)已經(jīng)比其半抑制質(zhì)量濃度(CI,50，54.8 mg/L)低33.7%，在層積120 d時(shí)比其半抑制質(zhì)量濃度低79.1%。由于未層積前2,6-二叔丁基對(duì)甲酚的質(zhì)量濃度比較低，其對(duì)烏桕種子萌發(fā)的抑制作用不是特別強(qiáng)，這也是乙醚相對(duì)白菜籽發(fā)芽的抑制率不高的主要原因。

本研究主要篩選了對(duì)烏桕種子的萌發(fā)有影響的內(nèi)源抑制物類別，而內(nèi)源激素對(duì)種子的休眠與萌發(fā)也發(fā)揮著重要作用[32-33]，但氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)不能鑒定激素類物質(zhì)，因此今后有必要深入開(kāi)展內(nèi)源激素物質(zhì)對(duì)烏桕種子萌發(fā)影響的研究。