血清NSE、CA-50、proGRP在食管癌術(shù)后淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移中的水平變化及聯(lián)合檢測價值*

田 濤，楊俊省

山東省棗莊市立醫(yī)院腫瘤科，山東棗莊 277100

食管癌是臨床常見的消化道惡性腫瘤，據(jù)統(tǒng)計，我國食管癌發(fā)病率高達21/10萬，且呈逐年升高趨勢[1-2]。手術(shù)是臨床治療食管癌的主要手段之一，能通過切除癌變病灶達到治療目的，但由于食管淋巴管分布密集、引流途徑復雜，從而導致術(shù)后易發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，進而致使預后較差[3]。及早確診淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、明確轉(zhuǎn)移情況是制訂針對性治療方案的關(guān)鍵所在。血清學指標具有取材方便、檢測耗時短等優(yōu)點，是診斷惡性腫瘤的重要手段，故積極探索較為可靠的血清學指標成為臨床熱點。神經(jīng)元特異性烯醇化酶(NSE)屬于新型腫瘤標志物，糖類抗原-50(CA-50)是傳統(tǒng)腫瘤標志物，胃泌素釋放肽前體(proGRP)是激素類腫瘤標志物，三者均被用于多種惡性腫瘤診斷中，具有良好的診斷價值[4-5]。但關(guān)于三者在食管癌術(shù)后淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移中的水平變化及聯(lián)合檢測價值仍未明確，本研究擬對此進行研究，并進行生存分析，旨在為食管癌的臨床診斷、治療方案的制訂及延長患者生存周期提供參考依據(jù)?，F(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2018年3月至2020年3月本院收治的食管癌術(shù)后淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者102例作為轉(zhuǎn)移組(術(shù)前無轉(zhuǎn)移，隨訪6個月發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移)，其中男75例，女27例；年齡27～72歲，平均(52.31±6.22)歲；病變部位：胸上段8例，胸中段62例，胸下段32例；病理類型：鱗癌91例，腺癌8例，小細胞癌3例；臨床分期：Ⅰ期10例，Ⅱa期59例，Ⅱb期33例。另選同期食管癌術(shù)后無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者61例作為無轉(zhuǎn)移組(術(shù)前無轉(zhuǎn)移，隨訪6個月未發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移)，其中男48例，女13例；年齡25～72歲，平均(51.56±5.89)歲；病變部位：胸上段5例，胸中段39例，胸下段17例；病理類型：鱗癌56例，腺癌4例，小細胞癌1例；臨床分期：Ⅰ期15例，Ⅱa期38例，Ⅱb期8例。兩組年齡、性別、病變部位、病理類型差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)；兩組臨床分期差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。納入標準：均經(jīng)胃鏡病理檢查證實為食管癌；均接受手術(shù)治療；預計生存期>1年。排除標準：術(shù)前已發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者；合并其他良惡性腫瘤者；存在心、肝、腎等其他重要臟器嚴重功能不全者；伴有急慢性感染性疾病者；存在自身免疫性疾病者。本研究經(jīng)本院倫理委員會審批通過?；颊呒凹覍倬?，并簽訂知情同意書。

1.2方法 兩組患者于入院當日采集清晨空腹靜脈血3 mL，離心處理，離心半徑為10 cm，離心速率為2 500 r/min，離心時間為15 min，取上清液，保存于-70 ℃恒溫冰箱內(nèi)，備用。采用購自德國羅氏公司的全自動電化學發(fā)光儀(型號為Roche Cobas E602)及其配套試劑盒檢測血清NSE、CA-50、proGRP水平，嚴格遵循試劑盒說明書進行操作。所有患者均通過門診、電話或微信等方式隨訪1年，剔除失訪病例后統(tǒng)計1年生存率。

1.3觀察指標 (1)兩組血清NSE、CA-50、proGRP水平。(2)血清NSE、CA-50、proGRP對食管癌術(shù)后淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移風險的影響。(3)血清NSE、CA-50、proGRP對食管癌術(shù)后淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的診斷價值。(4)不同淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移度、轉(zhuǎn)移數(shù)、轉(zhuǎn)移域數(shù)患者血清NSE、CA-50、proGRP水平。(5)血清NSE、CA-50、proGRP與食管癌術(shù)后淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況的相關(guān)性。(6)生存分析。

2 結(jié) 果

2.1兩組血清NSE、CA-50、proGRP水平 轉(zhuǎn)移組血清NSE、CA-50、proGRP水平高于無轉(zhuǎn)移組(P<0.05)，見表1。

2.2血清NSE、CA-50、proGRP對食管癌術(shù)后淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移風險的影響 由表1數(shù)據(jù)計算所有患者血清NSE、CA-50、proGRP的均值分別為22.24 ng/mL、49.81 U/mL、99.13 pg/mL，各指標以≥均值為高水平，<均值為低高水平。危險度分析顯示，血清NSE、CA-50、proGRP高水平患者發(fā)生術(shù)后淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的風險分別是低水平患者的3.086倍(95%CI：2.115～4.503)、11.855倍(95%CI：5.110～27.504)、2.538倍(95%CI：1.781～3.617)，均P<0.05，見表2。

表1 兩組血清NSE、CA-50、proGRP水平比較

表2 血清NSE、CA-50、proGRP對食管癌術(shù)后淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移風險的影響(n)

2.3血清NSE、CA-50、proGRP對食管癌術(shù)后淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的診斷價值 以轉(zhuǎn)移組作為陽性標本，無轉(zhuǎn)移組作為陰性標本，繪制ROC曲線，結(jié)果顯示，血清NSE、CA-50、proGRP單獨檢測診斷食管癌術(shù)后淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的曲線下面積(AUC)分別為0.735(95%CI：0.660～0.801)、0.835(95%CI：0.768～0.888)、0.815(95%CI：0.746～0.871)，3項指標聯(lián)合檢測診斷食管癌術(shù)后淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的AUC為0.927(95%CI：0.876～0.962)，大于各指標單獨診斷，見表3、圖1。

表3 血清NSE、CA-50、proGRP對食管癌術(shù)后淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的診斷價值

圖1 血清NSE、CA-50、proGRP對食管癌術(shù)后淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的診斷價值

2.4不同淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況患者血清NSE、CA-50、proGRP水平 單因素方差分析顯示，不同淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移度、轉(zhuǎn)移數(shù)、轉(zhuǎn)移域數(shù)患者血清NSE、CA-50、proGRP水平差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移度>40%的患者血清NSE、CA-50、proGRP水平均高于淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移度在20%～40%及<20%的患者(P<0.05)；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移度在20%～40%的患者血清NSE、CA-50、proGRP水平均高于淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移度<20%的患者(P<0.05)?！?枚淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者血清NSE、CA-50、proGRP水平均高于3枚、2枚、1枚淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者(P<0.05)，3枚淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者血清NSE、CA-50、proGRP水平均高于2枚、1枚淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者(P<0.05)，2枚淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者血清NSE、CA-50、proGRP水平高于1枚淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者(P<0.05)；轉(zhuǎn)移域數(shù)≥2個的患者血清NSE、CA-50、proGRP水平高于1個轉(zhuǎn)移域的患者(P<0.05)。見表4。

表4 不同淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況患者血清NSE、CA-50、proGRP水平比較

2.5血清NSE、CA-50、proGRP與食管癌術(shù)后淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況的相關(guān)性 Spearman相關(guān)分析顯示，血清NSE、CA-50、proGRP與食管癌術(shù)后淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移度、轉(zhuǎn)移數(shù)、轉(zhuǎn)移域數(shù)呈正相關(guān)(r>0,P<0.05)，見表5。

表5 血清NSE、CA-50、proGRP與食管癌術(shù)后淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況的相關(guān)性

續(xù)表5 血清NSE、CA-50、proGRP與食管癌術(shù)后淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況的相關(guān)性

2.6生存分析 隨訪1年，轉(zhuǎn)移組失訪3例。以ROC曲線獲取的血清NSE、CA-50、proGRP最佳截斷值為界分為陽性與陰性，NSE≥21.92 ng/mL為陽性、NSE<21.92 ng/mL為陰性，CA-50≥45.08 U/mL為陽性、CA-50<45.08 U/mL為陰性，proGRP≥76.15 pg/mL、proGRP<76.15 pg/mL為陰性。K-M曲線分析顯示，轉(zhuǎn)移組血清NSE、CA-50、proGRP陽性患者1年生存率低于陰性患者(Log-rankχ2=2.704、3.258、2.816，P<0.05)，見圖2。

圖2 轉(zhuǎn)移組不同血清NSE、CA-50、proGRP水平患者1年生存曲線

3 討 論

相關(guān)資料數(shù)據(jù)統(tǒng)計顯示，胸段食管癌腹腔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移發(fā)生率約為26%，頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移發(fā)生率約為30%，縱膈淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移發(fā)生率約為34%，防治形勢極為嚴峻[6-8]。同時，國內(nèi)外研究均證實，食管癌具有術(shù)后易發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的特點，且術(shù)后淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移是導致患者術(shù)后死亡的重要因素之一，需給予重視[9-10]。因此，積極探索較為可靠的指標早期診斷食管癌術(shù)后淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移對于提高術(shù)后生存率具有重要意義。

NSE屬于細胞內(nèi)的大分子蛋白質(zhì)，近年來有報道指出，其血清水平在肺癌、卵巢癌等多種惡性腫瘤中呈異常升高趨勢，可作為惡性腫瘤發(fā)生的血清學標志物[11-12]。CA-50是常規(guī)糖類抗原類腫瘤標志物，主要在肺部、胃部、肝部、結(jié)腸、膽囊、胰腺、子宮等多種器官、組織的糖脂及高分子糖蛋白中分布，參與上述器官、組織的惡性腫瘤發(fā)生過程[13-14]。proGRP屬于胃泌素釋放肽的前體結(jié)構(gòu)，在腫瘤組織中呈高表達狀態(tài)[15]。相關(guān)研究表明，與健康者、食管良性病變患者相比，血清NSE、CA-50、proGRP在食管癌患者中的水平明顯較高，可見三者均參與食管癌發(fā)生[16-17]。在此基礎(chǔ)上，本研究結(jié)果顯示，轉(zhuǎn)移組血清NSE、CA-50、proGRP水平高于無轉(zhuǎn)移組，且高水平患者發(fā)生術(shù)后淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的風險明顯升高，說明血清NSE、CA-50、proGRP不僅參與食管癌發(fā)生過程，還會促進術(shù)后淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。分析其原因，主要有以下方面：(1)NSE與腫瘤生長、增殖密切相關(guān)，在炎癥及腫瘤生長環(huán)境中，NSE會由細胞內(nèi)大量釋放出來，發(fā)揮控制腫瘤細胞生長的作用，還具有上調(diào)血管內(nèi)皮生長因子表達、加速腫瘤內(nèi)部新生血管生成的作用，從而在食管癌術(shù)后淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移中發(fā)揮促進作用[18]。(2)有報道顯示，細胞發(fā)生惡性病變時或激活胚胎期的轉(zhuǎn)化酶或?qū)е绿腔D(zhuǎn)化酶失活，從而促使細胞表面糖類結(jié)構(gòu)及抗原性質(zhì)改變，進而造成糖類抗原過多合成、釋放，形成腫瘤標志物，且隨著腫瘤細胞不斷生長、侵襲、擴散，糖類抗原含量呈逐漸增加趨勢[19]。故CA-50水平在食管癌術(shù)后淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移中顯著升高。(3)proGRP是新被發(fā)現(xiàn)的激素類腫瘤標志物，具有調(diào)控細胞周期、減弱上皮細胞分化和成熟能力，導致在惡性腫瘤發(fā)展過程中腫瘤細胞由G1期轉(zhuǎn)化為S期的時間顯著縮短，從而加速癌細胞增殖、轉(zhuǎn)移，促進淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移[20]。提示臨床可將血清NSE、CA-50、proGRP作為診斷食管癌術(shù)后淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的血清學指標。本研究進一步分析發(fā)現(xiàn)，血清NSE、CA-50、proGRP雖然均對食管癌術(shù)后淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移具有一定診斷價值，但仍存在較大局限性，故嘗試探討3項指標聯(lián)合檢測的診斷價值，結(jié)果顯示，3項指標聯(lián)合檢測的診斷價值明顯高于各指標單獨診斷，為臨床提供可靠的診斷思路。

本研究還表明，血清NSE、CA-50、proGRP水平隨淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移度、轉(zhuǎn)移數(shù)、轉(zhuǎn)移域數(shù)增加呈逐漸升高趨勢，與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移度、轉(zhuǎn)移數(shù)、轉(zhuǎn)移域數(shù)呈正相關(guān)，可見血清NSE、CA-50、proGRP還能用于評估食管癌術(shù)后淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移度、轉(zhuǎn)移數(shù)、轉(zhuǎn)移域數(shù)，有利于制訂針對性治療方案，從而控制淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移進展。此外，隨訪1年，轉(zhuǎn)移組血清NSE、CA-50、proGRP陽性患者1年生存率低于陰性患者，說明上述指標血清水平還會影響生存預后。但本研究未詳細探討血清NSE、CA-50、proGRP對食管癌術(shù)后淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者長期預后的預測價值，今后需作進一步探討與分析，以便為臨床提供更全面的數(shù)據(jù)支持。

綜上所述，血清NSE、CA-50、proGRP水平升高會顯著增加食管癌術(shù)后淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移風險，會對生存預后產(chǎn)生不利影響，這3項指標聯(lián)合檢測診斷食管癌術(shù)后淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的價值較高。