一例SOX10基因缺失所致的Waardenburg綜合征2型合并低促性腺激素性性腺功能減退癥的診斷和基因檢測(cè)分析

王思琪，陳陽(yáng)，羅寬宏，史寧杰，肖康麗，崔振海，曾天舒，黎慧清

遺傳資源

一例基因缺失所致的Waardenburg綜合征2型合并低促性腺激素性性腺功能減退癥的診斷和基因檢測(cè)分析

王思琪，陳陽(yáng)，羅寬宏，史寧杰，肖康麗，崔振海，曾天舒，黎慧清

華中科技大學(xué)附屬協(xié)和醫(yī)院內(nèi)分泌科，武漢 430000

低促性腺激素性性腺功能減退癥(hypogonadotropic hypogonadism, HH)是以下丘腦–垂體–性腺激素軸功能障礙為主要特征的一類(lèi)疾病，可致性激素水平低和生育能力受損。伴隨嗅覺(jué)喪失/減退的HH被稱(chēng)為Kallmann綜合征(Kallmann syndrome, KS)。Waardenburg綜合征(Waardenburg syndrome, WS)是一種罕見(jiàn)的常染色體顯性遺傳病，以感音神經(jīng)性聽(tīng)力損失以及色素沉著異常為主要特征。本研究收集1例不明原因的低促性腺激素性性腺功能減退和先天性耳聾患者的臨床資料，該患者進(jìn)入青春期后無(wú)明顯第二性征發(fā)育，在22q13.1區(qū)域(Chr.22:38106433-38525560)存在雜合缺失，至少419 kb，此區(qū)域覆蓋了基因?；颊吒改浮⒚妹没驕y(cè)序分析未見(jiàn)異常。通過(guò)總結(jié)分析該病例特點(diǎn)，分析探討低促性腺激素性性腺功能減退癥與Waardenburg綜合征2型在分子生物學(xué)上的病因關(guān)聯(lián)，豐富后續(xù)遺傳學(xué)研究的臨床資料，同時(shí)為此類(lèi)疾病的診療措施提供參考。

Waardenburg綜合征；低促性腺激素性性腺功能減退癥；Kallmann綜合征；基因；突變

低促性腺激素性性腺功能減退癥(hypogo-nadotro-pic hypogonadism, HH)是以下丘腦–垂體–性腺激素軸功能障礙為主要特征的一類(lèi)疾病，可致睪丸激素水平低和生育能力受損。HH可伴有其他幾種臨床特征，例如嗅覺(jué)喪失、聽(tīng)力損失以及唇腭裂等，伴隨嗅覺(jué)減退/喪失的HH被稱(chēng)為Kallmann綜合征(Kallmann syndrome, KS)[1]。Kallmann綜合征發(fā)病率低且存在性別差異，男性約為1/10,000，女性約為1/50,000。其病因可能是在胚胎發(fā)育過(guò)程中嗅覺(jué)軸突異常發(fā)育和GnRH神經(jīng)元遷移破壞[2]。已知有20多個(gè)基因突變與Kallmann綜合征相關(guān)[3]。2013年，Pingault等[4]發(fā)現(xiàn)基因突變與Kallmann綜合征的發(fā)生密切相關(guān)，并且大多數(shù)患者具有聽(tīng)力障礙。隨后，攜有基因突變的Kallmann綜合征患者在國(guó)內(nèi)外接連報(bào)道[5～8]。這些研究表明突變或是Kallmann綜合征的罕見(jiàn)遺傳原因。

最初發(fā)現(xiàn)于Waardenburg綜合征(Waardenburg syndrome, WS)患者[9]。Waardenburg綜合征是一種罕見(jiàn)的常染色體顯性遺傳病，以感音神經(jīng)性聽(tīng)力損失以及色素沉著異常為其主要特征，人群發(fā)病率低，約為1/42,000。目前根據(jù)不同的伴隨表型可分為4種亞型。已證實(shí)和等6個(gè)基因的致病性突變與Waardenburg綜合征的不同亞型相關(guān)。已證實(shí)為Waardenburg綜合征2型(WS2)和Waardenburg綜合征4型(WS4)的重要致病基因[10]。

本研究報(bào)道了1例患有HH合并Waardenburg綜合征2型的男性患者，對(duì)患者進(jìn)行嗅覺(jué)檢查后提示嗅覺(jué)功能減退，該患者可能同時(shí)患有Waardenburg綜合征2型和Kallmann綜合征，基因檢測(cè)發(fā)現(xiàn)了22q13.1區(qū)域存在至少419 kb的缺失(覆蓋了基因)，目前國(guó)內(nèi)外尚未見(jiàn)報(bào)道，屬于新發(fā)突變。此突變進(jìn)一步豐富了Waardenburg綜合征2型的基因突變譜，為后續(xù)的遺傳學(xué)研究提供新的線(xiàn)索。

1 對(duì)象與方法

1.1 對(duì)象及臨床資料收集

患者，男性，18歲，因青春期第二性征發(fā)育不良就診于華中科技大學(xué)附屬協(xié)和醫(yī)院內(nèi)分泌科。對(duì)先證者進(jìn)行全面體格檢查、臨床聽(tīng)力學(xué)評(píng)估(純音測(cè)聽(tīng)、聲導(dǎo)抗、聽(tīng)性腦干反應(yīng)、穩(wěn)態(tài)聽(tīng)覺(jué)誘發(fā)電位、畸變產(chǎn)物耳聲發(fā)射)、影像學(xué)檢查(左手骨齡片、顳骨CT、垂體CT、陰囊B超)、實(shí)驗(yàn)室檢查，詢(xún)問(wèn)既往史、家族史，并抽取先證者及其父母、妹妹每人5 mL外周靜脈血進(jìn)行基因組DNA制備及候選基因突變的篩查。本研究獲得華中科技大學(xué)附屬協(xié)和醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，患者及其父母均簽署知情同意書(shū)。

1.2 基因組DNA提取及文庫(kù)制備

采用磁珠法血液基因組DNA提取試劑盒(天根生化科技北京有限公司)，提取基因組DNA。對(duì)DNA樣本進(jìn)行檢測(cè)：(1)瓊脂糖凝膠電泳分析DNA降解程度以及有無(wú)RNA或蛋白等污染；(2)使用Qubit 3.0對(duì)DNA濃度進(jìn)行精準(zhǔn)定量。使用Agilent 2100生物分析儀進(jìn)行質(zhì)控，文庫(kù)主峰要在270～320 bp左右，主峰前后無(wú)雜峰。

1.3 目的基因捕獲與高通量測(cè)序

采用液相捕獲技術(shù)對(duì)將自定義的捕獲區(qū)域進(jìn)行高效、特異富集，富集后在Illumina HiSeq X10測(cè)序平臺(tái)上進(jìn)行雙端高通量、高深度測(cè)序，讀長(zhǎng)為150 bp。

1.4 生物信息分析與數(shù)據(jù)篩選

使用軟件SOAPnuke過(guò)濾處理原始數(shù)據(jù)，去除接頭和低質(zhì)量數(shù)據(jù)以得到高質(zhì)量數(shù)據(jù)。使用比對(duì)軟件BWA比對(duì)到人的參考基因組(hg19版本)，對(duì)測(cè)序深度、覆蓋度、比對(duì)率等評(píng)價(jià)指標(biāo)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。使用GATK(v3.3) BaseRecalibrator模塊進(jìn)行堿基質(zhì)量值重校正(base quality recalibration)，使用GATK HaplotypeCaller模塊檢測(cè)基因組變異中的單核苷酸多態(tài)性(single nucleotide polymorphisms, SNPs)和插入缺失突變(InDels)。篩選得到SNPs及InDels在千人基因組、ExAC_ALL、ExAC_EAS、gnomAD正常人群數(shù)據(jù)庫(kù)頻率≤0.05，且經(jīng)過(guò)Varcard、PolyPhen2、MutationTaster、LRT等數(shù)據(jù)庫(kù)預(yù)測(cè)結(jié)果均為致病性的位點(diǎn)作為與疾病相關(guān)的候選位點(diǎn)，同時(shí)結(jié)合臨床表型(HPO記錄)利用軟件Exomiser進(jìn)行致病位點(diǎn)篩選。使用基于測(cè)序覆蓋深度的算法檢測(cè)拷貝數(shù)變異(copy number variation, CNV)。

1.5 實(shí)時(shí)定量多聚核苷酸鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(real time quantitative polymerase chain reaction, RT-qPCR)

根據(jù)先證者篩選得到候選變異區(qū)域，設(shè)計(jì)合成擴(kuò)增目的區(qū)域所需要的引物序列。缺失區(qū)域：Forward1 5′-CCAGACAGGTAACACGCATGAA-3′, Reverse1 5′-GGTGACTTGACTTGCCTCCAG-3′; Forward2 5′-GGTCTCGGGACAACAGAACAAA-3′, Reverse2 5′-ACATTAGGAACATGGCGGAAGG-3′?；蛞铮篎orward 5′-CCCACACAAC-GA-GAAGCTCC-3′, Reverse 5′-ACTTGTCGATATTGC-CCTTGATG-3′。使用QuantStudio 5實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀(美國(guó)Applied Biosystems公司)對(duì)先證者及父母DNA樣本進(jìn)行RT-qPCR檢測(cè)，使用QuantStudio? Design & Analysis Software軟件計(jì)算相對(duì)表達(dá)值。

2 結(jié)果與分析

2.1 患者的臨床表現(xiàn)

患者出生后父母發(fā)現(xiàn)其對(duì)聲音無(wú)反應(yīng)，遂至醫(yī)院診斷為“先天性感音神經(jīng)性耳聾”，行“人工耳蝸植入術(shù)”?；颊呒议L(zhǎng)于其5歲時(shí)發(fā)現(xiàn)陰莖短小，入院檢查后予以注射用絨促性素(HCG)治療3次，身高與同齡兒相似，余未見(jiàn)明顯異常?；颊哌M(jìn)入青春期后自覺(jué)無(wú)明顯第二性征發(fā)育，至我科就診，體檢未見(jiàn)喉結(jié)，外陰呈幼稚狀態(tài)，Tanner分期1～2期，陰莖長(zhǎng)約4～5 cm，未見(jiàn)腋毛、陰毛，心肺腹查體未見(jiàn)異常，智力發(fā)育正常。既往：先天性耳聾，行“人工耳蝸植入術(shù)”，否認(rèn)耳外傷史，否認(rèn)耳毒性藥物服用史，否認(rèn)先天性巨結(jié)腸史，否認(rèn)家族遺傳病史。先證者父母及妹妹均無(wú)耳聾、色素異常、內(nèi)眥外移等異常。入院后查體：身高：171 cm，體重：44 kg，體重指數(shù)：15.0 kg/m2，血壓：93/63 mmHg。雙側(cè)虹膜上緣藍(lán)染，前額散在少許白發(fā)，未見(jiàn)喉結(jié)。無(wú)男性乳腺發(fā)育，無(wú)腋毛、陰毛生長(zhǎng)，陰莖長(zhǎng)約4～5 cm，Tanner分期1～2期。無(wú)皮膚色素沉著，無(wú)內(nèi)眥外移，無(wú)鼻根寬大，雙側(cè)耳廓外形正常，外耳道通暢(Waardenburg綜合征常見(jiàn)并發(fā)癥)。嗅覺(jué)減退，無(wú)唇/腭裂、手指縮短、牙齒缺失，無(wú)腎臟缺失，無(wú)智力運(yùn)動(dòng)方面異常(Kallmann綜合征常見(jiàn)并發(fā)癥)。聽(tīng)力學(xué)檢查：純音測(cè)聽(tīng)檢查提示雙耳極重度感音神經(jīng)性聾。聲導(dǎo)抗提示雙耳“A”型曲線(xiàn)。聽(tīng)性腦干反應(yīng)和穩(wěn)態(tài)聽(tīng)覺(jué)誘發(fā)電位提示雙耳極重度感音神經(jīng)性聾，畸變產(chǎn)物耳聲發(fā)射提示雙耳均未通過(guò)。影像學(xué)檢查：顳骨、骨迷路CT掃描提示雙側(cè)半規(guī)管發(fā)育異常，雙側(cè)耳蝸、中耳乳突未見(jiàn)明顯異常。左手骨齡片提示骨齡推遲(骨齡約13歲)。陰囊超聲顯示雙側(cè)睪丸體積偏小，左右側(cè)睪丸大小分別約為28.9×12.9 mm、29.6×13.9 mm，不存在隱睪癥。垂體CT提示垂體體積偏小。實(shí)驗(yàn)室檢查：結(jié)果見(jiàn)表1。睪酮0.81 nmol/L (正常參考值：Tanner 5期：6.5～30.6 nmol/L)，促性腺激素LH2.6 IU/L (正常參考值：1.7～8.6 IU/L)和FSH 2.45 IU/L (正常參考值：1.5～12.4 IU/L)，單次促性腺激素釋放激素(GnRH)刺激反應(yīng)后，LH水平從基礎(chǔ)值1.40 IU/L增加到12.67 IU/L，F(xiàn)SH水平從基礎(chǔ)值1.63 IU/L增加到5.01 IU/L (正常參考值：注射GnRH后，F(xiàn)SH平均增加0.5～2.0倍，LH平均增加>5倍)；人絨毛膜促性腺激素(HCG)刺激3天后血漿睪酮水平從0.51 nmol/L提高到8.26 nmol/L (正常參考值：注射HCG后，睪酮平均增加0.5～2.0倍)。促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)、皮質(zhì)醇、甲功、胰島素樣生長(zhǎng)因子-1(IGF-1)無(wú)異常。

表1 患者實(shí)驗(yàn)室檢查結(jié)果

患者入院后睪酮水平極低，促性腺激素水平處于正常低限，戈那瑞林興奮實(shí)驗(yàn)提示垂體對(duì)GnRH反應(yīng)良好，人絨毛膜促性腺激素興奮實(shí)驗(yàn)提示睪丸對(duì)促性腺激素反應(yīng)良好，ACTH、皮質(zhì)醇、甲狀腺功能無(wú)異常，排除由于垂體和睪丸功能障礙導(dǎo)致的青春期第二性征發(fā)育不良，診斷為低促性腺激素性性腺功能減退癥，結(jié)合患者嗅覺(jué)功能減退，懷疑其患有Kallmann綜合征。同時(shí)，患者患有先天性感音神經(jīng)性耳聾和虹膜色素異常，無(wú)內(nèi)眥外移，無(wú)鼻根寬大，無(wú)先天性巨結(jié)腸史，考慮其為罕見(jiàn)病Waarden-burg綜合征2型。

2.2 基因檢測(cè)結(jié)果分析

高通量測(cè)序結(jié)果顯示先證者22q13.1區(qū)域(Chr.22:38106433-38525560)存在雜合缺失，至少419 kb，(圖1，圖2)此區(qū)域覆蓋了基因。上述變異導(dǎo)致蛋白質(zhì)未能編碼，引起蛋白功能缺失。此拷貝數(shù)變異人類(lèi)基因組多態(tài)性數(shù)據(jù)庫(kù)尚未有報(bào)道。根據(jù)美國(guó)醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)和基因組學(xué)學(xué)會(huì)(American College of Medical Genetics and Genomics, ACMG)拷貝數(shù)分類(lèi)標(biāo)準(zhǔn)與指南，檢出變異歸類(lèi)為“致病”。先證者父母及妹妹22q13.1區(qū)域拷貝數(shù)正常。先證者22q13.1微缺失(涉及基因)是新發(fā)突變可能性大。

圖1 高通量測(cè)序結(jié)果

A：先證者(受檢者)及其父親(參考1)、母親(參考2)、妹妹(參考3)、正常人(參考4)的高通量測(cè)序圖；B：先證者(受檢者)及其父親(參考1)、母親(參考2)、妹妹(參考3)、正常人(參考4)的高通量測(cè)序圖。

圖2 RT-qPCR檢測(cè)體細(xì)胞中22q13.1缺失區(qū)域的相對(duì)表達(dá)量

3 討論

迄今為止，包括本例在內(nèi)，已報(bào)道的攜帶突變的19例Kallmann綜合征患者中，16例患有單側(cè)或者雙側(cè)感音性神經(jīng)性耳聾，占突變的84%。此外，42%的患者表現(xiàn)出色素沉著異常和其他典型的Waardenburg綜合征臨床表現(xiàn)，見(jiàn)表2?？梢?jiàn)，突變的Kallmann綜合征患者有多種臨床特征與Waardenburg綜合征相似。因此推測(cè)，這兩種疾病之間存在一定的關(guān)聯(lián)。

表2 攜帶SOX10突變KS患者的臨床特征

年齡為DNA取樣時(shí)的年齡，一般是確認(rèn)診斷時(shí)的年齡。

SOX10屬于一個(gè)由20個(gè)性別決定區(qū)域Y (sex-determining region Y, SRY)相關(guān)的高遷移率組盒(SOX)蛋白組成的家族，家族內(nèi)大部分蛋白參與了多種細(xì)胞系的細(xì)胞類(lèi)型規(guī)范和分化[9]。SOX10轉(zhuǎn)錄因子最初被定義為神經(jīng)膠質(zhì)轉(zhuǎn)錄因子，在神經(jīng)嵴的發(fā)育過(guò)程中發(fā)揮了不可或缺的作用。神經(jīng)嵴是一種出現(xiàn)在神經(jīng)和非神經(jīng)外胚層的特定細(xì)胞群，可衍生為嗅鞘細(xì)胞、黑素細(xì)胞、腸神經(jīng)節(jié)細(xì)胞以及許多自主神經(jīng)節(jié)和感覺(jué)神經(jīng)節(jié)細(xì)胞。Waardenburg綜合征和Kallmann綜合征的典型臨床表現(xiàn)分別與黑素細(xì)胞和嗅鞘細(xì)胞發(fā)育過(guò)程中的功能缺陷密切相關(guān)。脊椎動(dòng)物中的所有黑素細(xì)胞，包括血管紋中間細(xì)胞(耳蝸黑素細(xì)胞)，均來(lái)自于神經(jīng)嵴[16]。在黑素細(xì)胞中，SOX10協(xié)同PAX3與啟動(dòng)子相結(jié)合以激活，而后誘導(dǎo)黑素細(xì)胞特異性蛋白多巴色素互變異構(gòu)酶(dopachrome tautomerase, DCT)和酪氨酸酶(tyrosinase, TYR)的表達(dá)，在黑色素合成過(guò)程中起重要作用[17～19]。此外，SOX10可聯(lián)合MITF促進(jìn)BRG1向黑素細(xì)胞特異性基因的遠(yuǎn)端增強(qiáng)子的募集，促進(jìn)黑素細(xì)胞功能基因表達(dá)[20]。的缺失突變可造成皮膚黑色素細(xì)胞和內(nèi)耳黑色素細(xì)胞的發(fā)育缺陷，導(dǎo)致色素沉著異常以及感音神經(jīng)性聽(tīng)力損失等Waardenburg綜合征的典型臨床表現(xiàn)。Waardenburg綜合征4型病例的先天性巨結(jié)腸癥狀亦與缺失導(dǎo)致腸神經(jīng)系統(tǒng)的異常發(fā)育有關(guān)[21]。嗅鞘細(xì)胞是一種獨(dú)特的神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞，它能包裹嗅神經(jīng)軸突束，支持和引導(dǎo)其穿過(guò)篩骨板長(zhǎng)入嗅球，是嗅球發(fā)育和GnRH神經(jīng)元遷移過(guò)程的重要結(jié)構(gòu)[22,23]。突變可能會(huì)導(dǎo)致嗅鞘細(xì)胞的缺失。在基因敲除小鼠中，嗅鞘細(xì)胞顯著減少，導(dǎo)致嗅覺(jué)神經(jīng)通路的神經(jīng)纖維聚集成束障礙與靶向缺陷，同時(shí)，GnRH細(xì)胞沿此路徑遷移至下丘腦的過(guò)程受損，從而造成嗅覺(jué)缺失或減退和性腺功能障礙等Kallmann綜合征的典型臨床表現(xiàn)[4]。因此，突變可能是Kallmann綜合征和Waardenburg綜合征的共同致病因素。

本文報(bào)道了1例患有HH合并Waardenburg綜合征2型的男性患者，對(duì)患者進(jìn)行嗅覺(jué)檢查后提示患者嗅覺(jué)功能減退?；驒z測(cè)發(fā)現(xiàn)患者22q13.1區(qū)域(Chr.22:38106433-38525560)存在雜合缺失，至少419 kb，此區(qū)域涉及等14個(gè)蛋白編碼基因，且完全覆蓋了基因。據(jù)此，該患者可能同時(shí)患有Waardenburg綜合征2型和Kallmann綜合征。

在既往報(bào)道的攜帶突變的Kallmann綜合征患者中皆為基因出現(xiàn)點(diǎn)突變，本例患者的染色體微缺失所致的基因的丟失是首次報(bào)道。雖然突變類(lèi)型不盡相同，但19例患者皆屬于單拷貝突變。19例攜帶突變的Kallmann綜合征患者中表型不全相同，有1例伴隨出現(xiàn)智力障礙，另1例伴隨出現(xiàn)先天性巨結(jié)腸。部分突變可導(dǎo)致外周脫髓鞘神經(jīng)病變、中樞性脫髓鞘性腦白質(zhì)病變、Waardenburg綜合征和先天性巨結(jié)腸，統(tǒng)稱(chēng)為PCWH (peripheral demyelinating neuropathy, central dysmyelination, Waardenburg syndrome, Hirschsprung disease)[9,24,25]。上述兩種臨床癥狀或是PCWH綜合征的部分表現(xiàn)。目前已有研究表明[9]，基因的突變位置和類(lèi)型與表型存在一定關(guān)聯(lián)。位于22q13.1，包含5個(gè)外顯子，外顯子1和2是非編碼外顯子，起始密碼子位于外顯子3，終止密碼子位于外顯子5。先前的研究表明[24]，的任一編碼外顯子的截?cái)嗤蛔兌伎捎|發(fā)無(wú)義介導(dǎo)的RNA降解途徑(nonsense-mediated mRNA decay, NMD)，因此，大多數(shù)突變會(huì)導(dǎo)致單倍體不足。但最后一個(gè)外顯子發(fā)生截?cái)嗤蛔儠r(shí)可逃避NMD的識(shí)別，大量具有顯性負(fù)性功能的突變蛋白生成，導(dǎo)致PCWH。本例患者基因完全丟失，無(wú)截?cái)嗟鞍桩a(chǎn)生，未出現(xiàn)PCWH相關(guān)的嚴(yán)重表型。目前有2例基因純和突變的病例報(bào)道，在胎兒時(shí)期即出現(xiàn)致命表型，如心肺發(fā)育不全，提示純合缺失具有致死性[26,27]。

典型的Kallmann綜合征有低促性腺激素性性腺功能減退癥和嗅覺(jué)缺失或低下2大主要特征。迄今為止，Kallmann綜合征患者中發(fā)現(xiàn)了20余個(gè)突變基因，如等常見(jiàn)突變基因。低促性腺激素性性腺功能減退癥(HH)是影響Kallmann綜合征患者生活質(zhì)量的主要癥狀。對(duì)于6～12月齡新生兒，隱睪癥首選手術(shù)治療。激素替代治療應(yīng)根據(jù)治療目的進(jìn)行調(diào)整。對(duì)于確診患者，治療的主要目的是誘導(dǎo)和維持第二性征，部分患者或有生育需求。對(duì)于青春期男性，采用睪酮或促性腺激素(人絨毛膜促性腺激素和促卵泡激素)進(jìn)行青春期第二性征的發(fā)育誘導(dǎo)。對(duì)于有生育要求的Kallmann綜合征成年男性患者，應(yīng)采用脈沖式GnRH和促性腺激素治療[28]。在青春期女孩中，使用17β-雌二醇誘導(dǎo)青春期發(fā)育，在乳房完全發(fā)育后應(yīng)添加孕酮。對(duì)于沒(méi)有生育意愿的KS女性，也可以采用雌激素–孕激素治療。對(duì)于有生育要求的女性，采取脈沖式GnRH和促性腺激素治療來(lái)模擬GnRH生理分泌模式[29]。KS患者經(jīng)過(guò)及時(shí)、適當(dāng)?shù)募に靥娲委熀?，可出現(xiàn)第二性征，維持正常的性激素水平，恢復(fù)生育能力。本例患者目前給予注射人絨毛膜促性腺激素，肌注2000 IU/次，每周2次，以誘導(dǎo)患者第二性征發(fā)育。目前多例病例報(bào)道[5,8]顯示患者對(duì)上述治療措施的反應(yīng)較好，但針對(duì)上述治療措施，伴隨基因突變的Kallmann綜合征患者與其他低促性腺激素性腺功能減退癥患者的療效差異暫無(wú)報(bào)道。

是Waardenburg綜合征2型和4型的重要致病基因[10]。感音神經(jīng)性聽(tīng)力損失是影響Waardenburg綜合征患者健康和生活質(zhì)量的主要癥狀。常見(jiàn)的治療方法是佩戴助聽(tīng)器和人工耳蝸植入。對(duì)于有雙側(cè)聽(tīng)力障礙的患者，應(yīng)盡早植入人工耳蝸，避免影響患兒后天語(yǔ)言發(fā)育；對(duì)于單側(cè)聽(tīng)力障礙者，應(yīng)注意保護(hù)健耳。但助聽(tīng)器和人工耳蝸植入仍存在一些缺點(diǎn)。助聽(tīng)器依賴(lài)于殘余聽(tīng)力，對(duì)重度耳聾療效較差。人工耳蝸植入佩戴者還面臨著許多聽(tīng)力挑戰(zhàn)，如術(shù)后治療效果不確定、佩戴體驗(yàn)不舒適或不方便、終生康復(fù)維護(hù)費(fèi)用昂貴等。近年來(lái)，研究者們從基因和細(xì)胞的層面尋找有效的生物治療方法，例如基因療法、干細(xì)胞療法、iPSCs (induced pluripotent stem cells)療法[10]。Waardenburg綜合征患者傾向于在兒童時(shí)期通過(guò)先天性聽(tīng)力障礙或色素沉著異常確診，除非隨訪(fǎng)至青春期，否則無(wú)法確定患者是否患有性腺功能減退癥。患者應(yīng)及時(shí)進(jìn)行全外顯子基因檢測(cè)或 SNP檢測(cè)。一旦發(fā)現(xiàn)患者是由變異引起的Waardenburg綜合征，應(yīng)仔細(xì)檢查并跟蹤Kallmann綜合征的典型臨床特征，隨訪(fǎng)患者青春期發(fā)育狀況。一旦發(fā)現(xiàn)青春期發(fā)育延遲(青春期發(fā)育年齡比平均時(shí)間晚2～2.5歲，例如男孩14歲時(shí)睪丸體積<3 mL和女孩13歲時(shí)乳房發(fā)育缺失[30])，立即行GnRH激發(fā)實(shí)驗(yàn)，做到早期診斷、早期治療，以改善患者生活質(zhì)量和預(yù)防與疾病相關(guān)的并發(fā)癥。

綜上所述，本文推測(cè)基因缺失可致Kallmann綜合征與Waardenburg綜合征，對(duì)于攜帶基因突變的Waardenburg綜合征患者應(yīng)關(guān)注其青春期發(fā)育情況，一旦發(fā)現(xiàn)青春期延遲，應(yīng)盡早診斷并進(jìn)行干預(yù)；對(duì)于攜帶基因突變的Kallmann綜合征患者，應(yīng)關(guān)注有無(wú)聽(tīng)力損失或色素沉著異常等其他臨床表現(xiàn)，盡早植入人工耳蝸，避免造成患者后天語(yǔ)言發(fā)育不良。

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Diagnosis and genetic analysis of a case of Waardenburg syndrome type 2 with hypogonadotropic hypogonadism caused bygene deletion

Siqi Wang, Yang Chen, Kuanhong Luo, Ningjie Shi, Kangli Xiao, Zhenhai Cui, Tianshu Zeng, Huiqing Li

Hypogonadotropic hypogonadism (HH) is a disease defined by dysfunction of the hypothalamic- pituitary-gonadal hormone axis, leading to low sex hormone levels and impaired fertility. HH with anosmia or hyposmia is known as Kallmann syndrome (KS). Waardenburg syndrome (WS) is a rare autosomal dominant genetic disorder characterized by sensorineural hearing loss and abnormal pigmentation. In this report, we collected the clinical data of a patient with hypogonadotropic hypogonadism and congenital hearing loss of unknown cause. The patient had no obvious secondary sexual characteristics development after puberty, and had a heterozygous deletion (at least 419 kb) in 22q13.1 region (Chr.22:38106433-38525560), which covered thegene. The abnormalities were not found in gene sequencing analysis of both the parents and sister of the proband. By summarizing and analyzing the characteristics of this case, we further discussed the molecular biological etiological association between HH and WS type 2. This case also enriches the clinical data of subsequent genetic studies, and provides a reference for the diagnosis and treatment of such diseases.

Waardenburg syndrome; hypogonadotropic hypogonadism; Kallmann syndrome;gene; mutation

2022-07-31;

2022-09-21;

2022-10-09

王思琪，在讀碩士研究生，專(zhuān)業(yè)方向：內(nèi)分泌和代謝病。E-mail: wangsiqi8958@163.com

黎慧清，博士，副主任醫(yī)師，研究方向：內(nèi)分泌與代謝病。E-mail: lhqing5@126.com

10.16288/j.yczz.22-161

(責(zé)任編委: 周紅文)