血清α1-MG和NGAL在狼瘡腎炎早期診斷中的臨床價值

馬 珍，楊朝美

重慶市第四人民醫(yī)院/重慶市急救醫(yī)療中心：1.感染與疾病預(yù)防控制科；2.檢驗(yàn)科，重慶 400014

系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)是一種自身免疫介導(dǎo)的多器官、系統(tǒng)損害的結(jié)締組織病，腎臟是其損傷的主要靶器官之一，部分SLE患者早期或病程中可出現(xiàn)狼瘡腎炎(LN)。SLE患者LN的發(fā)病率為50%～70%，LN是SLE患者死亡的常見原因[1]。LN是最常見的繼發(fā)性腎小球腎炎，如能早期發(fā)現(xiàn)并采取積極的治療措施，將有助于LN患者腎功能的恢復(fù)[2]。中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)載脂蛋白(NGAL)是脂質(zhì)運(yùn)載蛋白家族成員之一，主要表達(dá)于中性粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、脂肪細(xì)胞，由腎臟代謝。有研究表明，在腎損傷的早期，血、尿NGAL水平開始升高，因此NGAL在預(yù)測腎損傷方面具有較高的特異度和靈敏度[3]。血清α1-微球蛋白(α1-MG)是肝細(xì)胞和淋巴細(xì)胞產(chǎn)生的一種糖蛋白，其水平可反映腎小球?yàn)V過功能，并可早期診斷腎損傷[4]。本研究通過分析LN患者血清α1-MG、NGAL水平變化，探討其對LN的早期診斷價值，以助于臨床早期發(fā)現(xiàn)LN并積極采取治療措施改善SLE患者的預(yù)后。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2019年3月至2021年4月本院收治的LN患者102例作為LN組，其中男11例，女91例；年齡20～52歲，平均(32.27±7.11)歲。另選擇同期本院健康體檢者114例作為對照組，其中男13例，女101例；年齡22～54歲，平均(31.71±7.26)歲。LN組與對照組性別、年齡比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2納入及排除標(biāo)準(zhǔn) 納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)SLE診斷符合2019年歐洲抗風(fēng)濕病聯(lián)盟更新的《系統(tǒng)性紅斑狼瘡管理指南》標(biāo)準(zhǔn)[5]；(2)LN診斷符合《中國狼瘡腎炎診斷和治療指南》標(biāo)準(zhǔn)[6]，在SLE基礎(chǔ)上出現(xiàn)以下1項(xiàng)及以上臨床和實(shí)驗(yàn)室檢查異常時，即可診斷為LN，①尿蛋白持續(xù)>0.5 g/24 h，或隨機(jī)尿蛋白+++，或尿蛋白肌酐比值>50 mg/mmol；②活動性尿沉渣(除尿路感染外，尿白細(xì)胞>5個/高倍鏡視野，尿紅細(xì)胞>5個/高倍鏡視野)，或紅細(xì)胞管型，或白細(xì)胞管型；③細(xì)胞管型包括紅細(xì)胞管型、顆粒管型、血紅蛋白管型、管狀管型或混合管型；④腎穿刺活檢病理結(jié)果為免疫復(fù)合物介導(dǎo)的腎小球腎炎；(3)臨床資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)合并其他自身免疫性疾病；(2)合并原發(fā)性腎小球疾病或其他繼發(fā)性腎臟??；(3)合并高血壓、糖尿病、腫瘤；(4)合并血液系統(tǒng)疾??；(5)合并泌尿系統(tǒng)感染等其他影響腎功能的炎癥性疾病；(6)哺乳期或妊娠期女性。

1.3儀器與試劑 貝克曼AU5821全自動生化分析儀購自美國貝克曼庫爾特公司；血清尿素(Urea)、肌酐(Cr)、尿酸(UA)、胱抑素C(Cys C)檢測試劑由寧波瑞源生物科技有限公司提供；α1-MG、NGAL檢測試劑由四川新健康成生物股份有限公司提供。

1.4方法 對所有研究對象抽取清晨空腹靜脈血3～4 mL，采血管為促凝管，3 000 r/min離心5 min，取血清檢測Urea、Cr、UA、Cys C、α1-MG、NGAL水平。

2 結(jié) 果

2.1兩組血清α1-MG、NGAL、Urea、Cr、UA、Cys C水平比較 LN組血清α1-MG、NGAL、Urea、Cr、Cys C水平與對照組比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；兩組血清UA水平比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，見表1。

表1 兩組血清α1-MG、NGAL、Urea、Cr、UA、β2-MG、Cys C水平比較[M(P25,P75)]

組別nCysC(μmol/L)α1-MG(mg/L)NGAL(ng/mL)LN組1021.31(0.88,3.56)38.90(32.70,59.15)269.70(218.00,421.25)對照組1140.79(0.69,0.87)17.10(14.90,18.70)135.20(111.50,185.60)Z-4.492-4.343-4.590P<0.001<0.001<0.001

2.2LN發(fā)生的影響因素分析 將表1中兩組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義的指標(biāo)納入多因素Logistic回歸分析模型，結(jié)果顯示，血清α1-MG、NGAL水平升高是LN發(fā)生的獨(dú)立危險因素(P<0.05)，見表2。

表2 LN發(fā)生的多因素Logistic回歸分析結(jié)果

2.3LN患者血清α1-MG和NGAL水平的相關(guān)性分析 Pearson相關(guān)分析結(jié)果顯示，LN患者血清α1-MG、NGAL水平呈正相關(guān)(r=0.749，P<0.05)。

2.4血清α1-MG、NGAL對LN的診斷效能 ROC曲線分析結(jié)果顯示，α1-MG診斷LN的曲線下面積(AUC)為0.723，靈敏度為64.7%，特異度為93.0%。NGAL診斷LN的AUC為0.814，靈敏度為73.5%，特異度為86.0%。兩項(xiàng)聯(lián)合檢測的AUC為0.842，靈敏度為73.5%，特異度為86.3%。見表3、圖1。

表3 血清α1-MG、NGAL診斷LN的效能

圖1 血清α1-MG、NGAL診斷LN的ROC曲線

3 討 論

LN主要由循環(huán)或原位免疫復(fù)合物沉積導(dǎo)致腎小球固有細(xì)胞增生、基底膜破壞和炎癥細(xì)胞浸潤所致，是最常見的繼發(fā)性免疫性腎小球疾病[7]。相關(guān)文獻(xiàn)顯示，有75%～90%的SLE患者伴有不同程度的腎損傷，其中有21%左右可進(jìn)展為尿毒癥[8]。腎穿刺活檢是明確LN病理類型的“金標(biāo)準(zhǔn)”，但侵入性操作難度大、風(fēng)險高，患者難以接受，不利于密切跟蹤LN進(jìn)展情況。探討引起LN的危險因素，尋找靈敏度高、特異性強(qiáng)、非侵入性、便于監(jiān)測的新型生物標(biāo)志物，對LN早期診斷、臨床治療效果評估等具有重要意義。

近年來，實(shí)驗(yàn)室早期診斷腎損傷的新型生物標(biāo)志物越來越多[9]。NGAL是一種相對分子質(zhì)量為25×103的小分子分泌蛋白，其mRNA可在人體中的很多組織和器官中表達(dá)，當(dāng)肝臟、腎臟的上皮細(xì)胞受到損傷時會釋放核轉(zhuǎn)錄因子(NF)-κB誘導(dǎo)NGAL產(chǎn)生并進(jìn)入血液。有研究發(fā)現(xiàn)，在正常生理狀態(tài)下，在腎組織中NGAL幾乎不表達(dá)，且腎臟的濾過清除作用可以使血液中的NGAL水平保持相對穩(wěn)定[10-11]，但是腎臟在發(fā)生缺血性損傷或腎毒性藥物損傷后，血清及尿液中NGAL水平可明顯升高，在腎損傷發(fā)生2 h達(dá)高峰，其水平變化早于Urea、Cr等生物標(biāo)志物，能更早地預(yù)測腎損傷[12]。NGAL在血液和尿液中的水平變化可早期反映腎小球?yàn)V過功能有無損傷，其臨床價值已在多種類型腎損傷的臨床研究中得到證實(shí)，被認(rèn)為是研究最廣泛的腎損傷早期診斷生物標(biāo)志物之一[13-14]。相關(guān)研究表明，血清及尿NGAL水平與LN腎損傷指數(shù)有關(guān)，在活動性LN中其水平顯著升高，提示NGAL在早期診斷LN、預(yù)測LN的發(fā)生方面具有潛在價值[15]。α1-MG主要是由淋巴細(xì)胞和肝臟恒定產(chǎn)生的一種糖蛋白，能自由通過腎小球?yàn)V過膜，絕大部分在腎近曲小管被重吸收并代謝，當(dāng)腎臟重吸收功能障礙或腎近曲小管受損時，血清α1-MG水平快速升高，可作為早期腎損傷的一個特異性標(biāo)志物，同時α1-MG既有不易受實(shí)驗(yàn)檢測因素干擾的優(yōu)勢，又可反映腎臟基底膜通透性及腎小球?yàn)V過膜損傷程度[16]。

本研究結(jié)果顯示，LN組血清Urea、Cr、Cys C、α1-MG、NGAL水平與對照組比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，提示上述指標(biāo)在LN患者中表達(dá)水平異常，可能可作為LN的診斷標(biāo)志物，但其中部分指標(biāo)受食物、藥物等外源性因素影響較大，用于LN早期診斷的價值有限。如早期腎損傷時，血清Cr、Urea水平往往要在24～72 h后才緩慢升高；血清Cys C 水平盡管與性別、種族、肌肉質(zhì)量和水合狀態(tài)無關(guān)，但可能受甲狀腺功能障礙、吸煙、炎癥、某些癌癥和糖皮質(zhì)激素的影響，在腎小球病變早期其診斷靈敏度低于NGAL[17]。UA是嘌呤代謝的終末產(chǎn)物，其由受損細(xì)胞產(chǎn)生，可促進(jìn)免疫炎癥反應(yīng)，受內(nèi)外源性因素干擾較大，有關(guān)研究報道，不同程度腎損傷的SLE患者血清UA水平差異明顯，較高的血清UA水平會增加SLE患者發(fā)生腎損傷的風(fēng)險，合并高尿酸血癥的SLE患者常伴有嚴(yán)重的腎損傷[18]。本研究中，LN組血清UA水平與對照組比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，提示血清UA作為LN診斷指標(biāo)的效果可能并不理想。

本研究中，多因素Logistic回歸分析結(jié)果顯示，血清α1-MG、NGAL水平升高是LN發(fā)生的獨(dú)立危險因素(P<0.05)，此外，LN患者血清α1-MG與NGAL水平呈正相關(guān)(P<0.05)。有研究證實(shí)，在糖尿病腎病中血清NGAL和α1-MG水平也存在高度相關(guān)性，二者對輔助診斷早期腎損傷有重要價值[11,16,19]。ROC曲線分析結(jié)果顯示，血清α1-MG、NGAL聯(lián)合檢測對LN有較高的診斷效能，優(yōu)于各指標(biāo)單獨(dú)檢測。

綜上所述，血清NGAL和α1-MG水平升高是LN發(fā)生的獨(dú)立危險因素，且二者對LN的診斷價值較高，可作為早期診斷LN的有效生物標(biāo)志物。但由于本研究為單中心研究，結(jié)果可能存在一定偏倚，結(jié)果有待后續(xù)多中心、大樣本量的臨床研究進(jìn)一步證實(shí)。