蜂膠對痤瘡的作用機(jī)理研究

牛德芳 柳剛 花曉艷 張翠平 │文

1 江蘇農(nóng)牧科技職業(yè)學(xué)院食品科技學(xué)院，泰州 225300；2 杭州蜂情科技有限公司，杭州 310000；3 浙江大學(xué)動物科學(xué)學(xué)院，杭州 310058

痤瘡是一種青春期常見的與性腺內(nèi)分泌功能失調(diào)有關(guān)的毛囊及皮脂腺阻塞引發(fā)的慢性炎癥性皮膚病，通常好發(fā)于面部、胸背部，臨床以白頭粉刺、黑頭粉刺、炎性丘疹、結(jié)節(jié)、囊腫等為主要表現(xiàn)。痤瘡發(fā)病的原因包括內(nèi)分泌因素（特別是雄性激素）、毛囊皮脂腺導(dǎo)管角化異常、毛囊內(nèi)微生物定植（痤瘡丙酸桿菌、金黃色葡萄球菌和表皮葡萄球菌是最重要的病原體）以及炎癥反應(yīng)、遺傳等。此外氣候變化、精神、飲食、某些化學(xué)因子及藥物等因素也影響其發(fā)病，但具體發(fā)病機(jī)制并不明確。目前治療痤瘡的方法包括局部外用（過氧化苯甲酰、壬二酸、水楊酸），口服（抗生素、維甲酸）和激素療法。然而，臨床醫(yī)師在開處方時往往根據(jù)藥物的確切療效、個人習(xí)慣和價格療效比等選擇藥物，而很少考慮細(xì)菌耐藥性的問題?？股厮幬锞幸种苹蚯宄畀彵釛U菌、抗炎等作用，很少誘導(dǎo)痤瘡丙酸桿菌產(chǎn)生耐藥性，但可能引起過敏反應(yīng)。因此，目前所有的痤瘡治療方法都有潛在的副作用，患者對快速、安全、無副作用新療法的需求越來越大。

許多植物具有固有的抗菌和消炎特性，草藥植物源性藥物在治療痤瘡方面越來越受歡迎。蜂膠作為蜜蜂用來建造和保護(hù)蜂巢的粘性物質(zhì)，具有廣泛的抗菌、抗病毒和抗炎活性，在民間醫(yī)療中有廣泛應(yīng)用。早在17 世紀(jì)，蜂膠被列為倫敦藥典成為官方藥物。在巴爾干半島國家，蜂膠被用于治療傷口和燒傷、喉嚨痛和胃潰瘍。蜂膠目前用于傷口愈合、治療燒傷、痤瘡、單純皰疹、生殖器和神經(jīng)性皮炎的皮膚科制劑。蜂膠由于在抗菌、抗炎、皮膚保護(hù)及創(chuàng)傷修復(fù)等方面的作用，使其在抗痤瘡方面的應(yīng)用前景廣闊。

一、蜂膠的抑菌作用

痤瘡的發(fā)病機(jī)制除與內(nèi)分泌、免疫、皮脂分泌過多和毛囊角化過度等因素有關(guān)外，還與厭氧的痤瘡丙酸桿菌感染有關(guān)。蜂膠具有廣譜的抗菌活性。Rojas Hernández 等[1]對人體分離的100 株金黃色葡萄球菌進(jìn)行蜂膠和6 種抗生素的藥敏實驗，結(jié)果95 個菌株對蜂膠敏感，而對抗生素敏感的只有49 個菌株。張芳英等[2]研究發(fā)現(xiàn)，蜂膠提取物對痤瘡丙酸桿菌有較好的體外抑菌效果。

1.蜂膠對革蘭氏陽性菌作用

痤瘡丙酸桿菌是革蘭氏陽性桿菌，大量研究表明，蜂膠對革蘭氏陽性菌具有明顯的抑菌效果。蜂膠中咖啡酸及其酯類對其抗菌性能有重要貢獻(xiàn)。Grange等[3]發(fā)現(xiàn)蜂膠對一系列常見的球菌和革蘭氏陽性桿菌具有抗菌活性，包括人體結(jié)核桿菌。Seidel 等[4]比較多個國家收集的蜂膠乙醇提取物對革蘭氏陽性和革蘭氏陰性細(xì)菌的活性。結(jié)果表明，蜂膠提取物對革蘭氏陽性菌具有較強(qiáng)的抗菌活性，不同來源蜂膠抑菌活性不同，樣本分為強(qiáng)[最低抑菌濃度（MIC）范圍3.9～31.25 mg/L]、中等（MIC 范圍31.25～500 mg/L）和弱抗菌活性或無活性（僅MIC ≥500 mg/L）。付英娟[5]研究發(fā)現(xiàn)，蜂膠液對不同微生物抑制強(qiáng)弱順序為：蠟狀芽孢桿菌＞金黃色葡萄球菌＞雞蛋表面混合菌＞枯草桿菌＞大腸桿菌＞沙門氏菌，有效抑菌濃度為0.2%。

2.蜂膠對厭氧菌作用

厭氧菌是人體正常菌群的組成部分，廣泛存在于人體皮膚和腔道的深部黏膜表面，蜂膠對不同厭氧菌具有廣泛抑菌活性。蜂膠及其溶劑提取物對幽門螺桿菌具有很好的抑制作用，抑制脲酶活性，促進(jìn)胃液分泌，減少胃病發(fā)生。蜂膠對感染根管常見優(yōu)勢厭氧菌具有良好的抑菌活性，對中間普氏菌、具核梭桿菌及二者的混合菌的最小殺菌濃度（MBC）分別為0.025%、0.025%和0.05%[6]。Gergova[7]研究了30%保加利亞蜂膠乙醇提取物對94 株臨床厭氧菌的影響，只有15%的梭狀芽孢桿菌、3.3%的其他革蘭氏陽性菌和9.1%的革蘭氏陰性厭氧菌不受抑制。說明蜂膠對口腔病原體、梭狀芽孢桿菌、類桿菌和丙酸桿菌等大多數(shù)不同屬的厭氧菌都有抑制作用。

蜂膠對厭氧菌的廣泛抑菌活性，為人們開發(fā)預(yù)防或治療口腔、皮膚和傷口等厭氧菌感染提供了理論基礎(chǔ)。

3.蜂膠對耐藥菌作用

抗生素耐藥性已成為全球主要的公共衛(wèi)生問題，天然化合物和抗生素對多藥耐藥細(xì)菌產(chǎn)生協(xié)同作用是一種替代方法。蜂膠70%乙醇浸液（蜂膠膏）可抑制對新青霉素已產(chǎn)生抗性的金黃色葡萄球菌的生長。阿根廷蜂膠對抗生素耐藥菌Streptococcus piogenes 的抗菌活性最強(qiáng)（MIC=7.8 mg/mL）。波蘭蜂膠乙醇提取物與10 種抗菌藥物聯(lián)合使用，對12 株受試金黃色葡萄球菌均產(chǎn)生了比蜂膠或藥物單獨使用更強(qiáng)的累積抗菌效果，但環(huán)丙沙星和氯霉素與蜂膠乙醇提取物無協(xié)同作用。Raghukumar 等[8]首次報道了“太平洋蜂膠”的抗甲氧西林金黃色葡萄球菌（MRSA）活性，明確了propolin D（MIC 8～16 mg/L）和propolin C（MIC 8～32 mg/L）的抗菌活性。Astani 等[9]研究發(fā)現(xiàn)，蜂膠提取物對化膿性鏈球菌、金黃色葡萄球菌、屎腸球菌和念珠菌的MIC 在0.03～2 mg/mL 之間。Saddiq 等[10]對40 株臨床分離的金黃色葡萄球菌進(jìn)行苯唑西林和不同種類抗生素的藥敏試驗。數(shù)據(jù)顯示，大多數(shù)菌株不僅對苯唑西林有耐藥性，而且對其他一些抗生素也有耐藥性；蜂膠提取物對所有供試菌株均具有抗菌活性。Gezgin 等[11]以蜂膠和慶大霉素為載體制備溫敏凝膠，探討聯(lián)合用藥對MRSA 的作用，結(jié)果顯示出明顯的協(xié)同效應(yīng)和部分協(xié)同效應(yīng)。

4.蜂膠非抗生素

抗生素是來自微生物的代謝產(chǎn)物，是一種具有固定化學(xué)組成的純化合物，它們在很低濃度時就能抑制其他微生物的生長，如鏈霉素、氯霉素、四環(huán)素等等。蜂膠是一種對某些病原微生物具有一定抑制和殺滅作用的天然物質(zhì)，不是抗生素。蜂膠中的黃酮類化合物、咖啡酸、肉桂酸、苯甲酸等多種化合物具有協(xié)同抗菌作用，這些化合物可能作用于微生物膜或細(xì)胞壁部位，引起功能和結(jié)構(gòu)損傷，低濃度蜂膠具有抑菌作用，在較高濃度下具有殺菌作用。

蜂膠的抗菌、殺菌作用原理十分復(fù)雜，可能包括：蜂膠能解偶聯(lián)能量傳遞的細(xì)胞質(zhì)膜并抑制細(xì)菌的運動；黃酮類化合物能抑制自由基的形成；蜂膠對不同細(xì)菌和霉菌具有直接抑制作用，并抑制細(xì)菌對細(xì)胞的粘附；蜂膠能破壞細(xì)菌細(xì)胞壁、細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)，產(chǎn)生溶菌作用，并能抑制細(xì)菌蛋白質(zhì)的合成；但其確切作用機(jī)制還有待進(jìn)一步研究探討。

二、蜂膠的抗炎作用

炎癥是機(jī)體組織受外界有害刺激（如病原體、受損細(xì)胞或其他刺激物等）時所產(chǎn)生的一種保護(hù)性應(yīng)答反應(yīng)，同時局部組織會發(fā)生變質(zhì)、滲出和增生等病理性變化。炎癥反應(yīng)是痤瘡發(fā)病機(jī)制中的重要組成部分。蜂膠具有較好的抗炎功效，對各種急性和慢性炎癥模型均具有良好的抑制效果[12]。痤瘡丙酸桿菌細(xì)胞壁成分主要可被TLR2 識別，通過TLR 誘導(dǎo)人的免疫細(xì)胞產(chǎn)生IL-1，IL-8，TNF-α，IL-12 等多種促炎因子，導(dǎo)致毛囊炎癥的發(fā)生。Pagliarone 等[13]探討了蜂膠對小鼠應(yīng)激性免疫抑制作用的可能作用，評估了脾細(xì)胞產(chǎn)生促炎細(xì)胞因子（IL-1β 和IL-6）和Toll 樣受體（TLR-2 和TLR-4）的表達(dá)。TLR-2 和TLR-4在應(yīng)激小鼠體內(nèi)的表達(dá)受到抑制，而蜂膠對TLR-4的表達(dá)具有免疫修復(fù)作用，因此，蜂膠處理不能拮抗促炎細(xì)胞因子的抑制作用，但至少部分恢復(fù)了應(yīng)激動物TLR-2 mRNA 的表達(dá)，抵消了TLR-4 表達(dá)的抑制作用，有助于應(yīng)激條件下微生物的識別。Orsatti 等[14]研究發(fā)現(xiàn)，蜂膠處理后小鼠腹腔巨噬細(xì)胞基礎(chǔ)IL-1β生成及TLR-2、TLR-4 表達(dá)增加；小鼠脾細(xì)胞TLR-2和TLR-4 表達(dá)及IL-1β 和IL-6 生成也上調(diào)。蜂膠通過上調(diào)小鼠TLRs 的表達(dá)和促炎性細(xì)胞因子的產(chǎn)生，激活了免疫應(yīng)答的初始階段，從而調(diào)節(jié)了天然免疫的機(jī)制。肖麗玲等[15]觀察蜂膠對兔全層皮膚缺損愈合及創(chuàng)面炎性介質(zhì)的影響，發(fā)現(xiàn)蜂膠通過抑制炎癥介質(zhì)IL-8、IL-18 釋放，減輕創(chuàng)面局部的炎性反應(yīng)，促進(jìn)創(chuàng)面愈合并提高愈合的質(zhì)量。

三、蜂膠對皮膚的保護(hù)作用

Bolfa 等[16]研究蜂膠提取物在紫外線暴露前后的抗氧化、抗炎、抗凋亡和抗基因毒性作用。結(jié)果表明，在暴露前或后局部使用蜂膠提取物，均可以顯著削弱丙二醛的形成和恢復(fù)谷胱甘肽過氧化物酶的活性，顯著降低IL-6 水平，顯著減少表皮增生和皮膚炎癥，減少曬傷細(xì)胞形成以及激活的caspase-3 和TUNEL 陽性細(xì)胞。蜂膠提取物的抗基因毒性作用通過顯著減少環(huán)丁烷嘧啶二聚體的形成而得到證實。顯著降低活性氧含量、基質(zhì)金屬蛋白酶-1 含量以及人成纖維細(xì)胞中氧化相關(guān)基因MMP-1 表達(dá)量。因此，蜂膠可能通過清除活性氧ROS 和抑制膠原等胞外基質(zhì)的降解而達(dá)到抗光老化的效果[17]。

四、蜂膠對潰瘍創(chuàng)面的作用

蜂膠軟膏對慢性靜脈性腿部潰瘍有治療作用，能有效加速創(chuàng)面愈合過程，改善創(chuàng)面愈合生理，是一種很有前途的創(chuàng)面外用藥物。蜂膠中咖啡酸、阿魏酸、對香豆酸和肉桂酸具有抗?jié)兓钚?。王元元等[18]研究發(fā)現(xiàn)蜂膠外用能明顯縮短創(chuàng)面愈合時間，顯著提高大鼠血清中超氧化物歧化酶含量，血清中丙二醛含量，從而增強(qiáng)機(jī)體對自由基的清除能力，避免自由基對機(jī)體組織細(xì)胞的損傷，促進(jìn)皮膚潰瘍創(chuàng)面的愈合，給藥后成纖維細(xì)胞數(shù)量增多，毛囊、汗腺、皮脂腺等組織結(jié)構(gòu)基本趨于完整。Puspasari 等[19]局部應(yīng)用蜂膠提取物凝膠治療創(chuàng)傷糖尿病所致潰瘍，治療組比對照組呈現(xiàn)更快的愈合過程，在第5 天和第7 天可提高治療組成纖維細(xì)胞生長因子-2 和成纖維細(xì)胞的表達(dá)，治療組在第5 天潰瘍開始愈合，出現(xiàn)輕微紅斑，第7 天，觀察到白色粘膜伴紅斑，第9 天出現(xiàn)正常粘膜。蜂膠提取物凝膠外用具有抗炎作用，可觸發(fā)血管生成，直接信號轉(zhuǎn)導(dǎo)誘導(dǎo)成纖維細(xì)胞生長因子-2，促進(jìn)糖尿病潰瘍創(chuàng)面愈合，促進(jìn)成纖維細(xì)胞增殖，加速傷口愈合。

五、蜂膠對痤瘡的治療效果

如果疤痕仍然存在，再生就很困難，炎癥性痤瘡應(yīng)在第一途徑緩解。Park 等[20]以首爾K 大學(xué)的18 名學(xué)生未被皮膚科醫(yī)生治療過痤瘡的學(xué)生為研究對象，觀察蜂膠對面部皮膚炎癥性痤瘡的緩解效果。蜂膠提取物稀釋純化水在同一比例適用于面部皮膚，實驗組用稀釋蜂膠浸透的紗布敷于面部皮膚15 分鐘，然后用橡皮膜敷于面部皮膚15 分鐘。對照組用純水浸泡的紗布敷于面部皮膚15 分鐘，然后用橡皮膜敷15 分鐘鎮(zhèn)靜。研究對象每周治療2 次，共8 周。分別于實驗前、實驗第4 周后和最后一次實驗結(jié)束后測定紅細(xì)胞數(shù)、色素沉著數(shù)和水分含量。實驗組紅細(xì)胞數(shù)、色素沉著明顯減少，含水量明顯增加；對照組無明顯變化。通過比較實驗過程中拍攝的照片，觀察炎癥的緩解情況，證實蜂膠提取物對面部皮膚有明顯的改善作用。Mi?kulin 等[21]用含蜂膠提取物的油基軟膏局部治療輕度面部尋常痤瘡，軟膏對因年輕人痤瘡和黑頭引起的皮脂腺分泌和恢復(fù)皮膚自然平衡非常有效。Mazzarello等[22]評估了一種新型乳膏（20%蜂膠、3%茶樹油、10%蘆薈乳膏）的抗痤瘡效果，并將其與紅霉素乳膏和安慰劑進(jìn)行比較，乳膏組在減少紅斑疤痕、痤瘡嚴(yán)重指數(shù)和總病損計數(shù)方面優(yōu)于3%紅霉素乳膏組。

六、小結(jié)

痤瘡是最常見的皮膚病之一，它影響所有年齡段，主要是處于青春期敏感期的年輕人。盡管痤瘡不是一種威脅生命的疾病，但它會產(chǎn)生自卑、社會孤立和抑郁等嚴(yán)重的社會心理后果。目前痤瘡治療主要通過藥物進(jìn)行全身或者局部抗菌治療，干擾該菌的生長和代謝，減輕炎癥反應(yīng)，避免瘢痕的形成。大量藥物的使用導(dǎo)致細(xì)菌耐藥性和過敏反應(yīng)的產(chǎn)生，尋求一種快速、安全、無副作用的新療法是廣大患者的迫切需求。蜂膠作為一種天然的植物源物質(zhì)，因其固有的抗菌、抗病毒、抗炎活性以及非抗生物特性，成為治療痤瘡的理想原料。文章通過綜述蜂膠在抑菌、抗炎、皮膚保護(hù)、創(chuàng)傷修復(fù)等方面的研究進(jìn)展，為其在抗痤瘡方面的應(yīng)用提供理論依據(jù)。