國(guó)產(chǎn)鹽酸溴己新可溶性粉在雞體內(nèi)的生物等效性評(píng)價(jià)

孫健，李彥，段笑笑，郭莉莉,4，吳寧鵬，李慧素，楊潔，趙永達(dá),4

(1. 青島農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院，山東青島 266109； 2. 青島市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，山東青島 266073；3. 河南省獸藥飼料監(jiān)察所，河南鄭州 450015； 4. 青島博霖生物科技有限公司，山東青島 266111)

動(dòng)物呼吸道因直接接觸外界環(huán)境，易受環(huán)境、氣候變化等因素的影響而誘發(fā)各種呼吸道疾病，如肺炎、支氣管炎、支氣管哮喘等。畜禽患呼吸道疾病的常見(jiàn)臨床表現(xiàn)為咳嗽，流鼻涕，伸頸、張口呼吸，帶有呼嚕音或發(fā)不出聲音，頻繁甩頭，嚴(yán)重時(shí)會(huì)因痰液過(guò)多而呼吸困難。近年來(lái)，畜禽呼吸道疾病多發(fā)且難以控制，引起呼吸道疾病的主要原因?yàn)槎喾N復(fù)雜病原體、不利的環(huán)境因素、多重混合感染等，禽流感、雞新城疫、傳染性支氣管炎等疾病也會(huì)誘發(fā)呼吸道癥狀[1]。畜禽類呼吸道疾病除需要對(duì)因治療外，還應(yīng)輔以鎮(zhèn)咳、祛痰、平喘等藥物來(lái)緩解呼吸道癥狀。祛痰藥可以促進(jìn)呼吸道分泌，降低痰液黏稠度，使痰液容易排出。鹽酸溴己新(bromhexine hydrochloride)為半合成的鴨嘴花堿衍生物，最早由德國(guó)勃林格殷格翰公司開(kāi)發(fā)，它可直接作用于支氣管腺體，促進(jìn)黏液分泌，降低痰液黏度，有利于黏痰的咳出[2]，常用于急/慢性支氣管炎、哮喘、支氣管擴(kuò)張等疾病的治療[3]，歐盟已批準(zhǔn)用于牛、豬等畜類和禽類的呼吸道疾病治療[4]。此外，鹽酸溴己新還可增強(qiáng)對(duì)抗生素的吸收效果，提高療效[5]。本試驗(yàn)根據(jù)文獻(xiàn)[6]要求，以德國(guó)勃林格殷格翰公司生產(chǎn)的鹽酸溴己新可溶性粉為參比制劑，以國(guó)產(chǎn)鹽酸溴己新可溶性粉為受試制劑，通過(guò)雞血漿中溴己新HPLC-MS/MS測(cè)定方法的建立，研究2種鹽酸溴己新可溶性粉的生物等效性，為獸醫(yī)臨床鹽酸溴己新可溶性粉的合理使用提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

鹽酸溴己新，質(zhì)量分?jǐn)?shù)99.8%，批號(hào)100427-201903，中國(guó)食品藥品檢定研究院；受試制劑鹽酸溴己新可溶性粉，規(guī)格1%，批號(hào)20200319，保定冀中藥業(yè)有限公司；參比制劑鹽酸溴己新可溶性粉，規(guī)格1%，批號(hào)0602506，德國(guó)勃林格殷格翰公司；甲醇、乙腈，色譜級(jí)，美國(guó)Sigma公司；甲酸，色譜級(jí)，德國(guó)Merck公司；不銹鋼灌胃針，20號(hào)90 mm，創(chuàng)博環(huán)球(北京)生物科技有限公司；一次性負(fù)壓采血管(含肝素鈉)，3 mL，山東奧賽特醫(yī)療器械有限公司；水為自制超純水。

1.2 儀器與設(shè)備

高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀，配電噴霧離子源，Thermo Fisher TSQ Quantiva；3-30K高速臺(tái)式離心機(jī)，美國(guó)Sigma公司；CenLee 4K臺(tái)式低速離心機(jī)，湖南湘立科學(xué)儀器有限公司。

1.3 溶液的配制

鹽酸溴己新標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液(1 mg/mL)：準(zhǔn)確稱取鹽酸溴己新11.15 mg于10 mL棕色容量瓶中，用甲醇溶解定容至刻度，搖勻，-20 ℃保存。

鹽酸溴己新標(biāo)準(zhǔn)中間工作液(10 μg/mL)：準(zhǔn)確吸取鹽酸溴己新標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液1 mL于100 mL棕色容量瓶中，用甲醇定容至刻度，搖勻?，F(xiàn)配現(xiàn)用。

鹽酸溴己新標(biāo)準(zhǔn)工作液：準(zhǔn)確吸取一定量鹽酸溴己新標(biāo)準(zhǔn)中間工作液，用超純水稀釋為所需濃度?，F(xiàn)配現(xiàn)用。

0.1%甲酸乙腈溶液：取乙腈1 000 mL，加入1 mL甲酸，混勻。

30%乙腈溶液(含0.1%甲酸)：取乙腈300 mL，加入0.3 mL甲酸，并用超純水稀釋定容至1 000 mL。

0.1%甲酸水溶液：取甲酸1 mL，用超純水稀釋定容至1 000 mL。

1.4 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

隨機(jī)挑選健康黃羽肉雞(羅斯317)70只，體質(zhì)量1.5～1.8 kg，雌雄各半，河南后羿生物工程股份有限公司提供。肉雞每天定時(shí)給料2次，飼料不含藥物，自由飲水，給藥前適應(yīng)性飼喂10 d，并記錄雞群每天的精神狀態(tài)、飲水、采食等情況。動(dòng)物房和隔離器使用前用甲醛+高錳酸鉀熏蒸、消毒3 d，隔離器溫度18～25 ℃，相對(duì)濕度30%～50%。

1.5 樣品處理與測(cè)試條件

1.5.1 樣品處理

血漿樣品自然解凍后，取0.2 mL于離心管中，加入0.1%甲酸乙腈溶液1 mL，渦旋2 min，以10 000 r/min離心10 min。取上清液0.3 mL，加入超純水0.7 mL，混勻，過(guò)0.22 μm有機(jī)濾膜。

1.5.2 溴己新濃度測(cè)定

血漿樣品按1.5.1節(jié)方法處理后，使用高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀分析測(cè)定。每批樣品測(cè)定前須重新制備空白基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)曲線，線性范圍0.2～30 ng/mL，并制備500 ng/mL、100 ng/mL、10 ng/mL、5 ng/mL 4個(gè)濃度水平的質(zhì)控樣品。超出檢測(cè)線性范圍的，使用空白基質(zhì)稀釋后重新測(cè)定。

1.5.2.1 色譜條件

色譜柱，Waters ACQUITY BEH C18(100 mm×2.1 mm，1.7 μm)；柱溫，30 ℃；進(jìn)樣量，2 μL；流動(dòng)相A相為乙腈，B相為0.1%甲酸水溶液；流量，0.3 mL/min。梯度洗脫程序見(jiàn)表1。

表1 梯度洗脫程序

1.5.2.2 質(zhì)譜條件

離子源，電噴霧離子源；掃描方式，正離子掃描；檢測(cè)方式，多反應(yīng)監(jiān)測(cè)(multi reaction monitor，SRM)；電離電壓，3.0 kV；鞘氣，20(相對(duì)單位)；輔助氣，5(相對(duì)單位)；離子遷移管溫度，300 ℃；霧化溫度，350 ℃。定性離子對(duì)、定量離子對(duì)及碰撞能等參數(shù)見(jiàn)表2。

表2 溴己新的定量離子對(duì)、定性離子對(duì)及碰撞能

1.6 方法學(xué)考察

參照文獻(xiàn)[7]進(jìn)行溴己新濃度測(cè)定方法學(xué)驗(yàn)證。

1.6.1 方法特異性考察

取6份來(lái)自不同雞的空白血漿，各取0.2 mL，按1.5.1節(jié)方法處理，按1.5.2節(jié)測(cè)試條件測(cè)定?？疾毂驹囼?yàn)條件下方法特異性，分析是否存在內(nèi)源性物質(zhì)干擾。

1.6.2 基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制

取8份雞空白血漿，按1.5.1節(jié)方法處理，離心后分別取上清液0.3 mL，加入超純水0.65 mL及一定濃度鹽酸溴己新標(biāo)準(zhǔn)工作液0.05 mL，使鹽酸溴己新濃度分別為0.2 ng/mL、0.5 ng/mL、 1 ng/mL、2 ng/mL、5 ng/mL、10 ng/mL、20 ng/mL、30 ng/mL，按1.5.2節(jié)測(cè)試條件測(cè)定。以測(cè)得的溴己新定量離子峰面積為縱坐標(biāo)(y軸)，以溴己新濃度為橫坐標(biāo)(x軸)，1/x2為權(quán)重系數(shù)，進(jìn)行線性回歸，繪制基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程和相關(guān)系數(shù)。

1.6.3 檢測(cè)限與定量限確定

取雞空白血漿6份，添加不同濃度的鹽酸溴己新標(biāo)準(zhǔn)工作液，按1.5.1節(jié)方法處理，按1.5.2節(jié)測(cè)試條件測(cè)定，分別將信噪比>3、信噪比>10確定為檢測(cè)限和定量限。

1.6.4 精密度與回收率考察

取雞空白血漿24份，分別添加不同濃度鹽酸溴己新標(biāo)準(zhǔn)工作液，進(jìn)行鹽酸溴己新濃度分別為5 ng/mL(定量限)、10 ng/mL(低濃度)、100 ng/mL(中濃度)和500 ng/mL(高濃度)的添加回收試驗(yàn)，計(jì)算回收率。每個(gè)濃度水平設(shè)6個(gè)平行樣品，重復(fù)3次，每批次間隔1 d以上。計(jì)算回收率和精密度平均值及批內(nèi)、批間變異系數(shù)。

1.6.5 反復(fù)凍融穩(wěn)定性考察

取雞空白血漿8份，分別添加一定量鹽酸溴己新標(biāo)準(zhǔn)工作液，配制鹽酸溴己新濃度分別為500 ng/mL(高濃度)和10 ng/mL(低濃度)的血漿樣品，每個(gè)濃度4個(gè)平行，-20 ℃冷凍12 h，然后取出常溫融化，反復(fù)凍融3次，得凍融后血漿樣品。取凍融后血漿樣品0.2 mL，按1.5.1節(jié)方法處理，按1.5.2節(jié)測(cè)試條件測(cè)定，考察鹽酸溴己新的穩(wěn)定性。

1.6.6 樣品溶液儲(chǔ)存穩(wěn)定性考察

取雞空白血漿12份，分別添加一定量鹽酸溴己新標(biāo)準(zhǔn)工作液，配制鹽酸溴己新濃度分別為500 ng/mL(高濃度)、100 ng/mL(中濃度)、10 ng/mL(低濃度)的血漿樣品，每個(gè)濃度4個(gè)平行，按1.5.1節(jié)方法處理后，所得樣品分別在自動(dòng)進(jìn)樣器中4 ℃放置24 h、48 h、72 h，并按1.5.2節(jié)測(cè)試條件測(cè)定，考察樣品溶液中鹽酸溴己新的儲(chǔ)存穩(wěn)定性。

1.6.7 基質(zhì)效應(yīng)考察

取5份來(lái)自不同雞的空白血漿，每份一分為二，分別添加一定量鹽酸溴己新標(biāo)準(zhǔn)工作液，配制鹽酸溴己新濃度分別為500 ng/mL(高濃度)、5 ng/mL(低濃度)的血漿樣品，每個(gè)濃度5個(gè)平行，按1.5.1節(jié)方法處理，按1.5.2節(jié)測(cè)試條件測(cè)定，考察不同雞空白血漿的基質(zhì)效應(yīng)。

1.6.8 稀釋可靠性考察

取雞空白血漿5份，分別添加一定量鹽酸溴己新標(biāo)準(zhǔn)工作液，配制鹽酸溴己新濃度1 000 ng/mL血漿樣品。取血漿樣品0.2 mL，按1.5.1節(jié)方法處理后，用空白基質(zhì)稀釋10倍制成樣品稀釋溶液，按1.5.2測(cè)試條件測(cè)定稀釋溶液，考察樣品的稀釋可靠性。

1.6.9 殘留效應(yīng)考察

在雞空白血漿中添加一定量鹽酸溴己新標(biāo)準(zhǔn)工作液，配制鹽酸溴己新濃度600 ng/mL血漿樣品，按1.5.1節(jié)方法處理，按1.5.2節(jié)測(cè)試條件測(cè)定，進(jìn)樣順序?yàn)檠獫{樣品—空白血漿，考察高濃度血漿樣品進(jìn)樣后的殘留情況。

1.7 生物等效性試驗(yàn)

1.7.1 設(shè)盲

申請(qǐng)者去除參比制劑、受試制劑外包裝并另行統(tǒng)一包裝，以A、B字母標(biāo)記區(qū)分。設(shè)盲人員按照雞編號(hào)隨機(jī)對(duì)應(yīng)給予A藥或B藥。雞的編號(hào)對(duì)應(yīng)的給藥字母作為一級(jí)盲底，A和B字母對(duì)應(yīng)的藥物作為二級(jí)盲底，分別由設(shè)盲人員和申請(qǐng)者保存。

1.7.2 給藥劑量與給藥方法

受試制劑、參比制劑均以鹽酸溴己新可溶性粉計(jì)，單次給藥劑量為250 mg/kg。

根據(jù)雞體質(zhì)量，計(jì)算并準(zhǔn)確稱取受試制劑、參比制劑，分別用超純水溶解并吸取至注射器中，然后給注射器編號(hào)，并按照設(shè)盲程序，將雞編號(hào)與注射器編號(hào)對(duì)應(yīng)。給藥時(shí)，將注射器中的藥液全部灌入雞胃，再使用3～5 mL生理鹽水沖洗灌胃針并灌入雞胃。給藥過(guò)程持續(xù)時(shí)間不超過(guò)1 min，給藥完成后，立即開(kāi)始計(jì)時(shí)。

1.7.3 血漿樣本采集

雞采用側(cè)臥方式保定，翅下靜脈設(shè)置留置針，于采血開(kāi)始后2 h拆除。每次使用留置針采血時(shí)，棄去前端0.5 mL血液，采血后立即向留置針管帽中注入肝素鈉溶液約0.5 mL抗凝。采血分別于給藥前0 min以及給藥后2 min、4 min、8 min、12 min、16 min、20 min、25 min、30 min、45 min、1 h、2 h、4 h、8 h、12 h、24 h進(jìn)行，每次采血約1.5 mL至一次性負(fù)壓采血管(含肝素鈉)。采集的血漿樣本以4 000 r/min離心10 min，移取上層血漿至帶標(biāo)記的離心管中，于-20 ℃冷凍保存，作為血漿樣品。

1.8 數(shù)據(jù)處理

采用Phoenix WinNonlin 5.2.1軟件中的非房室模型，按照采血時(shí)間和所測(cè)得的溴己新濃度計(jì)算鹽酸溴己新在雞體內(nèi)的藥物代謝動(dòng)力學(xué)參數(shù)，包括從0到計(jì)算時(shí)間(t)藥時(shí)曲線下面積(AUC0-t)、從0到無(wú)限長(zhǎng)時(shí)間(∞)藥時(shí)曲線下面積(AUC0-∞)、峰濃度(Cmax)、峰時(shí)間(tmax)、消除半衰期(t1/2β)等。其中AUC0-t值、AUC0-∞值、Cmax經(jīng)自然對(duì)數(shù)轉(zhuǎn)換后，采用軟件SPSS 22.0多因素方差分析法(ANOVA)進(jìn)行顯著性檢驗(yàn)，采用雙側(cè)t檢驗(yàn)法和90%置信區(qū)間法評(píng)價(jià)藥品生物等效性。

2 結(jié)果與分析

2.1 方法學(xué)驗(yàn)證

由圖1可知，溴己新保留時(shí)間3.5 min，血漿樣品中溴己新與雜質(zhì)峰分離效果較好，峰形良好，雜質(zhì)對(duì)溴己新的測(cè)定無(wú)干擾，方法特異性好。

詳細(xì)的方法學(xué)研究結(jié)果顯示：血漿中溴己新濃度為0.2～30 ng/mL時(shí)，溴己新濃度與峰面積線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)大于0.99；血漿中溴己新檢測(cè)限為2 ng/mL，定量限為5 ng/mL；鹽酸溴己新濃度5～500 ng/mL范圍內(nèi)，批內(nèi)平均回收率91.6%～116.2%，批內(nèi)變異系數(shù)1.8%～7.8%，批間平均回收率98.1%～110.3%，批間變異系數(shù)3.7%～7.7%，變異系數(shù)均小于15%，精密度符合要求。結(jié)果見(jiàn)表3。

此外，鹽酸溴己新在雞血漿中反復(fù)凍融3次后，溴己新穩(wěn)定性良好，且處理后的樣品溶液4 ℃保存72 h后仍穩(wěn)定，不同濃度檢測(cè)均值與標(biāo)示濃度的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差均小于15%。6份來(lái)自不同雞的空白血漿存在不同程度的基質(zhì)增強(qiáng)效應(yīng)，定量計(jì)算時(shí)須采用基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行外標(biāo)法校正。血漿樣品稀釋10倍后，5份樣品的鹽酸溴己新濃度檢測(cè)相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.68%，表明不存在稀釋效應(yīng)。殘留效應(yīng)考察結(jié)果顯示，高濃度血漿樣品進(jìn)樣后，在空白樣品中的殘留小于0.1%，表明本方法殘留效應(yīng)較小。上述方法學(xué)驗(yàn)證結(jié)果說(shuō)明本方法滿足檢測(cè)要求。

2.2 生物等效性試驗(yàn)結(jié)果

2.2.1 兩種鹽酸溴己新可溶性粉在雞體內(nèi)的藥物代謝動(dòng)力學(xué)參數(shù)

通過(guò)分析，A組(參比制劑)主要藥物代謝動(dòng)力學(xué)參數(shù)為：AUC0-t值(575.55±308.75)h·ng/mL，AUC0-∞值(636.56±325.58)h·ng/mL，Cmax=(164.09±152.04)ng/mL，tmax=(0.86±1.18)h，t1/2β=(4.70±1.95)h。B組(受試制劑)主要藥物代謝動(dòng)力學(xué)參數(shù)為：AUC0-t值(551.13±371.33)h·ng/mL，AUC0-∞值(621.18±396.46)h·ng/mL，Cmax=(128.50±83.83)ng/mL，tmax=(0.86±1.32)h，t1/2β=(4.96±2.34)h。參比制劑、受試制劑的主要藥物代謝動(dòng)力學(xué)參數(shù)無(wú)顯著性差異(p>0.05)。

A. 空白溶劑；B. 空白血漿； C. 添加2 ng/mL鹽酸溴己新血漿樣品；D. 添加5 ng/mL鹽酸溴己新血漿樣品；E. 實(shí)測(cè)樣品。

表3 雞血漿中溴己新的回收率及精密度

2.2.2 生物等效性分析

經(jīng)二次揭盲，A藥為參比制劑，灌服A藥的雞為A組，B藥為受試制劑，灌服B藥的雞為B組。兩種制劑的血藥濃度-時(shí)間曲線見(jiàn)圖2。

圖2 兩種鹽酸溴己新可溶性粉口服給藥后 在雞體內(nèi)的濃度-時(shí)間曲線

AUC0-t值、AUC0-∞值、Cmax經(jīng)自然對(duì)數(shù)轉(zhuǎn)換后，參比制劑、受試制劑數(shù)據(jù)間均無(wú)顯著性差異(p>0.05)，p值分別為0.52、0.63、0.48。生物等效性分析結(jié)果顯示，受試制劑AUC0-t的90%置信區(qū)間為95.02%～102.14%，符合在80%～125%之間的要求[6]；AUC0-∞的90%置信區(qū)間為95.57%～102.39%，符合在80%～125%之間的要求[6]；Cmax的90%置信區(qū)間為93.18%～103.51%，符合在70%～143%之間的要求[6]。

3 討論

鹽酸溴己新是呼吸道疾病輔助性用藥，目前已有鹽酸溴己新在多種動(dòng)物體內(nèi)的藥物代謝動(dòng)力學(xué)研究報(bào)道，結(jié)果說(shuō)明鹽酸溴己新具有吸收迅速、分布廣泛、蛋白結(jié)合率高、血漿清除率低、分布容積大等特征。Iwaki等[8]以大鼠為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，分別靜脈注射0.3 mg/kg、1 mg/kg劑量的鹽酸溴己新，結(jié)果顯示：注射劑量為0.3 mg/kg時(shí)，AUC0-∞值為(789±295)h·ng/mL，t1/2β為(9.41±2.26)h；注射劑量為1 mg/kg時(shí)，AUC0-∞值為(2 181±425)h·ng/mL，t1/2β為(12.80±4.51)h。Iwaki等[8]還研究了鹽酸溴己新的絕對(duì)生物利用度，當(dāng)按10 mg/kg、25 mg/kg劑量分別給藥后，AUC0-∞值分別為(535±57)h·ng/mL和(1 315±394)h·ng/mL，與靜脈注射1 mg/kg劑量時(shí)所得AUC0-∞值比較，得鹽酸溴己新的絕對(duì)生物利用度為1.8%±3.9%。絕對(duì)生物利用度低可能是由首過(guò)效應(yīng)引起的。

de Backer等[9]采用單交叉試驗(yàn)設(shè)計(jì)，分別通過(guò)靜脈注射1 mg/kg劑量、口服2 mg/kg劑量2種方式給藥，研究鹽酸溴己新在馬體內(nèi)的生物利用度。結(jié)果顯示：靜脈注射給藥組t1/2β為(3.57±0.59)h，體清除率為(52.93±4.29)mL·kg-1·min-1，表觀分布容積為(16.23±2.25)L/kg，AUC0-∞值為(289.80±21.65)h·ng/mL；口服給藥組tmax為(1.17±0.24)h，Cmax為(13.97±2.71)ng/mL，AUC0-∞值為(33.23±2.71)h·ng/mL，生物利用度為5.73%±0.21%。Vandecasteele-Thienpont等[10]進(jìn)行了犬體內(nèi)鹽酸溴己新的生物等效性研究，發(fā)現(xiàn)鹽酸溴己新在犬體內(nèi)的藥物代謝動(dòng)力學(xué)特征符合二室開(kāi)放模型，口服給藥時(shí)生物利用度較低，可能存在首過(guò)效應(yīng)。

Dutta等[11]進(jìn)行了兔聯(lián)合使用阿莫西林和鹽酸溴己新的生物利用度研究，設(shè)置3個(gè)口服給藥試驗(yàn)組，分別單獨(dú)服用46 mg/kg劑量的阿莫西林、1.5 mg/kg劑量的鹽酸溴己新，以及阿莫西林(劑量46 mg/kg)與鹽酸溴己新(劑量1.5 mg/kg)混合物。結(jié)果說(shuō)明聯(lián)合使用阿莫西林和鹽酸溴己新對(duì)溴己新tmax、Cmax等參數(shù)沒(méi)有影響。

根據(jù)歐洲藥品管理局(European Medicines Agency，EMA)發(fā)布的鹽酸溴己新總結(jié)報(bào)告可知[4]：鹽酸溴己新口服后能被豬迅速吸收，1～3 h內(nèi)血藥濃度達(dá)到峰值，在第2次或第3次給藥后12 h時(shí)，達(dá)到穩(wěn)態(tài)血藥濃度；被牛口服后的數(shù)小時(shí)內(nèi)，血藥濃度會(huì)逐漸升高；被雞或火雞口服后，2～4 h內(nèi)血藥濃度可達(dá)到峰值。鹽酸溴己新有親脂性，對(duì)脂質(zhì)組織有很高的親和力，在這些組織里消耗緩慢。鹽酸溴己新在不同靶動(dòng)物體內(nèi)的半衰期不同，在豬體內(nèi)為20～30 h，在牛體內(nèi)為40～50 h，在雞或火雞體內(nèi)為40～50 h。該報(bào)告還顯示：豬單次肌肉注射0.5 mg/kg劑量的鹽酸溴己新1.5 h時(shí)，血藥濃度達(dá)到峰值，t1/2β為7.3 h；注射部位鹽酸溴己新清除迅速，給藥后24 h時(shí)，注射部位鹽酸溴己新僅剩余約4%；而對(duì)于雞或火雞，按1 mg/kg劑量連續(xù)口服5 d，在最后一次給藥后2～4 h時(shí)，血藥濃度達(dá)到峰值。

本文建立的雞血漿中溴己新濃度測(cè)定方法穩(wěn)定性好，準(zhǔn)確度、精密度、檢測(cè)限和定量限均滿足生物樣品定量分析要求，可為鹽酸溴己新可溶性粉在雞體內(nèi)生物等效性研究提供可靠的濃度測(cè)定方法。根據(jù)該方法，測(cè)得國(guó)產(chǎn)鹽酸溴己新可溶性粉、德國(guó)勃林格殷格翰公司生產(chǎn)的鹽酸溴己新可溶性粉2種制劑在雞體內(nèi)的tmax、Cmax及藥時(shí)曲線下面積等參數(shù)均無(wú)顯著性差異，說(shuō)明兩者具有生物等效性，有相似的臨床療效。另外，藥物代謝動(dòng)力學(xué)參數(shù)tmax與文獻(xiàn)[8-10]數(shù)據(jù)略有差異，可能與靶動(dòng)物品種有關(guān)。