肉牛副結(jié)核病的診斷及防控

孟立志

（河北省唐山市路南區(qū)行政審批局，河北唐山 063000）

肉牛的副結(jié)核病是牛類養(yǎng)殖中一種較為常見的疾病，屬于慢性消化道疾病。通常情況下肉牛的腸黏膜是該病的發(fā)病位置，嚴(yán)重威脅著肉牛的健康。

1 流行病學(xué)

1．1 病原特點

副結(jié)核分枝桿菌是誘發(fā)肉牛副結(jié)核病的主要病原，該病原屬于分枝桿菌科，分枝桿菌屬。使用抗酸性染色體對菌體進(jìn)行鏡檢后，可以明顯看出菌體呈現(xiàn)彎曲或是筆直的狀態(tài)。該菌體沒有莢膜，也不會形成芽孢，同時沒有生長出鞭毛，不可以自行移動，革蘭氏染色呈現(xiàn)陽性，并且具有一定的抗酸染色特性。

該菌體對外界的環(huán)境有著極強(qiáng)的適應(yīng)性，可以在土壤以及糞便中存活1年的時間，在外界陽光直射的情況下可以存活10 個月，在外界干燥缺水的情況下可以存活17 個月，但是外部環(huán)境若是潮濕且高溫，那么菌體的存活時間將會大大的降低。在外界溫度達(dá)到60℃時，菌體的生存時間為30 min，若是將菌體放置在4%的福爾馬林溶液中或5%的來蘇兒溶液中，僅需要10 min 便可以將菌體殺死。在含量10%～20%的漂白粉中浸泡20 min 也會消滅菌體。在氫氧化鈉溶液中浸泡2 h 菌體也會被清除。

副結(jié)核病的病原菌體包括色素型副結(jié)核菌、牛型副結(jié)核菌以及羊型副結(jié)核菌。色素型副結(jié)核對肉牛的患病致命率相對較小，羊型副結(jié)核菌會導(dǎo)致牛羊雙雙得病，牛副結(jié)核菌只會導(dǎo)致牛類得病。

1．2 易感動物

副結(jié)核病菌會對豬牛羊等家畜造成感染，尤其對牛的感染最為嚴(yán)重，在牛類中又以小牛犢的感染最為嚴(yán)重。當(dāng)牛犢感染副結(jié)核病的時間一般都是在小牛犢剛剛出生不久后，但是該病存在一定的病理潛伏期，加之病程的變化與發(fā)展緩慢，小牛犢一般在2 歲左右時才會出現(xiàn)臨床反應(yīng)。隨著肉牛年齡的不斷的增長，其自身的抵抗能力也在隨之上升，因此成年肉牛的患病幾率相對較小。當(dāng)小牛犢在吃奶的階段吸吮過已經(jīng)感染副結(jié)核病母牛的乳汁后，并會將病菌隨著奶水流進(jìn)體內(nèi)。

1．3 發(fā)病機(jī)理

肉牛的副結(jié)核病通常會出現(xiàn)在春秋兩季，一般都是地方性流行以及發(fā)散式傳播。肉牛在患病初期主要是由于小腸系膜以及淋巴節(jié)點出現(xiàn)病菌感染，因為此時會限制感染，導(dǎo)致肉牛目前不會出現(xiàn)其他的消耗性疾病，但是隨著副結(jié)核病的病理變化，回腸以及在小腸的末端出現(xiàn)大規(guī)模的病理變化，隨著時間的推移，病理變化會遍布肉牛的全身。病牛在感染期內(nèi)會持續(xù)的排出體內(nèi)的病毒，在糞便以及乳汁中的病菌可以在周圍的環(huán)境中存活很長的時間。小牛犢是患病的高發(fā)群體，一般是在吃奶的過程中，病毒經(jīng)由口腔進(jìn)行體內(nèi)，在體內(nèi)蟄伏2年后，小牛犢進(jìn)行病毒的臨床期，會在進(jìn)入臨床期的初期小牛出現(xiàn)間歇性腹瀉，等到后期間歇性腹瀉便會變成持續(xù)性腹瀉，小牛的身體會不斷的消瘦，就會因為身體器官的嚴(yán)重衰竭而發(fā)生導(dǎo)致死亡[1]。

1．4 臨床表現(xiàn)

副結(jié)核病的潛伏時間有長有短，并且大部分的患病肉牛都是隱性感染，在患病的初期一般不會出現(xiàn)任何的臨床的反應(yīng)，只會在排便的過程中存在一定的差異，患病初期排稀便，之后肉牛會出現(xiàn)下痢，最初是間歇性下痢，之后會慢慢變?yōu)槌掷m(xù)性下痢，最后排便會像水一樣。此外，病牛的糞便中會出現(xiàn)一定數(shù)量的白色氣泡，并伴有粘液以及血凝塊，同時糞便的氣味也會變得奇臭無比。

患病的肉牛在患病初期的精神良好，食欲正常，隨著患病的時間不斷變化，會導(dǎo)致病牛的精神出現(xiàn)萎靡，食欲不振，身體消瘦，體重下降等情況，肉牛的眼窩也會明顯的出現(xiàn)下陷，通常情況下會跪臥在地。一些母性肉牛在患副結(jié)核病后，會導(dǎo)致其乳汁量大大的降低，身體出現(xiàn)明顯的消瘦，有時還會伴有水腫以及貧血，一般情況下3～4 個月就會死亡，但是在?；疾r肉牛的體溫沒有發(fā)生變化。

1．5 解剖分析

患病致死的病牛尸體僵度良好，眼部結(jié)膜呈白色，體形嚴(yán)重消瘦。病牛頭部皮下以及胸部等部位都會出現(xiàn)淡黃色的膠樣萎縮，萎縮體積約為20～30 cm，胸水、腹水明顯增多。在小腸處會發(fā)現(xiàn)十分明顯的病變反應(yīng)，特別是回腸黏膜會增厚并在表層出現(xiàn)褶皺，外觀形狀類似于大腦表層，小腸內(nèi)部會出現(xiàn)粘稠狀的暗紅色物質(zhì)，氣味腥臭難聞，腸系膜會呈現(xiàn)淤血，淤血形狀呈現(xiàn)樹枝形狀。并在病牛的小腸以及胃部存在諸多的出血點，這些出血點的體型大小不一，腸系膜的淋巴結(jié)會變得水腫，腫脹程度會是原來的1～2 倍，腸系膜的表面的顏色會變成灰白色，橫切面多汁，皮質(zhì)部以及髓質(zhì)部的分界線變得模糊不清。心臟部位為紅褐色，質(zhì)感變脆，心肌脂肪出現(xiàn)萎縮。但是病牛的腎臟、肝臟以及脾臟等其他部位都沒有明顯的病理變化。

2 實驗室診斷

2．1 細(xì)菌學(xué)診斷

在無菌的情況下，實驗室工作人員要對肉牛的腸系膜淋巴結(jié)或是腸黏膜進(jìn)行采樣用于實驗中的病料，在對其進(jìn)行采集完成后，將對其進(jìn)行相對應(yīng)的涂片制作，使用抗酸性染色對其進(jìn)行染色處理，并進(jìn)行鏡檢，在檢測完成后實驗室的工作人員可以在病料中發(fā)現(xiàn)紅色的副結(jié)核分枝桿菌，其周圍的細(xì)菌以及細(xì)胞漿質(zhì)則會呈現(xiàn)藍(lán)色，副結(jié)核分枝桿菌的體積一般在0.5～1.5m，一般情況下呈現(xiàn)分支狀或單獨的排列。

取病牛糞便進(jìn)行細(xì)菌分離培養(yǎng)，取糞便于40 ml 生理鹽水中搖勻，并使用四層紗布對混合液體進(jìn)行過濾，在濾液中要適當(dāng)?shù)奶砑右恍┛兹妇G、草酸水溶液，在將其進(jìn)行混合后放置在37℃的溫水中，以3500～5000r/min 的速度離心30 min，濾液沉渣，并在馬鈴薯培養(yǎng)基上進(jìn)行接種，在外界溫度為37℃的條件下進(jìn)行培養(yǎng)，并甄選培養(yǎng)物進(jìn)行鏡檢，可發(fā)現(xiàn)抗酸性著色小桿菌[2]。

2．2 血清學(xué)診斷

當(dāng)前的副結(jié)核病血清診斷法一般可以分為3種，分別為AGID、ELISA、CFT。CFT 是診斷副結(jié)核病最早的方式之一，也是當(dāng)前國際上用來診斷副結(jié)核病的常用血清法，但是這種血清診斷法不僅操作較為復(fù)雜，而且檢測結(jié)果也有可能存在一定的虛假陽性，在大范圍的檢疫工作中很少被應(yīng)用。AGID 則是一種較為經(jīng)典的免疫學(xué)實驗方法，但是這種方式對于羊的副結(jié)核病診斷有著比較權(quán)威的判斷，而對肉牛進(jìn)行診斷，很有可能造成檢測結(jié)合的虛假。ELISA 是當(dāng)前使用最為廣泛的血清診斷方式。

2．3 變態(tài)反應(yīng)

變態(tài)反應(yīng)在診斷肉牛是否感染副結(jié)核病中有著極好的功效，一般情況下，實驗室的工作人員會使用禽結(jié)核菌和副結(jié)核菌對其進(jìn)行變態(tài)反應(yīng)，將藥劑量為0.2 mg 的結(jié)核菌注射到肉牛的頸部皮下組織中，觀察2 d，若肉牛頸部注射出的皮膚厚度變成了原來的2 倍，并伴有一定的腫脹、熱痛反應(yīng)，代表該肉?；加懈苯Y(jié)核??；若在實驗中對疑似患病的肉牛進(jìn)行檢查后，肉牛的反應(yīng)呈現(xiàn)陰性，為了確保實驗的準(zhǔn)確性，可對肉牛頸部再次進(jìn)行注射，對比兩次的檢測結(jié)果，兩次注射都要在同一個地方。

分子生物學(xué)檢測一般會使用PCR、熒光探針等手段，在分子層上用最快的速度找尋副結(jié)核病的病原。

3 肉牛副結(jié)核病的防控

3．1 做好疫情處理

副結(jié)核病的主要傳染源是排菌的患病肉牛，所以要對處于排菌期的肉牛進(jìn)行詳細(xì)的檢測，一旦檢測結(jié)構(gòu)呈現(xiàn)陽性就要立刻對肉牛進(jìn)行隔離并淘汰，以此來有效的阻止副結(jié)核病的擴(kuò)散。針對疑似患有副結(jié)核病的養(yǎng)殖場，防疫人員要定期對其進(jìn)行檢測，要對養(yǎng)殖場中肉牛的乳汁以及糞便進(jìn)行診斷，一旦發(fā)現(xiàn)陽性肉牛，馬上將其隔離。如果養(yǎng)殖場中的母牛沒有出現(xiàn)任何的臨床反應(yīng)，但是診斷結(jié)構(gòu)呈現(xiàn)陽性，防疫人員也要對其進(jìn)行隔離，并等母牛生下小牛后，將其與小牛隔離，對小牛使用人工喂乳，之后再由健康母牛對其進(jìn)行喂奶，在小牛1月、3月以及6月齡時進(jìn)行副結(jié)核病檢查，結(jié)果為陰性便可以將其放回牛群進(jìn)行集中飼養(yǎng)，一旦呈現(xiàn)陽性，要立刻淘汰。

該病的傳播方式一般為口傳播居多，一些病牛吃過的草料以及使用過的飲水器具都有可能沾染病毒。因此，需要飼養(yǎng)人員對患病肉牛所生活的場所進(jìn)行仔細(xì)的消毒與殺菌。同時每一年牛群都要接受變天反應(yīng)的診斷，檢測牛群中是否存在陽性肉牛，每年最少要進(jìn)行兩次檢測，確保肉牛群體的安全[3]。

3．2 加強(qiáng)飼養(yǎng)管理

副結(jié)核病的防控原則為“預(yù)防為主，防治結(jié)合”，預(yù)防的關(guān)鍵在于加強(qiáng)肉牛的飼養(yǎng)管理，特別對小牛要進(jìn)行更為細(xì)致的飼養(yǎng)管理，保證肉牛各項身體機(jī)能良好，提升肉牛自身抗病能力。在飼養(yǎng)階段，工作人員要在放牧、運輸以及養(yǎng)殖舍的選擇上進(jìn)行固定式的選擇，不允許外來牛群進(jìn)入自家養(yǎng)殖牛群的放牧區(qū)域，對養(yǎng)殖場的草料庫進(jìn)行嚴(yán)格的管理。養(yǎng)殖人員還要保證養(yǎng)殖舍內(nèi)部的干燥、通風(fēng)。要定期對養(yǎng)殖舍進(jìn)行清掃，增加陽光照射，為肉牛的養(yǎng)殖提供一個良好的環(huán)境。

3.3 定期免疫接種

針對牛群的免疫接種，養(yǎng)殖人員要定期進(jìn)行牛群的免疫接種，提高牛群的抗病性能。當(dāng)前疫苗市場上最為常見的疫苗為弱毒疫苗以滅活苗。但是在接種疫苗后不會百分百保證肉牛不會出現(xiàn)感染，一些肉牛還可以因為接種疫苗而造成感染，同時疫苗的接種在一定程度上會影響臨床的判斷。因此，在接種疫苗的時，要選擇質(zhì)量好的疫苗，同時市場監(jiān)管部門也要對疫苗市場進(jìn)行嚴(yán)格的管控，對黑心疫苗商機(jī)進(jìn)行嚴(yán)厲的打擊，確保當(dāng)前疫苗市場的清明。近些年來，我國的防疫人員已經(jīng)研制除了副結(jié)核菌弱毒滅活疫苗。例如，當(dāng)一頭健康的肉牛生下一只小牛后，該小牛的生長年齡小于7 d，可以在小牛胸前皮下組織進(jìn)行接種，所使用的是藥劑含量為1.5 ml 并摻雜了5 ml 副結(jié)核菌的菌苗，接種后7 d，防疫人員對其進(jìn)行變態(tài)反應(yīng)診斷，若幾次診斷后結(jié)果皆呈現(xiàn)陽性，可以說明小牛開始在體內(nèi)形成副結(jié)核病的免疫抗體，免疫效果可持續(xù)4年[4]。

4 結(jié)論

加強(qiáng)對肉牛副結(jié)核病的流行病理、診斷以及防治措施的認(rèn)識，不僅有利切實滿足當(dāng)前人民日益增長的肉類食品需求，提升肉牛養(yǎng)殖戶的養(yǎng)殖收益，同時借助對副結(jié)核病流行病理等問題的分析與研究，還可以有效找尋出副結(jié)核病的防治規(guī)律，切實保證當(dāng)前養(yǎng)殖戶的經(jīng)濟(jì)收益，進(jìn)而推動我國養(yǎng)殖畜牧業(yè)的全面發(fā)展。