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    基于環(huán)境DNA宏條形碼的柴河浮游藻類研究

    2022-12-10 07:36:56呂嘉誠林淵源李愛軍
    環(huán)境科學(xué)導(dǎo)刊 2022年6期
    關(guān)鍵詞:藻屬柴河計(jì)數(shù)法

    呂嘉誠,林淵源,李愛軍,趙 崢

    (1.昆明學(xué)院,昆明市河湖健康評估與修復(fù)院士工作站,云南省高校河湖健康評估與修復(fù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,云南 昆明 650214;2.云南省生態(tài)環(huán)境監(jiān)測中心,云南 昆明 650034)

    0 引言

    浮游藻類是水生態(tài)系統(tǒng)關(guān)鍵類群之一[1]。浮游藻類多樣性可反映水生態(tài)系統(tǒng)健康狀況,對指導(dǎo)受損水生態(tài)系統(tǒng)的修復(fù)有重要作用,廣泛應(yīng)用于河湖生態(tài)健康評估和修復(fù)[2]。近年來滇池浮游藻類群落結(jié)構(gòu)引起人們的廣泛關(guān)注,學(xué)者們探尋其群落結(jié)構(gòu)的變化特征[3],研究影響群落結(jié)構(gòu)的環(huán)境因子[4],為滇池的治理和修復(fù)提供了諸多基礎(chǔ)信息。柴河是滇池的主要入湖河流,由于河流周邊持續(xù)的農(nóng)業(yè)活動(dòng),成為滇池流域典型的農(nóng)業(yè)面源污染河道[4]。研究發(fā)現(xiàn)柴河從上游到下游浮游藻類檢出率、藻密度與河流位置無關(guān),與采樣點(diǎn)具體環(huán)境有關(guān),石門坎水庫未能檢出浮游藻類,且在甸頭人民壩發(fā)生柵藻(Scenedesmus)水華現(xiàn)象[5]。

    環(huán)境DNA宏條形碼技術(shù)的應(yīng)用,為分析浮游藻類多樣性提供了新途徑[6]。許多研究已經(jīng)證明了環(huán)境DNA宏條形碼技術(shù)在監(jiān)測浮游藻類方面的出色效果[7]。有研究表明環(huán)境DNA宏條形碼技術(shù)與傳統(tǒng)方法相比在顯示浮游藻類豐度方面有顯著提升,同時(shí)能監(jiān)測到更為豐富的浮游藻類多樣性[8]。在評估水生生物多樣性方面結(jié)果可靠,并在描述水生生態(tài)景觀差異時(shí)展現(xiàn)出很大潛力[9]。已有研究人員使用環(huán)境DNA高通量測序方法對太湖等典型湖泊藻類進(jìn)行了監(jiān)測,證明環(huán)境DNA高通量測序是一種潛在代替?zhèn)鹘y(tǒng)監(jiān)測方法的優(yōu)秀工具[10-13]。

    基于傳統(tǒng)形態(tài)學(xué)鑒定的浮游藻類研究,對專業(yè)要求較高且費(fèi)時(shí)費(fèi)力。為了高效快速地監(jiān)測柴河浮游藻類狀況,本研究于2021年7月,在柴河水庫及水庫上下游的三個(gè)采樣點(diǎn),通過環(huán)境DNA宏條形碼技術(shù)及顯微鑒定計(jì)數(shù)法調(diào)查柴河浮游藻類的群落組成和分布,旨在探討環(huán)境DNA宏條形碼對柴河浮游藻類研究的適用性,并科學(xué)評價(jià)其水質(zhì),為柴河水資源保護(hù)提供基礎(chǔ)資料。

    1 實(shí)驗(yàn)方法

    1.1 采樣點(diǎn)布設(shè)和環(huán)境樣品采集

    柴河位于昆明市晉寧區(qū)。作為滇池南岸主要入湖河流,柴河承擔(dān)著防洪、灌溉等任務(wù)。柴河流域以第一產(chǎn)業(yè)為主,農(nóng)藥化肥使用量較大,流域內(nèi)農(nóng)田污染物隨降雨進(jìn)入河道,是滇池湖泊富營養(yǎng)化的驅(qū)動(dòng)力之一[14]。在雨季(2021年7月)對柴河水進(jìn)行環(huán)境DNA測序及顯微鏡鑒定計(jì)數(shù)進(jìn)行浮游藻類多樣性分析。研究中,在柴河選擇了柴河水庫及其上下游三個(gè)采樣點(diǎn)位(24°31′~24°37′N,102°40′~102°41′E),點(diǎn)位海拔(1955~1916 m),這些地點(diǎn)包括了位于六街鎮(zhèn)的柴河源頭和承擔(dān)生活用水的柴河水庫以及段七村旁的柴河主河道(圖1)。

    圖1 柴河采樣點(diǎn)位

    eDNA方法和顯微鑒定計(jì)數(shù)法在相同點(diǎn)位采樣,兩種方法在水體表層分別采集水樣2 L。采樣時(shí)對現(xiàn)場進(jìn)行觀察并做好采樣記錄。樣品采集好后帶回實(shí)驗(yàn)室,放置在4℃冰箱中保存至過濾前。過濾前將水樣混勻,然后使用真空過濾泵經(jīng)0.45 mm濾膜得到三組重復(fù)樣品,三個(gè)重復(fù)的樣本來自同一采樣點(diǎn)。在每個(gè)采樣點(diǎn)使用過濾相同體積去離子水的方法,建立空白對照,過濾后濾膜儲(chǔ)存在-80℃冰箱內(nèi)至分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)前。

    1.2 浮游藻類多樣性分析的傳統(tǒng)方法

    研究中鑒定浮游藻類使用的傳統(tǒng)方法是顯微鑒定計(jì)數(shù)法,每個(gè)采樣點(diǎn)用采水器采集2 L水樣,水樣放入棕色瓶并加入30 mL魯哥氏液固定,使用當(dāng)天采集的水樣獲取采樣點(diǎn)浮游藻類數(shù)據(jù)。這種方法確保了兩種方法之間確定的浮游藻類數(shù)據(jù)差異不是由外在水質(zhì)變化等因素造成的。在采樣點(diǎn)采集樣品時(shí),將同一點(diǎn)位采集的樣本混勻,最大限度提高了檢測浮游植物的準(zhǔn)確性和概率。采樣后將采樣瓶放入冷凍保溫箱保存,并及時(shí)運(yùn)回實(shí)驗(yàn)室,具體操作根據(jù)《SC/T 9402-2010 淡水浮游生物調(diào)查技術(shù)規(guī)范》進(jìn)行[15],浮游藻類形態(tài)學(xué)鑒定由云南省生態(tài)環(huán)境監(jiān)測中心專家進(jìn)行鑒定。

    1.3 DNA宏條形碼技術(shù)監(jiān)測分析方法

    1.3.1 DNA提取與PCR擴(kuò)增

    水環(huán)境DNA提取實(shí)驗(yàn)在“昆明市河湖健康評估與修復(fù)院士工作站” “云南省高校河湖健康評估與修復(fù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室”進(jìn)行,實(shí)驗(yàn)室具備完成本項(xiàng)目研究的儀器設(shè)備和工作條件。按照提取試劑盒的操作步驟,使用PowerWater水樣DNA提取試劑盒提取DNA,但根據(jù)實(shí)際情況需稍加修改使用。每個(gè)采樣點(diǎn)水樣搖勻后取500 mL經(jīng)0.45 μm濾膜過濾,將濾膜放入到研磨管中,在SP buffer和Lysis S Buffer作用下,通過劇烈震蕩,基因組DNA被釋放出來。通過離心,去除大部分雜質(zhì)。加入沉淀腐殖酸、蛋白質(zhì)等雜質(zhì)的DA buffer,然后加入有適當(dāng)鹽分及pH值的Bingding Buffer,DNA被特異性吸附在Biospin離心柱膜上。通過洗滌,將金屬離子等殘留的雜質(zhì)去除。最后使用Elution Buffer將DNA從濾膜上洗脫下來,獲得基因組DNA。過濾的空白對照和陰性對照與樣品一起提取,并與樣品采用相同的方案。經(jīng)提取的環(huán)境DNA使用超微量紫外分光光度計(jì)測定DNA濃度,并同時(shí)在1%瓊脂糖凝膠中檢測。使用超微量紫外分光光度計(jì)測定過濾空白和陰性對照的環(huán)境DNA濃度,空白和陰性對照結(jié)果應(yīng)顯示為空白及陰性。

    使用引物序列為“TCCCTGCCHTTTGTACAC AC”的正向引物,序列為“CCTTCYGCAGGTTC ACCTAC”的反向引物擴(kuò)增真核浮游藻類的18S rRNA的V9區(qū)。采用序列為“ACCTACGGGRSGC WGCAG”的正向引物,序列為 “TTACCGCGGC KGCTGG”的反向引物擴(kuò)增原核浮游藻類的基因,以識(shí)別原核浮游藻類種類,該引物針對核糖體小亞基16S rRNA的V3區(qū)[16-17]。DNA擴(kuò)增再在Applied Biosystems VeritiPro PCR平臺(tái)進(jìn)行,對每個(gè)樣本做三次PCR重復(fù)。PCR反應(yīng)體系為 30 μL,包括15 μL 2×Rapid Taq Master Mix, 12 μL ddH2O,1.5 μL正向引物,1.5 μL反向引物以及1 μL的DNA模板(環(huán)境樣品、過濾空白和陰性對照)。對于所有樣本反應(yīng)程序如下:95℃預(yù)變性3 min,然后對反應(yīng)進(jìn)行33個(gè)循環(huán)(95℃保持 15 s,58℃保持15 s,72℃保持3 s)最后72℃保持5 min以達(dá)到徹底延伸。PCR擴(kuò)增后,在2%的瓊脂糖凝膠中檢測PCR產(chǎn)物,并保證過濾空白和陰性對照都沒有擴(kuò)增跡象。

    1.3.2 文庫構(gòu)建及高通量測序

    使用膠回收試劑盒切膠回收PCR產(chǎn)物,并用TE緩沖液洗脫回收目標(biāo)DNA片段。使用IIIumina公司TruSeq DNA PCR-Free Sample Prep Kit(FC-121-30001/3003)。

    測序采用PE300測序方式,測序試劑盒使用IIIumina公司MiSeq Reagent Kit v3(600 Cycle)。

    1.3.3 生物信息學(xué)分析

    使用QIIME25軟件完成生物信息操作。為了獲得高質(zhì)量數(shù)據(jù),對測序得到的原始數(shù)據(jù)進(jìn)行序列拼接,并根據(jù)Barcode區(qū)分樣品,初步篩選過濾,消除低質(zhì)量數(shù)據(jù),使用基于OTU的方法構(gòu)建特征表,并去除低頻率OTU以降低假陽性結(jié)果[18]。將OTU序列通過國家生物技術(shù)信息中心(NCBI)GenBank數(shù)據(jù)庫下載的數(shù)據(jù)庫進(jìn)行比對,如果序列存在,則認(rèn)為屬于一個(gè)物種。

    1.3.4 統(tǒng)計(jì)分析

    計(jì)算eDNA的生物多樣性指數(shù)時(shí),使用R語言的R studio操作界面加載vegan包后進(jìn)行計(jì)算[19]。測序數(shù)據(jù)與顯微鏡直接計(jì)數(shù)的數(shù)據(jù)一起輸入EXCEL軟件。將物種序列數(shù)豐富度數(shù)據(jù)與顯微鏡直接計(jì)數(shù)法數(shù)據(jù)分別計(jì)算,后將數(shù)據(jù)進(jìn)行比較,物種的相對豐度根據(jù)OTU豐度表和物種計(jì)數(shù)表計(jì)算。使用SPSS19軟件計(jì)算以確定樣本組之間存在的差異[20]。平行間交叉情況計(jì)算公式為[7]:

    1.3.5 基于浮游植物多樣性指數(shù)的水質(zhì)生物學(xué)評估

    Shannon-Wiener多樣性指數(shù)H'在0~1代表重污染,H'在1~2代表中污染,H'在2~3代表輕污染,H'>3代表清潔。[21]

    Pielou均勻度指數(shù)J在0~0.3代表重污染,J在0.3~0.5代表中污染,J>0.5代表輕污染或無污染[21]。

    2 結(jié)果分析

    2.1 柴河浮游藻類多樣性監(jiān)測

    2.1.1 柴河浮游藻類門水平群落組成

    用顯微鑒定計(jì)數(shù)法對3個(gè)點(diǎn)位采集的水樣進(jìn)行藻類鑒定分析,鑒定了6門16目18科24屬的浮游藻類(表1)。在顯微鑒定計(jì)數(shù)法觀察到的浮游植物中,以細(xì)胞數(shù)區(qū)分優(yōu)勢門類,優(yōu)勢門中,藍(lán)藻門(Cyanophyta)占95.35%、硅藻門(Bacillariophyta)占1.4%、隱藻門(Cryptophyta)占1.13%、綠藻門(Chlorophyta)占1.06%(圖2a)。在顯微鑒定計(jì)數(shù)法發(fā)現(xiàn)的24屬浮游藻類中,藍(lán)藻門假魚腥藻屬(Pseudanabaena)占76.84%、藍(lán)纖藻屬(Dactylococcopsis)占9.36%、尖頭藻屬(Raphidiopsis)占4.06%。

    通過eDNA宏條形碼技術(shù)在3個(gè)點(diǎn)位鑒定出了來自9門25目33科43屬的浮游藻類(表1)。在eDNA高通量測序得到的有關(guān)浮游藻類的124個(gè)OTU中,最具代表性的門類,藍(lán)藻門(Cyanophyta)占31.39%、綠藻門(Chlorophyta)占23.81%、黃藻門(Xanthophyta)占21.06%、硅藻門(Bacillariophyta)占8.69%(圖2b)。環(huán)境DNA高通量測序平均每個(gè)點(diǎn)位發(fā)現(xiàn)浮游藻類32屬,監(jiān)測到豐度最高的藻類同樣是藍(lán)藻門假魚腥藻屬。從發(fā)生頻率來看,前三位中,藍(lán)藻門假魚腥藻屬(Pseudanabaena)占22.68%、黃藻門周泡藻屬(Vacuolaria)占21.06%、綠藻門腎形藻屬(Nephroselmis)占20.05%。

    表1 eDNA宏條形碼技術(shù)和顯微鑒定計(jì)數(shù)法在柴河檢測到的浮游藻類類群數(shù)量

    結(jié)合顯微鑒定計(jì)數(shù)法和eDNA高通量測序數(shù)據(jù)顯示優(yōu)勢門為:藍(lán)藻門(Cyanophyta)占63.37%、綠藻門(Chlorophyta)占12.44%、黃藻門(Xanthophyta)占10.53%、硅藻門(Bacillariophyta)占5.03%。通過這兩種方法共同發(fā)現(xiàn)了藍(lán)藻門(Cyanophyta)、綠藻門(Chlorophyta)、硅藻門(Bacillariophyta)、甲藻門(Dinophyta)、隱藻門(Cryptophyta)、裸藻門(Euglenophyta)(圖2a、2b、2c)。

    圖2 兩種方法監(jiān)測到的柴河浮游植物門類組成

    2.1.2 柴河浮游藻類屬水平分布

    通過eDNA宏條形碼技術(shù)監(jiān)測結(jié)果可以發(fā)現(xiàn),實(shí)驗(yàn)選取的3個(gè)采樣點(diǎn)水平浮游藻類相對豐度差異很大。點(diǎn)位一位于人類活動(dòng)相對較少的六街鎮(zhèn)楊樹種植區(qū),樣品中衣藻屬(Chlamydomonas)相對豐度最高,其次是隱藻屬(Cryptomonas)、菱形藻屬(Nitzschia)、鐘罩藻屬(Dinobryon)。點(diǎn)位二地處柴河水庫,樣品中假魚腥藻屬相對豐度最高,其次是周泡藻屬(Vacuolaria)、微囊藻屬(Microcystis)。點(diǎn)位三位于段七村,樣品中菱形藻屬(Nitzschia)、剛毛藻屬、假魚腥藻屬是優(yōu)勢藻屬(圖4)。

    圖4 eDNA宏條形碼各位點(diǎn)相對豐度

    顯微鏡直接計(jì)數(shù)法監(jiān)測到點(diǎn)位一水樣中隱藻屬、小環(huán)藻藻屬(Cyclotella)、柵藻屬(Scenedesmus)為優(yōu)勢藻屬。點(diǎn)位二中假魚腥藻屬、尖頭藻屬(Raphidiopsis)是優(yōu)勢藻屬。點(diǎn)位三優(yōu)勢藻門為硅藻門,但相應(yīng)藻屬未辨別出名稱(圖3)。

    圖3 顯微鑒定計(jì)數(shù)法各位點(diǎn)相對豐度

    2.2 環(huán)境DNA宏條形碼監(jiān)測的精準(zhǔn)性

    2.2.1 平行樣本間監(jiān)測情況

    eDNA高通量測序從9個(gè)送檢樣本中共檢出真核浮游藻類13051條18srDNA序列,原核浮游藻類7689條16srDNA序列。最終有124個(gè)OUT被注釋到43屬浮游藻類上,涵蓋了藍(lán)藻門、綠藻門、硅藻門、甲藻門、隱藻門、裸藻門、金藻門、紅藻門、黃藻門等主要浮游藻類類群。在準(zhǔn)確性方面,檢測到目標(biāo)類群的平行樣本中,3個(gè)平行樣品的交叉率達(dá)到34.96%,至少出現(xiàn)在兩個(gè)平行樣品的屬所占比例為55.01%(表2)。

    表2 eDNA宏條形碼監(jiān)測數(shù)據(jù)的精確性評價(jià)結(jié)果 (%)

    2.2.2 環(huán)境DNA宏條形碼技術(shù)與傳統(tǒng)方法的交叉情況

    檢測出的浮游藻類中有9個(gè)屬是由eDNA和顯微鏡直接觀察法共同檢測出來的,有34屬和15屬分別由eDNA和顯微鏡直接觀察法單獨(dú)檢測出。通過兩種方法共同檢測到的科有色球藻科(Chroococcaceae)、念珠藻科(Nostocaceae)、假魚腥藻科(Pseudanabaenaceae)、柵藻科(Sc-enedesmaceae)、水網(wǎng)藻科(Hydrodictyaceae)、小球藻科(Chlorellaceae)、雙星藻科(Zygnemataceae)、圓篩藻科(Cosscinodiscaceae)、舟形藻科(Naviculaceae)、異極藻科(Gomphonemaceae)、多甲藻科(Peridiniaceae)、隱鞭藻科(Cryptomonadaceae)、裸藻科,占顯微鑒定計(jì)數(shù)法的72.2%(圖5a)。共同檢測到的屬有假魚腥藻屬、微囊藻屬、席藻屬、柵藻屬,小環(huán)藻屬、異極藻屬、多甲藻屬、隱藻屬、裸藻屬,占顯微鑒定計(jì)數(shù)法的37.5%(圖5b)。

    圖5 通過顯微鑒定計(jì)數(shù)法與eDNA宏條形碼技術(shù)監(jiān)測的浮游藻類科(a)、屬(b)交叉情況

    2.3 柴河各位點(diǎn)浮游藻類多樣性分析

    α多樣性指數(shù)(Alpha Diversity)常用于衡量樣品內(nèi)的生物群落多樣性。其中Pielou均勻度指數(shù)與物種累積數(shù)越大,表明樣本的生物種類越多,豐富度越高;Shannon指數(shù)綜合考慮物種數(shù)及物種頻度分布的均勻性,其值越高,說明群落多樣性越高,物種分布越均勻?;?8S V9及16S V3引物的宏條形碼測序數(shù)據(jù)所注釋的OTUs及其序列數(shù),分析使用R語言的R studio操作界面加載vegan包后進(jìn)行計(jì)算,得到各樣品中的生物群落多樣性指數(shù)見表2。C3點(diǎn)位樣品的Shannon指數(shù)、Pielou均勻度指數(shù)都顯著高于C1和C2點(diǎn)位樣品,C3點(diǎn)位生物多樣性顯著高于C1和C2。C2點(diǎn)位樣品物種累計(jì)數(shù)更高,說明點(diǎn)位三群落均勻度更高,物種相較于一、二點(diǎn)位更豐富(表3)。生物多樣性指數(shù)結(jié)果與起初設(shè)想的景觀差異有些許出入,但與采樣時(shí)所觀察的水質(zhì)理化因素密切相關(guān)。

    表3 Alpha多樣性指數(shù)統(tǒng)計(jì)

    2.4 基于浮游植物多樣性指數(shù)的水質(zhì)生物學(xué)評價(jià)

    通過常用的浮游藻類評價(jià)水體水質(zhì)的方法[21],根據(jù)分子生物學(xué)方法得到的浮游植物多樣性指數(shù),柴河Shannon-Wiener多樣性指數(shù)(H')對源頭評價(jià)為中污染,柴河水庫為中污染,柴河主河道為輕污染,Pielou均勻度指數(shù)(J)對源頭評價(jià)為中污染,柴河水庫為中污染,柴河主河道為輕污染(表4)。

    表4 柴河水質(zhì)生物學(xué)評價(jià)結(jié)果

    3 討論

    3.1 環(huán)境DNA宏條形碼技術(shù)表征柴河浮游藻類多樣性

    基于環(huán)境DNA宏條形碼技術(shù)在柴河共鑒定出9門25目33科43屬浮游藻類單元。水庫上游優(yōu)勢藻屬為衣藻屬,水庫段為假魚腥藻屬,水庫下游為菱形藻屬。這一監(jiān)測結(jié)果與顯微鑒定計(jì)數(shù)法接近,eDNA宏條形碼技術(shù)在科、屬水平鑒定的浮游植物種類分別占顯微鑒定計(jì)數(shù)法的72.2%,37.5%。資料顯示柴河歷史共出現(xiàn)67屬浮游藻類[22],eDNA宏條形碼監(jiān)測技術(shù)方法與歷史記錄的浮游植物重合度高,極大程度地貼合了柴河浮游藻類的狀態(tài)。對水生生物群落結(jié)構(gòu)沿城市化發(fā)展進(jìn)程的響應(yīng)做了傳統(tǒng)方法以及eDNA方法監(jiān)測,發(fā)現(xiàn)eDNA方法比傳統(tǒng)方法更加準(zhǔn)確,且eDNA方法與水質(zhì)關(guān)系更緊密[23]。運(yùn)用分子生物學(xué)方法可以得到描述群落多樣性的物種豐富度和均勻度指數(shù),并將其運(yùn)用于水質(zhì)生物學(xué)評估[24]。

    3.2 柴河不同點(diǎn)位浮游藻類生物多樣性差異

    水庫上游浮游藻類Shannon-Wiener指數(shù)為1.426,Pielou均勻度指數(shù)為0.406,生物學(xué)水質(zhì)評價(jià)結(jié)果為中污染。結(jié)合現(xiàn)場采樣時(shí)對取樣點(diǎn)周邊環(huán)境記錄觀察發(fā)現(xiàn),該采樣點(diǎn)為天然河段,采樣點(diǎn)周邊沒有明顯污染源,河水渾濁,水體流速快,河道中幾乎沒有沉水植物,對水質(zhì)凈化能力差。柴河水庫浮游藻類Shannon-Wiener指數(shù)為1.564,Pielou均勻度指數(shù)為0.452,水庫內(nèi)假魚腥藻屬占絕對優(yōu)勢,生物學(xué)水質(zhì)評價(jià)結(jié)果為中污染。水庫下游位于段七村旁主河道,浮游藻類Shannon-Wiener指數(shù)為2.358,Pielou均勻度指數(shù)為0.692,水質(zhì)生物學(xué)評價(jià)結(jié)果為輕污染。采樣時(shí)水庫分水閘沒有放水,水庫水對點(diǎn)位三水樣影響不大,且河道內(nèi)有大量沉水植物,起到了凈化水質(zhì)的作用,是水庫下游浮游藻類生物多樣性優(yōu)于前兩個(gè)點(diǎn)位的原因。

    4 結(jié)論與展望

    環(huán)境DNA宏條形碼技術(shù)在柴河浮游藻類監(jiān)測物種識(shí)別方面與顯微鑒定計(jì)數(shù)法具有一致性。兩種方法識(shí)別出的優(yōu)勢藻屬相同?;诃h(huán)境DNA宏條形碼技術(shù)的浮游藻類監(jiān)測可反映不同河段水質(zhì)差異。作為一種新方法,eDNA宏條形碼技術(shù)可監(jiān)測評估柴河浮游藻類多樣性,為柴河水生態(tài)健康評估和保護(hù)提供依據(jù)。

    未來,還要進(jìn)一步完善統(tǒng)一環(huán)境DNA的操作流程,并完善本土物種DNA條形碼數(shù)據(jù)庫,使測序數(shù)據(jù)的可重復(fù)性、準(zhǔn)確性提升。環(huán)境DNA宏條形碼技術(shù)在監(jiān)測浮游藻類多樣性及其相關(guān)工作具有較高可靠性,有望提升流域內(nèi)水生藻類監(jiān)測工作的水平。

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