脫氧核糖核酸酶1類似物3在自身免疫性疾病中的研究進(jìn)展

歐陽(yáng)博慧

廣西壯族自治區(qū)柳州市中醫(yī)醫(yī)院檢驗(yàn)科，廣西柳州 545001

自身免疫性疾病是由于機(jī)體免疫系統(tǒng)對(duì)自身組織和器官產(chǎn)生了免疫應(yīng)答，進(jìn)而造成其損傷及功能障礙的一系列相關(guān)疾病。脫氧核糖核酸酶1類似物3（deoxyribonuclease 1 analogue 3，DNASE1L3）是一種廣泛存在于體內(nèi)的內(nèi)切酶，參與DNA 代謝、降解細(xì)胞凋亡的DNA、程序性細(xì)胞死亡等生物過程從而觸發(fā)自身免疫反應(yīng)，引起自身免疫性疾病[1]。近年來，DNASE1L3 在多種自身免疫性疾病的診斷和鑒別診斷、疾病活動(dòng)和治療效果監(jiān)測(cè)中取得了許多進(jìn)展。本文就DNASE1L3 在自身免疫性疾病及其他疾病中的表達(dá)情況及相關(guān)進(jìn)展作一簡(jiǎn)要綜述。

1 DNASE1L3 的生物學(xué)特性

DNASE1L3 基因又稱作DHP2、DNASE1L3、LSD、SLEB6 基因，位于人第3 號(hào)染色體p14.3 區(qū)域，由8 個(gè)外顯子構(gòu)成，翻譯的蛋白質(zhì)由275 個(gè)氨基酸構(gòu)成。DNASE1l3 是脫氧核糖核酸內(nèi)切酶DNASE1 家族的一員[2]，肝臟和脾臟的髓樣細(xì)胞、巨噬細(xì)胞及樹突狀細(xì)胞是DNASE1L3 主要的分泌來源[2-3]。當(dāng)DNASE1L3 缺失，機(jī)體無法清除循環(huán)凋亡小體的DNA 而產(chǎn)生自身抗體，導(dǎo)致炎癥免疫復(fù)合物形成并沉積在機(jī)體不同組織及臟器，造成各種類型的免疫性疾病。在腫瘤的細(xì)胞免疫學(xué)研究中發(fā)現(xiàn)，大量腫瘤組織周圍的巨噬細(xì)胞—TAMs 科轉(zhuǎn)化為M2 型巨噬細(xì)胞，屏蔽腫瘤免疫監(jiān)視，從而促進(jìn)了腫瘤發(fā)生、侵襲和轉(zhuǎn)移[4]。巨噬細(xì)胞作為DNASE1L3 主要的分泌來源之一，其在腫瘤患者中的浸潤(rùn)程度可能與機(jī)體血清DNASE1L3 水平密切相關(guān)。這些證據(jù)均提示DNASE1L3 在免疫反應(yīng)及腫瘤微環(huán)境中發(fā)揮著重要的作用。

2 DNASE1L3與自身免疫性疾病

2.1 系統(tǒng)性紅斑狼瘡（systemic lupus erythematosus，SLE）

SLE 被視為自身免疫病的典型。循環(huán)的DNASE1L3是促使自身抗體產(chǎn)生和炎癥免疫復(fù)合物形成的自身抗原的主要來源[5]。在SLE 中DNASE1L3 的缺失，使體內(nèi)凋亡細(xì)胞的清除出現(xiàn)障礙，自身抗原暴露、自身抗體產(chǎn)生、慢性炎癥和組織損傷最終導(dǎo)致機(jī)體免疫激活加速。Zhao 等[1]測(cè)定SLE 患者血清DNASE1L3 水平后發(fā)現(xiàn)，其在抗dsDNA 抗體陽(yáng)性、腎臟受的累的SLE患者中顯著降低，并與疾病的嚴(yán)重程度呈負(fù)相關(guān)。另研究證實(shí)DNASE1L3 基因突變是SLE 易感性的遺傳決定因素[6]，因此，血清DNase1l3 活性的降低可能是SLE 的發(fā)病機(jī)制之一，也是一種有效地監(jiān)測(cè)SLE 疾病活動(dòng)性及治療效果的評(píng)價(jià)指標(biāo)。

2.2 皮肌炎和多肌炎（dermatomyositis and polymyositis，DM/PM）

DM/PM 是特發(fā)性炎癥性肌病最常見的兩種臨床類型。是一組骨骼肌的系統(tǒng)性、非化膿性炎性疾病，可累及多種臟器，伴發(fā)腫瘤或其他結(jié)締組織疾病[7]，其發(fā)病機(jī)制與遺傳、環(huán)境和免疫等因素有關(guān)[8]?？笿o-1抗體、抗Ro52 抗體、IFN[9]被認(rèn)為是肌細(xì)胞特異性/相關(guān)的自身抗體，Zhao 等[1]研究顯示，抗Jo-1 抗體陽(yáng)性較陰性DM/PM 患者的DNASE1L3 水平顯著降低；而抗Ro52 抗體陽(yáng)性與陰性患者的DNASE1L3 水平無差異；且DNASE1L3 水平與C 反應(yīng)蛋白和IgG 濃度呈負(fù)相關(guān)。因此，血清DNASE1L3 可能是DM/PM 的潛在血清學(xué)標(biāo)志物及疾病炎癥程度的指標(biāo)。

2.3 強(qiáng)直性脊柱炎（ankylosing spondylitis，AS）

AS 是一種可導(dǎo)致脊柱、骶髂關(guān)節(jié)及周圍小關(guān)節(jié)的損傷，出現(xiàn)骶骼關(guān)節(jié)僵硬、脊柱僵硬纖維化，甚至侵犯全身多個(gè)系統(tǒng)的自身免疫性疾病。其發(fā)病原因及機(jī)制不明，盡管人類白細(xì)胞抗原-B27（HLA-B27）被公認(rèn)為與AS 強(qiáng)相關(guān)，但仍存在20%左右的假陰性[10]。基因檢測(cè)方面，盡管超90%的AS 患者攜帶這種基因，卻只有1%的患者會(huì)發(fā)展成AS[11]。該研究顯示，AS 患者血清中的DNASE1L3 水平較正常對(duì)照組明顯增高，且與疾病活動(dòng)性呈正相關(guān)。因此，血清DNASE1L3 可能是AS的潛在血清學(xué)標(biāo)志物，將其與其他實(shí)驗(yàn)室及影像學(xué)檢查聯(lián)合更有助于AS 的診斷及疾病進(jìn)展的監(jiān)測(cè)[12]。

2.4 類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（rheumatoid arthritis，RA）

RA 是一種以關(guān)節(jié)滑膜炎癥為特征的自身免疫性疾病。Zhao 等[1]研究顯示RA 患者血清中DNASE1L3水平和活性無明顯變化，且與其他常見臨床參數(shù)及疾病活動(dòng)性無相關(guān)性。因此，血清DNASE1L3 可能是鑒別RA及AS 的理想指標(biāo)，兩者的免疫病理機(jī)制也可能不同于SLE 和DM/PM。

2.5 系統(tǒng)性硬化?。╯ystemic sclerosis，SSc）

SSc 是一種以免疫激活、血管并發(fā)癥和內(nèi)部器官過度纖維化最終導(dǎo)致皮膚硬化、血管缺血為主要特征的全身性自身免疫性疾病。盡管大多數(shù)已確定的SSc易感性位點(diǎn)與其他自身免疫性疾病重疊，如SLE、RA等風(fēng)濕性疾病[13]，但有學(xué)者通過免疫芯片矩陣技術(shù)分析得出，DNASE1L3 的3p14 位點(diǎn)突變與SSc 的發(fā)生具有顯著的相關(guān)性[14-15]。血清DNASE1L3 有可能是SSc潛在的診斷指標(biāo)。

2.6 低補(bǔ)體性蕁麻疹血管炎綜合征（hypocomplementemic vasculitic urticarial syndrome，HUVS）

HUVS 為一種免疫復(fù)合物疾病，病因及發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，主要表現(xiàn)為復(fù)發(fā)性的皮膚蕁麻疹、關(guān)節(jié)炎/關(guān)節(jié)痛及低補(bǔ)體血癥、血管性水腫、眼部炎癥、腎小球腎炎[16]。Carbonella 等[17]及Oz?akar 等[16]發(fā)現(xiàn)HUVS患者存在DNASE1L3 突變，并認(rèn)為這與HUVS 的發(fā)病有關(guān)。

2.7 1 型糖尿?。╰ype 1 diabetes mellitus，T1DM）

T1DM 是一種具有遺傳傾向的促炎性自身免疫性疾病，多由T 淋巴細(xì)胞介導(dǎo)，攻擊破壞胰島β 細(xì)胞引發(fā)炎癥[18]。為了尋找自身免疫性疾病的潛在致病突變，有學(xué)者對(duì)T1DM 易感位點(diǎn)進(jìn)行了精細(xì)定位，最終在DNASE1L3、PTPN22、SH2B3 和TYK2 中找到了可信度較好的致病突變[19]。下一步，可就DNASE1L3 作為T1DM 易感位點(diǎn)在疾病發(fā)病中的功能機(jī)制及作用進(jìn)行更深入的研究。

3 DNASE1L3 在其他疾病中的研究

免疫系統(tǒng)在腫瘤發(fā)生發(fā)展中也發(fā)揮重要作用，但DNASE1L3 在不同癌癥中的表達(dá)存在差異。DNASE1L3基因在早期腎透明細(xì)胞癌（clear cell renal cell carcino ma，ccRCC）中過度表達(dá)，其表達(dá)要顯著高于晚期ccRCC 患者，這可能與DNASE1L3 誘導(dǎo)癌細(xì)胞的凋亡有關(guān)[20]。

既往在對(duì)肝細(xì)胞癌的診斷、預(yù)后預(yù)測(cè)及療效評(píng)估中，經(jīng)典腫瘤標(biāo)志物甲胎蛋白的敏感性較低，存在20%甚至更高的假陽(yáng)性或假陰性率，且其水平與肝細(xì)胞癌的分期和預(yù)后無關(guān)[21]。經(jīng)基因檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，肝癌組織中DNASE1L3 水平下調(diào)，且DNASE1L3 低表達(dá)組患者的甲胎蛋白含量較高，腫瘤較大，更易轉(zhuǎn)移，預(yù)后明顯差于高表達(dá)組[22-23]。因此，有理由認(rèn)為DNASE1L3可作為HCC 的疾病進(jìn)展和預(yù)后的檢測(cè)指標(biāo)。

在口腔鱗狀細(xì)胞癌中DNASE1L3 表達(dá)水平明顯降低，提示其可能在侵襲過程中起到了抑制作用[24]。在呼吸系統(tǒng)疾病中，有學(xué)者對(duì)患者支氣管肺泡灌洗液的RNA 進(jìn)行深度測(cè)序并定量分析發(fā)現(xiàn)重癥肺支原體肺炎患兒與輕度肺支原體肺炎患兒比較，DNASE1L3基因表達(dá)明顯下調(diào)[25]。DNASE1L3 在哮喘患者支氣管內(nèi)膜活檢組織中的基因表達(dá)增加[26]，在嗜酸性哮喘患者中表達(dá)也增高[27-28]?？梢?，DNASE1L3 在呼吸系統(tǒng)疾病中的作用值得期待。

4 結(jié)論與展望

綜上所述，多項(xiàng)研究報(bào)道了DNASE1L3與自身免疫性疾病發(fā)展及預(yù)后中的重要價(jià)值，但其作用機(jī)制仍未充分闡明。臨床常用各種自身抗體的檢測(cè)作為疾病的診斷及鑒別診斷的指標(biāo)，但最常見的抗核抗體陽(yáng)性既不是診斷的充分條件，也不是必要條件[29]；HLA-B27陽(yáng)性也不再是鑒別AS及RA 的金標(biāo)準(zhǔn)[30]。目前，除了SLE，DNASE1L3 在其他免疫性疾病中的表達(dá)研究甚少，在不同的惡性腫瘤及分期中其表達(dá)的差異性是否與DNASE1L3 誘導(dǎo)癌細(xì)胞的凋亡有關(guān)，仍停留于基礎(chǔ)研究階段，缺乏大量臨床驗(yàn)證，難以向臨床轉(zhuǎn)化。今后應(yīng)擴(kuò)大檢測(cè)范圍，探究DNASE1L3 在其他自身免疫性疾病及各類腫瘤中的表達(dá)水平，分析其差異，將其與各疾病相關(guān)基因的定量檢測(cè)、病理組化結(jié)合起來，以期為更多疾病的早期診斷、進(jìn)展、預(yù)后和治療提供既敏感又特異的實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)或新的治療策略，提高患者的生存期，改善其生活質(zhì)量。