聲帶切除術(shù)后損傷修復(fù)與再生的研究進(jìn)展

劉婕妤 周恩 楊慕 肖禹 秦念 張錕藝 肖旭平

聲音是在大腦皮質(zhì)以及皮質(zhì)下神經(jīng)中樞控制和協(xié)調(diào)下，通過正常的發(fā)聲器官、聽覺系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)共同作用形成的自動反饋的發(fā)聲系統(tǒng)產(chǎn)生的[1]。

聲帶由甲杓肌、固有層深層、固有層中層、固有層淺層和鱗狀上皮層組成，固有層深層和固有層中層形成聲韌帶，發(fā)聲主要歸功于固有層，它可以在100～1 000 Hz頻率承受高達(dá)30%的應(yīng)變，并且可以在短暫拉伸后快速恢復(fù)[2]。它主要由細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)組成，如：纖維蛋白(Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ型膠原蛋白，彈性蛋白)、間質(zhì)分子(糖胺聚糖:透明質(zhì)酸HA、蛋白多糖、糖蛋白)、脂質(zhì)和碳水化合物；在人和動物中聲帶固有層三層肉眼下并沒有明顯分開。固有層淺層可以在聲韌帶上自由移動，深層膠原蛋白和彈性蛋白越來越密集，固有層中層和固有層深層含有最高濃度的彈性蛋白和膠原蛋白(Ishii等，1996；de Melo等，2003)；由于硬度和粘度增加，聲帶局部瘢痕會影響?zhàn)つげɑ蚵晭У倪\動，還會導(dǎo)致聲門閉合不完全(Benninger等，1996)。硬度和粘度增加的綜合效應(yīng)導(dǎo)致聲帶振動減弱，也可致發(fā)聲嘶啞和疲勞(Thibeault等，2002；Sataloff等，2015)?？梢娐晭侨祟惏l(fā)聲的主要結(jié)構(gòu)，從極輕微的聲嘶到完全失聲，多為聲帶病變或其他病因使聲帶的正常運動發(fā)生障礙所致。美國約3%～9%的人口患有嗓音障礙[3]，老年人嗓音障礙患病率較高[4]。故聲帶損傷后的修復(fù)與再生對臨床以及人類日常生活和社會交際有重要意義。本文對不同手術(shù)方式及范圍致聲帶損傷后的修復(fù)和再生研究進(jìn)展進(jìn)行綜述，為進(jìn)一步認(rèn)識聲帶損傷及修復(fù)機制提供參考。

1 不同手術(shù)方式和范圍所致聲帶損傷后的修復(fù)過程

1.1聲帶銳性切除術(shù) 徐文等[5]通過在支撐喉鏡下對兔一側(cè)聲帶行前中部銳性切除，深達(dá)聲韌帶，觀察到在術(shù)后3天～3個月聲帶固有層內(nèi)細(xì)胞外基質(zhì)分泌增加,主要表現(xiàn)為以膠原為主的纖維組織明顯增多且呈無序排列,透明質(zhì)酸略有增加,纖維連接蛋白明顯增加;在術(shù)后6～12個月，膠原和纖維連接蛋白含量持續(xù)高于正常,聲帶局部瘢痕形成；而聲帶瘢痕形成則可引起發(fā)聲障礙甚至呼吸障礙，因此，認(rèn)為在聲帶損傷后 3～40天可能是聲帶損傷介入治療的關(guān)鍵時期，如果能在此時抑制膠原的沉積，可能會減少損傷后期聲帶瘢痕的形成。

聲帶損傷的預(yù)后與損傷程度直接相關(guān)。聲帶黏膜上皮層和固有層淺層的損傷愈合后不留瘢痕,因為固有層淺層的基質(zhì)中含有許多抗瘢痕形成的物質(zhì),如：透明質(zhì)酸、核心蛋白聚糖和纖維蛋白，透明質(zhì)酸可以抑制成纖維細(xì)胞合成膠原及膠原沉積,核心蛋白聚糖和纖維蛋白可以阻止膠原的形成和膠原纖維的生成(Hedlund等，1994)。而固有層中層以下即聲韌帶甚至聲帶肌受損,愈合過程中纖維組織廣泛增生,排列紊亂,將產(chǎn)生不可逆的瘢痕,導(dǎo)致聲帶黏膜波減弱或缺失及聲門閉合不全,成為影響發(fā)聲的兩個關(guān)鍵因素[6]。

1.2聲帶CO2激光術(shù) Remacle等(2000年)將內(nèi)鏡下聲帶CO2激光手術(shù)分為I型(聲帶上皮切除術(shù))、Ⅱ型(聲韌帶下聲帶切除術(shù))、Ⅲ型(跨肌肉聲帶切除術(shù))、Ⅳ型(全聲帶切除術(shù))、Ⅴ型(擴大聲帶切除術(shù))5種術(shù)式，其中Ⅴ型又分為Ⅴa型：對側(cè)聲帶和前連合；Ⅴb型：杓狀軟骨;Ⅴc型：聲門下；Ⅴd型:喉室。

梁耕田等[7]將4只實驗犬于支撐喉鏡下行Remacle Ⅲ型聲帶CO2激光顯微手術(shù)，功率為6 W；術(shù)后6 h可見聲帶創(chuàng)面大量炎性細(xì)胞浸潤、紅細(xì)胞滲出，細(xì)胞充血水腫；術(shù)后3周聲帶創(chuàng)面輕度充血水腫及炎性滲出，有成纖維細(xì)胞增生，新生血管形成，大量纖維組織無序排列；術(shù)后8周創(chuàng)面充血水腫消失，局部攣縮凹陷，無粘連和肉芽形成，但各層纖維組織增生紊亂，血管增粗；術(shù)后12周雙側(cè)聲帶表面光滑，局部攣縮，聲帶瘢痕形成，固有層增厚，膠原纖維增多，排列紊亂，呈團狀或束狀，纖維間較多不規(guī)則間隙，血管和腺體少見或消失；認(rèn)為損傷后3個月聲帶瘢痕基本形成。張慶翔等[8]觀察315例聲帶病變行CO2激光術(shù)后患者的聲帶及嗓音恢復(fù)情況，依據(jù)病變類型及范圍行RemacleⅠ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴa型聲帶CO2激光顯微手術(shù)，每組63例，隨訪6個月以上；結(jié)果表明：Ⅰ、Ⅱ型手術(shù)后聲帶形態(tài)及功能恢復(fù)較好；Ⅲ型手術(shù)后聲帶的形態(tài)和功能部分恢復(fù)；Ⅳ型及Ⅴa型手術(shù)后患者發(fā)聲功能常難以恢復(fù)；認(rèn)為手術(shù)切除聲帶的范圍與深度是影響術(shù)后聲帶自主修復(fù)的主要因素，如果手術(shù)不涉及聲帶肌，則具備恢復(fù)形態(tài)的框架和基礎(chǔ)；如果聲帶完全切除，則失去了恢復(fù)形態(tài)和功能的細(xì)胞和結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)。張燚等[9]將30只實驗犬隨機分A(CO2功能1 W)、B(CO2功能3 W)、C(CO2功能5 W)、D(CO2功能8 W)、E(冷器械)5組，分別行Remacle I型聲帶CO2激光顯微手術(shù)，觀察到C、D組創(chuàng)面黏膜反應(yīng)較A、B、E組重，創(chuàng)面愈合慢，可見病理性瘢痕；在光學(xué)顯微鏡下計數(shù)單位面積內(nèi)纖維細(xì)胞數(shù)量及毛細(xì)血管數(shù)量，C、D組明顯高于A、B、E組；在電鏡下觀察發(fā)現(xiàn)A、B、E組損傷較輕，聲帶修復(fù)過程無明顯差別，而C、D組損傷較重，聲帶修復(fù)后固有層內(nèi)彈力纖維稀少，膠原纖維明顯增多；認(rèn)為采用低功率CO2激光(1～3 W)行聲帶上皮下切除術(shù)，組織修復(fù)結(jié)果與冷器械手術(shù)相似。Shen等[10]對早期聲門型喉癌患者行聲帶CO2激光切除術(shù)，發(fā)現(xiàn)術(shù)后聲帶黏膜愈合過程在形態(tài)學(xué)上分為四個階段：階段1為創(chuàng)面暴露；階段2為滲出，于創(chuàng)面表面形成白色涂層；階段3為肉芽；階段4為穩(wěn)定的黏膜。認(rèn)為聲帶損傷在滲出和肉芽形成后120天內(nèi)形成新生聲帶，此階段內(nèi)應(yīng)密切監(jiān)測隨訪行喉鏡檢查，若出現(xiàn)異常表現(xiàn)，如：復(fù)發(fā)性白斑、肉芽組織增生或愈合持續(xù)時間超過4個月，應(yīng)考慮進(jìn)行干預(yù)。

1.3聲帶低溫等離子射頻消融手術(shù) 低溫等離子射頻消融是一種新型微創(chuàng)手術(shù)技術(shù)，范圍涵蓋口腔及口咽癌、下咽癌以及喉癌等，此類手術(shù)患者的預(yù)后與既往開放手術(shù)及經(jīng)口激光手術(shù)相當(dāng)，但恢復(fù)更快、圍術(shù)期及長期并發(fā)癥發(fā)生率亦極低，且功能保留率極高[11～14]。

2012年Divi等[15]對犬進(jìn)行喉部等離子射頻消融手術(shù)，在術(shù)后0、4、7天摘取喉部觀察，發(fā)現(xiàn)術(shù)后7天創(chuàng)面完全上皮化，未見聲帶肌肉的損傷，炎性反應(yīng)比先前報道的CO2激光術(shù)后輕，表明該技術(shù)是去除聲帶病損組織的可行方法，可最大限度地減少瘢痕的形成。黃鈞濤等[16]對低溫等離子射頻消融術(shù)和CO2激光手術(shù)治療早期聲門型喉癌效果比較的Meta分析表明，低溫等離子射頻消融術(shù)與CO2激光切除術(shù)都是治療早期聲門型喉癌的有效方式，相較于CO2激光，低溫等離子射頻消融術(shù)手術(shù)時間更短，術(shù)后嗓音恢復(fù)更好。

2 聲帶瘢痕的形成及分類

聲帶瘢痕主要是聲帶固有層內(nèi)纖維組織沉積而成[17]，其形成影響了發(fā)聲功能和嗓音質(zhì)量。過度用聲、炎性反應(yīng)、特異或非特異性感染、咽喉反流、外傷、腫瘤、化學(xué)刺激等都有可能導(dǎo)致聲帶瘢痕的形成。而聲帶注射、聲帶病變術(shù)后、器械損傷及長期氣管插管等使聲帶受到損傷，也可產(chǎn)生聲帶瘢痕[18]。王玲等[19]認(rèn)為聲帶瘢痕形成的患者主要有2種表現(xiàn)：一是聲音粗糙或出現(xiàn)復(fù)音，檢查可見聲帶表面尚光滑，聲門能閉合，但雙側(cè)聲帶振動不對稱，局部振動僵硬或可見白色瘢痕區(qū)；二是聲音低弱，發(fā)聲不能持久、乏力，檢查可見聲帶局部白色瘢痕突起，聲帶呈弓形，聲門閉合不全，聲時縮短。根據(jù)聲帶瘢痕的深度及單雙側(cè)可分為四種類型[20]：①固有層萎縮伴/不伴上皮受累；②上皮層、固有層和肌肉層均受到影響；③聲帶瘢痕位于前聯(lián)合處；④聲帶全長瘢痕形成且嗓音質(zhì)量明顯變差。目前預(yù)防聲帶瘢痕形成的最好的方法是采用適當(dāng)?shù)暮盹@微外科技術(shù)和激光進(jìn)行喉部手術(shù)。

3 聲帶修復(fù)與再生的材料及應(yīng)用

3.1組織工程學(xué)在聲帶修復(fù)與再生中的應(yīng)用 近幾年來組織工程學(xué)在聲帶修復(fù)與再生的研究方向主要集中在模擬天然聲帶組織機械特性的生物材料、捕捉動態(tài)聲帶生物力學(xué)特性的生物反應(yīng)器設(shè)計以及這些生物材料在體內(nèi)外的應(yīng)用?；诮M織工程的基本原理，可注射的、有生物活性的和可生物降解的聚合物和水凝膠具有合適的化學(xué)成分、結(jié)構(gòu)特征和特定的機械性能，已被廣泛應(yīng)用[21]。該材料比傳統(tǒng)的材料植入更具有優(yōu)勢，因為其能在損傷部位固化成任何需要的形狀，且能增強與周圍正常組織的界面交鎖；該方法對患者的侵襲性和潛在創(chuàng)傷最小，限制了感染和繼發(fā)瘢痕形成的風(fēng)險，簡單易行，患者易接受，降低了治療成本[21，22]。

3.1.1透明質(zhì)酸(HA)及其衍生物 HA是一種天然存在的糖胺聚糖，由D-葡萄糖醛酸和N-乙酰D-氨基葡萄糖重復(fù)單元組成[23]，它是聲帶中含量最豐富的糖胺聚糖，每毫克總蛋白質(zhì)中約有6 μg透明質(zhì)酸(Hahn等，2008年)，將HA從聲帶中移除會導(dǎo)致聲帶硬度增加25%～40%(Chan等，2001年)。HA具有生物活性，并與細(xì)胞遷移和傷口愈合有關(guān)。細(xì)胞表面受體CD44(Turley等，1991年)和透明質(zhì)酸介導(dǎo)的運動性受體(Krasinski等，2007年)與血凝素結(jié)合，啟動炎癥、細(xì)胞運動和細(xì)胞生長等級聯(lián)反應(yīng)，從而在傷口愈合和促進(jìn)瘢痕形成過程中發(fā)揮重要作用[23]。鑒于HA可再生能力的前景，需要關(guān)注的是如何延長其短的半衰期，為了延長其停留時間，可通過功能化交聯(lián)位點，如：取代HA骨干上的羧基或羥基。

Hylan B凝膠是天然透明質(zhì)酸的衍生物，具有增強流變性、抗降解和促進(jìn)結(jié)締組織向注射部位生長的作用(Hallén等，1999年)。Jahan-Parwar等(2008年)采用CO2激光切除實驗犬左側(cè)聲帶黏膜層和固有層，4周后，4只犬左側(cè)聲帶黏膜下注Hylan B凝膠，1只犬左側(cè)聲帶黏膜下注射生理鹽水，結(jié)果顯示激光切除術(shù)后4周時，所有動物術(shù)側(cè)聲帶均表現(xiàn)為軟組織缺損和黏膜波消失，注射Hylan B的動物術(shù)側(cè)聲帶黏膜波恢復(fù)，而注射生理鹽水的動物術(shù)側(cè)聲帶黏膜波仍消失；注射12周后，注射Hylan B的犬聲帶組織再生、黏膜波恢復(fù)，而注射鹽水的犬聲帶組織無再生，黏膜波仍消失；組織學(xué)研究顯示注射Hylan B的犬聲帶有殘留的固有層，而注射生理鹽水的犬術(shù)側(cè)聲帶僅見致密的黏膜下瘢痕。該研究表明CO2激光切除犬聲帶后黏膜下注射Hylan B凝膠可在12周內(nèi)恢復(fù)聲帶組織結(jié)構(gòu)和黏膜波，并促進(jìn)功能性組織再生；Hylan B凝膠可作為軟組織支架用于固有層缺損聲帶的發(fā)聲功能修復(fù)。

HA天生存在于聲帶中，具有生物活性、生物相容性和非免疫原性，由于易于修飾，天然HA分子可以提供交聯(lián)位點，根據(jù)交聯(lián)程度和使用的濃度，其粘彈性和生物特性具有極好的可調(diào)性。多項研究表明HA支架可以支持聲帶組織再生，未來的研究應(yīng)該著重于HA支架與細(xì)胞的結(jié)合，并根據(jù)患者的需要進(jìn)一步細(xì)化調(diào)控其粘彈性，以提供充分和持續(xù)的組織再生功能。

3.1.2細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)衍生的天然材料 脫細(xì)胞化ECM支架可以保存原生組織微結(jié)構(gòu)和ECM成分，為浸潤細(xì)胞(如：干細(xì)胞、成纖維細(xì)胞等)提供物理和生化環(huán)境，以促進(jìn)其良好的附著、生長和分化。ECM支架還可以保留對聲帶功能至關(guān)重要的固有力學(xué)性能，Huber等(2003年)進(jìn)行了第一次異種移植物植入聲帶重建的研究，此研究使用脫細(xì)胞豬膀胱黏膜下層(UBS-ECM)重建犬喉部組織以替代手術(shù)移除的犬甲狀軟骨和聲帶，3個月后，觀察到甲狀軟骨、上皮組織、結(jié)締組織、腺體結(jié)構(gòu)和部分骨骼肌的再生，但沒有恢復(fù)到原來的位置，重建的組織在微觀結(jié)構(gòu)和宏觀結(jié)構(gòu)上與原始組織非常相似。因此，可以推測ECM的組織和成分決定了聲帶的振動特性，由于此支架是膀胱黏膜下層ECM的異種移植，聲帶功能不會完全恢復(fù)。2016年，Kitamura等[24]對犬行半喉切除術(shù)，術(shù)后植入豬膀胱黏膜下層脫細(xì)胞化細(xì)胞外基質(zhì)(UBM)衍生支架重建喉缺損組織，雖然在支架植入后一周內(nèi)有一只犬出現(xiàn)局部感染，但1個月內(nèi)所有犬的創(chuàng)面均顯示良好的再上皮化，并且并發(fā)癥較少；術(shù)后6個月對喉再生效果進(jìn)行評價，約一半動物發(fā)聲閾值壓力和標(biāo)準(zhǔn)化黏膜波振幅為正?；蚪咏?。如前所述，膀胱黏膜下層異種移植物的使用可能會影響這些動物的聲帶功能，因此，聲帶特異性ECM可能是聲帶修復(fù)的理想選擇。

3.1.3合成生物高分子材料 由于大多數(shù)用于聲帶損傷治療的可注射非細(xì)胞生物材料快速的酶降解和注射后原生細(xì)胞補充有限，導(dǎo)致其再生潛力有限。針內(nèi)壓力和宿主免疫反應(yīng)的作用，往往引起細(xì)胞凋亡?？山到馕⑶蚩赏ㄟ^增加細(xì)胞停留時間、在注射過程中保護(hù)細(xì)胞、提供早期免疫應(yīng)答保護(hù)來提高治療效果。Reyes Valenzuela等[25]采用包裹人聲帶成纖維細(xì)胞(HVFF)的微球(Ms)作為聲帶固有層損傷后的靶向再生材料，制備了海藻酸鈉、海藻酸鈉-聚L-賴氨酸、海藻酸鈉-殼聚糖微球，并對其生物相容性、溶脹性、力學(xué)性能以及細(xì)胞因子的產(chǎn)生進(jìn)行了研究；發(fā)現(xiàn)海藻酸鈉微球的聲帶再生性能最理想，能抵抗機械損傷，并且具有類似于天然聲帶固有層的硬度，能增加成纖維細(xì)胞的增殖。

3.1.4生物反應(yīng)器 生物反應(yīng)器通過提供有利的條件，如：最佳的溫度、壓力、底物或支架支持、調(diào)節(jié)生化信號和物理化學(xué)刺激，為細(xì)胞和組織的體外發(fā)育提供一個可控的環(huán)境[26]。用于聲帶組織工程的可靠的體外模型或生物反應(yīng)器必須包含四個精確控制的主要變量，即：頻率、振幅、可編程振蕩機制以及延長細(xì)胞生存能力的適宜環(huán)境。除了生物相容性外，這些系統(tǒng)中使用的材料還必須能夠抵抗開關(guān)應(yīng)力和摩擦能量耗散(Titze等，2004年)。通常有四種生物反應(yīng)器：①基于揚聲器的生物反應(yīng)器；②基于執(zhí)行器的生物反應(yīng)器；③基于流變儀的生物反應(yīng)器；④基于氣流和真空的生物反應(yīng)器，生物反應(yīng)器對于在體外復(fù)制聲帶的發(fā)聲條件是必不可少的。迄今為止的研究主要集中在發(fā)展以執(zhí)行器和揚聲器為基礎(chǔ)的生物反應(yīng)器，以及少量基于流變儀和空氣動力學(xué)的生物反應(yīng)器。研究通過各種振蕩機制將張力應(yīng)用于細(xì)胞培養(yǎng)，涉及的頻率范圍為50～300 Hz，平面外位移為0.1～1.0 mm[27]。

3.2干細(xì)胞 干細(xì)胞應(yīng)用的主要目的是恢復(fù)原生組織的生化特性，使細(xì)胞外基質(zhì)得以重建，并恢復(fù)聲帶的振動和發(fā)聲功能。主要使用的干細(xì)胞為自體和非自體內(nèi)間充質(zhì)干細(xì)胞(MSCs)、成纖維細(xì)胞、肌細(xì)胞、脂肪衍生的干細(xì)胞(ASCS)、人胚胎干細(xì)胞(HESC)和誘導(dǎo)的多能干細(xì)胞(IPSCS)[28]。國內(nèi)胡蓉等[29]對34只實驗兔的53側(cè)聲帶進(jìn)行聲帶銳性損傷，將自體脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞植入20側(cè)損傷聲帶后，示蹤觀察脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞在聲帶固有層內(nèi)的生長分布；同時以單純支架(膠原或透明質(zhì)酸凝膠)植入18側(cè)受損聲帶(膠原10側(cè)，透明質(zhì)酸8側(cè))及單純損傷15側(cè)聲帶作為對照組，術(shù)后15 d～12個月時采用HE染色、Masson染色、Alcian Blue染色及免疫組化染色觀察聲帶形態(tài)學(xué)變化及聲帶固有層膠原、透明質(zhì)酸、纖維連接蛋白的含量及分布變化；結(jié)果表明脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞植入兔損傷聲帶后具有促進(jìn)聲帶細(xì)胞外基質(zhì)分泌、合理分布及部分有序化排列的功能，具有促進(jìn)聲帶修復(fù)再生的作用。Long等[30]將兔脂肪來源的間充質(zhì)干細(xì)胞(ASC)嵌入三維纖維蛋白凝膠中，形成細(xì)胞基質(zhì)外聲帶替代物(COVR)；16只兔切除單側(cè)聲帶上皮及固有層，并采用纖維蛋白膠原、自體切除聲帶覆蓋再植、COVR植入三種方法分別重建；4周后，對喉部進(jìn)行組織學(xué)檢查和發(fā)聲功能檢查，結(jié)果表明兔聲帶切除術(shù)后植入COVR減少了瘢痕的產(chǎn)生，短期內(nèi)發(fā)聲時產(chǎn)生對稱的黏膜波；1個月后發(fā)聲功能優(yōu)于自體聲帶覆蓋再植組。干細(xì)胞重建在乳腺癌中得到了最廣泛的研究，也仍然存在極大的爭議[31]；一項對小鼠的研究發(fā)現(xiàn)，使用MSC增加了導(dǎo)管癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移(Karnoub等，2007年)；頭頸部癌細(xì)胞株也出現(xiàn)了類似的結(jié)果[32]。因此在進(jìn)行喉癌切除術(shù)后喉部重建的干細(xì)胞療法之前，還需要更仔細(xì)的實驗研究。

3.33D打印技術(shù) 3D打印技術(shù)具有易用性、可承受性、可用材料的多樣性以及創(chuàng)建復(fù)雜結(jié)構(gòu)的能力，該技術(shù)已被用于模擬喉切除術(shù)后的氣管形態(tài)[33]和環(huán)狀軟骨的重建[34]。Goldstein等[35]描述了一種3D打印聚乳酸移植物，植入成熟軟骨細(xì)胞用于喉氣管重建。Romero等[36]選擇并改進(jìn)了一種3D打印技術(shù)，可以將紫外線固化液體硅膠嵌入凝膠狀介質(zhì)，3D打印出立方體并接受拉伸測試來驗證其材料性能，然后打印出自振蕩聲帶模型，涂上代表上皮細(xì)胞的薄層硅膠，用于發(fā)聲測試，以收集開始壓力、頻率和振幅數(shù)據(jù)。顯然，3D打印對聲帶修復(fù)再生有希望，但還需要進(jìn)一步研究。

4 總結(jié)

綜上所述，不同手術(shù)方式、不同手術(shù)范圍聲帶切除術(shù)后聲帶自主修復(fù)的過程有所不同，CO2激光切除術(shù)后3個月聲帶瘢痕基本形成，而手術(shù)范圍與深度是影響聲帶術(shù)后自主修復(fù)的主要因素。近年來等離子射頻消融手術(shù)開展越來越多，但對其具體術(shù)式暫無明確分類，對使用不同功率以及其損傷后不同時間段聲帶自主修復(fù)的機制也缺乏細(xì)致的研究。目前聲帶損傷后修復(fù)與再生的方法主要為組織工程學(xué)，但近年來已不局限于使用一種方法，因此應(yīng)將組織工程學(xué)、干細(xì)胞、3D打印結(jié)合起來，構(gòu)建綜合治療方案，進(jìn)行更多的實驗研究，以待能夠臨床應(yīng)用于聲帶創(chuàng)傷的修復(fù)。