廣西捐精人群葡萄糖-6-磷酸脫氫酶缺乏癥的篩查結(jié)果及意義▲

何思遠(yuǎn) 余政禮 梁 樂(lè) 覃 敏 黃燕梅 王志強(qiáng) 吳永明

(廣西醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院人類(lèi)精子庫(kù)，廣西南寧市 530021)

人類(lèi)精子庫(kù)是利用超低溫冷凍保存等技術(shù)，采集、檢測(cè)、保存和提供精液或精子供輔助生殖臨床治療使用的機(jī)構(gòu)[1]。廣西精子庫(kù)按照原國(guó)家衛(wèi)生和計(jì)劃生育委員會(huì)頒布的《人類(lèi)精子庫(kù)基本標(biāo)準(zhǔn)和技術(shù)規(guī)范》的要求[2]，對(duì)捐精志愿者進(jìn)行嚴(yán)格的精液質(zhì)量評(píng)估，以及血液傳染病、性傳播疾病、優(yōu)生遺傳疾病的篩查，排除不符合要求的志愿者，以保證精液質(zhì)量和供精安全。葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(glucose-6-phosphate dehydrogenase,G-6-PD)缺乏癥是由于基因突變導(dǎo)致紅細(xì)胞G-6-PD合成減少或缺乏，從而引起溶血性貧血的一種遺傳性血液病。廣西是我國(guó)南方G-6-PD缺乏癥高發(fā)區(qū)之一[3]。有學(xué)者指出，在中國(guó)南方地區(qū)應(yīng)考慮對(duì)捐精者進(jìn)行地中海貧血、G-6-PD缺乏癥等遺傳性疾病的排查[4]。廣西人類(lèi)精子庫(kù)接待的志愿者的籍貫主要為廣西籍，因此需要加強(qiáng)G-6-PD的篩查，最大限度降低精子庫(kù)出生后代患遺傳病的風(fēng)險(xiǎn)。本研究對(duì)廣西精子庫(kù)1 332例志愿者的G-6-PD篩查結(jié)果進(jìn)行回顧性分析，觀察不同籍貫、不同民族的捐精志愿者G-6-PD缺乏癥檢出率的差異，為廣西精子庫(kù)進(jìn)行相應(yīng)的區(qū)域或民族高發(fā)遺傳病檢測(cè)提供參考。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象 選取2013年3月至2021年5月期間在廣西醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院人類(lèi)精子庫(kù)捐精的1 332例志愿者作為研究對(duì)象。所有志愿者均符合《人類(lèi)精子庫(kù)基本標(biāo)準(zhǔn)和技術(shù)規(guī)范》規(guī)定的基本條件，精液常規(guī)篩查合格且精液病原學(xué)檢測(cè)無(wú)異常；精液篩查前志愿者已明白供精者權(quán)利、義務(wù)及所捐贈(zèng)的精液用途，并簽署知情同意書(shū)。

1.2 G-6-PD活性的篩檢方法 囑志愿者采血前一日不要熬夜，清淡飲食；次日抽取志愿者的靜脈血2～3 mL 送至我院產(chǎn)前診斷與地中海貧血篩查實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行檢測(cè)，采用WHO推薦的酶速率法進(jìn)行檢測(cè)。G-6-PD活性參考范圍(由我院產(chǎn)前診斷與地中海貧血篩查實(shí)驗(yàn)室提供)為1 300～3 600 IU，G-6-PD活性<1 300 IU時(shí)判定為G-6-PD缺乏癥。

1.3 志愿者一般資料的收集 將志愿者身份證信息(姓名、民族、出生日期、身份證號(hào)等)通過(guò)自動(dòng)識(shí)別設(shè)備導(dǎo)入精子庫(kù)捐精系統(tǒng)，根據(jù)志愿者填寫(xiě)的個(gè)人信息記錄籍貫。由精子庫(kù)接待醫(yī)生與所有志愿者確認(rèn)籍貫、民族。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 使用SPSS 26.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。計(jì)數(shù)資料以例數(shù)(百分比)表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 志愿者的一般資料 1 332例志愿者的年齡為20～40周歲，其中廣西籍志愿者1 006例(占75.53%)、非廣西籍志愿者326例(占24.47%)；非廣西籍志愿者中，176例來(lái)自我國(guó)南方地區(qū)(湖南籍42例、廣東籍29例、四川籍19例、湖北籍16例、安徽籍14例、福建籍13例、江西籍11例、重慶籍10例、貴州籍8例、海南籍8例、云南籍6例)，14例來(lái)自我國(guó)東部地區(qū)(浙江籍7例、江蘇籍7例)，134例來(lái)自我國(guó)北方地區(qū)(河南籍30例、山東籍29例、山西籍22例、河北籍13例、黑龍江籍12例、陜西籍9例、遼寧籍7例、內(nèi)蒙古籍5例、吉林籍3例、甘肅籍3例、寧夏籍1例)，2例來(lái)自我國(guó)西部地區(qū)(青海籍和新疆籍各1例)。1 006例廣西籍志愿者中，壯族364例，漢族593例，其他少數(shù)民族(包括瑤族、苗族、侗族、彝族、毛南族、仫佬族)49例。

2.2 廣西籍與非廣西籍志愿者的G-6-PD缺乏癥檢出率比較 1 332例志愿者中檢出G-6-PD缺乏癥134例，總檢出率為10.06%。廣西籍、非廣西籍志愿者的G-6-PD缺乏癥檢出率分別為12.62%(127/1 006)、2.15%(7/326)，廣西籍志愿者的G-6-PD 缺乏癥檢出率高于非廣西籍志愿者(χ2=29.870，P<0.001)。

2.3 非廣西籍G-6-PD缺乏癥志愿者的籍貫分布情況 7例非廣西籍G-6-PD缺乏志愿者中，6例來(lái)自我國(guó)南方地區(qū)(廣東籍2例、海南籍1例、貴州籍1例、湖南籍1例、湖北籍1例)、1例來(lái)自我國(guó)北方地區(qū)(山西籍)。

2.4 廣西籍G-6-PD缺乏癥志愿者的民族構(gòu)成情況 127例廣西籍G-6-PD缺乏癥志愿者中，壯族58例，檢出率為15.93%(58/364)，漢族64例，檢出率為10.79%(64/593)，其他少數(shù)民族5例(分別為瑤族3例、侗族2例)，檢出率為10.20%(5/49)。廣西籍壯族、漢族和其他少數(shù)民族(瑤、苗、侗、彝、毛南族和仫佬族)志愿者G-6-PD缺乏癥檢出率比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=5.679，P=0.058)。

3 討 論

遺傳咨詢、家系調(diào)查和體格檢查能發(fā)現(xiàn)有潛在遺傳病風(fēng)險(xiǎn)的捐精志愿者，而實(shí)驗(yàn)室檢查能篩選出無(wú)癥狀遺傳基因攜帶者。在《人類(lèi)精子庫(kù)基本標(biāo)準(zhǔn)和技術(shù)規(guī)范》[2]提出需要篩查的遺傳病中，部分遺傳病患者可表現(xiàn)為無(wú)癥狀基因攜帶，我國(guó)大多數(shù)的精子庫(kù)因所在單位由于實(shí)驗(yàn)條件受限而未能對(duì)志愿者進(jìn)行這部分遺傳病的檢測(cè)，只能通過(guò)遺傳咨詢、家系調(diào)查和體格檢查進(jìn)行篩選。雖然目前有相關(guān)基因檢測(cè)機(jī)構(gòu)可以進(jìn)行全外顯子基因檢測(cè)，但從運(yùn)營(yíng)成本方面考慮，大多數(shù)精子庫(kù)暫未將全外顯子基因檢測(cè)作為捐精者常規(guī)的遺傳篩查項(xiàng)目。因此，遺傳咨詢、家系調(diào)查和體格檢查在捐精遺傳篩選中至關(guān)重要。G-6-PD缺乏癥為伴X性染色體不完全顯性遺傳病，若父方為攜帶者，女兒會(huì)攜帶有致病基因，而兒子正常；父母均為患者時(shí)，母方若為純合子，子女均攜帶致病基因。然而，多數(shù)G-6-PD缺乏癥患者無(wú)誘因時(shí)可無(wú)臨床癥狀，易因服藥或進(jìn)食蠶豆時(shí)出現(xiàn)較嚴(yán)重的溶血性貧血[5]，在對(duì)捐精者進(jìn)行遺傳咨詢、家系調(diào)查和體格檢查時(shí)容易被遺漏。因此，在我國(guó)G-6-PD缺乏癥高發(fā)地區(qū)對(duì)捐精者開(kāi)展G-6-PD活性檢測(cè)尤為重要。

G-6-PD缺乏癥在黑色人種、地中海地區(qū)人群和東方民族人群中的發(fā)生率較高，患病人群地理分布與歷史上瘧疾流行的地理分布存在著一定的相關(guān)性，與地中海貧血在民族分布上有重疊現(xiàn)象[6-7]。杜傳書(shū)[8]對(duì)中國(guó)12個(gè)民族近4萬(wàn)人進(jìn)行抽樣調(diào)查，發(fā)現(xiàn)G-6-PD基因頻率在0～4.483%之間，呈“南高北低”分布。一項(xiàng)流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果顯示，我國(guó)大陸兒童G-6-PD缺乏癥患病率為4.03%，其中廣西、廣東、海南的G-6-PD缺乏癥位居前三，南部地區(qū)患病率高于中部地區(qū)及北部地區(qū)[9]。還有學(xué)者報(bào)告廣西地區(qū)新生兒G-6-PD缺乏癥檢出率為7.4%，男嬰的檢出率高于女?huà)隱10]。鐘志娟[11]報(bào)告，廣西西南邊境五縣(寧明縣、大新縣、天等縣、靖西市和那坡縣)居民的G-6-PD缺乏率為9.96%。以上調(diào)查研究表明，廣西地區(qū)人群G-6-PD缺乏癥發(fā)病率較高，因此有必要對(duì)廣西人類(lèi)精子庫(kù)捐精者開(kāi)展G-6-PD活性檢測(cè)。

廣西人類(lèi)精子庫(kù)是廣西目前唯一一家人類(lèi)精子庫(kù)，參與捐精的志愿者以來(lái)自廣西各縣市的人群為主，這些人群罹患G-6-PD缺乏癥的風(fēng)險(xiǎn)較大。本研究中，廣西籍志愿者占75.53%，非廣西籍志愿者占24.47%，非廣西籍志愿者來(lái)自26個(gè)省或自治區(qū)。廣西精子庫(kù)捐精志愿者的G-6-PD缺乏癥總檢出率為10.06%(134/1 332)，稍高于王奇玲等[12]報(bào)告的廣東省精子庫(kù)捐精志愿者G-6-PD缺乏癥檢出率[4.29%(266/6 207)]，以及胡靜等[13]報(bào)告的湖南省精子庫(kù)捐精志愿者G-6-PD缺乏癥檢出率[0.15%(5/3 336)]，說(shuō)明G-6-PD缺乏癥在廣西地區(qū)捐精志愿者中檢出率較高。此外，廣西籍捐精志愿者 G-6-PD缺乏率高于非廣西籍捐精志愿者(P<0.05)，這可能與廣西是我國(guó)G-6-PD缺乏癥高發(fā)區(qū)有關(guān)。在非廣西籍志愿者人群中，檢出的G-6-PD缺乏者的籍貫以廣東、海南、貴州、湖南為主，除山西有1例外均分布于我國(guó)南方地區(qū)，這與我國(guó)G-6-PD缺乏癥呈“南高北低”的發(fā)病特點(diǎn)相符合。另外，我們的調(diào)查尚未發(fā)現(xiàn)廣西籍壯族、漢族和其他少數(shù)民族(瑤族、苗族、侗族、彝族、毛南族和仫佬族)捐精者G-6-PD缺乏癥檢出率存在差異性(P>0.05)，這可能與該研究樣本量較少以及研究對(duì)象的特殊性有關(guān)。

鑒于廣西為G-6-PD缺乏癥高發(fā)區(qū)的特點(diǎn)，廣西人類(lèi)精子庫(kù)在捐精者首次精液篩查前即開(kāi)展此病的遺傳咨詢。根據(jù)該病的遺傳方式且攜帶者不一定發(fā)病的特點(diǎn)，對(duì)遺傳咨詢中否認(rèn)患此病的捐精者，重點(diǎn)對(duì)其兄弟、母親和外祖父進(jìn)行病史調(diào)查，同時(shí)開(kāi)展實(shí)驗(yàn)室G-6-PD活性檢測(cè)，以剔除患有G-6-PD缺乏癥的捐精者。實(shí)驗(yàn)室G-6-PD活性檢測(cè)是G-6-PD篩查的重要手段，有利于篩選出遺傳咨詢未發(fā)現(xiàn)的無(wú)癥狀G-6-PD缺陷者，大大降低了G-6-PD缺陷遺傳篩選的漏診率。

總之，G-6-PD缺乏癥在廣西人類(lèi)精子庫(kù)捐精志愿者中的檢出率較高，尤其是在廣西籍的志愿者中。雖有研究顯示女性不孕患者患有G-6-PD缺乏癥不影響行體外受精-胚胎移植的結(jié)局[14]，但精子庫(kù)必須遵循有利于供受者的倫理原則，降低子代遺傳病發(fā)生的風(fēng)險(xiǎn)和預(yù)防出生缺陷。G-6-PD缺乏癥發(fā)病率較高的地區(qū)的精子庫(kù)，必須嚴(yán)格把好遺傳咨詢、家系調(diào)查和實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)3大關(guān)口，最大限度降低精子庫(kù)后代患G-6-PD缺陷的風(fēng)險(xiǎn)。因此，我們建議國(guó)內(nèi)人類(lèi)精子庫(kù)，針對(duì)籍貫為南方地區(qū)省份，特別是廣西籍和廣東籍的捐精者，要加強(qiáng)G-6-PD缺乏癥的遺傳咨詢和家系調(diào)查，必要時(shí)應(yīng)進(jìn)行G-6-PD活性檢測(cè)，以確定捐精者是否有G-6-PD缺陷。