肝細(xì)胞生長因子是“乙癸同源”可能的物質(zhì)基礎(chǔ)探討

寧 港，吳 悔，李波男，石若冰，周 興*

（1.湖南中醫(yī)藥大學(xué)，湖南 長沙 410208；2.湖南中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院男科，湖南 長沙 410007）

中醫(yī)學(xué)認(rèn)為，“乙木”屬肝，“癸水”屬腎，“乙癸同源”又被稱為“肝腎同源”。 早在《黃帝內(nèi)經(jīng)》中就有關(guān)于“肝腎同源”理論的相關(guān)記載，《素問·五運(yùn)行大論》指出：“北方生寒，寒生水，水生咸，咸生腎，腎生骨髓，髓生肝”。 可見腎通過骨髓與肝產(chǎn)生聯(lián)系，構(gòu)成中醫(yī)學(xué)的“母子”關(guān)系。 李中梓在《醫(yī)宗必讀·乙癸同源論》中提出：“東方之木，無虛不可補(bǔ)，補(bǔ)腎即所以補(bǔ)肝。 北方之水，無實(shí)不可瀉，瀉肝即所以瀉腎……然木既無虛，又言補(bǔ)肝者，肝氣不可犯，肝血自當(dāng)養(yǎng)也……水既無實(shí)，又言瀉腎者，腎陰不可虧，而腎氣不可亢也。氣有余者伐之，木之屬也。伐木之干，水賴以安。夫一補(bǔ)一瀉，氣血攸分，即瀉即補(bǔ)，水木同府”，并據(jù)此總結(jié)出“益腎水以補(bǔ)肝血，瀉肝氣以驅(qū)腎邪”的肝腎互治理論，得到了后世醫(yī)家的普遍認(rèn)可，被用來廣泛指導(dǎo)臨床疾病的診治[1]。 肝細(xì)胞生長因子（hepatocyte growth factor, HGF）是一種多效性的生長因子，在促進(jìn)肝細(xì)胞再生與損傷修復(fù)[2-3]、改善生殖[4]等方面均發(fā)揮作用。 因此，HGF 是否為中醫(yī)肝、腎之間溝通聯(lián)系的紐帶，是否為“乙癸同源”的可能物質(zhì)基礎(chǔ)，本文將進(jìn)行初步探索。

1 “乙癸同源”理論對(duì)于臨床疾病特別是男科疾病的指導(dǎo)意義

隨著對(duì)“乙癸同源”理論的研究，從肝腎論治疾病越來越受到重視，并取得了良好的臨床療效。 如女童性早熟、帕金森病、灼口綜合征等臨床疾病的發(fā)生與肝腎二臟的功能失調(diào)密切相關(guān)，或因腎虛無以制陽、相火妄動(dòng)而致性早熟，或因肝腎不足、筋脈失養(yǎng)而致帕金森病，或因肝腎陰虛、虛火上炎而致灼口綜合征[5-7]。 由此可見，在“乙癸同源”理論的指導(dǎo)下，從肝腎入手可以為臨床疾病的診治提供新的思路與解決辦法。

中醫(yī)學(xué)認(rèn)為，男子以腎為先天。 近年來，“乙癸同源”理論在指導(dǎo)男科疾病的診治上同樣發(fā)揮重要作用，如勃起功能障礙、男性不育癥、男性更年期綜合征、前列腺增生癥和慢性前列腺炎等男性常見疾病。 譚新華認(rèn)為肝腎二臟的功能失調(diào)是導(dǎo)致年輕男性陽痿的主要原因，治療上主張肝腎為本，兩者兼顧[8]。曹繼剛從肝腎關(guān)系入手，認(rèn)為男性不育或因寒邪中腎，寒凝水結(jié)導(dǎo)致精氣閉阻；或郁久化熱，水與熱結(jié)，水熱熾盛，熱灼精液；或肝陰虛導(dǎo)致內(nèi)熱擾精；或肝氣虛導(dǎo)致疏泄不及，精液排泄不暢[9]。 崔云在治療男性更年期綜合征上著眼于“肝腎同源”，以補(bǔ)腎疏肝、調(diào)和氣血為主[10]。張春和從“肝腎同源”理論出發(fā)，認(rèn)為前列腺增生主要由于腎氣虧虛不能滋養(yǎng)肝血，導(dǎo)致肝臟功能失調(diào)，氣滯血瘀為患，在治療上主張“疏肝，補(bǔ)腎，活血”互用[11]。 此外，譚新華還認(rèn)為前列腺炎的發(fā)生主要是由外感濕熱，蘊(yùn)久成毒敗精，日久化為瘀濁所致，臨床常治以補(bǔ)腎化濁，瀉肝解毒[12]。 由此可見，“乙癸同源，肝腎同治”的理論已經(jīng)得到了廣泛的應(yīng)用，并被證實(shí)可以有效指導(dǎo)男性相關(guān)疾病的診治。

2 HGF 與肝的相關(guān)性

2.1 “肝主升發(fā)”與HGF 促進(jìn)肝臟細(xì)胞再生及損傷修復(fù)

“肝主升發(fā)”。 肝在五行中屬于木，通于春氣，具有生生不息的特性。 其“升發(fā)”之性可以激勵(lì)并促進(jìn)肝臟的“生發(fā)”之性，即促進(jìn)肝再生及損傷修復(fù)過程[13]。

研究表明，通過靜脈注射重組人HGF 到肝切除小鼠中時(shí)，可以明顯增強(qiáng)肝細(xì)胞的復(fù)制[14]；內(nèi)化素B蛋白可刺激肝切除大鼠的肝細(xì)胞增殖再生，這與激活HGF 受體依賴性MAPK 信號(hào)通路有關(guān)[15]；研究表明，非編碼的單鏈RNA 分子與肝臟疾病中的纖維化過程有關(guān)， 其中miR-202 可負(fù)調(diào)控靶基因HGF的表達(dá)，增加纖維化因子及Ⅰ型膠原的表達(dá)水平，促進(jìn)肝纖維化損傷的病理過程[16]。

2.2 “肝主筋”與HGF 促進(jìn)關(guān)節(jié)軟骨及韌帶肌腱損傷修復(fù)

“肝主筋”“諸筋皆屬于節(jié)”。 中醫(yī)學(xué)所說的“筋”包括肌腱、韌帶、筋膜、軟骨關(guān)節(jié)等[17]。骨骼關(guān)節(jié)的濡養(yǎng)離不開肝腎二臟的精血充盈。肝血充，腎精足則筋骨自利；肝腎虧，精血虛，則筋骨失養(yǎng)，關(guān)節(jié)不利。 所以骨骼關(guān)節(jié)疾病的發(fā)生，多責(zé)之肝腎，或肝血虛而致筋骨失于濡養(yǎng)，或肝氣郁結(jié)而致血不養(yǎng)筋，或腎精不足而致肝血不充，筋脈失養(yǎng)。 如絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥、膝骨關(guān)節(jié)炎、腰椎小關(guān)節(jié)骨關(guān)節(jié)炎及陽痿的發(fā)生都與肝腎密切相關(guān)[18-21]。

通過研究，已經(jīng)在骨骼、關(guān)節(jié)軟骨以及滑膜組織中發(fā)現(xiàn)HGF 及其受體c-Met 的表達(dá)[22]。 HGF 與“肝主筋”的聯(lián)系主要體現(xiàn)在：（1）促進(jìn)關(guān)節(jié)軟骨的損傷修復(fù)。 通過低硒條件和T-2 毒素構(gòu)建大鼠大骨節(jié)病模型發(fā)現(xiàn)，低硒組、T-2 毒素組、低硒+T-2 毒素組大鼠的關(guān)節(jié)軟骨及骺板軟骨中HGF 及c-Met 陽性表達(dá)率與常規(guī)組比較均有增加（P＜0.05），因此，推測(cè)HGF及c-Met 參與了軟骨關(guān)節(jié)細(xì)胞的損傷修復(fù)[23]；在研究HGF 對(duì)兔關(guān)節(jié)體外培養(yǎng)軟骨細(xì)胞的作用中發(fā)現(xiàn)，HGF 對(duì)關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞有明顯促增殖作用[24]；此外，在對(duì)髕股關(guān)節(jié)軟骨缺損的實(shí)驗(yàn)大耳白兔注射HGF后，發(fā)現(xiàn)其缺損組織修復(fù)明顯較對(duì)照組快（P＜0.05），且修復(fù)質(zhì)量更好（P＜0.05）[25]。 （2）促進(jìn)韌帶肌腱的損傷修復(fù)。 研究表明，對(duì)實(shí)驗(yàn)大鼠的韌帶損傷傷口注射HGF 相比對(duì)照組注射生理鹽水，其韌帶恢復(fù)后的膠原纖維直徑、極限負(fù)荷、軸向剛度均優(yōu)于對(duì)照組（P＜0.05）[26]；肌腱損傷修復(fù)功能在與肌腱干細(xì)胞合用時(shí)效果更顯著，可能與抑制TGF-β1 誘導(dǎo)的信號(hào)通路（p38 MAPK、Smad2/3、ERK1/2）而減少炎癥和纖維化有關(guān)[27]；也有研究表明，HGF 可促進(jìn)肌腱源性干細(xì)胞增殖且促進(jìn)作用與HGF 濃度呈正相關(guān)[28]。

綜上所述，HGF 具有的促進(jìn)肝細(xì)胞再生及損傷修復(fù)、關(guān)節(jié)軟骨及肌腱韌帶的損傷修復(fù)與中醫(yī)學(xué)“肝主升發(fā)”“肝主筋”存在高度一致性，通過研究也很好地證實(shí)了這些一致性。 由此推測(cè)，HGF 可能是肝發(fā)揮其生理作用的重要物質(zhì)基礎(chǔ)之一。

3 HGF 與腎的相關(guān)性

“腎藏精，主生殖”。 腎為先天之本，腎之精氣旺盛是產(chǎn)生孕育之力的根本。 肝血充，腎精足，精血互化，則天癸充盈，生殖功能穩(wěn)定。 越來越多的證據(jù)表明，HGF 與中醫(yī)學(xué)“腎主生殖”的功能存在聯(lián)系，并可對(duì)生殖功能產(chǎn)生多方面的調(diào)節(jié)作用。

3.1 HGF 調(diào)控男性生殖功能

HGF 調(diào)控男性生殖主要包括：（1）調(diào)節(jié)精子發(fā)生及精子質(zhì)量。 HGF 調(diào)控精子的發(fā)生可能與參與生精細(xì)胞凋亡調(diào)控及影響附睪內(nèi)精子獲能相關(guān)[29]；研究顯示，HGF 可以調(diào)節(jié)生殖細(xì)胞有絲分裂活性促進(jìn)精原細(xì)胞的產(chǎn)生，并且在大鼠的精原性生殖細(xì)胞到精子形成過程中始終存在c-Met 的表達(dá)[30]；實(shí)驗(yàn)研究顯示，HGF 組小鼠的精子活力、濃度較模型組相比明顯升高（P＜0.05），精子畸形率則降低（P＜0.05）[31]；與對(duì)照組比較，各濃度砷染毒組大鼠附睪組織中HGF及c-Met 表達(dá)均下降（P＜0.05），且精子頂體完整率降低，畸形率升高（P＜0.05）[32]。 （2）調(diào)控睪丸微環(huán)境。研究證實(shí)， 大鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞表達(dá)HGF 受體c-Met，并可影響類固醇生成途徑，顯著增加間質(zhì)細(xì)胞分泌的睪酮數(shù)量對(duì)生殖發(fā)育產(chǎn)生促進(jìn)作用[33]；RICCI 等[34]研究表明，HGF 可顯著減低間質(zhì)細(xì)胞的凋亡，并可促進(jìn)間質(zhì)細(xì)胞分化；研究表明，支持細(xì)胞可以分泌HGF 調(diào) 節(jié) 哺 乳 動(dòng) 物 睪 丸 發(fā) 育[35]；CATIZONE 等[36]同樣已經(jīng)證實(shí)HGF 對(duì)管周肌樣細(xì)胞存在調(diào)控作用。

3.2 HGF 調(diào)控女性生殖功能

HGF 調(diào)控女性生殖主要包括：（1）改善卵巢功能。 DING 等[37]發(fā)現(xiàn)，HGF 可改善自然衰老的卵巢功能而對(duì)生殖產(chǎn)生有利影響；唐立明等[38]研究表明，與模型組比較，左歸丸33 g/kg 組大鼠生成卵泡數(shù)、黃體數(shù)及血管數(shù)明顯上升（P＜0.05），且HGF、c-Met 表達(dá)明顯升高（P＜0.05），推測(cè)左歸丸可通過上調(diào)HGF及c-Met 的表達(dá)促進(jìn)大鼠卵巢血管生成，改善大鼠卵巢功能。（2）確保胚胎良好發(fā)育。研究表明，妊娠糖尿病產(chǎn)婦胎盤組織中HGF 蛋白表達(dá)水平明顯低于正常對(duì)照組，且與miR-508-3p 表達(dá)水平呈負(fù)相關(guān)（P＜0.05），而miR-508-3p 的高表達(dá)與妊娠期糖尿病進(jìn)展相關(guān)[39]；miR-130b-3p 可通過負(fù)調(diào)控HGF 的表達(dá)而降低妊娠期子癇的發(fā)生率提高生育質(zhì)量，抑制miR-130b-3p 表達(dá)可以促進(jìn)HGF 的表達(dá)進(jìn)而促進(jìn)妊娠滋潤層細(xì)胞的增殖、轉(zhuǎn)移與浸潤能力[40]；與正常妊娠組相比較，子癇前期非重度組及重度子癇前期組的HGF 水平降低（P＜0.05），可能加重子癇的病情[41]；研究顯示，300 名稽留流產(chǎn)女性受檢者絨毛組織中的HGF 陽性表達(dá)率明顯低于正常早孕女性受檢者(P＜0.05)，推測(cè)稽留流產(chǎn)與HGF 低表達(dá)具有相關(guān)性[42]。

綜上所述，HGF 對(duì)于生殖功能的影響是多方面的，在調(diào)控精子發(fā)生及精子質(zhì)量、調(diào)控睪丸微環(huán)境和改善卵巢功能、維持胚胎良好發(fā)育等方面廣泛發(fā)揮作用。因此，推測(cè)HGF 可能是腎發(fā)揮“藏精、主生殖”作用的重要物質(zhì)基礎(chǔ)之一。

4 補(bǔ)益肝腎與HGF 的產(chǎn)生

此外，補(bǔ)益肝腎與HGF 的產(chǎn)生也存在相關(guān)聯(lián)系。 一方面，單用補(bǔ)腎中藥可以引起HGF 的顯著改變。隆獻(xiàn)[43]發(fā)現(xiàn)采用六味地黃湯灌胃干預(yù)后，大鼠殘余腎組織中HGF 蛋白水平顯著提高；唐立明等[38]發(fā)現(xiàn)補(bǔ)腎填精的左歸丸可有效提高大鼠體內(nèi)的HGF 水平，并由此促進(jìn)大鼠卵巢血管生成而改善大鼠卵巢功能；吳學(xué)敏等[44]發(fā)現(xiàn)經(jīng)過益腎化瘀方治療后的糖尿病腎病患者血清HGF 水平明顯升高；魏曉露等[45]發(fā)現(xiàn)予以扶腎降濁方干預(yù)后，大鼠腎組織中HGF 蛋白表達(dá)水平顯著升高。 另一方面，單用補(bǔ)肝中藥也可影響體內(nèi)HGF 表達(dá)水平。 徐彩霞等[46]通過予以肝癌患者口服加味逍遙散，其血清HGF 水平顯著升高；謝丹[47]通過對(duì)大鼠灌胃歸芪方，觀察到其血清HGF 水平相比對(duì)照組顯著升高，歸芪方中重用當(dāng)歸，入肝經(jīng)，補(bǔ)血活血；徐蓮等[48]通過對(duì)體外培養(yǎng)的小鼠毛囊器官模型予以不同濃度的何首烏、女貞子等混合中藥提取物，中藥混合提取物促進(jìn)了毛乳頭細(xì)胞分泌HGF。 最后，聯(lián)合使用補(bǔ)肝腎中藥可顯著影響HGF 的表達(dá)。 羅俊華[49]發(fā)現(xiàn)予以地五養(yǎng)肝方治療可以提高肝組織HGF 的表達(dá)，方中重用熟地黃、五味子，并入肝腎二經(jīng)，肝腎同養(yǎng)。 胡毓詩等[50]通過對(duì)大鼠灌胃補(bǔ)肝腎、續(xù)筋骨類中藥，觀察到軟骨組織中HGF 的表達(dá)顯著升高，方中白芍為君，養(yǎng)血斂陰、柔肝止痛，三七、續(xù)斷補(bǔ)肝腎、強(qiáng)筋骨，黃芪、紫河車益氣養(yǎng)血、溫補(bǔ)腎精。

上述結(jié)果表明，單用補(bǔ)腎、補(bǔ)肝中藥或者聯(lián)合使用補(bǔ)益肝腎中藥治療，都可以促進(jìn)HGF 的產(chǎn)生，據(jù)此推測(cè)，HGF 可能是補(bǔ)益肝腎中藥對(duì)人體產(chǎn)生影響的重要物質(zhì)基礎(chǔ)之一。這也為HGF 與“肝腎同源”理論的相關(guān)性提供了進(jìn)一步的證據(jù)。

5 結(jié)語

“乙癸同源”理論的發(fā)展源遠(yuǎn)流長，對(duì)于臨床疾病的指導(dǎo)價(jià)值已經(jīng)得到廣泛認(rèn)可。 HGF 是一種多功能的生長因子，其與中醫(yī)肝、腎具有以下的功能相似性：第一，HGF 促進(jìn)肝臟細(xì)胞再生與損傷修復(fù)的功能與“肝主升發(fā)”的生理特性存在相似性；第二，HGF促進(jìn)軟骨關(guān)節(jié)及韌帶肌腱損傷修復(fù)的功能與“肝主筋”的生理特性存在相似性；第三，HGF 在促進(jìn)生殖功能（調(diào)控精子發(fā)生及精子質(zhì)量、調(diào)控睪丸微環(huán)境和改善卵巢功能、維持胚胎良好發(fā)育）的作用與“腎藏精，主生殖”的生理功能具有相似性；第四，通過補(bǔ)益肝腎的治法可以促進(jìn)體內(nèi)HGF 的產(chǎn)生。 根據(jù)HGF與中醫(yī)肝、腎二臟在生理與功能上存在的一致性，提出HGF 可能是“乙癸同源”物質(zhì)基礎(chǔ)的假說，這為進(jìn)一步研究“乙癸同源”理論提供了一個(gè)新的潛在的方向。 當(dāng)然，假說是否可行，還需要設(shè)計(jì)更多的實(shí)驗(yàn)進(jìn)行驗(yàn)證探索。 同時(shí)，本文也只是簡單總結(jié)了HGF與肝、腎二臟主要生理功能的一致性，具體的相互影響通過何種細(xì)胞通路實(shí)現(xiàn)以及其他生理功能是否也具有相似的一致性，還有待研究探討。