銀杏雌、雄植株花芽分化后期及開花期間生理代謝的比較

狄晶晶，葉 威，吳琴霞，馮 凱，曹 棟，李 強(qiáng)，陳 穎

(南京林業(yè)大學(xué)生物與環(huán)境學(xué)院，南方現(xiàn)代林業(yè)協(xié)同創(chuàng)新中心，江蘇 南京 210037)

銀杏(Ginkgobiloba)為雌雄異株落葉喬木，樹體高大挺拔，3—4月初開花，9—10月果實(shí)成熟，果實(shí)為橙黃色的種實(shí)核果，既是綠化、觀賞、果用、藥用等多用途樹種，又是現(xiàn)存裸子植物中最古老的稱為“活化石”的孑遺植物。因而在理論和應(yīng)用上都有重要的研究價(jià)值[1]。

銀杏雌、雄株之間存在差異，主要表現(xiàn)在形態(tài)、生理生化和分子生物學(xué)3個(gè)方面。形態(tài)差異包括葉片大小、葉形指數(shù)、葉裂指數(shù)、枝條節(jié)間長短、氣孔密度及根部形態(tài)等方面，一些研究認(rèn)為可通過葉形特征來鑒定銀杏幼苗的性別[2-3]；生理方面的差異主要在特異蛋白、色素、內(nèi)源激素含量及光合特性、蒸騰速率、呼吸強(qiáng)度、同工酶活性等方面[4-8]；分子生物學(xué)方面的差異主要表現(xiàn)在雌、雄株分子標(biāo)記特異條帶、基因差異表達(dá)等方面[2,9-10]。

銀杏雌、雄株在花芽分化和開花期的不同主要表現(xiàn)在雌性和雄性器官分化與發(fā)育上的差異。銀杏雌株的花芽形態(tài)分化在6月初—12月初；花芽分化末期(珠被分化期)在12月中旬—次年2月上旬；花芽分化完成在3月上旬—3 月下旬，此時(shí)樹液流動(dòng)加速，休眠芽萌動(dòng)，珠托迅速分化[11]；花期在3月底—4 月初，新葉展出, 花(胚珠)開始顯露。北京地區(qū)6月2日—10日為銀杏雌株花芽分化的發(fā)端[12]，銀杏雄株的花芽從6 月初開始形態(tài)分化，7月—次年2月為花粉母細(xì)胞分化期，花粉粒的形成在 2 月下旬—3 月下旬[13]，花期在3月底—4月初。正常年間雌、雄株能夠花期相遇，進(jìn)行授粉。

目前，有關(guān)銀杏雌、雄株花芽分化和花期的差異研究主要集中在花芽分化前期，大多關(guān)注的是雌、雄花芽分化期的解剖結(jié)構(gòu)、內(nèi)源激素等方面[14]，但對(duì)雌、雄株開花前后的激素變化、糖代謝、次生代謝物的研究較少。銀杏雌、雄花芽分化后期及開花前后(11月—次年4月)的生理變化與后期的授粉、花芽分化關(guān)系密切，研究花芽分化后期及開花前后雌、雄株的生理生化差異，可為銀杏雌、雄株花期調(diào)控、授粉樹配置、雌雄比例配置、提高坐果率和產(chǎn)量、合理經(jīng)營管理等提供理論依據(jù)和技術(shù)參考。

1 材料與方法

1.1 樣品采集

樣品采自南京林業(yè)大學(xué)(118°49′E，32°04′N)校區(qū)內(nèi)約25年生銀杏樹，選取不同地點(diǎn)、同一年齡、長勢(shì)相近的雌、雄株各6株(6個(gè)生物學(xué)重復(fù))進(jìn)行標(biāo)記，從2018年11月25日—2019年2月22日30 d采樣1次，2019年2月23日—4月28日每周采樣1次，采樣部位和日期見表1。每株采15～20個(gè)頂芽(去除外鱗片)，或30～60片小葉，或帶有雄花和雌胚珠小葉片，設(shè)置 3次重復(fù)。采回的樣品置于-70 ℃超低溫冰箱保存用于指標(biāo)的測(cè)定。

表1 銀杏雌、雄株開花期間的采樣時(shí)間及部位

1.2 指標(biāo)測(cè)定

可溶性糖含量(蒽酮比色法)參照王學(xué)奎[15]的方法測(cè)定，可溶性蛋白含量(考馬斯亮藍(lán)法)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)、過氧化物酶(POD)活性參照文獻(xiàn)[16]的方法測(cè)定,總黃酮含量測(cè)定參照文獻(xiàn)[17]的方法,總萜內(nèi)酯含量參照文獻(xiàn)[18]的方法測(cè)定。

激素玉米素(ZT)和赤霉素(GA)樣品提取參照文獻(xiàn)[19-20]的方法并有所改動(dòng)。稱取0.5 g新鮮植物材料在液氮環(huán)境下研磨成粉末，再加入0.1 g PVPP(聚乙烯吡喀烷酮)研磨成漿，用體積分?jǐn)?shù)80% 冷甲醇提取液溶解后轉(zhuǎn)入離心管中，搖勻后置于4 ℃下浸提4 h，3 000×g離心15 min，收集上清液。殘?jiān)玫攘?0%甲醇溶解，4 ℃浸提1 h后離心，合并上清液。將上清液經(jīng)C18固相萃取小柱進(jìn)行萃?。?0%甲醇(5 mL)平衡柱—上樣—收集樣品。將過柱后的樣品收集，經(jīng)真空濃縮干燥揮發(fā)去甲醇，再用色譜甲醇溶解定容至1 mL，經(jīng)0.22 μm有機(jī)濾膜過濾后，用于HPLC(Aglient1200)儀分析。

色譜條件：Eclipse XDB-C18柱(4.6 mm×150 mm)，粒徑5.0 μmC18(250 mm×4.6 mm，5 μm)色譜柱，柱溫 30 ℃。流動(dòng)相：甲醇與0.075%冰乙酸體積比為45∶55,流速為 1 mL/min。DAD檢測(cè)器，檢測(cè)波長254 nm，進(jìn)樣量10 μL，外標(biāo)法定量。

標(biāo)準(zhǔn)品配制：分別稱取5 mg GA、1 mg ZT標(biāo)準(zhǔn)品，用色譜甲醇溶解定容至100 mL，配制成10 mg/L(ZT)和50 mg/L(GA)的母液，經(jīng)0.22 μm有機(jī)濾膜過濾后進(jìn)樣，并繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。ZT、GA標(biāo)樣色譜圖見圖1。

1.3 數(shù)據(jù)處理

采用Microsoft Excel 2016對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理和作圖，SPSS 20.0軟件進(jìn)行差異顯著性分析(Duncan新復(fù)極差法)。

2 結(jié)果與分析

2.1 銀杏花芽分化后期及開花期間休眠芽和葉片形態(tài)的變化

2018年11月25日—2019年4月28日采集的雌、雄株短枝飽滿頂芽和開花期間雄花序及周圍小葉，或雌株胚珠及周圍小葉及開花后周圍葉片的形態(tài)變化見圖2。2018年11月25日—2019年2月22日30 d采樣1次，2019年2月23日—4月28日，1周采樣1次;3月17日—4月7日為包含雄株花穗和周圍小葉、或雌株胚珠及周圍小葉，4月8日以后為開花后的葉片。4月28日葉片未放入圖中。從圖2中可以看出，11月25日—次年3月16日，是雌株花芽分化的后期，芽體隨著采集時(shí)間推移逐漸增大，且表皮顏色從棕褐色變成淡綠色，雌株芽體比雄株大很多。3月16日后，雄花序開始陸續(xù)冒出，3月17日左右，雄株花序已經(jīng)形成，周圍小葉也已經(jīng)長出，至3月30日時(shí)雄株花粉已經(jīng)成熟，開始散粉(圖2A, i)，有的較早，有的較遲，前后大約相差5 d，到4月7日花粉幾乎散盡。雌株胚珠柄部到3月17日左右剛開始伸長，到4月7日有的已經(jīng)伸長至最大，各植株稍有差異，相差7 d左右(圖2B，i—j)。新長出的小葉片呈扇形，幾乎全緣，稍有二裂現(xiàn)象，雌、雄株葉形差別不大。因此可以將此次采樣周期分為3個(gè)階段：11月25日—次年3月16日為花芽分化后期(開花前期)，3月17日—4月7日為開花期，4月8日—4月28日為花后期。

2.2 銀杏雌、雄株花芽分化后期及開花期間ZT和GA含量的變化

銀杏雌、雄株ZT和GA含量在花芽分化后期及開花期出現(xiàn)不同變化(圖3)。從圖3可以看出，銀杏雄株在花芽分化后期ZT含量出現(xiàn)由高到低的變化趨勢(shì)，即從11月25日后逐漸下降，到3月2日達(dá)到一個(gè)低點(diǎn)，到3月23日又逐漸上升至近1月23日的水平；3月30日—4月7日開花期間，雄株的ZT含量陡然增加，如3月30日ZT的含量比花芽分化后期的3月2日高2.78倍，開花后(4月7日后)ZT含量開始下降，4月21日含量與3月2日接近，到4月28日又回升至4月7日水平。

雌株的ZT含量在11月25日達(dá)到最高后陡然下降，在2月22日達(dá)到一個(gè)低點(diǎn)，3月9日—23日，雌株ZT含量的變化雖有波動(dòng)，但變化不大。到3月30日開花期ZT 的含量開始增加,比3月2日低點(diǎn)時(shí)增加了0.44倍，而后在開花期又開始下降，到4月28日降至最低水平。3月16日之前雌株ZT的含量都高于雄株，而3月16日之后雄株的ZT含量又遠(yuǎn)高于雌株(除4月14日和4月21日外)。

銀杏雌、雄株花芽分化后期和開花期間GA含量的變化有所不同，雄株GA含量從11月25日后逐漸降低至次年3月2日水平，然后在3月9日—3月23日與11月25—1月23日出現(xiàn)相同的趨勢(shì)，3月30日—4月7日開花期GA含量達(dá)到最高，4月7日的GA含量是2月22日的17.9倍，到4月14—4月21日又大幅降低，但都遠(yuǎn)高于期12月24日—3月23日的水平，4月28日又降低至3月9日的水平。雌株前期的變化同雄株相似，也有一個(gè)低水平時(shí)期(12月24日—3月16日)，但雌株比雄株提前1周進(jìn)入GA含量的回升期，從3月23日到4月7日達(dá)到高點(diǎn)(開花期)，4月7日的GA含量是3月16日最低點(diǎn)的12.1倍。4月14日—4月21日又出現(xiàn)降低。另外雌、雄株的GA含量都存在顯著差異(除了12月24日至3月2日及4月14日外)，如4月7日開花期，雄株比雌株GA含量高90.9%。

2.3 銀杏雌、雄株花芽分化后期及開花期間可溶性糖、淀粉和可溶性蛋白含量的差異

銀杏雌、雄株葉芽的可溶性糖在整個(gè)研究期間出現(xiàn)升高—降低—再升高的趨勢(shì)(圖4)。在花芽分化后期(11月25日—次年3月16日)都保持較高的含量，含量為20～40 mg/g；在3月23日—4月7日(開花期)出現(xiàn)一個(gè)低谷期；4月14日—4月28日又逐漸回升至3月9日的水平。從含量變化來看，2月22日之前基本上雄株的可溶性糖含量高于雌株，但3月2日后，雌株的含量逐漸高于雄株，特別是在3月9日—3月30日，雌株的含量顯著高于雄株，如3月16日的雌株比雄株提高了48%(圖4A)。

銀杏雌雄株的淀粉含量呈波動(dòng)性變化，雌株分別在1月23日、3月9號(hào)、4月28日到達(dá)峰值。雄株淀粉含量的高點(diǎn)分別在1月23日、3月23日、4月21日，在3月23日比11月25日最低點(diǎn)高90.8%，4月21日高點(diǎn)比4月7日的高62.5%。雄株的第2個(gè)高點(diǎn)比雌株的第2個(gè)高點(diǎn)延遲2周，第3個(gè)高點(diǎn)又提早1周。另外除了3月23日、4月14日與4月21日外，其他時(shí)間雌株的淀粉含量都高于同時(shí)期的雄株，特別是3月9日和4月28日分別比雄株高出68.5%和85.7%(圖4B)。

銀杏雌、雄株在花芽分化后期及開花期間可溶性蛋白含量的變化有所差異，雌株的可溶性蛋白含量從11月25日起基本一直處于上升趨勢(shì)，到3月9日—4月23日開花前期達(dá)到高點(diǎn)，3月30日出現(xiàn)下降，4月7日回升至最高點(diǎn)，以后又出現(xiàn)大幅回落直到4月28日都沒有明顯的變化。雄株的可溶性蛋白含量在11月25日—3月16日都處于高水平階段，期間含量都沒有顯著的差異，到3月23日—3月30日出現(xiàn)顯著下降，3月30日到最低點(diǎn)。4月7日有所回升，4月14日后沒有顯著變化(圖4C)。

2.4 銀杏雌、雄株花芽分化后期及開花期間POD、PAL活性的差異

銀杏雌、雄株在花芽分化后期11月25日—3月16日，過氧化物酶(POD)雖有波動(dòng)但大多處于高活性狀態(tài)，雌株在11月25日、2月22日和3月16日都處于峰值，雄株的峰值在2月22日，但到3月23日后POD 活性出現(xiàn)大幅下降。開花期間，葉和雄花序及葉和胚珠的POD 活性比芽期低很多，3月30日—4月7日開花期間，雌株的POD活性顯著低于3月23日之前的水平，以后雌雄株P(guān)OD 活性一直處于低水平狀態(tài)。整體來看，雌株的POD 活性大于雄株的水平,如3月16日雌株的POD 活性比雄株高了28.8%(圖5A)。

銀杏雌、雄株在花芽分化后期和開花期間PAL 活性也是呈波動(dòng)性變化，分為11月25日—1月23日、2月22日—3月9日、3月16日—4月7日、4月14日—28日，4個(gè)波動(dòng)階段，雌株分別在11月25日、3月2日、3月16日出現(xiàn)高點(diǎn)，4月7日為最高點(diǎn)，是最低點(diǎn)(4月21日)的1.61倍。雄株分別在12月24日、3月2日、3月16日達(dá)到高點(diǎn)，特別是3月2日，雄株P(guān)AL 活性(最高)比3月9日的高81.6%。整體上看，在花芽分化后期雄株的PAL 活性高于雌株(3月9日之前)，但4月7日雌株的PAL活性比雄株高72.2%，此時(shí)雄株花粉已經(jīng)散盡，而雌株胚珠正是旺盛生長期(圖5B)。

2.5 銀杏雌、雄株花芽分化后期及開花期間總黃酮和萜內(nèi)酯含量的差異

花芽分化后期銀杏芽中的黃酮含量略低于開花期葉中的總黃酮含量，芽中的總黃酮含量為3～4 mg/g，葉中的總黃酮含量為3.5～6.0 mg/g。在花芽分化后期雄株芽中總黃酮的含量低于雌株芽，在11月25日雌、雄株總黃酮含量差異最大，雌株總黃酮含量比雄株高87%。但在開花期間(3月23日—4月7日)，雄株總黃酮處于高水平階段，后期出現(xiàn)下降，而雌株在3月30日出現(xiàn)一個(gè)低點(diǎn)后開始上升至高水平階段(4月7日—4月14日)，即雄株的高水平階段比雌株提前2周。而且在高水平階段雄株的總黃酮含量高于雌株的，如3月30日、4月7日雄株比雌株總黃酮含量分別高114.0%和15.5%(圖6A)。

花芽分化后期銀杏芽中萜內(nèi)酯的含量較低，呈先下降再上升的趨勢(shì)，在2月22日達(dá)到最低，而在花期，銀杏葉和雄花或胚珠中萜內(nèi)酯的含量處于較高水平，雄株高水平出現(xiàn)在3月16日—4月7日，比雌株(3月23日—4月14日)提前1周，在4月7日達(dá)到最高?？傮w來看，雌株的萜內(nèi)酯含量高于雄株(除3月16日、3月30日外)(圖6B)。

3 討 論

銀杏為雌、雄異株，其生理代謝存在著差異[13]。銀杏雌、雄株的開花數(shù)量以及質(zhì)量會(huì)直接影響果實(shí)的產(chǎn)量與質(zhì)量。研究銀杏雌、雄開花期間的差異,用以定向調(diào)控銀杏雌株的開花結(jié)實(shí)，可解決銀杏大樹結(jié)實(shí)不穩(wěn)定的問題，做到高產(chǎn)、穩(wěn)產(chǎn)；也可為銀杏行道樹的配置，雌、雄株鑒定提供參考[12,14]。本研究中銀杏花芽分化后期、開花期間、開花后雌雄株的葉片形態(tài)出現(xiàn)差異，在花芽分化后期，雄株的短枝芽體較小，在11月25日—次年3月16日開花前外形上變化不大，而雌株的短枝芽飽滿，體積大于雄株，另外開花后雄株的葉片也稍大于雌株，這一結(jié)果與陳珂等[3]的研究結(jié)果一致。

赤霉素(GA)和細(xì)胞分裂素是植物開花期間兩個(gè)重要的內(nèi)源激素[21-22]。赤霉素不僅控制著莖的伸長，還可促進(jìn)植物的開花[23]。植物花誘導(dǎo)后, 赤霉素對(duì)花器官的生長和發(fā)育起著至關(guān)重要的作用, 特別是對(duì)雄蕊、花瓣與子房的影響更明顯，如赤霉素合成途徑中關(guān)鍵酶或信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑中的受體發(fā)生了突變, 花瓣、雄蕊與子房都會(huì)發(fā)育不良，最終導(dǎo)致坐果率的降低[24]。本研究發(fā)現(xiàn)銀杏雌、雄株花芽分化后期(11月25日—次年3月16日)GA和ZT都處于低水平狀態(tài)，而在開花期間(3月17日—4月7日)兩者都出現(xiàn)急劇升高的現(xiàn)象，而且在此期間雌株GA含量的高峰期早于雄株的高峰期1周左右，在3月30日—4月7日雄株GA含量遠(yuǎn)高于雌株，可能與雄株花粉散后葉片的快速生長有關(guān)。沙波[25]在研究銀杏雌株大小年現(xiàn)象時(shí)也發(fā)現(xiàn)，3月29日—4月8日銀杏雌株出現(xiàn)了GA和ZT急劇升高的現(xiàn)象，說明銀杏開花期間，雄株花序發(fā)育和雌株胚珠生長都需要大量的GA和ZT供給，促進(jìn)雄花序和胚株(柄)伸長和發(fā)育，以及小葉展出。

植株在成花前，可溶性糖含量一般處于高水平，當(dāng)花芽進(jìn)入分化及開花狀態(tài)時(shí)，就會(huì)被大量消耗[26]。本研究中銀杏短枝芽的可溶性糖含量在花芽分化后期高于開花期和開花后，而淀粉含量在芽期和葉期的差異不明顯。兩者都是在4月7日開花末期出現(xiàn)低點(diǎn)，開花后可溶性糖和淀粉又開始上升?；ǖ陌l(fā)育需要大量碳水化合物代謝提供能量[27]，銀杏花芽分化后期高的碳水化合物可為雄花和胚珠的生長提供能量，以供開花和展葉期間對(duì)能量的消耗。開花期間可溶性糖和淀粉含量降低，可能與春季樹液流動(dòng)有關(guān)，此時(shí)的碳水化合物不僅要為雌、雄花的開放提供營養(yǎng)，還要提供給根部和枝條的生長。本研究結(jié)果與徐紅霞等[27]、熊俊飛[28]對(duì)枇杷和木蘭的研究結(jié)論一致。另外在花器形成及開花期，雌株銀杏可溶性糖含量高于雄株銀杏，這可能與銀杏雌株比雄株在開花過程中需要儲(chǔ)備更多的能量有關(guān)，這與熊俊飛[28]對(duì)木蘭的研究結(jié)果一致。

植物可溶性蛋白質(zhì)大多數(shù)是各種代謝的關(guān)鍵酶類，與植物的生長發(fā)育直接相關(guān)，高含量的可溶性蛋白，代表植物體內(nèi)具有高活性的關(guān)鍵酶類，維持細(xì)胞正常的代謝[29]。從本研究中可以看出，花芽分化后期(11月25日—次年3月16日)銀杏雄株芽的可溶性蛋白含量高于開花期及花后期葉中的可溶性蛋白含量，但雌株的可溶性蛋白含量從3月17日—4月7日開花期都保持較高的水平，特別是在4月7日達(dá)到最高點(diǎn)，且此時(shí)期雌株可溶性蛋白含量都顯著高于雄株，說明雌、雄株銀杏的花芽分化后期及開花期可溶性蛋白含量出現(xiàn)不同步性。結(jié)合可溶性糖含量的差異可以看出，雄株可溶性糖和可溶性蛋白含量增高主要在花芽分化后期，而開花期間可溶性糖和可溶性蛋白含量都降低，其原因可能有兩種：一是雄株樹液?jiǎn)?dòng)早于雌株，開花時(shí)其他部分的可溶性糖和可溶性蛋白需求量也較大，導(dǎo)致雄株的兩個(gè)指標(biāo)水平相對(duì)降低。而雌株樹液?jiǎn)?dòng)遲于雄株，因而在開花期間，可溶性糖和可溶性蛋白含量維持較高的水平，促進(jìn)其快速發(fā)育；另一種可能與雌、雄異株特異性有關(guān)，雌株在開花后還要維持胚珠繼續(xù)發(fā)育和葉片的生長，而雄株花粉散落后，只需要提供葉片生長，因而不需要那么多的營養(yǎng)物質(zhì)。這與張麗杰等[26]對(duì)胡桃楸的研究結(jié)果相似。

過氧化物酶(POD)是銀杏雌、雄株性別和生長發(fā)育研究中的一個(gè)重要指標(biāo)，在生物體內(nèi)具有重要的生理作用[30]。本研究中銀杏越冬的芽中(花芽分化后期)POD活性遠(yuǎn)高于開花期間葉和花序及胚珠中的活性，且雌株的POD活性普遍高于雄株。而3月30日—4月28日開花期間或開花后葉片中POD活性顯著低于3月30日之前短枝芽中的，特別是在開花后4月14日—4月28日，雌、雄株葉中的POD活性都極低。也就是POD 在芽中的活性表達(dá)遠(yuǎn)高于葉片，這與程華等[30]的研究結(jié)果相一致。另外，王雙明等[31]及溫偉慶等[32]發(fā)現(xiàn)，銀杏成年雄株葉片過氧化物酶活性高于雌性植株，而本研究中發(fā)現(xiàn)在3月23日雄株P(guān)OD活性高于雌株，在3月9日—4月7日開花期雌株高于雄株，開花后兩者沒有明顯的差異，這可能是采樣的時(shí)期、器官、雌雄株的樹齡、環(huán)境不同引起的。有關(guān)雌、雄株的這些差異還需進(jìn)一步驗(yàn)證。

銀杏樹體內(nèi)含有黃酮和萜內(nèi)酯2種重要的次生代謝物，而PAL是黃酮代謝的關(guān)鍵酶，對(duì)促進(jìn)植物木質(zhì)化、黃酮類化合物的合成具有重要作用[33]。本研究發(fā)現(xiàn)在花芽分化后期雄株的PAL活性普遍高于雌株(3月16日之前)，而開花期間4月7日雌株的活性遠(yuǎn)高于雄株，與雌雄株可溶性糖、可溶性蛋白的變化節(jié)點(diǎn)相一致，即開花期間雌株可溶性糖、可溶性蛋白和PAL活性都較雄株高，可能與開花間雌株胚珠發(fā)育代謝旺盛有關(guān)。

從雌、雄株總黃酮和萜內(nèi)酯的含量變化來看，花芽分化后期芽中總黃酮和萜內(nèi)酯的含量都低于開花期間或開花后，2種次生代謝物在雌、雄株高水平出現(xiàn)的時(shí)間節(jié)點(diǎn)不同，雄株在3月23日—4月7日總黃酮和萜內(nèi)酯含量都處于高水平，而雌株在4月7日—4月14日兩種化合物處于高水平，即雌株的高水平比雄株遲一些。這與上述可溶性糖等其他指標(biāo)的變化相一致，說明兩種次生代謝物與銀杏雌、雄株的開花關(guān)系密切，黃酮和萜內(nèi)酯不是銀杏雌、雄株開花期間多余的物質(zhì)，可能對(duì)銀杏開花具有保護(hù)作用。對(duì)于雌、雄株銀杏黃酮含量高低有不同的觀點(diǎn)，吳爭(zhēng)榮[34]認(rèn)為銀杏雌、雄株葉片的黃酮含量有較大差異;而江德安[35]發(fā)現(xiàn)不同類型葉黃酮含量有差異，但與銀杏的雌雄性別無關(guān)。

總之，在花芽分化后期，雄株銀杏比雌株銀杏含有更多的可溶性糖、可溶性蛋白和高的PAL活性;而在開花期，雌株銀杏比雄株銀杏具有更高的可溶性糖、淀粉、可溶性蛋白含量及PAL活性，且此時(shí)期雄株的GA和ZT含量高于雌株。雌、雄植株芽期的POD 活性遠(yuǎn)高于葉期，而開花期間雌、雄株都具有較高的ZT、GA、黃酮和萜內(nèi)酯含量。雌、雄株銀杏在開花時(shí)間各節(jié)點(diǎn)的生理代謝水平出現(xiàn)不同步性，雄株的可溶性糖、可溶性蛋白、總黃酮和萜內(nèi)酯含量的高點(diǎn)比雌株早2周左右。較高水平的GA和ZT、黃酮和萜內(nèi)酯是銀杏雄株開花及雌株胚珠發(fā)育所必需的。本研究結(jié)果可為銀杏雌、雄株的定向培育，銀杏授粉及雌雄性別鑒定提供參考。