季琳琳,陳素傳*,吳志輝,常 君,陶汝鵬,周米生,蔡新玲
(1.安徽省林業(yè)科學(xué)研究院,安徽 合肥 230031;2.寧國(guó)市林業(yè)局,安徽 寧國(guó) 242300;3.中國(guó)林業(yè)科學(xué)研究院亞熱帶林業(yè)研究所,浙江 杭州 311400)
山核桃(Caryacathayensis)和大別山山核桃(C.dabieshanensis)屬胡桃科(Juglandaceae)山核桃屬(Carya)植物,主要栽培范圍集中在天目山山脈、黃山余脈及大別山山區(qū),主產(chǎn)區(qū)在浙江的西部、安徽的南部及西部、湖北的東部等地[1-4]。山核桃作為我國(guó)重要的干果和木本油料樹(shù)種,具有較高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值和生態(tài)價(jià)值。山核桃仁中含有不飽和脂肪酸等物質(zhì),具有降低膽固醇、疏通血管及健腦等作用,目前暢銷市場(chǎng)的手剝山核桃及山核桃仁制品深受百姓青睞;山核桃含油率較高,其不飽和脂肪酸含量超過(guò)油茶4倍,可作為高檔的食用油開(kāi)發(fā)資源[5-10]。目前,關(guān)于山核桃的研究主要是種群表型、脂肪酸組成、果實(shí)營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)及繁殖栽培技術(shù)等方面:張深梅等[11]發(fā)現(xiàn)大別山山核桃表型變異主要來(lái)自種群間;王正加等[12]利用RAPD分子標(biāo)記了大別山山核桃3個(gè)天然群體,研究發(fā)現(xiàn)其種群內(nèi)具有較豐富的遺傳多樣性;常君等[13]選取11個(gè)山核桃無(wú)性系對(duì)其果實(shí)性狀及營(yíng)養(yǎng)成分分析,認(rèn)為可從果用和食用油利用方向開(kāi)展無(wú)性系選育。筆者通過(guò)對(duì)從安徽寧國(guó)市篩選的13個(gè)山核桃優(yōu)株及金寨縣復(fù)選9個(gè)大別山山核桃優(yōu)株的果實(shí)進(jìn)行主要經(jīng)濟(jì)性狀和營(yíng)養(yǎng)成分含量差異的研究,旨在初步篩選出研究區(qū)優(yōu)良的山核桃優(yōu)株,為山核桃良種選育與開(kāi)發(fā)利用提供理論依據(jù)。
寧國(guó)市位于安徽東南部(118°36′~119°24′E,30°16′~30°47′N),為皖南山地丘陵區(qū),屬北亞熱帶濕潤(rùn)季風(fēng)氣候區(qū),是我國(guó)山核桃主產(chǎn)區(qū)之一。該區(qū)氣候溫和,雨量充沛,四季分明,年均氣溫15.4 ℃,年均日照1 889 h以上,年均降雨量1 590 mm,無(wú)霜期226 d,氣候、土壤等條件非常適宜山核桃生長(zhǎng),其中南極、萬(wàn)家等鎮(zhèn)(鄉(xiāng))以低山、中山為主,屬天目山山脈,土壤主要由花崗巖、閃長(zhǎng)巖、花崗斑巖發(fā)育而成,并有少部分石灰?guī)r;甲路、胡樂(lè)等鎮(zhèn)(鄉(xiāng))屬黃山余脈,土壤主要由泥質(zhì)巖、硅質(zhì)砂巖發(fā)育而成,pH 5.5~6.5。
金寨縣位于皖西地區(qū)、大別山腹地(115°22′~116°11′E、31°06′~31°48′N),屬亞熱帶季風(fēng)氣候區(qū),四季分明,雨量充沛,年均氣溫15.1 ℃,年均日照1 750 h,年均降雨量1 300 mm,無(wú)霜期220 d。大別山山核桃主要分布于金寨縣關(guān)廟、果子園、天堂寨及燕子河等十幾個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)海拔500 m以上的陰坡和半陰坡,600~800 m地區(qū)較集中,為天然次生林。土壤主要由花崗巖、石灰?guī)r、板巖發(fā)育而成,pH 5.5~6.5。
共選取寧國(guó)市南極、萬(wàn)家、甲路、胡樂(lè)等鎮(zhèn)(鄉(xiāng))決選出的13株優(yōu)株,金寨縣關(guān)廟和果子園等鄉(xiāng)鎮(zhèn)9株優(yōu)株。每年果實(shí)成熟時(shí),在優(yōu)株向陽(yáng)面中部樹(shù)冠采收青果5 kg進(jìn)行果實(shí)經(jīng)濟(jì)性狀測(cè)定,連續(xù)測(cè)定3 a。
經(jīng)濟(jì)性狀指標(biāo)包括青果單果質(zhì)量、堅(jiān)果鮮質(zhì)量、堅(jiān)果干質(zhì)量、干仁單仁質(zhì)量、鮮出籽率、干出籽率、干出仁率等7個(gè),營(yíng)養(yǎng)成分指標(biāo)包括粗脂肪、蛋白質(zhì)、硬脂酸、油酸、亞油酸、亞麻酸等6個(gè)。青果、堅(jiān)果、干果、干仁質(zhì)量測(cè)定:每年各優(yōu)株隨機(jī)選取30個(gè)山核桃青果,用游標(biāo)卡尺測(cè)量其縱徑、橫徑,用電子天平稱其質(zhì)量;剝?nèi)デ喙?,測(cè)其堅(jiān)果大小(縱徑、橫徑)和質(zhì)量;將堅(jiān)果風(fēng)干,測(cè)干果質(zhì)量;敲開(kāi)山核桃干果,測(cè)其干仁質(zhì)量。鮮出籽率=堅(jiān)果質(zhì)量/青果質(zhì)量×100%;干出籽率=干果質(zhì)量/青果質(zhì)量×100%;干出仁率=干仁質(zhì)量/干果質(zhì)量×100%。以上各指標(biāo)測(cè)算后均取平均值。粗脂肪含量測(cè)定參照GB/T 14772—2008《食品中粗脂肪的測(cè)定》,蛋白質(zhì)含量測(cè)定參照GB 5009.5—2010《食品中蛋白質(zhì)的測(cè)定》。
所測(cè)指標(biāo)數(shù)據(jù)均為3年平均值。相關(guān)數(shù)據(jù)使用Excel 2007、DPS、SPSS 16.0進(jìn)行方差分析、相關(guān)性分析、主成分分析和聚類分析[14-15]。
供試山核桃優(yōu)株果實(shí)經(jīng)濟(jì)性狀的比較結(jié)果見(jiàn)表1。由表1可知,22個(gè)山核桃優(yōu)株青果單果質(zhì)量變化幅度為12.59~21.08 g,其中胡樂(lè)1號(hào)青果單果質(zhì)量最高,甲路1號(hào)青果單果質(zhì)量最低,前者是后者的1.67倍;堅(jiān)果干質(zhì)量變化幅度為3.19~5.41 g,金寨18號(hào)堅(jiān)果干質(zhì)量最大,甲路2號(hào)堅(jiān)果干質(zhì)量最小,兩者相差2.22 g。方差分析表明,22個(gè)山核桃優(yōu)株的青果單果質(zhì)量、堅(jiān)果鮮質(zhì)量差異均達(dá)到極顯著水平,從果實(shí)的表型性狀看,金寨大別山山核桃優(yōu)株的果實(shí)性狀優(yōu)于寧國(guó)山核桃優(yōu)株果實(shí)性狀。
從表1還可知,22個(gè)山核桃優(yōu)株堅(jiān)果鮮質(zhì)量變化幅度為4.06~7.53 g,其中果子園3號(hào)堅(jiān)果鮮質(zhì)量最大,甲路2號(hào)堅(jiān)果鮮質(zhì)量最小,前者高出后者85.46%;干仁單仁質(zhì)量變化幅度1.11~2.64 g,果子園3號(hào)干仁單仁質(zhì)量最大,甲路1號(hào)干仁單仁質(zhì)量最小,前者是后者的2.36倍。方差分析結(jié)果同時(shí)表明,22個(gè)山核桃優(yōu)株的堅(jiān)果鮮質(zhì)量、干仁單仁質(zhì)量均差異極顯著,其中果子園3號(hào)堅(jiān)果鮮質(zhì)量和干仁單仁質(zhì)量最大。
22個(gè)山核桃優(yōu)株鮮出籽率變化幅度27.43%~48.84%,干出籽率變化幅度20.55%~38.34%,干出仁率變化幅度32.60%~49.13%,22個(gè)山核桃優(yōu)株的果實(shí)鮮出籽率、干出籽率、干出仁率均差異極顯著,其中金寨63號(hào)鮮出籽率和干出籽率最高,金寨19號(hào)干出仁率最高。
山核桃種仁品質(zhì)主要與粗脂肪、蛋白質(zhì)、主要脂肪酸含量密切相關(guān)[16]。22個(gè)山核桃優(yōu)株種仁粗脂肪、蛋白質(zhì)、主要脂肪酸含量的測(cè)定分析結(jié)果表明(表2):不同優(yōu)株種仁的粗脂肪、蛋白質(zhì)、主要脂肪酸含量均存在極顯著差異,種仁粗脂肪含量最高的是果子園3號(hào),超過(guò)總體均值2.42%,最低的是甲路1號(hào),為總體均值的94.35%;金寨16號(hào)蛋白質(zhì)含量最高,超過(guò)總體均值11.76%,果子園1號(hào)蛋白質(zhì)含量最低,僅是總體均值的84.81%。主要脂肪酸組成中,油酸、亞油酸是脂肪酸的重要組成部分,對(duì)粗脂肪中不飽和脂肪酸含量起到關(guān)鍵作用,22個(gè)山核桃優(yōu)株中,油酸含量最高的是果子園3號(hào),超過(guò)總體均值的12.96%,最低的是甲路1號(hào),比總體均值低9.19%;亞油酸含量最高的為甲路1號(hào),比總體均值高出44.61%,最低是果子園3號(hào),較總體均值低49.05%;亞麻酸含量最高的是萬(wàn)家2號(hào),超過(guò)總體均值110.70%,最低的是金寨15號(hào)和金寨18號(hào),較總體均值低25.13%;硬脂酸含量最高為南極15號(hào)、甲路1號(hào),比均值高20.30%,金寨15號(hào)硬脂酸含量較總體均值低27.41%。
表2 山核桃優(yōu)株種仁主要營(yíng)養(yǎng)成分含量的方差分析及多重比較
2.3.1 果實(shí)主要經(jīng)濟(jì)性狀的相關(guān)性
山核桃優(yōu)株果實(shí)主要經(jīng)濟(jì)性狀相關(guān)性分析結(jié)果見(jiàn)表3。
由表3可知:山核桃果實(shí)主要經(jīng)濟(jì)性狀間幾乎都達(dá)到極顯著正相關(guān),其中青果單果質(zhì)量與堅(jiān)果鮮質(zhì)量、堅(jiān)果干質(zhì)量、干仁單仁質(zhì)量及干出仁率呈極顯著(P<0.01)正相關(guān),與鮮出籽率、干出籽率呈負(fù)相關(guān)且相關(guān)性均不顯著;堅(jiān)果鮮質(zhì)量與堅(jiān)果干質(zhì)量、干仁單仁質(zhì)量、鮮出籽率、干出籽率、干出仁率均呈極顯著正相關(guān);干果單仁質(zhì)量與干仁單仁質(zhì)量、鮮出籽率、干出籽率、干出仁率呈極顯著正相關(guān);干仁單仁質(zhì)量與鮮出籽率、干出籽率、干出仁率均呈極顯著正相關(guān);鮮出籽率與干出籽率、干出仁率均呈極顯著正相關(guān);干出籽率與干出仁率呈極顯著正相關(guān)。
表3 山核桃優(yōu)株果實(shí)主要經(jīng)濟(jì)性狀的相關(guān)性分析
2.3.2 種仁主要營(yíng)養(yǎng)成分間的相關(guān)性
山核桃種仁主要營(yíng)養(yǎng)成分含量的相關(guān)性分析結(jié)果見(jiàn)表4。由表4可知:粗脂肪含量與油酸含量呈極顯著正相關(guān);與亞油酸含量呈顯著負(fù)相關(guān),與硬脂酸、亞麻酸含量呈正相關(guān),與蛋白質(zhì)含量呈負(fù)相關(guān),但相關(guān)性不顯著。蛋白質(zhì)含量與油酸含量呈極顯著負(fù)相關(guān),與亞油酸含量呈極顯著正相關(guān);其他營(yíng)養(yǎng)成分含量相關(guān)性不顯著。硬脂酸含量與油酸含量呈極顯著負(fù)相關(guān),與亞油酸含量呈極顯著正相關(guān),與亞麻酸含量呈顯著正相關(guān)。油酸含量與亞油酸含量呈極顯著負(fù)相關(guān),與亞麻酸含量呈正相關(guān),但相關(guān)性不顯著。亞油酸含量與亞麻酸呈負(fù)相關(guān)。
表4 山核桃優(yōu)株種仁主要營(yíng)養(yǎng)成分含量的相關(guān)性分析
2.3.3 山核桃主要經(jīng)濟(jì)性狀主成分分析
以供試的22個(gè)山核桃優(yōu)株為樣本,將果實(shí)主要經(jīng)濟(jì)性狀與種仁主要營(yíng)養(yǎng)成分含量指標(biāo)作變量進(jìn)行主成分分析,結(jié)果見(jiàn)表5。
表5 山核桃優(yōu)株果實(shí)品質(zhì)影響因子的主成分分析
由表5可知,3個(gè)主成分的貢獻(xiàn)率分別為46.055%、20.907%、10.031%,累積貢獻(xiàn)率達(dá)76.993%。在第1主成分上荷載量較大的因子由大至小依次是堅(jiān)果鮮質(zhì)量、堅(jiān)果干質(zhì)量和油酸,集中反映了果實(shí)的經(jīng)濟(jì)性狀指標(biāo);在第2主成分上荷載量較大的因子由大至小依次是鮮出籽率、干出籽率和蛋白質(zhì),集中反映了果實(shí)的經(jīng)濟(jì)性狀指標(biāo);在第3主成分上荷載量較大的因子由大至小依次是亞麻酸、干出仁率和硬脂酸,集中反映了種仁主要營(yíng)養(yǎng)成分含量。主成分分析結(jié)果顯示,影響山核桃果實(shí)品質(zhì)的主要性狀是堅(jiān)果鮮質(zhì)量、堅(jiān)果干質(zhì)量和油酸含量。
2.3.4 山核桃優(yōu)株聚類分析
以山核桃果實(shí)主要經(jīng)濟(jì)性狀與種仁主要營(yíng)養(yǎng)成分含量為指標(biāo),對(duì)22個(gè)山核桃優(yōu)系進(jìn)行聚類分析,結(jié)果見(jiàn)圖1。如圖1所示,可將供試的22個(gè)優(yōu)系分為5類:第1類為寧國(guó)的南極1號(hào)、南極2號(hào)、南極3號(hào)、南極14號(hào)、南極15號(hào)、甲路大樹(shù)王、甲路1號(hào)、萬(wàn)家2號(hào)、胡樂(lè)2號(hào)、云梯1號(hào)、云梯2號(hào)、仙霞2號(hào);第2類為胡樂(lè)1號(hào);第3類為果子園1號(hào);第4類為果子園3號(hào);第5類為金寨15號(hào)、金寨16號(hào)金寨18號(hào)、金寨19號(hào)、金寨61號(hào)、金寨62號(hào)、金寨63號(hào)。寧國(guó)山核桃主要為人工林,從聚類分析可以看出其表型較少,其中的胡樂(lè)1號(hào)變異較大,單獨(dú)聚為一類,與寧國(guó)其他山核桃優(yōu)株表型差異較大,其堅(jiān)果鮮質(zhì)量最大,比單果鮮質(zhì)量最小的甲路2號(hào)高56.40%,但與金寨系列未聚在一起,說(shuō)明寧國(guó)山核桃與金寨山核桃之間存在差異。金寨山核桃為天然種群,優(yōu)株的表型多樣性非常豐富,兩個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)的山核桃優(yōu)株可分為3類,果子園1號(hào)和果子園3號(hào)均單獨(dú)聚為一類,其余關(guān)廟鎮(zhèn)聚為一類。
植物物種遺傳多樣性或變異越豐富,就越有利于群體進(jìn)化,適應(yīng)能力也就越強(qiáng)[17]。22株山核桃優(yōu)株果實(shí)主要經(jīng)濟(jì)性狀測(cè)定分析結(jié)果表明,優(yōu)株青果單果質(zhì)量、堅(jiān)果鮮質(zhì)量、堅(jiān)果干質(zhì)量、干仁單仁質(zhì)量、果實(shí)鮮出籽率、干出籽率、干出仁率差異均達(dá)到極顯著水平,生產(chǎn)中建議將胡樂(lè)1號(hào)、金寨18號(hào)作為手剝型大果商品株培育,并逐步加以開(kāi)發(fā)利用,以滿足消費(fèi)者的需求。
山核桃種仁中營(yíng)養(yǎng)成分含量較高的是脂肪,其次是蛋白質(zhì),山核桃優(yōu)株脂肪酸中油酸和亞油酸相對(duì)含量約占90%,蛋白具有一定的抗氧化性。22個(gè)山核桃優(yōu)株種仁粗脂肪、蛋白質(zhì)、主要脂肪酸含量均達(dá)到極顯著差異,果子園3號(hào)種仁粗脂肪、油酸含量均最高,超過(guò)總體均值2.42%、12.96%;金寨16號(hào)蛋白質(zhì)含量最高,超過(guò)總體均值11.76%;亞油酸含量最高的為甲路1號(hào),超過(guò)總體均值達(dá)44.61%;亞麻酸含量最高的是萬(wàn)家2號(hào),超過(guò)總體均值110.70%;硬脂酸含量最高為南極15號(hào)、甲路1號(hào),比均值高20.30%。杜洋文等[1]研究表明,大別山山區(qū)18 株山核桃優(yōu)樹(shù)種仁含油率變幅為 48.6%~70.3%,變異系數(shù)達(dá)到7.83%,脂肪酸中變異最大的為亞油酸(21.23%),其次為亞麻酸(12.93%),其中飽和脂肪酸變異低于不飽和脂肪酸。脂肪酸中的油酸、亞油酸等不飽和脂肪酸是細(xì)胞膜的重要成分,山核桃較高含量的不飽和脂肪酸,具有降低血脂、預(yù)防心血管疾病等功能[7,18-20]。目前山核桃多為天然實(shí)生繁殖群體,脂肪酸含量受基因及環(huán)境等多方面因素的影響[21-26],不同的優(yōu)株間具有不同的基因型,優(yōu)株間脂肪酸含量差異較大,可為油用良種的選擇提供豐富的遺傳資源。
22個(gè)山核桃優(yōu)株果實(shí)主要經(jīng)濟(jì)性狀與種仁主要營(yíng)養(yǎng)成分含量相關(guān)性分析結(jié)果表明,青果單果質(zhì)量與干仁單仁質(zhì)量及干出仁率呈極顯著正相關(guān),鮮出籽率與干出籽率、干出仁率均呈極顯著正相關(guān)。山核桃為優(yōu)良的經(jīng)濟(jì)樹(shù)種,林中選育優(yōu)系時(shí),可以通過(guò)單果質(zhì)量、鮮出籽率指標(biāo)做出初步判斷。粗脂肪含量與油酸含量呈極顯著正相關(guān)(相關(guān)系數(shù)為0.461),與亞油酸含量呈顯著負(fù)相關(guān)(相關(guān)系數(shù)為-0.286),說(shuō)明粗脂肪含量越高則油酸含量越高、亞油酸含量越低。將22個(gè)山核桃優(yōu)株果實(shí)主要經(jīng)濟(jì)性狀與種仁主要營(yíng)養(yǎng)成分含量指標(biāo)作變量進(jìn)行主成分分析可知,第1主成分為46.055%,在第1主成分上荷載量較大的因子由大至小依次是堅(jiān)果鮮質(zhì)量、堅(jiān)果干質(zhì)量和油酸,集中反映了果實(shí)的經(jīng)濟(jì)性狀指標(biāo),根據(jù)上述研究結(jié)果,在山核桃優(yōu)良品種的篩選過(guò)程中,可以將堅(jiān)果鮮質(zhì)量、堅(jiān)果干質(zhì)量和油酸作為重要的選優(yōu)指標(biāo)。
對(duì)22個(gè)山核桃優(yōu)系進(jìn)行聚類分析結(jié)果表明,胡樂(lè)1號(hào)、果子園1號(hào)、果子園3號(hào)3個(gè)優(yōu)株單獨(dú)聚為一類,其他寧國(guó)山核桃為一類,金寨大別山山核桃為一類。胡樂(lè)1號(hào)大果型與寧國(guó)其他山核桃優(yōu)株表型差異較大,但與金寨的大果型未聚在一起,說(shuō)明寧國(guó)山核桃與金寨大別山山核桃之間存在差異。胡樂(lè)1號(hào)變異較大,需進(jìn)行更深入的研究。劉茂春等[27]在金寨縣燕子河鎮(zhèn)調(diào)查時(shí)發(fā)現(xiàn)大別山山核桃是不同于山核桃的新種;Huang等[28]通過(guò)基因組測(cè)序表明大別山山核桃與山核桃的親緣關(guān)系最近,本次聚類結(jié)果與前人研究結(jié)論一致。金寨大別山山核桃為天然種群,同一鄉(xiāng)鎮(zhèn)的山核桃優(yōu)株被聚為不同類,可見(jiàn)大別山區(qū)山核桃遺傳資源的豐富性,還需深入研究并加以利用。
南京林業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版)2022年1期