黑胸散白蟻工蟻與工蟻型補(bǔ)充生殖蟻體內(nèi)抗氧化酶和解毒酶的活性及基因表達(dá)變化

董亞楠,牛 童,吳 佳,王 超,張 賀

(1.西北工業(yè)大學(xué)生態(tài)環(huán)境學(xué)院,西安 710129;2.西安外事學(xué)院醫(yī)學(xué)院,西安 710077;3.鄭州大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院病理科,鄭州 450008)

黑胸散白蟻Reticulitermeschinensis屬等翅目(Isoptera)鼻白蟻科(Rhinotermitidae)散白蟻屬Reticulitermes(蔡邦華和陳寧生,1964)，是我國分布最廣泛、危害最嚴(yán)重的白蟻種類之一(尉吉乾等,2010)。其群體小，巢群分散，蟻巢結(jié)構(gòu)簡單，無主、副巢之分，適應(yīng)性強(qiáng)，極易產(chǎn)生補(bǔ)充型生殖蟻，是防治難度較大的原因(嚴(yán)少輝等,2012)。補(bǔ)充生殖蟻包括由若蟻分化來的翅芽型生殖蟻和工蟻分化來的無翅芽型生殖蟻(劉明花等,2014)。成熟巢群中，補(bǔ)充型生殖蟻主要由若蟻分化而來，而在原始生殖蟻生殖力不足的無若蟻巢中，補(bǔ)充型生殖蟻主要由工蟻分化而來(張小晶等,2015)。

近些年國內(nèi)外學(xué)者對于若蟻、若蟻型補(bǔ)充生殖蟻以及原始生殖蟻的產(chǎn)生規(guī)律、發(fā)育和生理機(jī)制等都進(jìn)行了相關(guān)研究報(bào)道。原始生殖蟻由若蟻發(fā)育而來，在此過程中，若蟻的鮮重會逐漸降低，體內(nèi)的甘油三酯的滴度會逐漸增加，為分飛提供能量。而在分飛后生殖蟻體內(nèi)的能量有明顯降低，與飛行相關(guān)的肌肉有明顯的退化現(xiàn)象。建巢后生殖蟻體內(nèi)的蛋白水平及葡萄糖和甘油三脂滴度會在建巢初降低，但在7.5個月時上升并達(dá)到最高水平(Lietal.,2015,2021;Zhangetal.,2021)。張小晶等(2015)闡明了圓唇散白蟻Reticulitermeslabralis的若蟻型生殖蟻發(fā)育過程中卵黃蛋白原基因表達(dá)呈現(xiàn)先升高后降低的動態(tài)變化模式，并記錄了若蟻型生殖蟻的產(chǎn)卵量；王怡等(2019)詳細(xì)介紹了黑胸散白蟻若蟻型補(bǔ)充生殖蟻的分化表型特征，以及群體組成、數(shù)量、成熟程度和取食等對其分化的影響；Harrison等(2021)對工蟻、原始生殖蟻和若蟻等進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組測序，分析了相應(yīng)的品級分化基因；張磊等(2021)鑒定了品級分化過程中表皮信息素6,9-二十九二烯烴、6,9-三十一烷、6,9，17-三十二烷和 6,9,17-三十三烷僅蟻王和蟻后體內(nèi)存在，對工蟻型補(bǔ)充生殖蟻的研究集中于工蟻分化過程中保幼激素和蛻皮激素的含量變化(Elliott and Stay,2007,2008;Oguchietal.,2020;Milaceketal.,2021)，而對于其分化完成后關(guān)于生殖和衰老的生理生化特征研究甚少。

已有報(bào)道證明有效的抗氧化系統(tǒng)是生殖品級長期活躍產(chǎn)卵并且保持長壽的秘訣(Tasakietal.,2017,2021;Krameretal.,2021)。工蟻分化形成補(bǔ)充生殖蟻后能參與生殖(Hayashietal.,2006)，其是否與原始生殖蟻具有類似的抗氧化系統(tǒng)？過氧化氫酶(catalase,CAT)和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)是抗氧化體系中重要的抗氧化劑和自由基清除劑，能夠?qū)C(jī)體內(nèi)新陳代謝所產(chǎn)生的有毒過氧化物通過氧化還原作用轉(zhuǎn)化為毒害較低或者無害的物質(zhì)，有效延緩機(jī)體衰老(Arhontakietal.,2002;吳啟仙和夏嬙,2014)。酸性磷酸酶(acid phosphatase,ACP)、堿性磷酸酶(alkaline phosphatase,AKP)、羧酸酯酶(carboxylesterase,CarE)和細(xì)胞色素P450(cytochrome P450,CYP450)是昆蟲體內(nèi)重要的解毒酶，主要參與外源毒物的初生代謝(水解、氧化、還原等酶促反應(yīng))和次級代謝(共軛反應(yīng))過程，能夠分解代謝農(nóng)藥、植物次生代謝產(chǎn)物等外源毒物，維持昆蟲正常生理生化活動(王康等,2017)。此外，ACP參與卵母細(xì)胞的退化與吸收(Rajalakshmi and Mohandas,2005;Zhangetal.,2012),AKP參與卵泡細(xì)胞中激素的吸收運(yùn)轉(zhuǎn)保證卵球的成熟(Weietal.,2015)。

工蟻分化成補(bǔ)充生殖蟻后，迅速進(jìn)入產(chǎn)卵狀態(tài)，其產(chǎn)卵量遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于若蟻型生殖蟻(唐國清和劉源智,1990)，對巢群發(fā)展和穩(wěn)定具有重要作用。本研究擬通過測定工蟻型補(bǔ)充生殖蟻、工蟻和原始生殖蟻的抗氧化酶、解毒酶的酶活力和基因表達(dá)水平，從生理和分子水平上闡明工蟻型補(bǔ)充生殖蟻的生殖潛能和延緩衰老能力，揭示其在巢群發(fā)展和擴(kuò)張中的重要作用，給工蟻轉(zhuǎn)化成生殖蟻提供理論補(bǔ)充，為掌握白蟻群體發(fā)展規(guī)律及其生物防治和應(yīng)用開發(fā)提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 供試?yán)ハx

供試黑胸散白蟻于2021年4月采自南京市中山陵。將整個蟻巢帶回實(shí)驗(yàn)室后放入塑料箱(長×寬×高=30 cm×40 cm×50 cm)內(nèi)飼養(yǎng)，適量添加松木塊，定期補(bǔ)充水分，并放置在20～26℃自然光照條件下的實(shí)驗(yàn)室中，以用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

1.1.1雌雄成蟲配對：成蟲婚飛當(dāng)天在實(shí)驗(yàn)室收集巢內(nèi)飛出的黑胸散白蟻成蟲，然后立即根據(jù)其雌雄腹板的差別(雌性成蟲的第7腹板相比于雄性成蟲較寬)進(jìn)行性別鑒定，并分別放在不同的培養(yǎng)皿里飼養(yǎng)，培養(yǎng)皿內(nèi)放入濕潤的濾紙，待人工脫翅后進(jìn)行雌雄配對。將所配對的婚飛成蟲放入直徑2.5 cm、高5.5 cm的透明塑料瓶內(nèi)，瓶內(nèi)含有滅菌后用蒸餾水濕潤的壓實(shí)的鋸末，在靠近瓶口處放一小團(tuán)脫脂棉，用蒸餾水浸濕，以保持瓶內(nèi)環(huán)境的濕度，并定期補(bǔ)充水分；每個瓶中僅放入一對婚飛蟻飼養(yǎng)；瓶蓋輕輕蓋上，保持通氣。每組配對處理設(shè)置60組重復(fù)。配對飼養(yǎng)過程中，每天觀察各組白蟻的活動與死亡情況，記錄各組白蟻的行為特點(diǎn)與產(chǎn)卵時間，待第一波卵完全產(chǎn)生后，隨機(jī)取出5～10組成蟲個體待測。

1.1.2補(bǔ)充生殖蟻培養(yǎng)：待黑胸散白蟻成蟲婚飛后，將工蟻從巢內(nèi)剖出，以200頭左右分離培養(yǎng)于90 mm的培養(yǎng)皿中(培養(yǎng)皿中鋪有浸濕的濾紙)，并使用保鮮膜環(huán)繞培養(yǎng)皿1周以保持水分；將處理好的白蟻放置于濕度70%±5%、溫度26±2℃的培養(yǎng)箱中，定期補(bǔ)充水分，20～30 d之后，待培養(yǎng)皿中部分工蟻?zhàn)兂裳a(bǔ)充生殖蟻并產(chǎn)卵后，取出補(bǔ)充生殖蟻及其對應(yīng)的工蟻待測。

1.2 粗酶液制備及酶活力測定

選取工蟻2頭為一組，工蟻型補(bǔ)充生殖蟻1頭為一組，原始生殖蟻2頭為一組，各6組重復(fù)。準(zhǔn)確稱重后用蒸餾水清洗，再用95%的酒精體表消毒，消毒后將其置于1.5 mL離心管中，根據(jù)重量(g)∶體積(mL)=1∶9的比例加入9倍體積的磷酸緩沖液(PBS)，冰浴條件下機(jī)械勻漿，渦旋混勻，勻漿液在4℃ 12 000 r/min 條件下離心10 min，得離心后取上清液即為粗酶液，保存于-80℃超低溫冰箱待測。本實(shí)驗(yàn)所用總蛋白含量,CAT,SOD,AKP,ACP,GarE和CYP450試劑盒均由南京建成生物工程研究所提供，所有操作均按照試劑盒說明書嚴(yán)格執(zhí)行。

1.3 RNA提取和cDNA合成

根據(jù)RNeasy Mini Kit(QIAGEN)試劑盒方法提取成年雌雄工蟻、轉(zhuǎn)化完成并產(chǎn)卵的雌雄工蟻型補(bǔ)充生殖蟻和交配產(chǎn)卵的雌雄原始生殖蟻總RNA，用Promega反轉(zhuǎn)錄試劑盒 GoScriptTMReverse Transcription Mix,Oligo(dT)分別制備各cDNA樣本。

1.4 qRT-PCR

qRF-PCR采用QuantiNovaTMSYBR(Green PCR Kit(QIAGEN)試劑盒。以成年雌雄工蟻、轉(zhuǎn)化完成并產(chǎn)卵的雌雄工蟻型補(bǔ)充生殖蟻和交配產(chǎn)卵的雌雄原始生殖蟻的cDNA為模板，并以β-actin作為內(nèi)參基因(Zhouetal.,2007)進(jìn)行qRT-PCR，檢測抗氧化酶和解毒酶基因RsCAT,RsSOD,RsACP,RsCYP450和RsCarE的表達(dá)量，引物信息見表1。PCR反應(yīng)體系(20 μL):SYBRGreen PCR Master Mix 10 μL,QN ROX Reference Dye 2 μL,正反向引物(10 μmol/L)各1.4 μL,模板cDNA 2 μL,ddH2O 3.2 μL。擴(kuò)增程序:95℃預(yù)變性2 min;95℃變性5 s,60℃退火10 s,40個循環(huán)。

表1 引物信息Table 1 Primer information

1.5 數(shù)據(jù)分析

采用 Microsoft Excel 2013統(tǒng)計(jì)處理試驗(yàn)數(shù)據(jù)，其中細(xì)胞色素P450的數(shù)據(jù)采用Elisacalc軟件擬合標(biāo)準(zhǔn)曲線及數(shù)據(jù)處理。整理后的數(shù)據(jù)使用IBM SPSS Statistic 22.0中的單因素方差分析(one-way ANOVA)中的LSD多重比較進(jìn)行分析，所有實(shí)驗(yàn)結(jié)果均采用GraphPad Prism7 軟件作圖。全部數(shù)據(jù)均為平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤，以P<0.05作為差異顯著性標(biāo)準(zhǔn)。

2 結(jié)果

2.1 工蟻、補(bǔ)充生殖蟻和原始生殖蟻中抗氧化酶的活性及基因表達(dá)差異

工蟻和原始生殖蟻體內(nèi)的抗氧化酶酶活性及基因表達(dá)量與補(bǔ)充生殖蟻都有顯著性差異，如圖1和2所示。補(bǔ)充生殖蟻的CAT活性顯著高于工蟻的(雌性：P<0.001；雄性：P<0.001)和原始生殖蟻(雌性：P<0.001；雄性：P<0.001)的，是雌性工蟻的5.82倍(圖1:A,B)。同時，雌性原始生殖蟻的CAT活性顯著高于工蟻的(P=0.05)(圖1:A)。補(bǔ)充生殖蟻的SOD活性顯著高于工蟻的(雌性：P=0.002；雄性：P<0.001)，是雌性工蟻的1.41倍，但與原始生殖蟻的無顯著差異(雌性：P=0.076；雄性：P=0.156)(圖1:C,D)。然而，雄性原始生殖蟻的SOD活性顯著高于雄性工蟻的(P<0.001)(圖1:D)。雌性補(bǔ)充生殖蟻的RsCAT表達(dá)量顯著高于雌性工蟻的(P=0.003)和雌性原始生殖蟻的(P=0.001)，是雌性原始生殖蟻的5.68倍(圖2:A)；雄性補(bǔ)充生殖蟻的RsCAT表達(dá)量顯著高于雄性工蟻的(P=0.002)和雄性原始生殖蟻的(P=0.005)，是雄性原始生殖蟻的3.60倍(圖2:B)。雌性補(bǔ)充生殖蟻的RsSOD表達(dá)量顯著高于雌性工蟻(P=0.001)和雌性原始生殖蟻的(P<0.001)(圖2:C)；雄性補(bǔ)充生殖蟻的RsSOD表達(dá)量與雄性工蟻(P=0.590)和雄性原始生殖蟻的(P=0.422)無顯著差異(圖2:D)。此外，無論是雌性還是雄性，工蟻和原始生殖蟻的RsCAT和RsSOD表達(dá)量均沒有顯著性差異(P>0.05)(圖2)。

圖1 黑胸散白蟻工蟻、補(bǔ)充生殖蟻和原始生殖蟻體內(nèi)抗氧化酶CAT(A,B)和SOD(C,D)的活性Fig.1 Activities of antioxidant enzymes CAT (A,B) and SOD (C,D) in workers,ergatiod reproductives and primary reproductives of Reticulitermes chinensisCAT:過氧化氫酶Catalase;SOD:超氧化物歧化酶Superoxide dismutase;FW:雌性工蟻Female worker;MW:雄性工蟻Male worker:FE:雌性補(bǔ)充生殖蟻Female ergatoid reproductive;ME:雄性補(bǔ)充生殖蟻Male ergatoid reproductive;Q:原始生殖蟻后Queen in primary reproductive;K:原始生殖蟻王King in primary reproductive.圖中數(shù)據(jù)為平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤；柱上不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)(one-way ANOVA,LSD檢驗(yàn))。Data in the figure are mean±SE.Different small letters above indicate significant difference measured using one-way ANOVA followed by LSD test (P<0.05).下圖同。The same for the following figures.

圖2 黑胸散白蟻工蟻、補(bǔ)充生殖蟻和原始生殖蟻體內(nèi)RsCAT(A,B)和RsSOD(C,D)的相對表達(dá)量Fig.2 Relative expression levels of RsCAT (A,B) and RsSOD (C,D) in workers,ergatiod reproductives and primary reproductives of Reticulitermes chinensis

2.2 工蟻、補(bǔ)充生殖蟻和原始生殖蟻中解毒酶活性及基因表達(dá)差異

補(bǔ)充生殖蟻體內(nèi)解毒酶活性顯著提高。補(bǔ)充生殖蟻的ACP活性顯著高于工蟻的(雌性：P=0.001；雄性：P=0.007)和原始生殖蟻的(雌性：P<0.001；雄性：P<0.001)，是雌性工蟻的1.39倍(圖3:A,B)。工蟻的ACP活性也顯著高于原始生殖蟻的(雌性:P=0.001;雄性:P=0.043)(圖3:A,B)。補(bǔ)充生殖蟻的AKP活性顯著高于工蟻的(雌性：P=0.029；雄性：P=0.016)，是雌性工蟻的2.27倍，但與原始生殖蟻的無顯著差異(雌性：P=0.143；雄性：P=0.168)(圖3:C,D)。雌性補(bǔ)充生殖蟻的RsACP表達(dá)量顯著高于雌性工蟻的(P<0.001)和雌性原始生殖蟻的(P<0.001)，是雌性原始生殖蟻的81.12倍(圖4:A)；雄性補(bǔ)充生殖蟻的RsACP表達(dá)量顯著高于雄性工蟻的(P=0.001)和雄性原始生殖蟻的(P=0.001)，是雄性原始生殖蟻的46.72倍(圖4:B)。工蟻和原始生殖蟻的RsACP表達(dá)量沒有顯著性差異(P>0.05)(圖4)。

雌性補(bǔ)充生殖蟻的CarE活性顯著高于雌性工蟻的(P<0.001)和雌性原始生殖蟻的(P<0.001)，是雌性工蟻的2.70倍(圖5:A)；雄性補(bǔ)充生殖蟻的CarE活性與雄性工蟻(P=0.988)和雄性原始生殖蟻的(P=0.111)(圖5:B)無顯著差異。補(bǔ)充生殖蟻的CYP450活性與工蟻的(雌性：P=0.502；雄性：P=0.367)和原始生殖蟻的(雌性：P=0.096；雄性：P=0.833)無顯著差異(圖5:C,D)。雌性補(bǔ)充生殖蟻的RsCarE表達(dá)量顯著高于雌性工蟻(P<0.001)和雌性原始生殖蟻的(P<0.001)(圖6:A)；雄性補(bǔ)充生殖蟻的RsCarE表達(dá)量與雄性工蟻(P=0.907)和雄性原始生殖蟻的(P=0.590)無顯著差異(圖6:B)。雌性補(bǔ)充生殖蟻的RsCYP450表達(dá)量顯著高于雌性工蟻(P<0.001)和雌性原始生殖蟻的(P<0.001)(圖6:C)；雄性補(bǔ)充生殖蟻的RsCYP450表達(dá)量顯著高于雄性工蟻的(P=0.009)，但與雄性原始生殖蟻的(P=0.078)沒有顯著差異(圖6:D)。此外，工蟻和原始生殖蟻的RsCarE和RsCYP450表達(dá)量也沒有顯著性差異(P>0.05)(圖6)。

圖3 黑胸散白蟻工蟻、補(bǔ)充生殖蟻和原始生殖蟻體內(nèi)解毒酶ACP(A,B)和AKP(C,D)的活性Fig.3 Activities of detoxification enzymes ACP (A,B) and AKP (C,D) in workers,ergatiod reproductives and primary reproductives of Reticulitermes chinensisACP:酸性磷酸酶Acid phosphatase;堿性磷酸酶Alkaline phosphatase.

圖4 黑胸散白蟻工蟻、補(bǔ)充生殖蟻和原始生殖蟻體內(nèi)RsACP的相對表達(dá)量Fig.4 Relative expression levels of RsACP in workers,ergatiod reproductives and primary reproductives of Reticulitermes chinensis

圖5 黑胸散白蟻工蟻、補(bǔ)充生殖蟻和原始生殖蟻體內(nèi)解毒酶CarE(A,B)和CYP450(C,D)的活性Fig.5 Activities of detoxification enzymes CarE (A,B) and CYP450 (C,D) in workers,ergatiod reproductives and primary reproductives of Reticulitermes chinensisCarE:羧酸酯酶Carboxylesterase;CYP450:細(xì)胞色素P450 Cytochrome P450.

圖6 黑胸散白蟻工蟻、補(bǔ)充生殖蟻和原始生殖蟻體內(nèi)RsCarE(A,B)和RsCYP450(C,D)的相對表達(dá)量Fig.6 Relative expression levels of RsCarE (A,B) and RsCYP450 (C,D) in workers,ergatiod reproductives and primary reproductives of Reticulitermes chinensis

3 討論與結(jié)論

本研究對比了工蟻、工蟻型補(bǔ)充生殖蟻和原始生殖蟻體內(nèi)抗氧化酶活性和基因表達(dá)量的差異，發(fā)現(xiàn)工蟻轉(zhuǎn)化成補(bǔ)充生殖蟻后，其CAT和SOD活性和基因表達(dá)量都有顯著提高(圖1和2)，這表明工蟻轉(zhuǎn)化為補(bǔ)充生殖蟻后通過提高體內(nèi)抗氧化酶的活性和基因表達(dá)水平延緩了衰老速度；而其CAT的活性和基因表達(dá)量以及SOD的基因表達(dá)量都高于原始生殖蟻的，SOD活性與原始生殖蟻的沒有顯著性差異(圖1和2)。原始生殖蟻婚飛建巢以后，需要承擔(dān)繁重的巢群維護(hù)和育幼工作，建巢第一年大約產(chǎn)7～10顆卵，而工蟻轉(zhuǎn)變成補(bǔ)充生殖蟻后受到其他工蟻的照料，會立即進(jìn)入產(chǎn)卵狀態(tài)，其產(chǎn)卵速率以及產(chǎn)卵量都遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于原始生殖蟻的，Schrempf等(2005)在螞蟻中證實(shí)交配會增加壽命，而交配和繁殖率高的補(bǔ)充生殖蟻的CAT活性顯著高于產(chǎn)卵率低的原始生殖蟻的也從側(cè)面印證了這一點(diǎn)，但還有待證實(shí)。

代謝解毒是昆蟲抵抗寄主植物的防御反應(yīng)和化學(xué)殺蟲劑毒殺的重要途經(jīng)(袁星星等,2020)，解毒酶活性的增加有助于昆蟲抵抗毒素。Banerjee(1967)對工蟻、兵蟻和生殖蟻體內(nèi)AKP活性進(jìn)行檢測，研究結(jié)果表明生殖蟻體內(nèi)AKP活性高于工蟻和兵蟻的。本研究中檢測了工蟻、工蟻型補(bǔ)充生殖蟻和原始生殖蟻體內(nèi)的AKP活性，雌雄補(bǔ)充生殖蟻體內(nèi)AKP活性分別達(dá)到工蟻的2.27和1.80倍，與原始生殖蟻沒有顯著差異(圖3:C,D)，這與Banerjee (1967)的結(jié)果基本一致。同時我們也檢測了ACP的活性和基因表達(dá)量，雌雄補(bǔ)充生殖蟻體內(nèi)ACP的活性相較工蟻提高了39%和48%，基因表達(dá)水平分別達(dá)到工蟻的95.49和59.78倍(圖3:A,B;圖4:A,B)。磷酸酶是機(jī)體的解毒酶之一，同時也參與卵母細(xì)胞的退化與吸收與卵泡細(xì)胞中激素的吸收運(yùn)轉(zhuǎn)，而工蟻轉(zhuǎn)化為補(bǔ)充生殖蟻后，其最重要的職能就是產(chǎn)卵，AKP和ACP活性的提高促進(jìn)了補(bǔ)充生殖蟻的產(chǎn)卵。CarE是昆蟲體內(nèi)重要的解毒酶之一。高祖鵬等證明昆蟲通過提高CarE等解毒酶的活性，加速代謝有毒物質(zhì)，提高自身抗藥性(Scott,1999;高祖鵬,2020)。Field等(1999)以及Field和Devonshire(1998)在研究中發(fā)現(xiàn)CarE活性與昆蟲對有機(jī)磷的抗藥性倍數(shù)成正相關(guān)。我們經(jīng)過實(shí)驗(yàn)檢測，發(fā)現(xiàn)補(bǔ)充生殖蟻體內(nèi)CarE活性是工蟻的3倍(圖5:A)。補(bǔ)充生殖蟻升高的CarE活性提高了其抵抗外界毒素的能力，有助于其維持自身的良好狀態(tài)，進(jìn)行正常的生理活動以維持巢群的穩(wěn)定。

黑胸散白蟻廣泛分布于我國北京、天津、山西、陜西、四川和長江流域，以植物、木質(zhì)材料為食，對建筑物及森林造成重大破壞，是損害房屋建筑的主要元兇之一。Huang等(2013) 對采集自我國不同地區(qū)的黑胸散白蟻進(jìn)行了遺傳分析，發(fā)現(xiàn)重慶的白蟻群體存在兩個不同的遺傳結(jié)構(gòu)，來源于采樣地的兩次建筑施工，其中一個群體與長沙的樣本有相似的遺傳結(jié)構(gòu)，這可能是由于人類活動導(dǎo)致其進(jìn)行了長距離遷移。除此以外，Wu等(2019)在對黑胸散白蟻的研究中發(fā)現(xiàn)，黑胸散白蟻與黃胸散白蟻婚飛期有交叉，但是兩種白蟻在配對選擇上沒有種間偏好，并且都能夠雜交產(chǎn)生后代。這無疑提高了黑胸散白蟻的適應(yīng)性，但同時也增加了其防治難度。

白蟻蟻群由蟻王蟻后發(fā)展而來，蟻王蟻后在建巢前后會經(jīng)歷大量生理變化(Lietal.,2015,2021;Zhangetal.,2021)，建巢后產(chǎn)卵量較少，卵孵化的成功率較低，巢群發(fā)展緩慢(彭曉濤等,2009)。在低等白蟻中，當(dāng)巢群發(fā)展到一定規(guī)模，就會有補(bǔ)充生殖蟻產(chǎn)生，補(bǔ)充生殖蟻完成轉(zhuǎn)化后會立即進(jìn)入產(chǎn)卵階段，產(chǎn)卵數(shù)量高于建巢初期的原始生殖蟻(唐國清和劉源智,1990)，其危害性更高。因此對于補(bǔ)充生殖蟻的生理研究有助于掌握白蟻群體發(fā)展規(guī)律，深入了解白蟻巢群生存和擴(kuò)張的機(jī)理，對開展生物防治和白蟻類資源的研究有重要意義。