牛結(jié)核病的臨床癥狀、病理變化及診斷方法

覃小紅

廣西北流市動(dòng)物檢疫駐鎮(zhèn)工作站，廣西北流 537400

牛結(jié)核病是一種慢性、消耗性、細(xì)菌性疾病，主要由牛分枝桿菌感染所引起，牛結(jié)核病還會(huì)傳染給人類(lèi)，導(dǎo)致人結(jié)核病。該病歷史比較悠久，但直到1882年科赫才確定其病原菌為結(jié)核分枝桿菌。據(jù)相關(guān)研究[1]結(jié)果顯示，牛結(jié)核病在全球的流行率為10%左右，每年對(duì)全球養(yǎng)牛業(yè)造成的經(jīng)濟(jì)損失高達(dá)數(shù)十億美元。世界動(dòng)物衛(wèi)生組織將牛結(jié)核病列為B 類(lèi)動(dòng)物疫病，我國(guó)將其列為2 類(lèi)動(dòng)物疫病。目前，澳大利亞、新加坡、加拿大等國(guó)家已成為無(wú)結(jié)核病國(guó)家。亞洲和非洲大部分國(guó)家仍是牛結(jié)核病的流行地區(qū)，且目前仍然沒(méi)有有效疫苗可用于防控牛結(jié)核病，給養(yǎng)牛生產(chǎn)業(yè)的健康發(fā)展構(gòu)成了嚴(yán)重的威脅。

1 病原學(xué)

牛結(jié)核病的病原菌為牛分枝桿菌，隸屬于分枝桿菌屬、牛分枝桿菌種，為不產(chǎn)生芽孢，無(wú)莢膜和鞭毛的革蘭氏陽(yáng)性短桿菌，抗酸染色為紅色；該菌為嚴(yán)格的需氧菌，是結(jié)核分枝桿菌屬生長(zhǎng)最慢的細(xì)菌，普通培養(yǎng)基上生長(zhǎng)緩慢，在添加血清或其他營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)良好；該菌對(duì)外界環(huán)境具有一定的抵抗力，但對(duì)熱和化學(xué)消毒劑敏感，常用的消毒劑如來(lái)蘇兒、甲醛、75%酒精可輕易將其滅活。

2 流行病學(xué)

2.1 傳染源

患病牛和帶菌牛是該病的主要傳染源，患病牛和帶菌的分泌物、排泄物或被其污染的飼料、飲水、環(huán)境、空氣等也可成為傳染源；與病牛接觸的車(chē)輛、器具或注射工具也可能成為傳染源。

2.2 傳播途徑

牛結(jié)核病主要通過(guò)呼吸道和消化道2 種方式進(jìn)行傳播。健康牛與病?；烊猴曫B(yǎng)，病牛排出的病原體污染了飼料、飲水或墊草，一旦誤食，即可造成消化道傳播；病牛排出的病原體也可漂浮在空氣和灰塵中，健康牛吸入可造成呼吸道傳播。

2.3 易感動(dòng)物

牛是牛分枝桿菌的主要易感動(dòng)物。奶牛易感性最高，黃牛、耗牛和水牛次之；豬、人類(lèi)及其他動(dòng)物也可感染牛分枝桿菌。

2.4 流行特點(diǎn)

牛結(jié)核病的發(fā)生沒(méi)有明顯的季節(jié)性，一年四季均有發(fā)生，可散發(fā)或呈地方性流行。飼養(yǎng)管理不當(dāng)，牛舍通風(fēng)不良、飼養(yǎng)密度擁擠、營(yíng)養(yǎng)不良等外界環(huán)境因素可促進(jìn)該病的發(fā)生。

3 臨床癥狀

牛感染后可表現(xiàn)為肺結(jié)核、乳房結(jié)核、腸結(jié)核、腦結(jié)核、淋巴結(jié)核、生殖器結(jié)核等臨床癥狀，前3 種癥狀較多見(jiàn)[2]。

1）肺結(jié)核。發(fā)病初期食欲和反芻活動(dòng)無(wú)明顯變化，但可表現(xiàn)為長(zhǎng)時(shí)間的干咳，尤其是病牛起立運(yùn)動(dòng)或吸入冷空氣時(shí)咳嗽更為明顯；隨著病程的發(fā)展，咳嗽次數(shù)會(huì)增加，呼吸急促或困難；病牛逐漸消瘦、貧血，肩前淋巴結(jié)、股前淋巴結(jié)、腹股溝淋巴結(jié)、頜下淋巴結(jié)等腫大。

2）乳房結(jié)核。病牛泌乳量下降，乳汁品質(zhì)降低，嚴(yán)重時(shí)稀薄如水；乳房淋巴結(jié)腫大，觸摸乳房凹凸不平，有硬結(jié)節(jié)。

3）腸結(jié)核。此類(lèi)型臨床癥狀多見(jiàn)于犢牛，主要表現(xiàn)為食欲降低、消化不良、腹瀉消瘦、不喜活動(dòng)。

4 病理變化

剖檢病死?？梢?jiàn)肺臟表面有許多散在的灰白色結(jié)節(jié)，切面為干酪樣壞死；部分結(jié)節(jié)鈣化，刀切有沙礫感；胸膜和腹膜表面有散在的大小不等的灰白色結(jié)節(jié)，外觀似珍珠，因而又可成為“珍珠病”；乳房結(jié)核型病牛剖檢可見(jiàn)里面有大小不等的壞死灶，內(nèi)部為干酪樣壞死；胃黏膜、腸黏膜上有大小不等的結(jié)節(jié)或潰瘍[3]。

5 診斷方法

5.1 細(xì)菌學(xué)檢測(cè)

可采集病牛的病變組織直接抹片，也可以無(wú)菌接種至培養(yǎng)基進(jìn)行分離培養(yǎng)，取純培養(yǎng)物進(jìn)行革蘭氏染色或抗酸染色，顯微鏡檢，若革蘭氏染色見(jiàn)到陽(yáng)性短桿菌或抗酸染色見(jiàn)到紅色菌體，可基本確診。該法成本低、操作簡(jiǎn)單、假陽(yáng)性率低，但對(duì)生物安全要求高、不能區(qū)分牛分枝桿菌和其他細(xì)菌。

5.2 分子生物學(xué)檢測(cè)

常用的方法有PCR 技術(shù)、實(shí)時(shí)定量PCR、環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)等。PCR 技術(shù)可以分離菌或病變組織核酸為模板進(jìn)行擴(kuò)增，敏感性高、特異性強(qiáng)，檢測(cè)速度快，可用來(lái)檢測(cè)大批量樣品；實(shí)時(shí)定量PCR 比普通PCR 技術(shù)更為敏感，結(jié)果判定比較直觀，不需要凝膠電泳，更適合檢測(cè)大量樣品，但需要熒光PCR 儀，只適合實(shí)驗(yàn)室診斷；環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)操作簡(jiǎn)單、靈敏度和特異性好、成本低，可在基層推廣使用。

5.3 血清學(xué)檢測(cè)

常用的技術(shù)有ELISA 試驗(yàn)和免疫膠體金試驗(yàn)。前者操作簡(jiǎn)單、靈敏度高、特異性強(qiáng)，是檢測(cè)牛結(jié)核病的主要方法之一，可檢測(cè)大批量樣本，且出結(jié)果快；免疫膠體金試驗(yàn)對(duì)操作人員要求較低，靈敏度和特異性都較高，可在基層推廣使用，但成本較高。

5.4 結(jié)核菌素試驗(yàn)

結(jié)核菌素試驗(yàn)是世界動(dòng)物衛(wèi)生組織推薦使用的檢測(cè)方法，包括提純結(jié)核菌素和老結(jié)核菌素2種，應(yīng)用較廣。該方法檢測(cè)率高，但周期較長(zhǎng)，且影響試驗(yàn)結(jié)果的因素較多，易導(dǎo)致出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果。

6 防治措施

6.1 加強(qiáng)飼養(yǎng)管理，提高牛群抵抗力

養(yǎng)殖場(chǎng)或養(yǎng)殖戶(hù)應(yīng)加強(qiáng)牛群的飼養(yǎng)管理工作，定期給圈舍消毒，不定期更換消毒劑，避免消毒效果降低；定時(shí)清掃圈舍，保持地面干燥，環(huán)境優(yōu)良；科學(xué)配比飼料，適當(dāng)添加抗生素或其他營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，促進(jìn)牛群健康生長(zhǎng)，增強(qiáng)機(jī)體抵抗力。

6.2 嚴(yán)格把控檢疫關(guān)，合理處置病、死牛

養(yǎng)殖場(chǎng)或養(yǎng)殖戶(hù)引進(jìn)牛只時(shí)，應(yīng)從非疫區(qū)引進(jìn)健康牛，引進(jìn)后不能立即混群，須隔離飼養(yǎng)一段時(shí)間后才能混群飼養(yǎng)；定期監(jiān)測(cè)牛群免疫抗體水平，根據(jù)結(jié)果選擇合適疫苗或免疫增強(qiáng)劑進(jìn)行調(diào)整。若發(fā)現(xiàn)牛結(jié)核病疫情，要及時(shí)隔離病牛，選擇敏感抗生素進(jìn)行治療，避免傳播給健康牛群；若有病死牛，應(yīng)進(jìn)行無(wú)害化處理，并對(duì)場(chǎng)地進(jìn)行全面消毒，消滅傳染源。