• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    microRNA調(diào)控缺血性腦卒中小膠質(zhì)細(xì)胞激活作用的研究進(jìn)展

    2022-11-26 00:39:00聶晨晨凡勇福阮曉迪綜述蘇凱奇馮曉東2審校
    關(guān)鍵詞:膠質(zhì)表型腦缺血

    聶晨晨, 袁 潔, 凡勇福, 阮曉迪綜述, 蘇凱奇, 馮曉東,2審校

    缺血性腦卒中是全球最常見的死亡與致殘?jiān)?占所有卒中的75%~80%[1]。嚴(yán)重影響患者的生存質(zhì)量。組織型纖溶酶原激活目前雖作為腦缺血損傷公認(rèn)且有效的治療手段,但其具有治療時(shí)間窗短、再通率低等弊端。中樞神經(jīng)系統(tǒng)固有免疫細(xì)胞-小膠質(zhì)細(xì)胞,在腦缺血損傷早期,激活的小膠質(zhì)細(xì)胞起吞噬碎片作用;隨著炎癥反應(yīng)及炎性細(xì)胞的進(jìn)一步釋放,其被過度激活,進(jìn)一步加重炎癥反應(yīng)的發(fā)生,引起腦缺血后神經(jīng)元的損傷、加劇血腦屏障破壞和腦水腫。有研究表明[2]小膠質(zhì)細(xì)胞介導(dǎo)腦缺血損傷的炎癥反應(yīng)與M1與M2表型極化有關(guān)。目前,關(guān)于小膠質(zhì)細(xì)胞表型改變的分子機(jī)制尚未明確,現(xiàn)有大量研究證實(shí)[3,4]microRNA(miRNA)可調(diào)控小膠質(zhì)細(xì)胞的激活、表型轉(zhuǎn)化及炎癥因子的表達(dá)。本文將從miRNA調(diào)控小膠質(zhì)細(xì)胞激活及表型轉(zhuǎn)化方面進(jìn)行介紹,旨在為腦缺血臨床治療開拓新視角。

    1 小膠質(zhì)細(xì)胞激活與雙重作用

    19世紀(jì)末小膠質(zhì)細(xì)胞被稱為桿狀細(xì)胞,起源于卵黃囊原始巨噬細(xì)胞,其更新依賴于自身增殖與凋亡的偶聯(lián)過程,含量約占大腦組織的10%[5],多分布在灰質(zhì)、海馬體、基底節(jié)和嗅皮質(zhì)中,是唯一一個(gè)永久駐留于中樞神經(jīng)系統(tǒng)中的免疫細(xì)胞。小膠質(zhì)細(xì)胞在腦缺血、缺氧環(huán)境下快速激活,激活后在釋放嗜神經(jīng)因子、吞噬有害物質(zhì)的同時(shí)誘導(dǎo)大量促炎因子的釋放。小膠質(zhì)細(xì)胞對(duì)腦缺血損傷的保護(hù)作用取決于小膠質(zhì)細(xì)胞中M2表型的極化。Choi等[6]研究發(fā)現(xiàn)M2型的小膠質(zhì)細(xì)胞條件培養(yǎng)基導(dǎo)致缺血性腦卒中后同側(cè)SVZ(側(cè)腦室)中NSPCs(神經(jīng)干細(xì)胞)的增殖與分化。在缺血損傷腦內(nèi)早期注射小膠質(zhì)細(xì)胞有助于M2型小膠質(zhì)細(xì)胞發(fā)揮神經(jīng)抗炎作用。小膠質(zhì)細(xì)胞的M1和M2不同表型之間動(dòng)態(tài)變化,對(duì)于腦組織損傷修復(fù)的調(diào)節(jié)起著重要的作用。

    小膠質(zhì)細(xì)胞在腦缺血時(shí)的損害作用與其過度激活、M1表型極化有關(guān)。在腦缺血損傷中,過度激活的小膠質(zhì)細(xì)胞已被證明參與多種疾病中神經(jīng)炎癥的表達(dá)[7]。研究結(jié)果顯示[8]通過減少小膠質(zhì)細(xì)胞的表達(dá),增加Bcl-2的表達(dá)數(shù)量,可提高細(xì)胞存活率。Yang等人發(fā)現(xiàn)[9]黃芩素通過降低JNK、ERK、p38的磷酸化水平、抑制NF-κB信號(hào)通路、降低炎性因子IL-6的釋放,促使小膠質(zhì)細(xì)胞向M2型的轉(zhuǎn)化,有利于降低炎癥反應(yīng)。此外還可以通過抑制小膠質(zhì)細(xì)胞M1型的表達(dá),促進(jìn)PI3K/Akt/mTOR信號(hào)通路的磷酸化,抑制細(xì)胞自噬。由此可見小膠質(zhì)細(xì)胞的激活可促使細(xì)胞自噬、神經(jīng)元凋亡。一項(xiàng)研究使用[10]時(shí)移雙光子成像技術(shù)對(duì)MOCA大鼠小膠質(zhì)細(xì)胞的激活進(jìn)行動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè),其結(jié)果顯示小膠質(zhì)細(xì)胞的增多伴隨著血管生成的減少。在腦卒中早期,抑制小膠質(zhì)細(xì)胞的激活,將有助于維持血腦屏障的完整性,其機(jī)制涉及炎癥遞質(zhì)釋放及相關(guān)通路的激活、細(xì)胞間的相互作用與氧化應(yīng)激。以上結(jié)果均表明抑制小膠質(zhì)細(xì)胞的過度激活及M1表型的轉(zhuǎn)化有望成為腦缺血損傷治療的有效靶點(diǎn)。

    總之,及時(shí)抑制小膠質(zhì)細(xì)胞的促炎表型表達(dá)可作為腦缺血損傷治療的有效手段。此外,不同表型的極化在腦缺血損傷中具有時(shí)空分布特性。在恰當(dāng)?shù)臅r(shí)期給予干預(yù)有助于最大程度發(fā)揮小膠質(zhì)細(xì)胞神經(jīng)保護(hù)作用。

    2 miRNA調(diào)節(jié)小膠質(zhì)細(xì)胞在腦缺血損傷中的作用

    MicroRNA作為一種長(zhǎng)度為18~25個(gè)核苷酸的非編碼RNA,通過誘導(dǎo)Dicer復(fù)合體降解mRNA或抑制mRNA的表達(dá),從而影響某些轉(zhuǎn)錄因子、細(xì)胞因子的表達(dá)[11]。在一項(xiàng)臨床實(shí)驗(yàn)[12]中采用miRNA高通量技術(shù)可觀察到腦缺血環(huán)境下miRNA的變化,但是miRNA是否能夠成為腦缺血后診斷與治療的重要靶點(diǎn)一直是研究熱點(diǎn)。依據(jù)miRNA在小膠質(zhì)細(xì)胞中的具體作用,將miRNA分為:促進(jìn)小膠質(zhì)細(xì)胞激活及M1型轉(zhuǎn)化與抑制小膠質(zhì)細(xì)胞激活及M2型轉(zhuǎn)化兩種。

    2.1 正向調(diào)控小膠質(zhì)細(xì)胞激活與促使M1轉(zhuǎn)化

    2.1.1 miRNA let-7c-5p miRNA let-7c-5p作為人體最為豐富的miRNA,可通過調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖與凋亡參與疾病的病理過程,Jingshu Ni等人[13]發(fā)現(xiàn)在BV2小膠質(zhì)細(xì)胞以及脂多糖誘導(dǎo)的小膠質(zhì)細(xì)胞中miRNA let-7c-5p的含量下降,提示活化的小膠質(zhì)細(xì)胞伴隨著Let-7c-5p的含量減少。該研究與MCAO小鼠體內(nèi)Let-7c-5p的變化一致。當(dāng)MCAO小鼠腦內(nèi)過表達(dá)let-7c-5p時(shí),腦梗死損傷體積減少,有利于腦缺血損傷的恢復(fù)。由此可見miRNA let-7c-5p可作為腦缺血損傷的治療靶點(diǎn),其機(jī)制為miRNA Let-7c-5p靶向結(jié)合在凋亡蛋白caspase 3 mRNA的3’-未翻譯區(qū)抑制其表達(dá),維持小膠質(zhì)細(xì)胞靜息狀態(tài)。

    2.1.2 MiRNA-200b 缺血性腦梗死若不及時(shí)治療容易誘發(fā)腦水腫,不利于患者日后恢復(fù)。而大腦神經(jīng)炎癥因子的釋放是缺血后腦水腫發(fā)生的重要機(jī)制。已有研究表明miRNA-200b的表達(dá)與腦缺血損傷密切相關(guān),其高度上調(diào)可促進(jìn)相關(guān)神經(jīng)炎癥因子釋放。Wen等人[14]證實(shí)這一結(jié)論,在體內(nèi)或體外實(shí)驗(yàn)中,注射高滲鹽水能夠通過抑制miR-200b的表達(dá)誘導(dǎo)小膠質(zhì)細(xì)胞M2表型極化及減弱TNF-α、IL-1β及小膠質(zhì)細(xì)胞M1標(biāo)記物(iNOS、CD86)和miR-200b的表達(dá)。隨后的熒光素酶報(bào)告基因測(cè)定Krüppel樣因子4(Krüppel-like factor4,KLF4)為miRNA-200b在腦缺血損傷小膠質(zhì)細(xì)胞作用中的靶基因。KLF4可在抑制NF-κB活化因子同時(shí)與Arg1、Stat6結(jié)合,誘發(fā)小膠質(zhì)細(xì)胞M2型基因程序[15]。

    2.1.3 miR-377 已有研究表明miR-377可成為腦缺血損傷的治療靶點(diǎn)。Fan Y等人[16]發(fā)現(xiàn)在腦缺血損傷大鼠側(cè)腦室內(nèi)注射miR-377抑制劑,能夠減少氧剝奪模型(OGD)下小膠質(zhì)細(xì)胞的激活及相關(guān)促炎因子的釋放,并且促使血管生成相關(guān)細(xì)胞的增殖與遷移。隨后他們應(yīng)用miRNA靶標(biāo)預(yù)測(cè)分析證實(shí)ERG2、VEGF可作為miR-377的作用靶點(diǎn),miR-377與EGR2、VEGF的表達(dá)水平呈負(fù)相關(guān)。EGR2[17]通過降低炎癥因子表達(dá)量,抑制小膠質(zhì)細(xì)胞活化在調(diào)控小膠質(zhì)細(xì)胞介導(dǎo)的免疫反應(yīng)中發(fā)揮著關(guān)鍵作用。此外,VEGF作為一種多效性血管生長(zhǎng)因子,可誘導(dǎo)M2型小膠質(zhì)細(xì)胞極化。并有研究表明VEGF可作為miR-377的直接靶點(diǎn)誘導(dǎo)血管生成相關(guān)細(xì)胞的增殖[18]。因而,抑制miR-377可抑制小膠質(zhì)細(xì)胞過度激活、促進(jìn)血管再生。

    2.1.4 miR-3473b Wang X等人[19]發(fā)現(xiàn)MCAO小鼠同側(cè)皮質(zhì)、紋狀體中miR-3473b水平顯著增加。這與體外被脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)或OGD激活的小膠質(zhì)細(xì)胞中miR-3437b的水平變化一致。經(jīng)注射miRNA-3437b抑制劑的小鼠相比對(duì)照組而言,大腦同側(cè)皮質(zhì)及紋狀體中的梗死體積顯著減少且神經(jīng)功能評(píng)分得以改善。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)SOCS3(細(xì)胞因子信號(hào)抑制因子3)上存在miR-3437b的結(jié)合位點(diǎn)。SOCS3作為細(xì)胞因子誘導(dǎo)蛋白,能夠?qū)γ庖呒?xì)胞中細(xì)胞因子的信號(hào)傳導(dǎo)產(chǎn)生抑制作用[20],尤其針對(duì)IL-6炎性家族。因此,miR-3437b可通過靶向抑制SOCS3的表達(dá)介導(dǎo)腦缺血損傷后小膠質(zhì)細(xì)胞中的神經(jīng)炎癥。

    2.1.5 miR-155 miR-155與小膠質(zhì)細(xì)胞介導(dǎo)的免疫反應(yīng)密切相關(guān)。最新研究表明[21]miR-155介導(dǎo)小膠質(zhì)細(xì)胞在腦缺血損傷中的炎癥反應(yīng),可歸納為以下幾個(gè)方面:(1)miR- 155直接作用于SOCS-1(細(xì)胞信號(hào)抑制因子-1)、SOCS-6和SHIP-1,抑制細(xì)胞因子信號(hào)的傳導(dǎo),抑制小膠質(zhì)細(xì)胞活化。其機(jī)制為miR-155直接結(jié)合到SOCS-1與SHIP中,減弱STAT-3的活性,其中STAT-3是小膠質(zhì)細(xì)胞激活的指標(biāo);(2)顯微鏡下觀察在注射miR-155后,血管周圍聚集的小膠質(zhì)細(xì)胞/吞噬細(xì)胞減少,提示miR-155抑制活化后小膠質(zhì)細(xì)胞對(duì)血管的吞噬作用;(3)調(diào)控免疫細(xì)胞(小膠質(zhì)細(xì)胞)表型轉(zhuǎn)化:在miR-155抑制劑注射7 d后,M1表型標(biāo)志物CD45與CD86的表達(dá)下降。而M2型激活因子:IL-10與CD-45的表達(dá)上調(diào),IL-10可通過激活CD-45磷酸化,從而負(fù)向調(diào)控小膠質(zhì)細(xì)胞的激活。因而miRNA-155能夠調(diào)控小膠質(zhì)細(xì)胞的分化及抗炎表型的極化。在此基礎(chǔ)上,Wen Y等人[22]用100 mol/L的旋覆花內(nèi)酯(acetylbritannilactone,ABL)處理BV2細(xì)胞后,可消除mi-155的增長(zhǎng)。其機(jī)制為ABL通過抑制NF-κB、TLR4表達(dá)和促進(jìn)MyD88、SOCS1及I-κB的表達(dá),進(jìn)而抑制CGD誘導(dǎo)的BV2細(xì)胞中炎癥因子的表達(dá)。因而,靶向應(yīng)用MiR-155可為抑制小膠質(zhì)細(xì)胞的過度激活提供新策略。

    2.2 負(fù)向調(diào)控小膠質(zhì)細(xì)胞激活及促使M2型轉(zhuǎn)化

    2.2.1 miRNA203 髓樣分化因子(myeloiddifferentiationfactor88,MyD88)通過誘發(fā)轉(zhuǎn)錄因子NF-κB、AP-1核轉(zhuǎn)位,增強(qiáng)宿主細(xì)胞對(duì)病原體的免疫應(yīng)答。已研究證明[23]MyD88介導(dǎo)小膠質(zhì)細(xì)胞的神經(jīng)炎癥。此外,miR-203在病理及生理免疫反應(yīng)中也起到重要作用。Yanga等人[24]發(fā)現(xiàn)在OGD誘導(dǎo)活化的小膠質(zhì)細(xì)胞中,MyD88可作為miR-23調(diào)控小膠質(zhì)細(xì)胞釋放炎癥因子的重要靶點(diǎn),直接調(diào)控MyD88轉(zhuǎn)錄水平的表達(dá),減弱NF-κB、IL-1β等炎性因子的表達(dá)活性。過表達(dá)miR-203可減少神經(jīng)炎癥,改善神經(jīng)元功能。這一發(fā)現(xiàn)為腦缺血損傷的治療提供新靶點(diǎn)。

    2.2.2 miR-93與miR-27a 白細(xì)胞介素-1受體相關(guān)激酶(IRAK4)可增強(qiáng)小膠質(zhì)細(xì)胞中NO和TNF-α的釋放,介導(dǎo)炎癥反應(yīng)的發(fā)生。在體內(nèi)或體外實(shí)驗(yàn)中[25],小膠質(zhì)細(xì)胞中的miR-93水平與IRAK4的表達(dá)均呈負(fù)相關(guān)。ELISA結(jié)果顯示,在腦缺血再灌注小鼠體內(nèi)注射miR-93模擬物容易導(dǎo)致RAK4的蛋白表達(dá)量減少,IL-1、TNF-α的釋放減少,抑制神經(jīng)元凋亡。因此,miR-93可抑制腦缺血再灌注中炎癥因子釋放,抑制缺氧后小膠質(zhì)細(xì)胞的表達(dá)。然而,關(guān)于IRAK4能否成為miR-93的直接靶點(diǎn)尚不確定。

    隨后Lv等[26]對(duì)miR-27a是否能夠調(diào)控小膠質(zhì)細(xì)胞介導(dǎo)的神經(jīng)炎癥進(jìn)行研究,結(jié)果發(fā)現(xiàn)過表達(dá)miR-27a可顯著降低小膠質(zhì)細(xì)胞的炎性因子白介素-6 (IL-6)、白介素-1β (IL-1b)、腫瘤壞死因子-α (TNF-α)和一氧化氮(NO)的表達(dá),其機(jī)制為miR-27a可直接靶向結(jié)合到IRAK4、TLR4的3’非翻譯區(qū),抑制其表達(dá)。進(jìn)一步佐證了IRAK4可作為miRNA對(duì)小膠質(zhì)細(xì)胞激活影響的重要靶點(diǎn)的可能性。

    2.2.3 miRNA-124 miRNA-124在小膠質(zhì)細(xì)胞中特異性表達(dá),對(duì)維持大腦小膠質(zhì)細(xì)胞處于穩(wěn)定狀態(tài)具有重要作用。在缺血缺氧環(huán)境下,miR-124通過直接抑制轉(zhuǎn)錄因子CCAAT/增強(qiáng)結(jié)合蛋白-a(C/EBP-a)及其下游靶蛋白pu1,可誘導(dǎo)小膠質(zhì)細(xì)胞從激活狀態(tài)變?yōu)殪o止?fàn)顟B(tài),減少神經(jīng)炎性因子的釋放。有研究顯示[27]miRNA-124水平與小膠質(zhì)細(xì)胞介導(dǎo)的神經(jīng)炎癥呈負(fù)相關(guān),在腦缺血損傷大腦內(nèi)早期注射miRNA-124可增加Arg-1表達(dá),促進(jìn)小膠質(zhì)細(xì)胞M2型的轉(zhuǎn)化、提高神經(jīng)元存活率。且miRNA-124在腦缺血損傷中的表達(dá)作用具有區(qū)域和時(shí)間依賴性,早期注射及持續(xù)長(zhǎng)時(shí)間注射能夠?qū)⑵渖窠?jīng)保護(hù)作用發(fā)揮到最大。Hamzei等人[28]分別在促炎高峰期之前、之后給予miR-124注射,以此觀察miRNA最佳治療時(shí)間窗,其中miR-124在促炎高峰前注射能顯著使激活的小膠質(zhì)細(xì)胞向M2表型轉(zhuǎn)化,與之前研究結(jié)果一致。此外,有研究發(fā)現(xiàn)D-4F[29]作為一種具有抗炎作用的載脂蛋白可通過增加體內(nèi)、體外microRNA-124水平,促進(jìn)1型糖尿病型腦缺血大鼠的神經(jīng)功能恢復(fù),其機(jī)制為miRNA-124可通過促進(jìn)小膠質(zhì)細(xì)胞M2型極化、降低基質(zhì)金屬蛋白酶-9、腫瘤壞死因子-1和toll樣受體-4基因表達(dá),改善神經(jīng)功能與維持血腦屏障的完整性。因此,在缺血缺氧環(huán)境下,miRNA-124可通過結(jié)合多個(gè)靶點(diǎn)抑制神經(jīng)炎癥發(fā)生、減少神經(jīng)元凋亡及降低血腦屏障的破壞。

    2.2.4 miRNA-1906 在腦缺血損傷中TLR4的表達(dá)增多介導(dǎo)小膠質(zhì)細(xì)胞的激活及炎癥介質(zhì)的釋放(miRNA調(diào)控Toll 樣受體4參與神經(jīng)系統(tǒng)缺血缺氧性損傷的研究進(jìn)展)。Xu XM等人[30]在體內(nèi)、體外實(shí)驗(yàn)均發(fā)現(xiàn)小膠質(zhì)細(xì)胞中TLR4的表達(dá)多伴隨著神經(jīng)細(xì)胞毒性的發(fā)生,不利于神經(jīng)功能的恢復(fù),當(dāng)體內(nèi)注射miR-1906激動(dòng)劑后,TLR4的表達(dá)量受到抑制。應(yīng)用microRNA圖譜確定TLR4為miR-1906的靶向結(jié)合位點(diǎn)。此外,在TLR4基因敲除的小鼠中miR-1906的神經(jīng)保護(hù)作用消失。提示miR-1906在腦缺血損傷中的保護(hù)作用依賴TLR4的表達(dá)。

    2.2.5 miR-26b 先前已有研究表明OGD誘導(dǎo)下的BV2小膠質(zhì)細(xì)胞中IL-6表達(dá)增多,miR-26b的表達(dá)下降,為進(jìn)一步確定IL-6與miR-26b在腦缺血中的關(guān)系,Kang YC等人[31]運(yùn)用熒光素酶實(shí)驗(yàn)以確定OGD-小膠質(zhì)細(xì)胞與MCAO小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞中miR-26b的靶基因,結(jié)果表明miR-26b能夠直接結(jié)合到IL-6的3’端的非翻譯區(qū),抑制其轉(zhuǎn)錄,減少大腦神經(jīng)炎癥與損傷。此外,miR-26b在介導(dǎo)小膠質(zhì)細(xì)胞激活過程中,仍存在許多下游靶基因。進(jìn)一步研究可為腦缺血治療提供新靶點(diǎn)。

    3 小結(jié)與展望

    綜上所述,miRNA作為一種可同時(shí)調(diào)控多種通路及蛋白的非編碼RNA,可通過抑制小膠質(zhì)細(xì)胞激活及M1表型極化,從而減少腦缺損傷中神經(jīng)炎癥及細(xì)胞凋亡的發(fā)生。但目前為止,miRNA相關(guān)抑制劑及模擬物還未在臨床實(shí)踐中開展,主要在于miRNA的給藥途徑多為側(cè)腦室注射,不易被患者接受。我們應(yīng)在現(xiàn)有基礎(chǔ)上繼續(xù)深入研究,以確保日后臨床上安全及有效實(shí)施。由于小膠質(zhì)細(xì)胞表型空間分布特征不夠明確,miRNA的注射時(shí)間也有待進(jìn)一步研究。此外,小膠質(zhì)細(xì)胞的促炎與抗炎表型并非相互對(duì)立,探究miRNA維持小膠質(zhì)細(xì)胞表型的穩(wěn)定狀態(tài)可能是未來研究方向。小膠質(zhì)細(xì)胞和星形膠質(zhì)細(xì)胞與周圍環(huán)境關(guān)系密切,因此探究miRNA在多種小膠質(zhì)細(xì)胞中相互作用機(jī)制,可為腦缺血損傷治療提供新靶點(diǎn)。

    猜你喜歡
    膠質(zhì)表型腦缺血
    人類星形膠質(zhì)細(xì)胞和NG2膠質(zhì)細(xì)胞的特性
    建蘭、寒蘭花表型分析
    視網(wǎng)膜小膠質(zhì)細(xì)胞的研究進(jìn)展
    GABABR2基因遺傳變異與肥胖及代謝相關(guān)表型的關(guān)系
    原花青素對(duì)腦缺血再灌注損傷后腸道功能的保護(hù)作用
    側(cè)腦室內(nèi)罕見膠質(zhì)肉瘤一例
    磁共振成像(2015年1期)2015-12-23 08:52:21
    血必凈對(duì)大鼠腦缺血再灌注損傷的保護(hù)作用及其機(jī)制
    細(xì)胞外組蛋白與腦缺血再灌注損傷關(guān)系的初探
    慢性乙型肝炎患者HBV基因表型與血清學(xué)測(cè)定的臨床意義
    72例老年急性白血病免疫表型分析
    国产又黄又爽又无遮挡在线| 超碰成人久久| 在线a可以看的网站| 美女大奶头视频| 19禁男女啪啪无遮挡网站| 欧美成人一区二区免费高清观看 | 亚洲无线观看免费| 此物有八面人人有两片| 超碰成人久久| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放| 午夜免费激情av| 亚洲一区高清亚洲精品| 观看免费一级毛片| 观看免费一级毛片| 国产激情偷乱视频一区二区| 一区二区三区国产精品乱码| 亚洲一区二区三区不卡视频| 国产激情欧美一区二区| 亚洲av成人精品一区久久| 啦啦啦韩国在线观看视频| 看黄色毛片网站| 欧美日本视频| 国产毛片a区久久久久| 搞女人的毛片| 亚洲午夜精品一区,二区,三区| 精品福利观看| 一区二区三区激情视频| 亚洲精品在线美女| 日韩精品青青久久久久久| 亚洲精品一区av在线观看| 巨乳人妻的诱惑在线观看| 日本 av在线| 制服丝袜大香蕉在线| 精品一区二区三区视频在线 | 日韩大尺度精品在线看网址| 人妻夜夜爽99麻豆av| 日韩欧美三级三区| 黄片大片在线免费观看| 免费在线观看日本一区| 日韩免费av在线播放| 精品乱码久久久久久99久播| 两性夫妻黄色片| 国产精品 欧美亚洲| 欧美绝顶高潮抽搐喷水| 色在线成人网| 亚洲七黄色美女视频| 欧美丝袜亚洲另类 | 99国产综合亚洲精品| 在线观看日韩欧美| 亚洲在线观看片| 熟女电影av网| 日韩欧美一区二区三区在线观看| 国产精品久久视频播放| 真实男女啪啪啪动态图| 色老头精品视频在线观看| 国产精品亚洲一级av第二区| 国产又色又爽无遮挡免费看| 色吧在线观看| 亚洲成av人片免费观看| 精品国内亚洲2022精品成人| 男人舔女人的私密视频| 桃色一区二区三区在线观看| 亚洲乱码一区二区免费版| 男女床上黄色一级片免费看| 午夜福利视频1000在线观看| 国产高清三级在线| 久久精品亚洲精品国产色婷小说| 手机成人av网站| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 久久亚洲精品不卡| 欧美zozozo另类| 亚洲精品456在线播放app | 天堂动漫精品| 午夜精品久久久久久毛片777| 久久热在线av| 成人特级黄色片久久久久久久| 国产免费av片在线观看野外av| 免费人成视频x8x8入口观看| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 757午夜福利合集在线观看| 精品久久久久久,| 男女之事视频高清在线观看| 久久草成人影院| 久久精品亚洲精品国产色婷小说| 色在线成人网| 99国产精品一区二区蜜桃av| 在线播放国产精品三级| 国产99白浆流出| 午夜免费观看网址| 麻豆成人午夜福利视频| 精品国产乱子伦一区二区三区| 白带黄色成豆腐渣| 国产精品av视频在线免费观看| 日日干狠狠操夜夜爽| 禁无遮挡网站| 黄色女人牲交| 久久精品亚洲精品国产色婷小说| 国产精品乱码一区二三区的特点| 久久香蕉精品热| 久久久久久九九精品二区国产| 午夜免费成人在线视频| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆| 丰满人妻一区二区三区视频av | 亚洲一区二区三区色噜噜| 最好的美女福利视频网| 久久精品国产亚洲av香蕉五月| 中文亚洲av片在线观看爽| 久久久久亚洲av毛片大全| 国产精品爽爽va在线观看网站| 亚洲人与动物交配视频| 免费在线观看视频国产中文字幕亚洲| 亚洲成人中文字幕在线播放| 十八禁人妻一区二区| 国产 一区 欧美 日韩| 在线观看免费视频日本深夜| 在线免费观看的www视频| 欧美乱妇无乱码| 午夜精品一区二区三区免费看| 亚洲电影在线观看av| 国产精品免费一区二区三区在线| 国产精品美女特级片免费视频播放器 | 日韩欧美在线乱码| 婷婷精品国产亚洲av在线| 听说在线观看完整版免费高清| 精品无人区乱码1区二区| 欧美高清成人免费视频www| 日韩精品青青久久久久久| 淫秽高清视频在线观看| 成熟少妇高潮喷水视频| 亚洲中文字幕一区二区三区有码在线看 | 国内久久婷婷六月综合欲色啪| 成人特级黄色片久久久久久久| 麻豆国产97在线/欧美| av片东京热男人的天堂| 又紧又爽又黄一区二区| 久久精品综合一区二区三区| 国产69精品久久久久777片 | 熟女人妻精品中文字幕| 超碰成人久久| 十八禁网站免费在线| 欧美乱妇无乱码| 色综合婷婷激情| 搡老岳熟女国产| 麻豆av在线久日| 精品国产乱子伦一区二区三区| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 亚洲精品中文字幕一二三四区| 国内久久婷婷六月综合欲色啪| 老汉色∧v一级毛片| 黄色视频,在线免费观看| 婷婷丁香在线五月| 女同久久另类99精品国产91| 中文字幕熟女人妻在线| 中文在线观看免费www的网站| ponron亚洲| 欧美日韩乱码在线| 亚洲在线观看片| 国产男靠女视频免费网站| 日韩av在线大香蕉| 国产探花在线观看一区二区| 美女大奶头视频| 99久久无色码亚洲精品果冻| 看免费av毛片| 国产一级毛片七仙女欲春2| 亚洲av美国av| 久9热在线精品视频| 亚洲国产精品久久男人天堂| 神马国产精品三级电影在线观看| 99久久无色码亚洲精品果冻| 日韩大尺度精品在线看网址| www日本黄色视频网| 这个男人来自地球电影免费观看| 久久精品国产综合久久久| 日韩成人在线观看一区二区三区| 俺也久久电影网| 丁香六月欧美| 亚洲自拍偷在线| 亚洲精品久久国产高清桃花| 一级毛片高清免费大全| 最新中文字幕久久久久 | 757午夜福利合集在线观看| 丰满人妻一区二区三区视频av | 午夜福利成人在线免费观看| 两个人的视频大全免费| 欧美黑人巨大hd| 国产精品一区二区免费欧美| 人人妻人人澡欧美一区二区| 欧美zozozo另类| 久久久精品大字幕| 国产男靠女视频免费网站| 色播亚洲综合网| 观看免费一级毛片| 亚洲国产精品999在线| 嫩草影院入口| 欧美高清成人免费视频www| 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| 国模一区二区三区四区视频 | 亚洲精品中文字幕一二三四区| 日韩欧美国产在线观看| av中文乱码字幕在线| 嫩草影院入口| 韩国av一区二区三区四区| 精品国产三级普通话版| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 免费在线观看视频国产中文字幕亚洲| 国产欧美日韩精品亚洲av| xxxwww97欧美| 久久精品91蜜桃| 噜噜噜噜噜久久久久久91| 日韩欧美在线二视频| 国产99白浆流出| 成在线人永久免费视频| 91老司机精品| 美女免费视频网站| 欧美日韩福利视频一区二区| 一个人看的www免费观看视频| 十八禁网站免费在线| aaaaa片日本免费| 白带黄色成豆腐渣| 嫩草影院精品99| 色尼玛亚洲综合影院| 午夜视频精品福利| 欧美成人一区二区免费高清观看 | 亚洲av熟女| 脱女人内裤的视频| 国产精品av视频在线免费观看| 精品一区二区三区视频在线 | 亚洲欧美日韩无卡精品| 真人一进一出gif抽搐免费| 免费在线观看视频国产中文字幕亚洲| 19禁男女啪啪无遮挡网站| 成年女人毛片免费观看观看9| 亚洲熟女毛片儿| 噜噜噜噜噜久久久久久91| 国产精品永久免费网站| 午夜福利高清视频| 十八禁人妻一区二区| 国产亚洲精品综合一区在线观看| 久久久久久久久久黄片| 欧美中文综合在线视频| 日本与韩国留学比较| 黄片大片在线免费观看| 又黄又爽又免费观看的视频| 九色成人免费人妻av| 色av中文字幕| 午夜福利在线在线| 亚洲国产欧美一区二区综合| 99国产精品一区二区三区| 五月玫瑰六月丁香| www.精华液| 韩国av一区二区三区四区| 久久久成人免费电影| 国产麻豆成人av免费视频| 国产精品一区二区精品视频观看| 国产精品精品国产色婷婷| 中文字幕最新亚洲高清| 国产真人三级小视频在线观看| 给我免费播放毛片高清在线观看| 少妇熟女aⅴ在线视频| 国产精品,欧美在线| 狂野欧美激情性xxxx| 精品国产亚洲在线| 欧美zozozo另类| 国产激情偷乱视频一区二区| 亚洲av美国av| 日韩欧美在线二视频| www.自偷自拍.com| 免费看十八禁软件| 国内精品一区二区在线观看| 久久久久久国产a免费观看| 亚洲国产精品久久男人天堂| 亚洲国产精品sss在线观看| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 亚洲自偷自拍图片 自拍| 亚洲18禁久久av| 91麻豆av在线| 午夜免费成人在线视频| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 老司机在亚洲福利影院| 淫秽高清视频在线观看| 99热精品在线国产| 色综合亚洲欧美另类图片| 成年免费大片在线观看| 欧美三级亚洲精品| 老鸭窝网址在线观看| 亚洲一区二区三区不卡视频| 成人特级av手机在线观看| www.熟女人妻精品国产| 巨乳人妻的诱惑在线观看| 亚洲成人久久爱视频| 在线观看免费视频日本深夜| 亚洲精华国产精华精| 国产精品99久久久久久久久| 90打野战视频偷拍视频| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 国产免费av片在线观看野外av| 久久精品国产99精品国产亚洲性色| 999精品在线视频| 亚洲五月天丁香| 好看av亚洲va欧美ⅴa在| 亚洲熟妇熟女久久| 在线播放国产精品三级| 99久久精品热视频| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看| 日韩欧美精品v在线| 国产欧美日韩一区二区精品| 久久香蕉精品热| 狠狠狠狠99中文字幕| 免费一级毛片在线播放高清视频| 男女床上黄色一级片免费看| 黑人欧美特级aaaaaa片| 久久精品国产亚洲av香蕉五月| 日本黄色片子视频| 久久久久亚洲av毛片大全| 1024手机看黄色片| 国语自产精品视频在线第100页| 亚洲狠狠婷婷综合久久图片| 中文字幕av在线有码专区| 欧美黑人欧美精品刺激| 九色国产91popny在线| 美女午夜性视频免费| 午夜激情欧美在线| 国产精品综合久久久久久久免费| 给我免费播放毛片高清在线观看| 亚洲精品在线美女| 亚洲成av人片免费观看| 国产99白浆流出| 一边摸一边抽搐一进一小说| 精品福利观看| a级毛片在线看网站| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 国产精品日韩av在线免费观看| 久久国产精品人妻蜜桃| 1024香蕉在线观看| 色尼玛亚洲综合影院| 搡老岳熟女国产| 国内精品久久久久久久电影| 久久欧美精品欧美久久欧美| 黄色片一级片一级黄色片| 黄色成人免费大全| 夜夜爽天天搞| 老司机在亚洲福利影院| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放| 韩国av一区二区三区四区| 国产一区二区在线av高清观看| 天堂网av新在线| 他把我摸到了高潮在线观看| 国产久久久一区二区三区| 亚洲国产精品999在线| 很黄的视频免费| 国产精品综合久久久久久久免费| 精品一区二区三区视频在线 | 波多野结衣高清作品| 在线播放国产精品三级| 国产精品久久久人人做人人爽| 欧美中文日本在线观看视频| 日本与韩国留学比较| 国产日本99.免费观看| 成人av一区二区三区在线看| 99在线视频只有这里精品首页| 黑人巨大精品欧美一区二区mp4| 亚洲av熟女| 搞女人的毛片| 男女之事视频高清在线观看| 欧美日韩瑟瑟在线播放| 欧美zozozo另类| 亚洲国产精品合色在线| 老鸭窝网址在线观看| 日本熟妇午夜| 欧美zozozo另类| 超碰成人久久| 免费搜索国产男女视频| 亚洲专区国产一区二区| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 日韩精品中文字幕看吧| 色精品久久人妻99蜜桃| 九九在线视频观看精品| 男插女下体视频免费在线播放| 亚洲成人免费电影在线观看| 亚洲国产精品成人综合色| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久| 最近视频中文字幕2019在线8| 怎么达到女性高潮| 天堂动漫精品| 99热精品在线国产| 亚洲精品国产精品久久久不卡| 国内精品久久久久精免费| 深夜精品福利| 一级毛片女人18水好多| 国产亚洲欧美在线一区二区| 中文资源天堂在线| 欧美日韩乱码在线| 国内精品一区二区在线观看| 亚洲五月天丁香| 麻豆成人av在线观看| 色精品久久人妻99蜜桃| 午夜两性在线视频| 久久性视频一级片| 成人av一区二区三区在线看| 女警被强在线播放| 男人舔奶头视频| 午夜激情福利司机影院| 欧美日本亚洲视频在线播放| 欧美一级毛片孕妇| 草草在线视频免费看| 国产精品 欧美亚洲| 国产伦精品一区二区三区视频9 | 免费在线观看日本一区| 亚洲精品国产精品久久久不卡| 啦啦啦韩国在线观看视频| АⅤ资源中文在线天堂| 国产欧美日韩精品一区二区| 欧美日韩中文字幕国产精品一区二区三区| 亚洲国产欧美网| 亚洲精品美女久久av网站| 夜夜躁狠狠躁天天躁| 天堂动漫精品| 天堂av国产一区二区熟女人妻| 国产一区二区在线av高清观看| 国产av麻豆久久久久久久| 午夜福利免费观看在线| 特级一级黄色大片| 免费人成视频x8x8入口观看| 一级黄色大片毛片| 99riav亚洲国产免费| 国产精品久久久久久久电影 | 亚洲欧美日韩高清在线视频| 国产一区二区激情短视频| 国产精品电影一区二区三区| 90打野战视频偷拍视频| 国产亚洲精品一区二区www| 制服丝袜大香蕉在线| 超碰成人久久| 色播亚洲综合网| 国产视频一区二区在线看| 亚洲无线在线观看| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 国产精品香港三级国产av潘金莲| 国内久久婷婷六月综合欲色啪| 精品国产美女av久久久久小说| 制服人妻中文乱码| 亚洲国产欧美人成| 欧美乱码精品一区二区三区| 精品免费久久久久久久清纯| 欧美精品啪啪一区二区三区| 麻豆av在线久日| 全区人妻精品视频| 国产真实乱freesex| 欧美又色又爽又黄视频| 性欧美人与动物交配| 啦啦啦免费观看视频1| 99热这里只有精品一区 | av片东京热男人的天堂| 巨乳人妻的诱惑在线观看| 亚洲国产中文字幕在线视频| 久久久久久久久久黄片| 99久久精品一区二区三区| 亚洲av电影在线进入| 香蕉久久夜色| 99国产精品一区二区蜜桃av| 99视频精品全部免费 在线 | 村上凉子中文字幕在线| 欧美一级毛片孕妇| 免费av毛片视频| 亚洲人成网站高清观看| 色综合站精品国产| 亚洲专区字幕在线| 夜夜爽天天搞| 我的老师免费观看完整版| 99热6这里只有精品| 久久国产乱子伦精品免费另类| 亚洲avbb在线观看| 99热只有精品国产| 成人精品一区二区免费| 男女之事视频高清在线观看| 变态另类成人亚洲欧美熟女| 精品欧美国产一区二区三| 日韩欧美国产一区二区入口| 亚洲欧美精品综合久久99| 精品国产美女av久久久久小说| 国产成人av激情在线播放| 国产精品爽爽va在线观看网站| 亚洲午夜理论影院| 最近最新中文字幕大全免费视频| 亚洲电影在线观看av| 国产成人一区二区三区免费视频网站| 日韩成人在线观看一区二区三区| 国产久久久一区二区三区| 岛国视频午夜一区免费看| 成人一区二区视频在线观看| 最近视频中文字幕2019在线8| 日本熟妇午夜| 国模一区二区三区四区视频 | 特大巨黑吊av在线直播| 久久99热这里只有精品18| 国产成人av激情在线播放| 亚洲av日韩精品久久久久久密| 国产免费男女视频| 18美女黄网站色大片免费观看| 三级国产精品欧美在线观看 | 一a级毛片在线观看| 天堂影院成人在线观看| 天堂动漫精品| 韩国av一区二区三区四区| cao死你这个sao货| 成人特级黄色片久久久久久久| 国产美女午夜福利| 在线视频色国产色| 国产av一区在线观看免费| 亚洲精品国产精品久久久不卡| 欧美精品啪啪一区二区三区| 1024手机看黄色片| 精华霜和精华液先用哪个| 国产高清三级在线| 我要搜黄色片| 亚洲精品在线美女| www国产在线视频色| 色吧在线观看| 香蕉久久夜色| 国产亚洲av嫩草精品影院| 男女午夜视频在线观看| 中文在线观看免费www的网站| 一个人免费在线观看的高清视频| 亚洲欧美精品综合一区二区三区| 热99re8久久精品国产| 午夜a级毛片| 日日夜夜操网爽| 亚洲精品中文字幕一二三四区| 亚洲熟女毛片儿| 亚洲成a人片在线一区二区| 欧美午夜高清在线| 亚洲成av人片在线播放无| 国产精品 国内视频| 国产一级毛片七仙女欲春2| 首页视频小说图片口味搜索| 欧美黄色片欧美黄色片| 国产免费男女视频| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 美女大奶头视频| 午夜精品一区二区三区免费看| 黄频高清免费视频| 国产极品精品免费视频能看的| 欧美黄色淫秽网站| 亚洲精品色激情综合| 久久精品亚洲精品国产色婷小说| 久久性视频一级片| 91av网一区二区| 免费观看精品视频网站| 最近最新中文字幕大全免费视频| 一进一出抽搐gif免费好疼| 精品午夜福利视频在线观看一区| 亚洲国产欧洲综合997久久,| 岛国在线观看网站| 国产精品美女特级片免费视频播放器 | 国产成人一区二区三区免费视频网站| 黄色女人牲交| 搡老熟女国产l中国老女人| 国产精华一区二区三区| 亚洲国产精品999在线| 高潮久久久久久久久久久不卡| 国产高清有码在线观看视频| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站 | 国产黄a三级三级三级人| 欧美不卡视频在线免费观看| 午夜激情欧美在线| 国产私拍福利视频在线观看| 欧美乱码精品一区二区三区| 久久九九热精品免费| 亚洲美女黄片视频| 天堂网av新在线| 亚洲无线在线观看| 亚洲国产欧美网| 老鸭窝网址在线观看| 不卡一级毛片| av在线天堂中文字幕| 白带黄色成豆腐渣| 国产日本99.免费观看| 欧美av亚洲av综合av国产av| 最近最新中文字幕大全电影3| 亚洲九九香蕉| 老司机深夜福利视频在线观看| 成年人黄色毛片网站| 日本免费一区二区三区高清不卡| 黄色丝袜av网址大全| 宅男免费午夜| 亚洲自偷自拍图片 自拍| av女优亚洲男人天堂 | av片东京热男人的天堂| 天天躁狠狠躁夜夜躁狠狠躁| 亚洲欧美日韩高清在线视频| 成人特级av手机在线观看| 国产亚洲精品久久久久久毛片| 丝袜人妻中文字幕| 91av网一区二区| 国产精品久久久久久人妻精品电影| 国产精品亚洲一级av第二区| 老司机午夜福利在线观看视频| 最新中文字幕久久久久 | 亚洲欧美日韩无卡精品| 色综合欧美亚洲国产小说| 亚洲精品国产精品久久久不卡| 亚洲av片天天在线观看| 午夜福利视频1000在线观看| 1000部很黄的大片| 法律面前人人平等表现在哪些方面| 国产精品香港三级国产av潘金莲| 亚洲成av人片在线播放无| 一个人免费在线观看电影 | 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 精品国产亚洲在线| 亚洲男人的天堂狠狠| 天堂动漫精品| 一二三四在线观看免费中文在| 久久久久久久久久黄片| 窝窝影院91人妻|