黨參種子質(zhì)量檢驗(yàn)方法與標(biāo)準(zhǔn)

武世英

（山西忻州市農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)發(fā)展中心，山西 忻州 034000）

黨參是傳統(tǒng)中藥材，味甘性平，具有補(bǔ)中益氣、健脾益肺之功效，藥效與人參相近而偏補(bǔ)中氣，多用于治療心悸氣短、脾肺虛弱、虛喘咳嗽、內(nèi)熱消渴及食少便溏等癥。黨參原產(chǎn)于山西上黨盆地，目前全國各地均有種植，山西仍是主要產(chǎn)區(qū)之一。黨參種子不耐貯藏，市場種質(zhì)混雜，優(yōu)良品種逐漸退化，導(dǎo)致黨參產(chǎn)量及品質(zhì)急劇下降，直接影響了用藥有效性及安全性。需總結(jié)黨參種子質(zhì)量檢驗(yàn)辦法，提供檢測參考，以避免不合格的黨參種子流向市場。

目前，國內(nèi)僅有少量中藥材種子具備相應(yīng)的種子檢驗(yàn)辦法，如三七、川牛膝、丹參、甘草等，絕大部分中藥材種子仍缺乏具體的種子質(zhì)量檢驗(yàn)方法，無法精確評價(jià)與控制種子質(zhì)量。隨著市場上對黨參需求量的不斷增加，黨參現(xiàn)已被多地大面積種植，且有繼續(xù)擴(kuò)大種植范圍的趨勢，研究黨參種子質(zhì)量檢驗(yàn)辦法十分有必要。

一、種子質(zhì)量檢驗(yàn)辦法

1、凈度分析

種子凈度指種子的干凈程度，即將雜質(zhì)除去后的凈種子質(zhì)量占分析樣品總質(zhì)量的百分率，是衡量種子質(zhì)量的重要指標(biāo)之一。后續(xù)種子質(zhì)量檢測中發(fā)芽率、質(zhì)量、含水率及生活力測定均需使用經(jīng)凈度分析后篩選出的干凈種子。

黨參種子凈度分析可參照國家《農(nóng)作物種子檢驗(yàn)規(guī)程》GB/T3543.1-7，1995 定義的黨參凈種子、雜質(zhì)、其他植物種子及其區(qū)分原則[1]。操作前需準(zhǔn)備電子天平、放大鏡、鑷子、解剖針、0.5 mm 孔徑檢驗(yàn)篩、0.9 mm 孔徑檢驗(yàn)篩及分樣板等器具。取種子3000 粒左右作為試樣，約1.5 g，稱質(zhì)量后先用0.9 mm 孔徑篩子反復(fù)篩選，剔除大體積砂礫和其他雜質(zhì)；然后用紙將篩選出的種子包裹后反復(fù)揉搓，將摻雜的塵粒揉碎，再使用0.5 mm 孔徑篩子反復(fù)篩，留取干凈種子。將各層混合物保存在不同器皿中，用鑷子和放大鏡在凈度分析臺上進(jìn)行逐粒觀察鑒定。分別稱量干凈種子、廢種子和雜質(zhì)的質(zhì)量，結(jié)果精確至0.001 g，計(jì)算出凈種子質(zhì)量百分率、雜質(zhì)質(zhì)量百分率。

種子凈度=[100-（廢種子含量+雜質(zhì)含量）]%。

凈度分離后的各成分之和與原始質(zhì)量之差，即凈度分析后的增失差不要超過5%，超過允許誤差需重新實(shí)驗(yàn)。2 次重復(fù)，計(jì)算出平均值。

2、千粒質(zhì)量測定

千粒質(zhì)量是種子活力的重要指標(biāo)之一，以“g”表示1000 粒種子的質(zhì)量，可體現(xiàn)種子大小及飽滿程度。千粒質(zhì)量越大其內(nèi)部貯藏營養(yǎng)物質(zhì)較多，發(fā)芽迅速，播種后易出全苗、齊苗、壯苗，增加整體產(chǎn)量。

凈度分析后將全部純凈種子分為4 份，每份隨機(jī)取250 粒，共1000 粒為1 組，3 次重復(fù)。將其分別放置在1/1 萬電子天平秤上稱質(zhì)量并詳細(xì)記錄結(jié)果，最后計(jì)算出3 組平均值。

3、發(fā)芽率測定

種子發(fā)芽率是計(jì)算種子用價(jià)的重要指標(biāo)，做好發(fā)芽實(shí)驗(yàn)有利于正確計(jì)算出種子用價(jià)及實(shí)際種植中所需的播種量，對黨參生產(chǎn)具有重要意義。

發(fā)芽率測定前消毒調(diào)試發(fā)芽設(shè)備，根據(jù)實(shí)際條件選擇紙床、砂床、海綿床等適合黨參種子的發(fā)芽床。發(fā)芽床應(yīng)始終保持濕潤，稍有干燥可用噴壺均勻噴水。發(fā)芽盒內(nèi)的水不宜過多，水與隔板之間要存在合適空間，以保證空氣流通。

將黨參種子倒入0.3%高錳酸鉀溶液中浸泡15 min 左右，撈出后用清水沖洗2～3 遍，放入發(fā)芽盒，設(shè)置相應(yīng)編號，置于光照培養(yǎng)箱中，光強(qiáng)度控制為2400 Lx 冷白色熒光[2]，每天確保光照12 h、黑暗12 h。黨參種子較佳發(fā)芽溫度為20℃，應(yīng)將培養(yǎng)箱溫度控制在18～22℃，以促進(jìn)種子發(fā)芽。

黨參種子發(fā)芽率達(dá)到10%時的天數(shù)記錄為初次計(jì)數(shù)時間，種子萌發(fā)率達(dá)到最高且以后再無萌發(fā)種子出現(xiàn)的天數(shù)為末次計(jì)數(shù)時間。實(shí)驗(yàn)中注意觀察種子狀態(tài)，及時撿出出現(xiàn)腐爛癥狀的種子。發(fā)霉種子數(shù)量超過總數(shù)量的5%時，及時調(diào)換發(fā)芽床，避免霉菌蔓延危害其他種子。實(shí)驗(yàn)設(shè)2 個重復(fù)，計(jì)算出平均發(fā)芽率。

發(fā)芽率=（發(fā)芽種子數(shù)/樣品總數(shù)）×100%。

4、含水率測定

種子中的水分按其特性可分為自由水、分解水和束縛水。自由水主要集中在種子表面及細(xì)胞間隙內(nèi)，極易受外界環(huán)境影響而增加或蒸發(fā)。分解水由種子中含有氫元素與氧元素的化合物分解產(chǎn)生，若種子中分解水流失過快會導(dǎo)致有機(jī)物分解變質(zhì)。束縛水主要與種子內(nèi)的親水膠體物質(zhì)牢牢結(jié)合在一起，性質(zhì)相對較穩(wěn)定，不會輕易蒸發(fā)消失。

含水率測定時要防止水分增加、蒸發(fā)。送檢時盡量將種子放置在防潮隔濕容器中；樣品接收后盡量在最短時間內(nèi)進(jìn)行檢測，加快取樣、稱質(zhì)量、磨碎等操作流程速度，避免種子自由水、分解水蒸發(fā)；測定時盡量在相對濕度小于70%的室內(nèi)進(jìn)行。

黨參種子含水率測定適宜方法為高溫磨碎烘干法。首先用小匙將樣品攪拌均勻，取出18 g 左右種子放進(jìn)小型粉碎機(jī)中粉碎約2 min，稱取4.5～5.0 g 棕色種子粉末。

實(shí)驗(yàn)前將樣品盒烘干，冷卻后稱質(zhì)量并記錄數(shù)據(jù)；然后將試樣放進(jìn)盒內(nèi)稱總質(zhì)量，數(shù)據(jù)精確至0.001 g。將烘箱預(yù)熱至140～145℃，將試樣盒蓋上盒蓋放入繼續(xù)加熱，期間注意觀察種子顏色變化，防止種子顏色由棕色變?yōu)楹谧厣蚝谏? h 后取出放入干燥器內(nèi)冷卻，去蓋后稱質(zhì)量。

種子含水率=[（M2-M3）/（M2-M1）]×100%，其中M1為樣品盒質(zhì)量（g），M2為樣品盒及樣品烘前總質(zhì)量（g），M3為樣品盒及樣品烘后總質(zhì)量（g）。黨參種子含水率應(yīng)為5.25%～10.13%，平均含水率8.24%，遠(yuǎn)低于其他農(nóng)作物種子13%～15%的含水率。

5、生活力測定

種子生活力是指種子發(fā)芽潛力或種胚生命力。由于外界因素影響處于休眠狀態(tài)下的種子，即使放在適宜發(fā)芽的環(huán)境下也難以發(fā)芽或發(fā)芽率偏低。此時僅對種子發(fā)芽率進(jìn)行測定無法測出最高發(fā)芽率，必須測定種子生活力，才能測算出最高發(fā)芽率。

黨參種子生活力測定選用四唑法較適宜，即TTC 染色法[3]。操作時首先將供試種子放置在解剖鏡下，左手用鑷子輕輕按壓住種子，右手使用解剖針避開種胚進(jìn)行穿孔處理，便于染色處理時四唑溶液的浸入。然后將種子倒進(jìn)黑暗條件下，30℃恒溫水箱中浸泡8 h。撈出后放入濃度1%的TTC 溶液中，染色溫度控制為40℃，3 h 后取出觀察。用鑷子將種胚輕輕擠壓出，可更為清晰地觀察種胚染色情況。具有生命活力的種胚在呼吸代謝中產(chǎn)生的氫可將TTC 還原為紅色的TTF，種子活力越強(qiáng)，種胚TTC 染色越為鮮艷；種胚生活力喪失或生活力部分喪失，則TTC 染色為淺紅色或著色不均勻、狀如扎染。

二、黨參種子質(zhì)量檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)

黨參種子質(zhì)量檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)的建立基于大量實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的總結(jié)，并充分考慮種子生物學(xué)特性，共分為一級、二級、三級標(biāo)準(zhǔn)。

一級標(biāo)準(zhǔn)黨參種子凈度應(yīng)≥95%，千粒質(zhì)量5.0～6.0 g，發(fā)芽率≥90%，含水率≥5.52%，生活力≥85%。二級標(biāo)準(zhǔn)黨參種子凈度為90%～94%，千粒質(zhì)量4.0～5.0 g，發(fā)芽率80%～89%，含水率≥7.71%，生活力為73%～84%。三級標(biāo)準(zhǔn)黨參種子凈度80%～89%，千粒質(zhì)量3.0～4.0 g，發(fā)芽率50%～79%，含水率≥9.51%，生活力60%～72%。黨參種子質(zhì)量檢驗(yàn)中，應(yīng)結(jié)合以上標(biāo)準(zhǔn)對其進(jìn)行質(zhì)量分級，為實(shí)際生產(chǎn)提供便利。

三、結(jié)語

采用不同方法對凈度、千粒質(zhì)量、發(fā)芽率、含水率及生活力等能體現(xiàn)黨參質(zhì)量的指標(biāo)進(jìn)行檢測分析，并結(jié)合黨參種子質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)對其進(jìn)行分級處理，可為黨參的規(guī)范化栽培及產(chǎn)業(yè)化發(fā)展提供科學(xué)依據(jù)，從而保障黨參生產(chǎn)及用藥企業(yè)的可持續(xù)發(fā)展，確保用藥的有效性及安全性。