調(diào)節(jié)性T細胞對血管新生調(diào)控作用的研究進展

肖春紅 ，周 騏

（1. 重慶醫(yī)科大學(xué)研究生院，重慶 400010 ；2. 重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院心血管內(nèi)科，重慶 400010）

調(diào)節(jié)性T 細胞（Tregs）是一類控制自身免疫反應(yīng)的T 細胞亞群，在免疫耐受和組織穩(wěn)態(tài)方面起著重要作用。具有CD4+CD25+FOXP3+特征的Tregs 數(shù)量減少或功能異常，均可能導(dǎo)致自身免疫性疾病的發(fā)生。在許多惡性腫瘤中均發(fā)現(xiàn)Tregs明顯增多。血管新生在多種疾病的進展中均發(fā)揮著重要作用。近年來的研究發(fā)現(xiàn)，Tregs 在血管新生方面發(fā)揮著動態(tài)作用，但其增強血管反應(yīng)和抑制血管新生的確切機制尚待完全闡明。本綜述旨在探討Tregs 的免疫調(diào)節(jié)功能及其對血管新生的影響，為未來更有針對性地治療有關(guān)病理性炎癥和血管新生相關(guān)疾病提供新的思路。

1 Tregs 簡介

1.1 Tregs 的表型

Tregs 是一組異質(zhì)性淋巴細胞群，F(xiàn)OXP3對Tregs 的發(fā)育和功能起到重要的調(diào)節(jié)作用。FOXP3缺乏的人群會發(fā)生X 連鎖綜合征（IPEX），出現(xiàn)嚴重的多器官自身免疫性疾病[1]。

1.2 Tregs 的功能

Tregs 對免疫系統(tǒng)的影響作用比較復(fù)雜，其功能包括分泌抑制性細胞因子、與白細胞介素- 2（IL-2）結(jié)合、調(diào)節(jié)樹突狀細胞的功能、調(diào)節(jié)效應(yīng)T 細胞和其他免疫細胞的活性等。Tregs 可通過上述機制在自身免疫性疾病、移植耐受、腫瘤免疫和妊娠維持中發(fā)揮重要作用[2]。

2 Tregs 在促進血管生成中的作用

2.1 Tregs 促進血管生成的證據(jù)

血管新生參與了多種疾病的發(fā)病機制，如癌癥、慢性炎癥等，而Tregs 已被證明對于惡性腫瘤具有強大的治療潛力。雖然臨床發(fā)現(xiàn)腫瘤組織中血管內(nèi)皮生長因子A（VEGF-A）高表達、腫瘤組織中Tregs 的存在與患者預(yù)后不良有關(guān)，但僅僅提供了Tregs 水平與VEGF 信號傳導(dǎo)之間的相關(guān)性證據(jù)，而不是因果關(guān)系。近年來的研究發(fā)現(xiàn)，轉(zhuǎn)移性結(jié)直腸癌患者循環(huán)淋巴細胞的初始水平可預(yù)測貝伐單抗的治療效果[3]，且低水平的循環(huán)Tregs 與良好的治療效果有關(guān)。在腎細胞癌的研究中也發(fā)現(xiàn)高水平的Tregs 與腫瘤內(nèi)血管密度相關(guān)，類似結(jié)果也見于急性淋巴細胞白血病、卵巢癌和乳腺癌的研究中。

2.2 Tregs 促進血管生成的途徑

血管新生與Tregs 之間的關(guān)系可分為與VEGF通路有關(guān)或通過調(diào)節(jié)其他免疫細胞產(chǎn)生促血管新生的細胞因子兩方面。

2.2.1 VEGF 的依賴途徑 研究指出，易流產(chǎn)小鼠的胎盤受損、螺旋動脈重塑不足，可溶性VEGFR-1 顯著升高，通過結(jié)合VEGF 抑制血管的生成，阻止其對血管內(nèi)皮細胞的促有絲分裂作用；而Tregs 過繼后出現(xiàn)了胎兒- 母體界面處子宮巨噬細胞上調(diào)與可溶性VEGFR-1 下調(diào)，促進了小鼠的正常妊娠發(fā)育。但該研究對于Tregs 增強血管生成的確切機制未做報道。另有 報 道，CD4+CD25+Foxp3+Helios+Tregs 通 過VEGF-A/VEGFR-2 途徑可促進小鼠體外血管的生成；卵巢癌中缺氧可誘導(dǎo)黏膜相關(guān)上皮趨化因子CCL28 上調(diào)，引起癌組織中Tregs 招募增加，導(dǎo)致VEGF-A 增加并直接促進血管的新生；上調(diào)子宮內(nèi)膜間質(zhì)細胞和/ 或單核細胞分泌趨化因子CCL17 和CCL22 可誘導(dǎo)Tregs 募集，上調(diào)CCR4的表達，增加Tregs 分泌轉(zhuǎn)化生長因子（TGF），并進一步通過p38/ERK1/2 信號通路促進子宮內(nèi)膜間質(zhì)細胞分泌VEGF，發(fā)揮促血管新生的作用[4]。

2.2.2 非VEGF 信號的依賴途徑 在小鼠結(jié)腸癌模型中發(fā)現(xiàn)，CD4+效應(yīng)T 細胞通過釋放干擾素-g（IFN-g）引起Tregs 降低，產(chǎn)生抗腫瘤反應(yīng)，并使血管生成減少[5]。在小鼠糖尿病模型中也發(fā)現(xiàn)當(dāng)阻斷CD4+T 細胞時，缺血組織中內(nèi)皮細胞增加，進一步證實了Tregs 可通過旁分泌作用直接促進血管的新生。在小鼠肺缺血模型中發(fā)現(xiàn)，Tregs 缺失可導(dǎo)致肺血管生成減少，巨噬細胞數(shù)量減少，由此可認為Tregs 促血管生成的機制是Tregs 可對巨噬細胞及其釋放的細胞因子發(fā)揮作用。

3 Tregs 在抑制血管生成中的作用

盡管絕大多數(shù)組織需要豐富的血管直接供血，但也有少數(shù)組織（如角膜、晶狀體等）在穩(wěn)態(tài)條件下無血管?！把苄律貦?quán)”是指在某些組織中維持無血管狀態(tài)的過程，是促血管生成與抗血管生成因子之間的動態(tài)平衡，雖然其詳細機制目前仍不清楚。

3.1 急性缺血模型

在Tregs 基因敲除小鼠結(jié)扎股動脈導(dǎo)致的后肢缺血模型中發(fā)現(xiàn)血管新生明顯增加，而補充Tregs 后新生血管減少，雖然與對照組比較VEGF-A 蛋白水平與內(nèi)源性Tregs 降低沒有統(tǒng)計學(xué)差異。有學(xué)者在心肌梗死后充血性心力衰竭大鼠模型的研究中發(fā)現(xiàn)其Tregs 功能紊亂，Tregs 能通過CCL5/CCR5 調(diào)控循環(huán)CD34+的血管新生相關(guān)細胞，產(chǎn)生IFN-g 和IL-4，表現(xiàn)為促炎癥及血管新生抑制作用。

3.2 慢性炎癥

研究發(fā)現(xiàn)， 給予銀屑病樣皮膚小鼠CD4+CD25+Tregs，可顯著降低其VEGF 驅(qū)動的皮膚炎癥反應(yīng)。對卵清蛋白（OVA）誘導(dǎo)的小鼠氣道炎癥模型過繼轉(zhuǎn)移Tregs 后發(fā)現(xiàn)，Tregs 可通過細胞接觸依賴機制減少血管的生成，即通過D-like 4 Notch 信號通路促進內(nèi)皮細胞的凋亡，發(fā)揮抗血管生成作用，導(dǎo)致VEGF 下調(diào)[6]。

3.3 眼部疾病

角膜移植前新生血管的存在能促進免疫效應(yīng)細胞向移植部位傳遞，是后續(xù)出現(xiàn)移植物高排斥的重要原因。以VEGF 為靶點的血管新生治療策略能促進移植物的存活。然而，由于角膜不同神經(jīng)表達的VEGF 受體不同，故進行抗VEGFs 治療可能產(chǎn)生角膜毒性，臨床研究也顯示局部使用大量抗VEGF 藥物無效。有研究發(fā)現(xiàn)，在縫線誘導(dǎo)的角膜血管新生模型中，通過注射Tregs 可使角膜新生血管顯著減少[7]。在氧誘導(dǎo)視網(wǎng)膜病變的小鼠模型中，視網(wǎng)膜Foxp3+Tregs 的增加促進了小膠質(zhì)細胞的活化，減少了缺血損傷后血管的新生。

4 VEGF 信號對Tregs 的作用

4.1 VEGF 信號轉(zhuǎn)導(dǎo)對Tregs 遷移和增殖的影響

盡管Tregs 在調(diào)節(jié)血管新生中發(fā)揮著重要作用，但血管生成過程本身同樣具有免疫調(diào)節(jié)功能。除了通過抑制樹突狀細胞功能和巨噬細胞成熟的間接作用之外，VEGF 還可直接調(diào)節(jié)適應(yīng)性免疫細胞的發(fā)育、增殖、遷移和存活，VEGF 信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和血管新生與Tregs 功能的關(guān)系值得進一步研究?，F(xiàn)已證實，VEGFR 靶向藥物既能阻止實體瘤患者的腫瘤血管生成，又能減少腫瘤微環(huán)境中浸潤性Tregs 的數(shù)量，但未證明浸潤性Tregs與血管生成之間存在因果關(guān)系。新生的腫瘤血管內(nèi)皮細胞可分泌免疫調(diào)節(jié)因子，如TGF-β、VEGF，其中TGF-β 可誘導(dǎo)CD4+Foxp32 T 細胞向CD4+Foxp3+T 細胞表型的轉(zhuǎn)化；VEGF 除了在腫瘤微環(huán)境中能抑制樹突狀細胞成熟以外，還可通過協(xié)同方式促使Tregs 遷移，發(fā)揮免疫抑制作用[8]。VEGF 能直接引起腫瘤環(huán)境中Tregs 的積聚。此外，VEGF 還可通過VEGFR-2 直接刺激Tregs在周圍環(huán)境中合成和分泌VEGF，而VEGF-A 顯示出以VEGFR-2 依賴的方式直接刺激Tregs 的增殖。

4.2 VEGF 信號轉(zhuǎn)導(dǎo)對Tregs 存活和功能的影響

目前已發(fā)現(xiàn)，VEGFR-1 和VEGFR-2 對淋巴細胞發(fā)育有相反的影響，VEGF 通過VEGFR-2可強烈抑制T 細胞的發(fā)育，而VEGFR-1 則降低了這種抑制作用；在VEGFR-2 中發(fā)現(xiàn)了具有高免疫抑制功能的FOXP3high，存在于細胞表面的VEGFR-2 可易位到細胞核，通過激活自己的啟動子調(diào)節(jié)自我轉(zhuǎn)錄[9]。

5 結(jié)語

Tregs 對血管新生有重要的調(diào)節(jié)作用，其促血管新生和抗血管新生與不同組織的固有特性和微環(huán)境密切相關(guān)。Tregs 促進血管生成方面的作用已經(jīng)在腫瘤發(fā)病機制方面引起了廣泛關(guān)注。新的證據(jù)表明，Tregs 在缺血、慢性炎癥和眼部疾病中具有抗血管生成的特性。進一步研究Tregs 的免疫調(diào)節(jié)功能及其對血管新生的影響，對于明確Tregs治療病理性血管新生的作用和安全性至關(guān)重要。