寧夏豬流感血清學(xué)調(diào)查

王進(jìn)香，王曉亮，周海寧，張玉玲，李知新，張成蓮，閆小芹，吳亞文，李志紅，王 磊，馬 龍，周秀玲，宋權(quán)儒

（寧夏動物疾病預(yù)防控制中心，寧夏銀川 750001）

豬流感（Swine Influenza，SI）是由A型流感病毒引起豬的一種急性、傳染性呼吸道疾病，臨床上以突發(fā)、高熱、精神沉郁、食欲廢絕、呼吸困難、陣發(fā)性咳嗽、衰竭、發(fā)病率高、死亡率低為特征。豬流感病毒（Swine Influenza Virus,SIV）還可以破壞豬的免疫系統(tǒng)而引起免疫抑制，導(dǎo)致其他疾病并發(fā)或繼發(fā)感染，加劇病情與降低生產(chǎn)性能，給養(yǎng)豬業(yè)造成重大的經(jīng)濟(jì)損失。由于豬呼吸道上皮同時具有兩種類型流感病毒受體。所以人和禽流感病毒都可以感染豬，豬是禽、人、豬流感毒基因重組的“混合器”，因此SI對于預(yù)防獸醫(yī)學(xué)及公共衛(wèi)生學(xué)均具有重要意義。為了解寧夏SI的流行狀況，我們于2011年3—4月采集寧夏22個縣（市、區(qū)）43個規(guī)模豬場、10個屠宰場、197個散養(yǎng)戶的1710份血清樣品，進(jìn)行了SI的H1和H3亞型血清抗體檢測，現(xiàn)將結(jié)果報告如下。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 SIV H1、H3亞型血凝抗原和標(biāo)準(zhǔn)陰陽性血清均購自中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾濱獸醫(yī)研究所。

1.1.2 被檢血清 2011年3－4月采自寧夏22個縣（區(qū)）43個規(guī)模場、10個屠宰場、197個散養(yǎng)戶（不同年齡階段）的豬血清樣品1710份。

1.1.3 雞紅細(xì)胞懸液 以阿氏液作抗凝劑，無菌采集健康公雞血液與等體積阿氏液混合，以1500 r/min離心10 min，棄去上清液和白細(xì)胞，重復(fù)洗滌3次，洗滌后用PBS配成1%（V/V）紅細(xì)胞懸液，現(xiàn)配現(xiàn)用。

1.2 方法

1.2.1 血凝和血凝抑制試驗(yàn) 按使用說明書操作。

1.2.2 血清樣品處理 待檢血清樣品經(jīng)“胰酶－加熱高碘酸鹽方法”處理，以去除血清中非特異性凝集抑制因子。其步驟為：先加0.15 mL胰酶溶液于0.3 mL血清中，在56℃滅活30 min后冷卻至室溫；加0.9 mL高碘酸鉀，混合，室溫孵育15 min；加0.9 mL丙三醇鹽溶液，混合，室溫孵育15 min；加0.75 mL生理鹽水并混合，置4℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2.3 血清樣品檢測 分別用H1、H3亞型血凝抗原同步檢測每份血清樣品，H1抗體效價大于或等于1:10者判為陽性。

2 結(jié)果

2.1 豬場SI抗體陽性率

在被查的22個縣（區(qū)）250個豬場中，H1亞型SI抗體陽性率為24.0%（60/250），H3亞型SI陽性率為2.80%（7/250），H1+H3亞型 SI抗體陽性率為 0.80%（2/250），結(jié)果見表1。

表1 豬場SI抗體檢測結(jié)果

2.2 血清樣品SI抗體陽性率

在1710份被檢血清中，H1亞型SI抗體陽性率為 11.81%（202/1710），H3亞型 SI抗體陽性率為0.46%（8/1710），H1+H3 亞型 SI抗體陽性率為0.35%（6/1710），結(jié)果見表2。

表2 血清樣品SI抗體檢測結(jié)果

3 小結(jié)與討論

3.1 規(guī)模場SIV抗體水平

43個規(guī)模豬場均受到不同程度的H1和H3亞型SIV感染，H1亞型SIV抗體平均陽性率為46.51%（20/43）；H3亞型 SIV抗體平均陽性率為 0.465%（2/43）；H1+H3亞型SIV抗體平均陽性率為0%。

3.2 散養(yǎng)戶不同年齡階段豬的SIV抗體水平

散養(yǎng)戶檢測血清來自全區(qū)22縣（市、區(qū)）197戶，不同年齡階段豬都存在SIV抗體，H1陽性率為16.75%（33/197）；H3亞型SIV抗體平均陽性率為1.52%（3/197）；H1+H3亞型SIV抗體平均陽性率為0.50%（1/197）。

3.3 屠宰場SIV抗體水平

10個屠宰豬場均受到不同程度的H1和H3亞型SIV感染，H1亞型SIV抗體平均陽性率為70.0%（7/10）；H3亞型SIV抗體平均陽性率為20.0%（2/10）；H1+H3亞型SIV抗體平均陽性率為10.0（1/10）%。

3.4 采用血凝抑制試驗(yàn)檢測方法

采用該方法檢測寧夏22個縣（市、區(qū)）共1710份血清，按照試劑盒陽性判定標(biāo)準(zhǔn)，共有 202份陽性，陽性率為11.81%。由于目前我區(qū)豬群未免疫過豬流感疫苗，用血清學(xué)方法檢測可以反應(yīng)豬對流感病毒的感染狀況，為豬流感的預(yù)防控制提供一定的基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。

3.5 禽流感病毒H5和H9亞型抗體檢測

本次調(diào)查中從1710份豬血清中檢出H5亞型禽流感病毒（AIV）抗體陽性1份，陽性率為0.05%；檢出H9亞型禽流感病毒（AIV）抗體陽性3份，陽性率為0.17%。

3.6 豬場豬群的健康狀況與豬場的環(huán)境，消毒隔離，人員素質(zhì)等有密切的關(guān)系

在本次調(diào)查的幾個豬場中，有的豬場抗體檢測陽性率低，但有的豬場的陽性率很高。如固原市檢測的兩個豬場中，豬場1檢測27份血清，陽性率為3.70%，豬場2檢測22份血清，陽性率有59.09%。經(jīng)調(diào)查，豬場1在養(yǎng)殖環(huán)境，豬場布局設(shè)計(jì)以及人員素質(zhì)上均好于豬場2。

3.7 隨著我國養(yǎng)豬業(yè)不斷發(fā)展，豬只、人員流動大，應(yīng)激因素多，因此象豬流感這類群發(fā)性傳染病在我國各地豬場中普遍存在

豬呼吸道疾病成了困擾眾多豬場的常見疾病，其中SIV是豬呼吸道疾病的主要病原之一，因其死亡率較低，往往不能引起養(yǎng)豬業(yè)者的重視，SIV還可引起懷孕母豬的繁殖障礙[1-2]，降低母豬的生產(chǎn)性能。同時，SI是豬的主要免疫抑制性疾病之一[3]，會破壞豬的免疫系統(tǒng)，導(dǎo)致免疫抑制，使得豬對其它疫病疫苗免疫應(yīng)答能力下降，所以感染了SIV的豬易并發(fā)或繼發(fā)其它疾病，使疫情加重和復(fù)雜，死亡率增高，經(jīng)濟(jì)損失嚴(yán)重。

3.8 當(dāng)前甲型H1N1流感給人類健康構(gòu)成了巨大威脅，我國對其研究給予了高度的重視

豬在禽-豬-人的流感種間傳播過程中，起著中間宿主及多重宿主的作用，豬是人源、禽源和豬源流感的唯一共同易感宿主[4-6]，因此應(yīng)加強(qiáng)對寧夏豬群中H1N1豬流感病毒的監(jiān)測，密切注意流感的動向，以便及時預(yù)測及發(fā)現(xiàn)有可能引起流感大流行的病毒。

[1]Heinen P P，de Boer-Luijtze E A，Bianchi A T J.Respiratory and systemic humoral and cellular immune responses of pigs to a heterosubtypic influenza A virus infection[J].Journal General Virology，2001，82（11）：2697-2707.

[2]Choi Y K，Coyal S W，Joo H S.Prevalence of swine influenza virus subtyped on swine farms in the united states[J].Archives of Virology，2002，147（6）：1209-1220.

[3]Jake W.Immunosuppressive viruses a new pattern in pig disease[J].Pig International，1996，26（8）：27-28.

[4]黃勝斌，蒙雪瓊，陳義祥，等.廣西豬群H1和H3亞型豬流感病毒抗體水平調(diào)查[J].中國動物檢疫，2008，25（7）：42.

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[6]董玲娜.從“豬流感”到“甲型H1N1流感”看當(dāng)前動物檢疫工作[J].中國動物檢疫，2009，26（11）：29-31.