附紅細(xì)胞體的研究進(jìn)展

楊磊，王祎，薛翠娜，谷麗

（1.臨猗縣畜牧獸醫(yī)發(fā)展中心，山西 臨猗 044199；2.運(yùn)城市農(nóng)業(yè)農(nóng)村局，山西 運(yùn)城 044000）

附紅細(xì)胞體病（Eperythrozoonsis）可感染豬、牛、羊等多種動(dòng)物的人畜共患病。人發(fā)生附紅細(xì)胞體病后，會(huì)出現(xiàn)發(fā)低熱、嗜睡無(wú)力、上呼吸道感染等癥狀。附紅細(xì)胞體病在世界30多個(gè)國(guó)家和地區(qū)都有發(fā)生，其中我國(guó)就是流行嚴(yán)重的國(guó)家之一。附紅細(xì)胞體病已經(jīng)對(duì)我國(guó)的畜牧業(yè)生產(chǎn)和人民生命健康產(chǎn)生嚴(yán)重的危害[1-2]。

1 病原學(xué)

附紅細(xì)胞體，又稱嗜血支原體，1928年首次在德國(guó)被發(fā)現(xiàn)[3]，是一類無(wú)細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)且對(duì)四環(huán)素敏感的單細(xì)胞類嗜紅細(xì)胞性原核生物。

1.1 形態(tài)特點(diǎn)

附紅細(xì)胞體缺少細(xì)胞壁和細(xì)胞核，為單層膜細(xì)胞結(jié)構(gòu)，直徑380～600 nm，以球形、環(huán)形、棒狀、啞鈴型、鏈型、星型等形態(tài)出現(xiàn)。革蘭氏染色呈陰性,姬姆薩染色呈紫紅色，瑞氏染色呈藍(lán)紫色。附紅細(xì)胞體一般以單個(gè)或多個(gè)團(tuán)狀形態(tài)附著在紅細(xì)胞表面，有些種類附紅細(xì)胞體可以通過(guò)伸出纖絲方式鑲嵌在紅細(xì)胞膜上，同時(shí)也可以呈游離態(tài)活動(dòng)，不同種類附紅細(xì)胞體游離的范圍不同[4]。附紅細(xì)胞體的增殖方式還不明確，可二裂方式增殖、出芽增殖、裂殖體分裂增殖等。紅細(xì)胞的破裂溶解不會(huì)對(duì)附著于其表面的附紅細(xì)胞體產(chǎn)生影響，室溫干燥可使其短時(shí)間內(nèi)停止活動(dòng)、75℃～100℃水浴可使其短時(shí)間內(nèi)失去活性、含氯、碘酒、鹽酸等常用化學(xué)藥品短時(shí)間可使其失去活性，對(duì)低溫的抵抗力較強(qiáng)，在0℃～4℃可存活60 d，并保持其感染力。試驗(yàn)證明，附紅細(xì)胞體可以體外利用培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)，并且保持較強(qiáng)的感染能力[1]。

1.2 病原分類

附紅細(xì)胞體因其兼具原蟲(chóng)和立克次氏體兩者一部分特征，所以長(zhǎng)期以來(lái)都被列為立克次氏體目（Rickttsiales），無(wú)型體科（Anaplasmataceae），附紅細(xì)胞體屬。但是附紅細(xì)胞體的分類地位存在著一定程度的爭(zhēng)議。有研究證明附紅細(xì)胞體的16SRNA基因序列與柔膜體綱支原體屬同源性很高，把其歸入柔膜體綱支原體屬的聲音一直存在。附紅細(xì)胞體的命名主要根據(jù)感染來(lái)源，如來(lái)源于豬的豬附紅細(xì)胞體、來(lái)源于羊的羊附紅細(xì)胞體等，種類可達(dá)到15種，不同種類的附紅細(xì)胞體存在一定差異性，一般不會(huì)交叉感染，但是某些種類的附紅細(xì)胞體對(duì)同源性較高的不同動(dòng)物具有一定的感染性[5]。

2 流行病學(xué)

2.1 地理分布及易感動(dòng)物范圍

從1928年在德國(guó)發(fā)現(xiàn)附紅細(xì)胞體以來(lái)，已經(jīng)在美國(guó)、南非、日本、法國(guó)、英國(guó)、印度、中國(guó)等30多個(gè)國(guó)家和地區(qū)流行。我國(guó)一直是附紅細(xì)胞體病流行最嚴(yán)重的各個(gè)國(guó)家之一，其在全國(guó)范圍內(nèi)均有發(fā)生。

附紅細(xì)胞體的易感動(dòng)物種類比較多，有豬等雜食性動(dòng)物，牛、綿羊、山羊等反芻動(dòng)物，鼠、兔等嚙齒類動(dòng)物，貓、狗等肉食動(dòng)物，狐、貂、馴鹿等野生動(dòng)物，雞等鳥(niǎo)類和人類。在我國(guó)易感動(dòng)物是豬。

2.2 傳播方式

附紅細(xì)胞體的傳播方式主要分為3種：①蟲(chóng)媒傳播。夏秋季節(jié)昆蟲(chóng)大量繁殖、活動(dòng)，節(jié)肢動(dòng)物和吸血昆蟲(chóng)通過(guò)叮咬等，大量傳播附紅細(xì)胞體病，是主要的傳播途徑。所以附紅細(xì)胞體病多發(fā)于夏秋季節(jié)；②垂直傳播。主要通過(guò)產(chǎn)道分娩或者胎盤(pán)等媒介，附紅細(xì)胞體由母體傳播給胎兒的方式，有研究證明，豬、人類均可以通過(guò)垂直傳播的方式感染附紅細(xì)胞體??；③血液傳播。通過(guò)患病動(dòng)物血液直接接觸和接觸了被患病動(dòng)物血液污染的物品進(jìn)行傳播，一般通過(guò)受污染的針頭、手術(shù)器械、食物、動(dòng)物外傷等傳播[6]。

從1991年我國(guó)出現(xiàn)首例人感染附紅細(xì)胞體病后，感染人數(shù)呈逐年增長(zhǎng)的態(tài)勢(shì)。飼養(yǎng)員、獸醫(yī)、牧民、從事畜禽屠宰、畜禽運(yùn)輸?shù)葟臉I(yè)人員感染附紅細(xì)胞體病的概率明顯高于其他人群。有報(bào)道稱，某地區(qū)附紅細(xì)胞體病流行時(shí)，將患病動(dòng)物和病人體內(nèi)的附紅細(xì)胞體基因序列進(jìn)行比對(duì)，發(fā)現(xiàn)高度同源性，推斷動(dòng)物與人類之間可能存在傳播，表明附紅細(xì)胞體病屬于人獸共患病[7]。另外，免疫抑制可能導(dǎo)致附紅細(xì)胞體病概率明顯增高。

3 致病機(jī)理

目前，由于某些研究手段的研制，附紅細(xì)胞體的致病機(jī)理還不清楚。普遍被大家接受的致病機(jī)理有4個(gè)方面：①加速紅細(xì)胞衰老死亡。附紅細(xì)胞體附著于紅細(xì)胞表面，通過(guò)自身分泌的唾液酸酶及蛋白酶改變紅細(xì)胞膜的通透性，使紅細(xì)胞發(fā)生變形、破裂、溶解[8]，導(dǎo)致機(jī)體的紅細(xì)胞數(shù)量減少、血紅蛋白總量降低、攜氧能力降低，出現(xiàn)貧血、黃疸、呼吸困難、酸堿失衡等癥狀；②免疫反應(yīng)：作為異物的附紅細(xì)胞體會(huì)激活機(jī)體的免疫系統(tǒng)產(chǎn)生特異性免疫抗體，清除附紅細(xì)胞體和其附著的紅細(xì)胞，同時(shí)還容易激活補(bǔ)體系統(tǒng)，造成補(bǔ)體介導(dǎo)的大量溶血現(xiàn)象；③抑制紅細(xì)胞產(chǎn)生：附紅細(xì)胞體主要在宿主的骨髓中增殖，抑制紅細(xì)胞的產(chǎn)生[9]；④凝血作用：附紅細(xì)胞體可以產(chǎn)生大量黏附性蛋白將紅細(xì)胞黏附在一起，導(dǎo)致局部毛細(xì)血管堵塞、破裂，使機(jī)體出現(xiàn)局部粘膜、皮膚出血的癥狀。

4 臨床癥狀

當(dāng)動(dòng)物感染附紅細(xì)胞體后，臨床表現(xiàn)為嚴(yán)重的溶血性貧血或慢性貧血、體質(zhì)量減輕、不孕和免疫抑制，也會(huì)因?yàn)閯?dòng)物的個(gè)體差異出現(xiàn)不同表現(xiàn)，甚至發(fā)病前期沒(méi)有任何癥狀。生豬感染附紅細(xì)胞體后，一般分為急性感染和慢性感染兩種，大多為慢性感染。仔豬、架子豬、懷孕母豬容易發(fā)生急性感染，仔豬感染后會(huì)出現(xiàn)溶血性貧血、黃疽、皮膚蒼白、體質(zhì)量降低；架子豬感染后會(huì)出現(xiàn)黃疸性貧血、發(fā)熱、皮膚蒼白、食欲不振；懷孕母豬感染后會(huì)出現(xiàn)流產(chǎn)、乳房外陰水腫、厭食發(fā)熱。慢性感染表現(xiàn)為貧血、黃疸、發(fā)育遲緩[10]。

5 診斷技術(shù)

5.1 形態(tài)學(xué)診斷技術(shù)

形態(tài)學(xué)診斷技術(shù)，指利用顯微鏡對(duì)被檢動(dòng)物染色血液涂片觀察來(lái)判定是否感染的技術(shù)，一般采用染色方法有瑞氏染色法和姬姆薩染色法。該技術(shù)試驗(yàn)成本低、操作簡(jiǎn)單，但對(duì)隱形感染的動(dòng)物敏感性和特異性差。該方法的關(guān)鍵點(diǎn)是如何區(qū)分附紅細(xì)胞體與其他類似大小的物質(zhì)，比如染料顆粒、線粒體、高爾基體等細(xì)胞成分以及病原微生物等[9]。

5.2 血清學(xué)診斷技術(shù)

血清學(xué)診斷技術(shù)是利用抗體和其對(duì)應(yīng)抗原之間發(fā)生反應(yīng)的一種診斷方法，目前主要采用的方法是補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)、間接血凝試驗(yàn)和酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)[11-12]。該方法操作簡(jiǎn)單、可以大批量進(jìn)行檢測(cè)。但抗原來(lái)源需要從染病動(dòng)物體內(nèi)提取，所以檢測(cè)的敏感性和特異性不穩(wěn)定，存在批次差異和交叉反應(yīng)。該方法需要進(jìn)一步純化抗體，是一種比較有發(fā)展前景的檢測(cè)方法。

5.3 分子診斷技術(shù)

分子診斷技術(shù)是利用DNA探針雜交法和PCR擴(kuò)增法等方法診斷的一類方法[13]，該方法主要基于附紅細(xì)胞體16 S rRNA基因、rpoB基因和特異性的基因片段進(jìn)行檢測(cè)。該方法特異性和敏感性強(qiáng)、重復(fù)性好、可靠性強(qiáng)、可大批量檢測(cè)、可用于各種樣本的檢測(cè)，檢測(cè)成本較高。

6 治療

目前，治療豬附紅細(xì)胞體病主要采用血蟲(chóng)凈與土霉素、鹽酸四環(huán)素、強(qiáng)力霉素等抗菌素配合使用進(jìn)行綜合治療；對(duì)于出現(xiàn)典型癥狀的可采用肌肉注射血蟲(chóng)凈、長(zhǎng)效土霉素注射液等，除此以外還可以使用氧氟沙星、二氟沙星、環(huán)丙沙星、泰妙菌素、強(qiáng)力霉素、黃色素、金霉素等。治療的同時(shí)，要注意補(bǔ)充生理鹽水或者葡萄糖，必要時(shí)給仔豬、慢性感染豬注射鐵劑、維生素等。人附紅細(xì)胞體病目前缺乏有效、完整的治療方案，一般采用土霉素、四環(huán)素、慶大霉素等藥物治療。另外，由于附紅細(xì)胞體缺失細(xì)胞壁，導(dǎo)致青霉素等干擾細(xì)胞壁形成抗生素類藥物對(duì)附紅細(xì)胞體無(wú)效[6]。

7 預(yù)防

目前，附紅細(xì)胞體病還沒(méi)有成熟的疫苗，預(yù)防只能采取綜合防治措施進(jìn)行預(yù)防：一是科學(xué)飼養(yǎng)管理，加強(qiáng)圈舍環(huán)境、物品的清潔、消毒，定期驅(qū)蟲(chóng)；二是要科學(xué)規(guī)范程序化操作，杜絕因正常操作產(chǎn)生血液污染；三是做好藥物預(yù)防，采用投喂金霉素、四環(huán)素、對(duì)氨基苯胂酸等藥物進(jìn)行預(yù)防。另外，有研究證明甲醛滅活附紅細(xì)胞體苗對(duì)豬群有一定效力的免疫保護(hù)作用[6]。

8 結(jié)語(yǔ)

綜上所述，附紅細(xì)胞體病作為一種人畜共患病，已經(jīng)嚴(yán)重威脅了我國(guó)畜牧業(yè)特別是生豬養(yǎng)殖業(yè)的健康穩(wěn)定發(fā)展，也嚴(yán)重威脅公共衛(wèi)生安全。雖然對(duì)其病原學(xué)、流行病學(xué)、致病機(jī)理、臨床癥狀、診斷技術(shù)、治療和預(yù)防等方面進(jìn)行了大量研究，但是還未徹底了解附紅細(xì)胞體病的全貌，沒(méi)有研制出安全穩(wěn)定的疫苗，今后應(yīng)該繼續(xù)加大對(duì)附紅細(xì)胞體病的分子診斷技術(shù)和疫苗研制等方面的研究，同時(shí)做好規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)的預(yù)防凈化工作。