蜂毒治療病毒性疾病的研究進(jìn)展

馬倩倩，王一杰，王曉禹，張柂儇，吳國(guó)泰

（甘肅省蘭州市甘肅中醫(yī)藥大學(xué)，甘肅 蘭州， 730000）

在風(fēng)濕類(lèi)疾病、周?chē)窠?jīng)炎及神經(jīng)痛疾病的治療方面均有較好的應(yīng)用前景[3]。病毒性疾病傳染性大、傳播速度快，嚴(yán)重危害人類(lèi)健康，其發(fā)病率與病死率較高[4]。常見(jiàn)的抗病毒藥物主要通過(guò)影響病毒復(fù)制周期的某個(gè)環(huán)節(jié)來(lái)發(fā)揮作用，然而病毒傳播途徑廣泛，易發(fā)生毒力變異和耐藥性變異，給臨床抗病毒治療帶來(lái)極大難度，可用于針對(duì)性治療的藥物相當(dāng)有限[5]。蜂毒治療病毒性疾病取得了顯著效果，可為豐富蜂毒臨床應(yīng)用提供幫助。

1 急性病毒性呼吸道感染

蜂毒含有多肽類(lèi)、脂類(lèi)、活性酶類(lèi)、游離氨基酸等多種成分，具有抗病毒、抗炎、抗輻射、抗腫瘤及提高免疫力等多種藥理活性[1-2]。

急性病毒性呼吸道感染是由流感病毒引起的，癥見(jiàn)發(fā)熱、頭痛和全身不適等[6]，具有傳染性強(qiáng)、呈季節(jié)性流行的特點(diǎn)[7]。WHO 表示，每年與流感相關(guān)的呼吸道疾病死亡人數(shù)高達(dá)65 萬(wàn)[8]，帶來(lái)極大的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)[9]。

研究發(fā)現(xiàn)，蜂毒的主要活性成分蜂毒肽可有效滅活甲型流感病毒（H1N1），可降低感染24 h 細(xì)胞的病毒滴度和GFP 表達(dá)，在病毒細(xì)胞附著之前，蜂毒肽對(duì)H1N1 表面有直接破壞作用[10]。對(duì)SPF 雞胚胎接種甲型流感病毒H7N7 亞型，用低濃度蜂毒肽治療可提高40%的存活率，而高濃度則無(wú)作用[11]。提示蜂毒肽高濃度或因毒性過(guò)高而影響治療作用。

中醫(yī)臨床選穴用蜂針治療，并佐蜂產(chǎn)品（蜂膠、蜂蜜等） 提高自身免疫力，可有效治愈流感[12]。鄒超用西藥先對(duì)流感患者退熱，再進(jìn)行合谷（雙）、曲池（雙）、大椎、足三里（雙） 蜂針點(diǎn)刺，同時(shí)服用鮮蜂王漿、復(fù)方蜂膠丸，3～7 d 可完全退熱，應(yīng)用此法成功治療110 例流感患者[13]。

2 病毒性肝炎

病毒性肝炎是由肝炎病毒引起的，癥見(jiàn)食欲不振、肝區(qū)痛、黃疸等。就傳染途徑及預(yù)后來(lái)看，丙型肝炎（HCV） 及乙型肝炎（HBV）是病毒性肝炎防治的重點(diǎn)。目前利用核苷（酸） 和干擾素進(jìn)行抗病毒治療，易產(chǎn)生耐藥性和嚴(yán)重不良反應(yīng)。

研究表明，蜂毒素對(duì)HCV 感染有阻斷作用，蜂毒素以劑量依賴(lài)性方式作用于病毒顆粒，直接阻斷HCV 進(jìn)入細(xì)胞，但對(duì)宿主細(xì)胞無(wú)干擾作用，因此，蜂毒素被認(rèn)為是開(kāi)發(fā)新型天然抗HCV 治療劑的候選藥物[14-15]。Picoli 等[16]對(duì)蜂毒主成分蜂毒肽及阿帕明的抗牛病毒性腹瀉病毒（BVDV） 作用進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)二者協(xié)同作用要優(yōu)于單獨(dú)作用。而B(niǎo)VDV 與肝炎病毒同屬黃病毒科，提示蜂毒的抗肝炎病毒作用是多種成分共同作用的結(jié)果，在研究時(shí)要關(guān)注蜂毒多種成分的共同作用。

中醫(yī)臨床應(yīng)用蜂毒治療HBV 感染取得了較好的療效[17]，王強(qiáng)等[18]用蜂針配合蜂產(chǎn)品治療乙型肝炎82 例，蜂毒可有效治愈乙肝患者，使其肝功能恢復(fù)正常、清除體內(nèi)病毒。黃翠云等[19]運(yùn)用蜂療治療免疫耐受期HBV 攜帶者60例，可顯著提高HBV 無(wú)癥狀、慢性攜帶者血象中WBC、中性粒細(xì)胞及T 細(xì)胞亞群水平。肝臟是人體代謝的主要場(chǎng)所。

肝炎后肝細(xì)胞損傷較大，此時(shí)再進(jìn)行藥物治療無(wú)疑會(huì)加重肝臟負(fù)擔(dān)及肝毒性風(fēng)險(xiǎn)，而蜂毒配合蜂產(chǎn)品治療則沒(méi)有此方面的顧慮。蜂毒治療高效且價(jià)格低廉，除少數(shù)過(guò)敏者不適用外，均可適用，因此應(yīng)用蜂毒治療病毒性肝炎前景光明。

3 艾滋病

艾滋?。ˋIDS） 是由艾滋病病毒（HIV）引起的并發(fā)多種感染，以至全身衰竭而死亡。目前主要從抗病毒、改善免疫功能、降低機(jī)會(huì)性感染等方面治療，尚無(wú)根治藥物及有效疫苗。

自20 世紀(jì)90 年代以來(lái)，國(guó)內(nèi)外研究者對(duì)蜂毒抗HIV 進(jìn)行了不斷深入的探索。Wachinger 等[20]在研究?jī)尚噪膶?duì)持續(xù)感染的T淋巴瘤細(xì)胞HIV-1 產(chǎn)生的影響時(shí)發(fā)現(xiàn)，蜂毒肽可劑量依賴(lài)性的通過(guò)胞內(nèi)作用使HIV 蛋白損傷而大幅度減少HIV-1 的復(fù)制。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，蜂毒肽劑量依賴(lài)性抗HIV 作用是通過(guò)抑制HIV 轉(zhuǎn)錄和降低病毒基因產(chǎn)物的總體水平實(shí)現(xiàn)的，并不是通過(guò)裂解細(xì)胞或病毒膜實(shí)現(xiàn)的[21]。Fenard 等[22]研究證明，蜂毒中的磷脂酶A2 多肽通過(guò)與CXCR4 趨化因子受體相互作用，抑制T 細(xì)胞型HIV-1 株的復(fù)制。

Hood 等[23]首次構(gòu)建蜂毒肽納米顆粒，顯著降低TZM-bl 報(bào)告細(xì)胞的CXCR4 和CCR5菌株感染力。其機(jī)制可能是HIV-1 顆粒與蜂毒肽納米顆粒通過(guò)脂質(zhì)-脂質(zhì)膜半融合機(jī)制相互作用，促進(jìn)了蜂毒肽從納米顆粒單層向HIV-1 包膜脂質(zhì)雙層運(yùn)輸，使得蜂毒肽大量聚集并形成包膜孔，從而使病毒包膜失活。蜂毒肽納米顆粒可抑制陰道內(nèi)HIV 傳播且無(wú)陰道角質(zhì)細(xì)胞毒性，有效降低性傳播途徑的HIV感染。Jallouk 等[24]證明蜂毒肽納米顆粒可在減少精子和陰道上皮細(xì)胞毒性的同時(shí)降低HIV感染，是HIV 等包膜病毒的高效殺毒劑。

Dehghani 等[20]發(fā)現(xiàn)蜂毒肽與HIV 的包膜和長(zhǎng)末端極其相似，且將HIV 的包膜和蛋白酶作為蜂毒肽的靶標(biāo)可能有研究意義，為抗HIV新藥創(chuàng)造了新的靶點(diǎn)。

中醫(yī)和蜂療結(jié)合，隨癥取穴[25]進(jìn)行直刺、點(diǎn)刺或散刺，對(duì)進(jìn)行艾滋病治療，可有效升高患者CD4 細(xì)胞水平。

4 帶狀皰疹感染

感染人類(lèi)的皰疹病毒有8 種，皰疹病毒可分為HSV-1 與HSV-2 兩種類(lèi)型。主要侵害皮膚、黏膜以及神經(jīng)組織，具有復(fù)制周期短和散播快的特點(diǎn)，尚無(wú)特效藥物，治療時(shí)以減少?gòu)?fù)發(fā)為主要原則。

Baghian 等[26-27]研究表明Na+-K+-ATP 酶對(duì)HSV-1 誘導(dǎo)的細(xì)胞融合具有重要介導(dǎo)作用，并驗(yàn)證蜂毒肽抑制了Na+-K+-ATP 酶活性從而抑制由HSV-1 突變病毒引起的Vero 細(xì)胞的融合，并使syn1 突變病毒株特異性逆轉(zhuǎn)為syn+（野生型） 株形態(tài)，抑制病毒的吸附和滲透。Vanesa 等[28]研究證明蜂毒肽在3μ L 濃度下，對(duì)HSV-1 和HSV-2 的抑制率達(dá)80%，但對(duì)宿主細(xì)胞的毒性過(guò)大，可能影響蜂毒肽的用藥開(kāi)發(fā)。

有學(xué)者對(duì)純蜂毒肽和神蜂精（內(nèi)含蜂毒肽0.05 mg/mL 的中藥外搽劑） 進(jìn)行體外及HSV-1 致小鼠腦炎體內(nèi)的抗HSV-1 病毒作用研究，結(jié)果表明蜂毒肽對(duì)HSV-1 病毒具有抑制作用，抑制率隨濃度的增加而增加，但抑制率低于阿昔洛韋；神蜂精治療作用隨著濃度的增加其抑制率有所降低[29-30]。對(duì)其抗病毒機(jī)制進(jìn)一步探索發(fā)現(xiàn)，蜂毒肽通過(guò)抑制HSV-1 病毒的吸附、合成和釋放，有效減少非正常細(xì)胞周期的數(shù)量，進(jìn)而保護(hù)受HSV-1 侵染小鼠的腦組織[31-32]。丁志賢[33]、李榮農(nóng)[34]用蜂毒注射液通過(guò)神經(jīng)根阻滯注射、穴位注射治療帶狀皰疹及帶狀皰疹后遺癥性神經(jīng)痛，治愈率超過(guò)95%，療效顯著。在目前現(xiàn)有藥物對(duì)抗皰疹病毒逐漸耐受的情況下，尋求蜂毒治療，也是較為理想的途徑。

5 其他

除上述病毒性疾病，蜂毒對(duì)其他病毒引起的疾病，如人乳頭瘤病毒（HPV） 引起的尋常疣[35]、人呼吸道合胞病毒（RSV） 引起的肺炎和毛細(xì)支氣管炎[36]、腸道病毒71（EV-71） 引起的手足口病[37]均有效果。對(duì)包膜型病毒，通過(guò)與病毒表面直接相互作用破壞病毒的穩(wěn)定性；對(duì)非包膜型病毒，通過(guò)刺激I 型IFN，進(jìn)而刺激宿主細(xì)胞內(nèi)的抗病毒狀態(tài)，抑制病毒復(fù)制[10]。

綜上所述，蜂毒作為病毒性疾病的預(yù)防或治療藥物發(fā)展前景良好。但仍有亟待解決的問(wèn)題是蜂針療法是最能發(fā)揮蜂毒療效的途徑，然而其帶來(lái)的表皮疼痛使其適用度有所降低，因此無(wú)痛蜂針的研究十分必要；蜂針療法的過(guò)敏反應(yīng)也是其主要限制因素，因此借助現(xiàn)代提取分離技術(shù)對(duì)主要作用成分的高度純化十分必要；蜂毒注射液的開(kāi)發(fā)利用給蜂針療法提供了新的途徑，但注射液的不良反應(yīng)也是將來(lái)發(fā)展中需要考慮的問(wèn)題。

我國(guó)是蜂蜜生產(chǎn)大國(guó)，蜂毒資源豐富，但對(duì)蜂毒治療病種研究集中在風(fēng)濕類(lèi)疾病、周?chē)窠?jīng)炎及神經(jīng)痛等疾病，仍有其他病種未發(fā)掘。蜂毒的抗病毒機(jī)制探索仍是未來(lái)研究的重點(diǎn)，而其他昆蟲(chóng)毒液抗病毒機(jī)制研究較為成熟，如蝎毒、蛇毒等的抗病毒機(jī)制，可對(duì)比進(jìn)行蜂毒抗病毒研究。