一例犬復(fù)孔絳蟲病的診斷與防治

唐洪文

（永州市道縣畜牧水產(chǎn)事務(wù)中心，湖南 道縣 425300）

犬復(fù)孔絳蟲病（Dipylidiasis caninum）是由犬復(fù)孔絳蟲寄生于犬的小腸內(nèi)所引起的一種以活動(dòng)遲緩、食欲不振、消化不良、肛門瘙癢及間或腹瀉為特征性病理癥狀的人畜共患寄生蟲病[1-2]。該病為家犬最常見的疾病之一[3]，可引起犬、貓、狼、獾、花面貍、野貓等一些肉食性嚙齒動(dòng)物出現(xiàn)食欲不振、消化不良等癥狀[4-5]，經(jīng)消化道感染人可引起人出現(xiàn)腹痛、消化障礙、肛門瘙癢及輕微的中毒性神經(jīng)癥狀[6]。犬復(fù)孔絳蟲為一種大型的體內(nèi)寄生蟲，其幼蟲及成蟲階段主要存在于犬、貓的小腸內(nèi)，引起患病犬貓出現(xiàn)發(fā)育遲緩、腸炎、肛門瘙癢及消化不良等一系列癥狀[7-8]。該蟲以蚤、貓虱、犬虱等一些無脊椎動(dòng)物為中間宿主，并在其體內(nèi)發(fā)育成似囊尾蚴[9]，犬貓因誤吞含有似囊尾蚴的中間宿主而成感染動(dòng)物。此外，犬復(fù)孔絳蟲病流行于全世界[10]，遍布各個(gè)國家及地區(qū)[11]，且發(fā)病無明顯的季節(jié)性[12]，對(duì)犬的生長發(fā)育及繁殖影響巨大，嚴(yán)重阻礙了全球養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展。

1 發(fā)病情況

2020年7月25日，永州市道縣某寵物醫(yī)院接診一只發(fā)病的獵犬（公，1.5歲，21kg）。據(jù)家主敘述：該獵犬于4月初就開始出現(xiàn)逐漸消瘦、被毛粗亂、精神不振、不喜運(yùn)動(dòng)且活動(dòng)遲緩、食欲不振，偶有腹瀉；于5月中旬開始出現(xiàn)用屁股摩擦地面或墻壁等癥狀，寵主未加以重視。于3天前該寵物犬開始出現(xiàn)拉帶有血液的稀糞，寵主以為是某細(xì)菌所引起的傳染病，曾使用慶大霉素、地塞米松等藥物進(jìn)行治療，但未取得良好的治療效果；遂攜其前來就診。

2 臨床證狀

經(jīng)寵物醫(yī)生視診，可見該患犬具有精神沉郁、體格消瘦、被毛粗亂、活動(dòng)遲緩、腹部膨大，不時(shí)有屁股摩擦地面或墻壁及排出不成形的稀糞之狀。

3 診斷

3.1 初步診斷

根據(jù)患犬所表現(xiàn)出的臨床癥狀、寵主的描述及筆者臨床實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)，初步診斷該病為某種寄生蟲所引發(fā)的疾??；待病犬排糞后，在其所排的糞便中發(fā)現(xiàn)存有黃白色、長大于寬瓜子樣絳蟲節(jié)片，遂進(jìn)一步確診該病為復(fù)孔絳蟲病。

3.2 蟲卵鏡檢

采集該患犬糞便，配置飽和鹽水，以進(jìn)行飽和鹽水漂浮法檢驗(yàn)節(jié)片和蟲卵。具體步驟為：取糞便2克，放入燒杯中，搗碎；在室溫下，向燒杯中加入飽和鹽水100mL；用玻璃棒將糞便攪拌均勻開來；然后再將混勻物倒入試管中，使其液面高于試管口，靜置30分鐘；取一片蓋玻片，輕輕地放于試管口；最后，將蓋玻片放在載玻片上，置于光學(xué)顯微鏡下進(jìn)行蟲卵檢查。鏡檢結(jié)果，見圖1。

如圖1所示，該糞便中存有呈球形、內(nèi)含六鉤的蟲卵。對(duì)照寄生蟲蟲卵圖譜，發(fā)現(xiàn)此蟲卵與犬復(fù)孔絳蟲的蟲卵基本相同。從而，基本確診該病為犬復(fù)孔絳蟲病。

圖1 犬復(fù)孔絳蟲蟲卵Fig 1.Eggsof Dipylidiasis caninum

3.3 分子生物學(xué)診斷

將剩下的飽和鹽水漂浮法的混懸溶液，以20000 r/min離心2分鐘，棄去上清液。收集沉淀，用糞便DNA提取試劑盒（購買于北京天根生化科技有限公司）提取沉淀的總DNA。將提取的好的DNA樣品，置于-20℃保存，備用。

利用引物NC5(GTAGGTGAACCTGCGGAAGGATCATT)，NC2(TTAGTTTCTTTTCCT-CCGCT)，對(duì)總DNA的ITS-1基因進(jìn)行PCR擴(kuò)增。反應(yīng)體系為50uL，反應(yīng)條件為：95℃（預(yù)熱），5 min；95℃（變性），30 s；54℃（退火），30 s；72℃（延伸），1 min；共35個(gè)循環(huán)；最后72℃（延伸），5 min。反應(yīng)完成后，吸取5uLPCR產(chǎn)物在1.5%瓊脂糖上進(jìn)行凝膠電泳檢測，結(jié)果顯示為陽性（圖2）。將PCR產(chǎn)物發(fā)送至上海生工生物有限公司進(jìn)行測序。

圖2 犬復(fù)孔絳蟲ITS-1基因PCR結(jié)果Fig 2.The PCR resultsofITS-1 gene of Dipylidiasis caninum

將所獲得的序列在GenBank上進(jìn)行BLAST搜索分析，發(fā)現(xiàn)與已公布犬復(fù)孔絳蟲的ITS-1基因序列的相似度為100%，從而確定該病的病原體為犬復(fù)孔絳蟲，該病為犬復(fù)孔絳蟲病。

4 治療

根據(jù)確診結(jié)果，我們采用丙硫咪唑+頭孢曲松靜等藥物對(duì)病犬進(jìn)行治療。使用丙硫咪唑?qū)Σ∪M(jìn)行驅(qū)蟲，按30mg/kg比例拌料飼喂，1次/天，連喂7天[13]；肌肉注射頭孢曲松靜進(jìn)行消炎，劑量按25mg/kg·bw，2次/天，連用3天[14]。此外，靜脈注射50毫升加有維生素B6、止血敏及維生素C等藥物的5%葡萄糖溶液，1次/天，連用5天[15]，以增強(qiáng)病犬的抗病力。1周后，病犬徹底恢復(fù)健康。

5 預(yù)防措施

5.1 加強(qiáng)飼養(yǎng)管理

寵物主在進(jìn)行飼料配比的過程中，應(yīng)當(dāng)注重寵物犬飼料的營養(yǎng)均衡搭配，增加維生素和礦物質(zhì)的含量，以期提高寵物的身體素質(zhì)，增強(qiáng)其抵抗力。

5.2 改善衛(wèi)生條件

及時(shí)清掃犬舍和更換墊料，確保犬舍干燥及通風(fēng)良好。不定時(shí)用雙甲脒乳油劑100倍稀釋液對(duì)犬舍進(jìn)行噴灑（盡量把犬舍的所有表面籠具和縫隙都噴灑到位，以免遺漏）[16]。定期使用伊維菌素對(duì)寵物犬體表進(jìn)行噴撒或利用帶有驅(qū)蟲特征的香皂對(duì)其體表進(jìn)行清洗。

5.3 切斷傳播途徑

因?yàn)樘?、虱子等無脊椎動(dòng)物為犬復(fù)孔絳蟲的中間宿主，故避免寵物犬體表帶有跳蚤、虱子等無脊椎宿主是預(yù)防犬復(fù)孔絳蟲病的關(guān)鍵。盡量不要讓寵物犬到跳蚤、虱子等中間宿主孳生的區(qū)域內(nèi)玩耍，如需帶寵物犬到戶外活動(dòng)時(shí)，則可在其體表涂抹拜寵爽等驅(qū)蟲藥加以預(yù)防。

5.4 定期驅(qū)蟲

在幼犬2周齡時(shí)進(jìn)行驅(qū)蟲一次，2～3周后再驅(qū)蟲一次；當(dāng)幼犬達(dá)到2月齡時(shí)，再進(jìn)行驅(qū)蟲一次；成年家犬每年驅(qū)蟲2～4次，每次時(shí)間間隔為3～6個(gè)月[1]。

6 小結(jié)

犬復(fù)孔絳蟲病是由犬復(fù)孔絳蟲寄生于犬的小腸內(nèi)所引起的一種人畜共患寄生蟲病[1]，它以活動(dòng)遲緩、食欲不振、消化不良、肛門瘙癢及間或腹瀉為特征性病理癥狀[2]。犬復(fù)孔絳蟲為一種大型的體內(nèi)寄生蟲，它的幼蟲及成蟲階段主要存在于犬、貓的小腸內(nèi)，可引起犬、貓、狼、獾、花面貍、野貓等一些肉食性嚙齒動(dòng)物出現(xiàn)食欲不振、消化不良、肛門瘙癢及輕微的中毒性神經(jīng)癥狀[4-6]，也可經(jīng)消化道感染人引起人出現(xiàn)腹痛、消化障礙等臨床癥狀。該蟲具有多種無脊椎中間宿主，其中以蚤、貓虱、犬虱等為最常見的中間宿主，并在其體內(nèi)發(fā)育成似囊尾蚴[9]，犬貓因誤吞含有似囊尾蚴的中間宿主而成為感染動(dòng)物[10]。此外，犬復(fù)孔絳蟲病流行于全世界，遍布各個(gè)國家及地區(qū)[11]，且發(fā)病無明顯的季節(jié)性[12]，對(duì)犬的生長發(fā)育及繁殖影響巨大。然而，患病動(dòng)物一般在感染早期無任何明顯的臨床癥狀，且多在感染后期逐漸出現(xiàn)非典型的臨床癥狀，極易被忽略或與其他細(xì)菌、病毒所引起的疾病相互混淆；傳統(tǒng)的檢測技術(shù)操作過于繁瑣、費(fèi)時(shí)，造成診治極為不便。利用分子技術(shù)檢測不僅操作簡單，而且也大大提高了檢測結(jié)果的精確性，為寵主對(duì)該病的診斷和治療提供了便捷有效的途徑。因此，本文所采用的診斷和防治方法，也為以后的臨床診療提供技術(shù)參考。