冬蟲夏草提取物及其活性成分研究進(jìn)展

苑 鵬，劉鑫龍

（天津現(xiàn)代職業(yè)技術(shù)學(xué)院，天津 300350）

冬蟲夏草，為麥角菌科水蘇屬植物，是冬蟲夏草菌寄生在蝙蝠蛾科昆蟲幼蟲上的子座與幼蟲尸體的干燥復(fù)合體。其氣微腥、味微苦，性甘、平，歸肺、腎經(jīng)，具有益肺補腎和化痰止血的功效[1]。冬蟲夏草既可作為其他治療手段的輔助單方使用[2]，也可制成復(fù)方制劑發(fā)揮作用[3]。由于來源有限，一些臨床藥品和保健食品中以組分和藥理作用相似的發(fā)酵蟲草菌粉作為原料，如藥典收載的金水寶片以發(fā)酵蟲草菌粉（Cs-4）為原料。多年來，冬蟲夏草中的活性成分受到科研工作者持續(xù)關(guān)注。針對冬蟲夏草各種提取物及活性成分的研究進(jìn)行歸納，旨在為進(jìn)一步研究冬蟲夏草、挖掘其價值提供參考。

1 冬蟲夏草提取物

冬蟲夏草具有生物活性的提取物，往往成分比較復(fù)雜，難以確認(rèn)是單一組分還是多組分協(xié)同作用的體系，尚未從分子層面闡釋其產(chǎn)生生物活性的機理。冬蟲夏草提取物的制備方法多種多樣，不同條件下制取的提取物成分、含量均有差異。不同組分的提取物，可能體現(xiàn)出不同的生物活性。

1.1 提取物制備方法

1.1.1 冬蟲夏草的選擇

傳統(tǒng)的冬蟲夏草藥材，是以其干品入藥，如《中國藥典》對其描述為“曬至六七成干，除去似纖維狀的附著物及雜質(zhì)，曬干或低溫干燥”。而不同的干燥方式對冬蟲夏草活性成分含量有影響。李光榮等人[4]對比了冷凍干燥、陰涼干燥、熱風(fēng)烘干3種不同干燥方式對冬蟲夏草中代表性成分的影響，結(jié)果表明，通過冷凍干燥制備的冬蟲夏草，維持了較高的超氧化物歧化酶（SOD）的活性，而熱風(fēng)烘干的產(chǎn)品中，麥角甾醇、膽固醇、豆甾醇等含量較高。此外，一些研究在選擇原料時采用了鮮冬蟲夏草，在一定程度上避免了干燥方法及工藝對冬蟲夏草提取物成分的影響。

1.1.2 提取方法

在制備冬蟲夏草提取物時，最常用的方式是浸取。為了提高浸取效率，可以采用一些輔助手段，如熱回流、超聲等。馬微等人[5]比較了加熱回流提取、超聲波提取及熱回流輔助超聲波提取，通過對比常見重金屬元素、指紋圖譜、部分主要/差異性成分，發(fā)現(xiàn)含超聲方式所制得的提取液穩(wěn)定性和均一性均較好、提取到的生物活性化合物種類更多。值得注意的是，較高的溫度可能導(dǎo)致某些熱敏性物質(zhì)損失。

制備冬蟲夏草提取物最常用的溶劑是水。在使用水進(jìn)行提取時，不同的pH值條件仍然可能導(dǎo)致有差異的提取結(jié)果。才鳳等人[6]在研究冬蟲夏草超聲提取蛋白組分工藝時發(fā)現(xiàn)，溶媒為0.02 mol/L pH值7.4磷酸緩沖鹽溶液（PBS），料液比1∶50，提取15 min為最佳提取工藝。除了單獨使用水作為溶媒，還可以使用水-有機溶劑混合溶媒對冬蟲夏草進(jìn)行提取，楊淑華等人[7]在制備冬蟲夏草提取物時，除了用水浸取之外，還使用了水-甘油（V水∶V甘油=1.0∶21.5）混合溶液作為溶媒。此外，部分有機溶劑也可用來制備冬蟲夏草提取物，如使用乙醇作為溶媒可以得到總酚和總黃酮類小分子成分含量較高的提取物[8]。

1.2 提取物活性

1.2.1 抗腫瘤活性

在對冬蟲夏草的研究中，其抗腫瘤活性受到了廣泛關(guān)注。田野等人[9]以鮮冬蟲夏草為原料，通過粉碎、勻漿、超聲提取、離心、凍干等工序，在不同工藝參數(shù)下制備了提取物，并對提取物實際黑色素瘤B16細(xì)胞的抑制率進(jìn)行了測定。在最佳工藝參數(shù)條件下，提取物實際黑色素瘤B16細(xì)胞的抑制率達(dá)到72.80%。

1.2.2 抗HIV活性

朱瑩[10]對冬蟲夏草提取物的體外抗HIV活性進(jìn)行了研究。選取新鮮蟲體、新鮮子座、新鮮全草、干燥蟲體和干燥子座，其中新鮮材料采用凍干法制成凍干粉，5組樣品分別使用水在4℃下浸取、離心、凍干制備成提取物，并測定其體外抗HIV活性。結(jié)果表明，5組提取物具有良好的安全劑量范圍，新鮮樣本提取物具有一定的抗HIV-1作用，其中的活性成分可能為熱敏性物質(zhì)，容易在干制過程中損失。

1.2.3 抗氧化作用

陳佳等人[11]以鮮冬蟲夏草為原料，制備其水提物和醇提物，并進(jìn)一步采用萃取、吸附等工藝獲得了一系列提取物。在活性測試中，水提物的95%乙醇洗脫物體現(xiàn)出顯著的抗氧化活性和抑制醛糖還原酶活性。

1.2.4 抗衰及美白活性

陳曉娜等人[12]在80℃條件下依次使用蒸餾水及水-甘油混合物對干燥冬蟲夏草藥粉進(jìn)行提取，提取液經(jīng)濃縮離心后，上清液用甘油稀釋得到提取物，并對其進(jìn)行了抗衰活性測試。結(jié)果表明，該提取物能在一定程度上拮抗氧化應(yīng)激、增強皮膚彈性和促進(jìn)細(xì)胞新陳代謝，具有一定的抗衰功效。

2 活性成分

對冬蟲夏草及其提取物的諸多研究表明，冬蟲夏草中含有大量具有生物活性的物質(zhì)，在使用提取物時，受藥材本身質(zhì)量、提取工藝參數(shù)控制等因素影響，提取物質(zhì)量可能有所差異。此外，由于冬蟲夏草來源有限，大規(guī)模可持續(xù)的提取物生產(chǎn)受到限制。因此，進(jìn)一步對冬蟲夏草提取物進(jìn)行分離純化，確定其中的活性成分十分必要。

2.1 肽類物質(zhì)

Jia J M等人[13]從冬蟲夏草培養(yǎng)液中分離得到一種環(huán)二肽Cordycedipeptide A，通過活性測定，發(fā)現(xiàn)該化合物對小鼠成纖維L-929細(xì)胞、人體惡性黑色素瘤A375和人體宮頸癌Hela細(xì)胞具有細(xì)胞毒性。

漆偉[14]以冬蟲夏草干燥的子實體為原料，分離純化得到蟲草多肽，并使用糖尿病骨質(zhì)疏松大鼠模型對其治療骨質(zhì)疏松的效果進(jìn)行評價。結(jié)果表明，該蟲草多肽可以緩解相關(guān)癥狀，防止骨質(zhì)流失，降低體內(nèi)氧化劑活性，抑制骨吸收相關(guān)標(biāo)志物的表達(dá)。

2.2 蟲草多糖

多糖具有多種生理活性，蟲草多糖是冬蟲夏草中極其重要的成分。郭新銘等人[15]采用單因素水平對照法優(yōu)化提取條件，獲得蟲草粗多糖，并對其進(jìn)行抗氧化能力測試。結(jié)果表明，通過該法分離得到的蟲草多糖粗品自由基清除率接近維C，具有較好的抗氧化活性。趙彪希等人[16]以鮮冬蟲夏草為原料，經(jīng)脫脂、提取、沉淀、脫蛋白和透析獲得了蟲草粗多糖，活性測試發(fā)現(xiàn)其可顯著促進(jìn)RAW246.7巨噬細(xì)胞增殖和釋放NO、TNF-α，具有良好的免疫調(diào)節(jié)作用。

2.3 活性蛋白組分

任艷[17]采用液氮研磨冷提法對冬蟲夏草蛋白組分進(jìn)行提取，并進(jìn)一步進(jìn)行了蛋白分離。在體外細(xì)胞免疫活性測定結(jié)果中，發(fā)現(xiàn)冬蟲夏草蛋白組分對巨噬細(xì)胞分泌TNF-α、IL-1、IL-12因子整體呈雙向調(diào)節(jié)作用，認(rèn)為具有雙向調(diào)節(jié)的免疫作用。

3 結(jié)語

隨著研究的不斷深入，冬蟲夏草的潛力被不斷挖掘。目前，研究者已經(jīng)發(fā)現(xiàn)各種冬蟲夏草提取物的諸多生理活性。但大部分提取物成分仍比較復(fù)雜，受到藥材本身質(zhì)量及提取工藝的影響，提取物的質(zhì)量及活性要保持均一、穩(wěn)定有一定難度。因此，提取物的原料質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)、提取生產(chǎn)工藝和質(zhì)量控制方法均需要進(jìn)行科學(xué)的試驗和嚴(yán)謹(jǐn)?shù)恼撟C。

隨著分離純化手段的不斷發(fā)展，有望發(fā)現(xiàn)提取物中的有效成分。在對有效成分有充分認(rèn)知的基礎(chǔ)上，可以利用生物技術(shù)、化學(xué)工業(yè)等手段大量生產(chǎn)有效成分，降低有效成分的獲取成本，滿足大眾的需要。