血清核轉(zhuǎn)錄因子-κB及CD64診斷細(xì)菌性感染疾病的價值

田 宇, 馬夢影, 辛 娜, 曾 佳, 高 娟

(1. 西安醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院 檢驗(yàn)科, 陜西 西安, 710077; 2. 陜西省人民醫(yī)院 檢驗(yàn)科, 陜西 西安, 710000)

細(xì)菌感染是金黃色葡萄球菌、大腸桿菌等致病菌侵入血液循環(huán)中生長繁殖，產(chǎn)生毒素和其他代謝產(chǎn)物所引起的急性全身性感染，好發(fā)于老人、兒童、免疫力低下或有慢性疾病者，以寒戰(zhàn)、高熱、皮疹、關(guān)節(jié)痛為臨床特征，部分患者還可出現(xiàn)煩躁、四肢厥冷、呼吸加快、血壓下降等癥狀，治療不及時可發(fā)展為敗血癥或膿毒癥，嚴(yán)重者可導(dǎo)致死亡[1]。因此，準(zhǔn)確且及時的診斷對治療細(xì)菌感染性疾病具有重要的意義。目前，細(xì)菌培養(yǎng)仍然是診斷細(xì)菌感染的金標(biāo)準(zhǔn)，但病原微生物培養(yǎng)通常需要24 h以上才能獲取結(jié)果，所需時間較長，干擾因素較多且陽性率低，不能滿足臨床對細(xì)菌感染的快速診斷要求[2]。研究[3]報道，降鈣素原(PCT)、超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)等炎癥因子是診斷細(xì)菌感染的經(jīng)典指標(biāo)，但敏感性和特異性較低。核轉(zhuǎn)錄因子-κB(NF-κB)是一種極具潛力的調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)的轉(zhuǎn)錄因子，參與感染、炎癥、免疫反應(yīng)、細(xì)胞凋亡和腫瘤等病理過程，被認(rèn)為是連接慢性炎癥與腫瘤的橋梁[4]。CD64是免疫球蛋白G(IgG)的Fc受體之一，當(dāng)機(jī)體遭受細(xì)菌侵襲時, CD64在中性粒細(xì)胞表面大量表達(dá)，是診斷細(xì)菌性感染性疾病的重要指標(biāo)[5]。本研究探討血清NF-κB、外周血CD64診斷細(xì)菌性感染的效能，現(xiàn)將結(jié)果報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2018年2月—2020年2月接受治療的124例細(xì)菌性感染患者為研究組，均表現(xiàn)出感染相關(guān)癥狀或體征，經(jīng)白細(xì)胞分類、病原學(xué)及血清學(xué)檢查確診為細(xì)菌性感染，并排除不愿意接受調(diào)查者及嚴(yán)重器官功能障礙者。124例患者中，男57例，女67例，年齡32～81歲，平均(56.53±10.26)歲。另選取同期在醫(yī)院進(jìn)行體檢的78例健康人群為對照組，其中男45例，女33例，年齡30～78歲，平均(54.26±9.57)歲。2組患者性別、年齡等一般資料比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。

1.2 方法

1.2.1 血清NF-κB水平、CD64測定: 采集所有研究對象空腹靜脈血5 mL, 4 000 轉(zhuǎn)/min離心10 min, 收集上層血清，置于-80℃冰箱保存待測。采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測定血清NF-κB水平，試劑盒購自武漢博士德生物科技有限公司，試劑盒的檢測范圍為15 pg/mL至100 ng/mL, 嚴(yán)格按照ELISA試劑盒說明書進(jìn)行操作，本研究采用受試者工作特征(ROC)曲線分析確定的血清NF-κB水平臨界點(diǎn)在檢測范圍內(nèi)。采用流式細(xì)胞術(shù)檢測所有受試者外周血CD64。

1.2.2 重度細(xì)菌感染的判斷及分組[6]: 經(jīng)白細(xì)胞分類、病原學(xué)及血清學(xué)檢查確診為細(xì)菌性感染的患者出現(xiàn)嚴(yán)重脫水并表現(xiàn)出明顯的煩躁、嗜睡、面色蒼白、白細(xì)胞計數(shù)增高等癥狀定義為重度感染。本研究124例患者分為重度感染組52例和一般感染組72例。

1.2.3 資料收集: 收集細(xì)菌感染者的相關(guān)資料，包括性別、年齡、體質(zhì)量指數(shù)(BMI)、吸煙史、飲酒史、糖尿病、高脂血癥?；颊呷朐?8 h內(nèi)完成心率(HR)、空腹血糖(FBG)、血脂[總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)]、肌酐、尿酸(UA)、PCT、hs-CRP、血紅蛋白(Hb)、白細(xì)胞(WBC)等檢測。

1.3 統(tǒng)計學(xué)分析

2 結(jié) 果

2.1 研究組與對照組NF-κB、CD64比較

研究組NF-κB、CD64均高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01), 見表1。

表1 研究組與健康對照組NF-κB、CD64比較

2.2 NF-κB、CD64對細(xì)菌性感染的診斷價值

NF-κB、CD64單獨(dú)診斷細(xì)菌性感染的最佳臨界值分別為42.35 ng/mL、0.41%, ROC曲線的曲線下面積(AUC)分別為0.759(95%CI: 0.712～0.823)、0.796(95%CI: 0.732～0.846), 敏感度分別為86.54%、88.46%, 特異度分別為87.50%、88.89%; 二者聯(lián)合診斷的AUC為0.937(95%CI: 0.857～0.968)，敏感度、特異度分別為96.15%、95.83%。見表2、圖1。

表2 NF-κB、CD64對細(xì)菌性感染的診斷價值

2.3 細(xì)菌性感染患者發(fā)生重度感染的單因素分析

重度感染組與一般感染組患者在性別、年齡、BMI、吸煙史、飲酒史、糖尿病、高脂血癥、收縮壓(SBP)≥120 mmHg、舒張壓(DBP)≥90 mmHg、HR≥70次/min、FBG≥6.1 mmol/L、TC≥5.7 mmol/L、TG≥1.7 mmol/L、HDL-C≤1.2 mmol/L、LDL-C≥4.1 mmol/L、肌酐≥106 μmol/L、UA≥420 μmol/L等方面比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05); 重度感染組體溫≥38 ℃、PCT≥0.08 μg/L、hs-CRP≥26 mg/L、Hb≤120 g/L、NF-κB≥42.35 ng/mL、WBC≥10×109、CD64≥0.41%患者比率均高于一般感染組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表3。

2.4 影響細(xì)菌性感染患者發(fā)生重度感染的Logistic回歸分析

將發(fā)生重度感染作為自變量，將單因素分析有統(tǒng)計學(xué)意義的指標(biāo)作為因變量，進(jìn)行Logistic回歸分析，結(jié)果顯示, NF-κB≥42.35 ng/mL、CD64≥0.41%是發(fā)生重度感染的獨(dú)立危險因素(P<0.05)。見表4。

3 討 論

感染性疾病包括細(xì)菌感染、真菌感染和病毒感染，屬于臨床常見且易誤診的疾病，其中細(xì)菌性感染是臨床中較常見的類型。近年來，條件致病菌感染以及抗生素濫用導(dǎo)致了耐藥菌的產(chǎn)生，細(xì)菌性感染發(fā)病率呈升高趨勢[7]。引起細(xì)菌性感染的細(xì)菌種類較多，且早期臨床癥狀具有不典型性和多樣性，可導(dǎo)致診斷難度增加，延誤治療時機(jī)，影響治療效果與預(yù)后。目前，臨床上對于細(xì)菌感染的常用診斷指標(biāo)是PCT、白細(xì)胞介素-6及hs-CRP等，但這些指標(biāo)在鑒別不同程度細(xì)菌性感染人群時靈敏度不高[8]。本研究多因素分析發(fā)現(xiàn), PCT、hs-CRP與重度感染無相關(guān)性。

本研究中，研究組NF-κB、CD64均顯著高于對照組，提示細(xì)菌性感染者NF-κB、CD64異常。

表3 細(xì)菌性感染患者發(fā)生重度感染的單因素分析[n(%)]

表4 影響細(xì)菌性感染患者發(fā)生重度感染的Logistic回歸分析

NF-κB是近年來發(fā)現(xiàn)的一種重要的細(xì)胞核轉(zhuǎn)錄因子，具有普遍的生物活性，在細(xì)胞因子誘導(dǎo)的基因表達(dá)中起重要的調(diào)控作用，不僅可以調(diào)控免疫細(xì)胞的激活, T淋巴細(xì)胞、B淋巴細(xì)胞的發(fā)育，還廣泛參與機(jī)體的應(yīng)激反應(yīng)和炎癥反應(yīng)[9]。NF-κB廣泛存在于機(jī)體各種組織細(xì)胞中，未受刺激前表現(xiàn)為失活狀態(tài)，受到刺激后胞質(zhì)內(nèi)NF-κB與抑制蛋白IK-BS分離并活化，進(jìn)入細(xì)胞核內(nèi)與靶基因啟動子內(nèi)的NF-κB位點(diǎn)結(jié)合并進(jìn)行靶基因轉(zhuǎn)錄，促使各類細(xì)胞因子及生長因子生成，誘發(fā)炎癥反應(yīng)釋放白細(xì)胞介素-1、白細(xì)胞介素-6、腫瘤壞死因子等炎癥細(xì)胞因子，參與感染性疾病的發(fā)生發(fā)展[10]。王智英等[11]探討了臍血NF-κB及髓磷脂堿性蛋白檢測對早產(chǎn)兒腦白質(zhì)損傷的早期診斷價值及其與預(yù)后的關(guān)系，發(fā)現(xiàn)腦白質(zhì)損傷早產(chǎn)兒NF-κB水平顯著升高，且隨著病情程度的加重, NF-κB水平越高。李靜[12]對血清IL-16、NF-κB及糖類抗原125(CA125)檢測在子宮內(nèi)膜異位癥診斷中的臨床意義進(jìn)行了分析，結(jié)果顯示子宮內(nèi)膜異位癥的病情越嚴(yán)重，則血清NF-κB的表達(dá)越高，且診斷價值較好。

CD64是免疫球蛋白家族成員之一，屬于Fc受體和IgG高親和受體，其表達(dá)同時受細(xì)胞因子的調(diào)節(jié)，正常生理情況下, CD64主要分布在外周靜脈血中的單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞等抗原呈遞細(xì)胞表面，通常在中性粒細(xì)胞表面表達(dá)較低，當(dāng)其受到粒細(xì)胞集落刺激因子等刺激時會大量表達(dá)，并在CD64分子與其配體結(jié)合后，可啟動并放大免疫反應(yīng)，參與感染性疾病的發(fā)生發(fā)展[13]。董玉俊[14]研究發(fā)現(xiàn)中性粒細(xì)胞CD64對肝癌患者化療后細(xì)菌感染的診斷價值較高。研究[15-16]表明，中性粒細(xì)胞表面分子CD64的表達(dá)有利于判斷感染嚴(yán)重程度，可作為早期診斷新生兒敗血癥及評價病情預(yù)后的指標(biāo)。本研究結(jié)果顯示，重度感染組血清CD64水平顯著高于一般感染組，與李觀華等[17]研究結(jié)果一致，說明中性粒細(xì)胞CD64表達(dá)可作為細(xì)菌感染性疾病的診斷及病情判斷的可靠指標(biāo)。然而, CD64除了在細(xì)菌性感染時表達(dá)可迅速升高，在病毒感染時也會升高，故需聯(lián)合其他指標(biāo)以提高其診斷準(zhǔn)確性[18]。ROC曲線分析結(jié)果顯示，血清NF-κB與CD64聯(lián)合診斷細(xì)菌性感染的敏感度及特異度更高; 單因素分析結(jié)果顯示，重度感染組體溫≥38 ℃、PCT≥0.08 μg/L、hs-CRP≥26 mg/L、Hb≤120 g/L、NF-κB≥42.35 ng/mL、WBC≥10×109、CD64≥0.41%患者比率均顯著高于一般感染組; 多因素Logistic回歸分析結(jié)果顯示, NF-κB≥42.35 ng/mL、CD64≥0.41%是導(dǎo)致重度感染的獨(dú)立危險因素，表明NF-κB、CD64與細(xì)菌性感染關(guān)系密切。

綜上所述，NF-κB、CD64有助于細(xì)菌性感染者的診斷及病情判斷，或可作為細(xì)菌感染性疾病診斷與治療的篩查指標(biāo)。