• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    藏黨參提取物對(duì)酵母膏聯(lián)合氧嗪酸鉀致高尿酸血癥小鼠的保護(hù)作用研究*

    2022-11-11 06:00:02袁瑞瑛王敏竹范成德卓瑪東智王聚樂
    中醫(yī)藥導(dǎo)報(bào) 2022年10期
    關(guān)鍵詞:別嘌醇黨參尿酸

    袁瑞瑛,普 珍,王敏竹,范成德,李 斌,卓瑪東智,王聚樂

    (1.西藏大學(xué),西藏 拉薩 850012;2.武漢大學(xué),湖北 武漢 430072;3.青島科技大學(xué),山東 青島 266042)

    人體嘌呤代謝失調(diào)導(dǎo)致尿酸過量生成,或由于尿酸排泄受到抑制,可引起血清尿酸含量急劇升高。當(dāng)男性血尿酸濃度超過417 μmol/L,女性超過357 μmol/L時(shí),則被認(rèn)定為高尿酸血癥(hyperuricemia,HUA)[1]。流行病學(xué)研究表明,HUA發(fā)病率逐年上升,并伴隨糖尿病、高脂血癥、原發(fā)性高血壓及心血管疾病等慢性疾病的發(fā)生,已成為嚴(yán)重危害社會(huì)居民健康的代謝性疾病之一[2-4]。目前,治療HUA的藥物多為西藥,如別嘌醇、丙磺舒和苯溴馬隆,但長(zhǎng)期服用副作用較大,血尿酸水平易反彈,甚至損傷肝臟、腎臟等器官[5-6]。近年來,傳統(tǒng)藥物因藥效溫和、多成分、多靶點(diǎn)、多途徑作用等特點(diǎn),廣泛受到國(guó)內(nèi)外學(xué)者的重視,已成為開發(fā)治療HUA新藥的主要來源之一[7]。

    藏黨參為桔梗科植物長(zhǎng)花黨參[Codonopsis thalictrifolia Wall.var.mollis(Chipp.)L.T.Shen]的全草,藏藥名為羅堆多吉、魯堆多吉。藏黨參生長(zhǎng)于我國(guó)西藏南部及中部,具有干黃水、消腫之功效,在當(dāng)?shù)爻S糜谥委燂L(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、神經(jīng)痛、神經(jīng)麻痹等病癥[8-11]。孫杰等[12]研究發(fā)現(xiàn),在體外實(shí)驗(yàn)中藏黨參提取物及其單體成分均有抑制黃嘌呤氧化酶(XOD)的作用,并表現(xiàn)出良好的量效關(guān)系,表明藏黨參具有降血尿酸的作用,其機(jī)制可能為抑制嘌呤核苷酸代謝。然而,目前筆者未見有關(guān)于藏黨參體內(nèi)抗高尿酸的研究,因此本實(shí)驗(yàn)通過建立酵母膏聯(lián)合氧嗪酸鉀誘導(dǎo)的高尿酸血癥小鼠模型,進(jìn)一步評(píng)估藏黨參提取物的降尿酸作用。

    1 材料與方法

    1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物4周齡SPF級(jí)雄性昆明種小鼠60只,體質(zhì)量18~20 g,購(gòu)于湖北省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究中心,動(dòng)物生產(chǎn)許可證號(hào):SCXK(鄂)2015-0018,飼養(yǎng)于武漢大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心,動(dòng)物使用許可證號(hào):SYXK(鄂)2019-0013。將小鼠飼養(yǎng)于清潔級(jí)動(dòng)物房,室溫控制在(22±2)℃,相對(duì)濕度為50%~70%,12 h/12 h光照晝夜循環(huán),所有小鼠均自由攝食與飲水。適應(yīng)性喂養(yǎng)1周,觀察小鼠身體狀況良好,行為正常。所有動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作均符合國(guó)家《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理?xiàng)l例》,并經(jīng)武漢大學(xué)醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理與使用委員會(huì)批準(zhǔn)。

    1.2 藥物與試劑 藏黨參采集于西藏林芝地區(qū),經(jīng)西藏大學(xué)王聚樂教授鑒定為正品。將干燥的藏黨參地上部分進(jìn)行粉碎,與70%乙醇按質(zhì)量比1∶20混合后加熱至微沸,回流提取2 h,過濾;濾渣與70%乙醇按照相同比例繼續(xù)提取2 h。合并兩次濾液,減壓濃縮至浸膏,置于烘箱中烘干至粉末,得率為19.5%,用蒸餾水溶解,得不同濃度的藏黨參提取物。

    氧嗪酸鉀(批號(hào):20190427,純度≥98%)購(gòu)于合肥博美生物科技有限責(zé)任公司;別嘌醇片(批號(hào):20190101)購(gòu)于廣東彼迪藥業(yè)有限公司;酵母膏(批號(hào):20190318,純度≥98%)購(gòu)于北京奧博星生物技術(shù)責(zé)任有限公司;尿酸檢測(cè)試劑盒(UA)(批號(hào):20191023)、肌酐檢測(cè)試劑盒(Cr)(批號(hào):20191023)、尿素氮檢測(cè)試劑盒(UN)(批號(hào):20191023)、黃嘌呤氧化酶檢測(cè)試劑盒(XOD)(批號(hào):20191117)、谷草轉(zhuǎn)氨酶檢測(cè)試劑盒(AST)(批號(hào):20191117)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶檢測(cè)試劑盒(ALT)(批號(hào):20191117)均購(gòu)于南京建成生物工程研究所;Bradford蛋白濃度測(cè)定試劑盒(批號(hào):20210609)、RIPA裂解液(批號(hào):20200917)均購(gòu)于北京索萊寶生物科技有限公司;葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白9兔單克隆抗體(GLUT9)(批號(hào):GR3189763-16)購(gòu)于美國(guó)Abcam公司;有機(jī)陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白3小鼠單克隆抗體(OAT3)(批號(hào):A0719)購(gòu)于美國(guó)Santa Cruz公司;尿酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1兔單克隆抗體(URAT1)(批號(hào):16i9411)、有機(jī)陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1兔單克隆抗體(OAT1)(批號(hào):DF8582)、辣根過氧化物酶標(biāo)記的山羊抗小鼠IgG二抗(批號(hào):4358j982)、山羊抗兔IgG二抗(批號(hào):7573s21)均購(gòu)于美國(guó)Affinity公司;其余試劑均為分析純。

    1.3 主要儀器AS110R2型分析天平(波蘭Radwag公司);ELX800型多功能酶標(biāo)儀(美國(guó)Bio-Tek公司);Mini P-4型小型垂直電泳系統(tǒng)(北京凱元信瑞儀器有限公司);Tanon-4600型化學(xué)發(fā)光成像儀(上海天能科技有限公司);TDZ5-WS型冷凍離心機(jī)(湖南湘儀實(shí)驗(yàn)室儀器開發(fā)有限公司)。

    1.4 造模與分組 將60只小鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)1周后,按隨機(jī)數(shù)字表法隨機(jī)分為空白組、模型組、藏黨參提取物低劑量組、藏黨參提取物中劑量組、藏黨參提取物高劑量組、別嘌醇組,每組10只。除空白組外,其余小鼠每日08∶00∶00灌胃給予酵母膏(30 g/kg),15∶00∶00灌胃給藥,持續(xù)14 d。末次給藥后,取24 h尿液,后禁食12 h,測(cè)量小鼠體質(zhì)量,腹腔注射氧嗪酸鉀(300 mg/kg),間隔1 h后摘眼球取血并脫頸處死。

    1.5 實(shí)驗(yàn)給藥 依據(jù)《部頒藏藥標(biāo)準(zhǔn)》中藏黨參臨床劑量3 g/d為低劑量組,中、高劑量以此加倍,通過人鼠劑量換算公式“小鼠劑量(g/kg)=人體用量(g)/70 kg×9.1”計(jì)算得每天藏黨參提取物低劑量為76 mg/kg(相當(dāng)于生藥量390 mg/kg),中劑量為152 mg/kg,高劑量為304 mg/kg,別嘌醇劑量為5 mg/kg(相當(dāng)于人38.46mg/kg),造模與給藥同時(shí)進(jìn)行,1次/d,持續(xù)14d。

    1.6 觀察指標(biāo)

    1.6.1 臟器指數(shù)、血清與尿液指標(biāo)測(cè)定 將小鼠摘眼球取血,收集的血樣靜置30 min后,在4℃下3 500 r/min離心15 min,分離血清,試劑盒檢測(cè)血清中尿酸含量,模型組大鼠血清尿酸水平明顯高于空白組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),即為造模成功[13]。解剖小鼠,取肝臟、腎臟樣本,生理鹽水洗凈,濾紙吸干稱肝臟與腎臟質(zhì)量,計(jì)算臟器指數(shù)(臟器指數(shù)=臟器質(zhì)量/體質(zhì)量×100%);試劑盒測(cè)定血尿酸(SUA)、血肌酐(SCr)、血尿素氮(BUN)、尿尿酸(UUA)、尿肌酐(UCr)、尿尿素氮(UUN)及血清中AST、ALT、XOD水平,并測(cè)定尿酸排泄分?jǐn)?shù)(FEUA)。FEUA=[(尿尿酸×血肌酐)/(血尿酸×尿肌酐)]×100%。肝臟XOD活性測(cè)定:取小鼠肝臟,在冰水浴中制成10%肝組織勻漿(組織質(zhì)量與生理鹽水體積比為1∶9),離心收集上清液,按試劑盒說明書測(cè)定肝臟XOD活性。

    1.6.2 尿酸轉(zhuǎn)運(yùn)體蛋白表達(dá)測(cè)定 取各組小鼠腎臟部位,并將其剪碎,按每100 mg組織加入1 mL裂解液(RIPA裂解液與PMSF按體積比100∶1配制),研磨成勻漿,于冰上裂解30 min,4℃下15 000 r/min離心20 min,取上清液,用BCA法進(jìn)行蛋白定量,按上樣量計(jì)算,加入4倍上樣緩沖液,混勻,金屬浴95℃加熱5 min。定量后的蛋白樣品上樣40 μg,10% SDS-PAGE分離膠電泳分離,電泳結(jié)束后轉(zhuǎn)膜,將膠上蛋白轉(zhuǎn)至PVDF膜,室溫下封閉于5%脫脂奶粉封閉液中2 h。孵育相關(guān)一抗(1∶1 000)2 h,再以HRP標(biāo)記相應(yīng)二抗(1∶5 000)孵育1 h。ECL顯色后利用成像儀成像,使用軟件Image J_v1.8.0分析URAT1、GLUR9、OAT1、OAT3條帶灰度值。

    1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用統(tǒng)計(jì)軟件SPSS 22.0進(jìn)行數(shù)據(jù)處理,計(jì)量資料以“均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差”(±s)表示,經(jīng)正態(tài)性檢驗(yàn)和方差齊性分析,多組比較采用單因素方差分析,兩兩比較采用LSD-t檢驗(yàn)。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

    2 結(jié) 果

    2.1 各組小鼠肝臟指數(shù)、腎臟指數(shù)比較 與空白組比較,模型組小鼠肝臟指數(shù)明顯升高(P<0.01);與模型組比較,藏黨參提取物高劑量組和別嘌醇組小鼠肝臟指數(shù)均明顯降低(P<0.05),且藏黨參提取物高劑量組小鼠肝臟指數(shù)與別嘌醇組比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);藏黨參提取物低、中劑量組小鼠肝臟指數(shù)與模型組比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。各組小鼠腎臟指數(shù)比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。(見表1)

    表1 各組小鼠肝臟指數(shù)、腎臟指數(shù)比較 (±s,%)

    表1 各組小鼠肝臟指數(shù)、腎臟指數(shù)比較 (±s,%)

    注:與空白組比較,aP<0.05,bP<0.01;與模型組比較,cP<0.05;與別嘌醇組比較,eP<0.05

    組別 動(dòng)物數(shù)(只)給藥劑量(mg/kg)肝臟指數(shù) 腎臟指數(shù)空白組 10 - 3.41±0.10 0.96±0.06模型組 10 - 3.72±0.22b 1.01±0.07藏黨參提取物低劑量組10 76 3.62±0.21be 1.03±0.07藏黨參提取物中劑量組10 152 3.51±0.19a 1.03±0.09藏黨參提取物高劑量組10 304 3.42±0.21c 1.03±0.09別嘌醇組 10 5 3.40±0.27c 0.98±0.08 F 47.931 0.253 P 0.000 0.895

    2.2 各組小鼠血清ALT、AST水平比較 與空白組比較,模型組小鼠血清中ALT、AST水平均明顯升高(P<0.01);與模型組比較,藏黨參提取物高劑量組和別嘌醇組小鼠血清中ALT、AST水平均明顯降低(P<0.05或P<0.01);與模型組比較,藏黨參提取物中劑量組小鼠血清中AST水平明顯降低(P<0.05),ALT水平與模型組比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);藏黨參提取物低劑量組小鼠血清中ALT、AST水平與模型組比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);藏黨參提取物高劑量組小鼠血清中ALT、AST水平與別嘌醇組比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。(見表2)

    表2 各組小鼠血清ALT、AST水平比較 (±s,U/L)

    表2 各組小鼠血清ALT、AST水平比較 (±s,U/L)

    注:與空白組比較,aP<0.05,bP<0.01;與模型組比較,cP<0.05,dP<0.01;與別嘌醇組比較,eP<0.05

    組別 動(dòng)物數(shù)(只)給藥劑量(mg/kg)ALT AST空白組 10 - 26.55±1.59 106.27±2.84模型組 10 - 34.23±1.53b 129.91±7.81b藏黨參提取物低劑量組10 76 34.60±1.76b e 129.96±5.15b e藏黨參提取物中劑量組10 152 32.76±0.99a 123.11±6.55a c藏黨參提取物高劑量組10 304 30.46±1.29a d 115.19±5.65a d別嘌醇組 10 5 31.49±1.76a d 119.45±3.62a c F 232.384 63.206 P 0.000 0.001

    2.3 各組小鼠XOD活性比較 與空白組比較,模型組小鼠血清及肝臟中XOD活性均明顯升高(P<0.01);與模型組比較,藏黨參提取物中、高劑量組和別嘌醇組小鼠血清及肝臟中XOD活性均明顯降低(P<0.01或P<0.05);藏黨參提取物低劑量組小鼠血清及肝臟中XOD活性與模型組比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);藏黨參提取物高劑量組小鼠血清及肝臟中XOD活性與別嘌醇組比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。(見表3)

    表3 各組小鼠XOD活性比較 (±s)

    表3 各組小鼠XOD活性比較 (±s)

    注:與空白組比較,aP<0.05,bP<0.01;與模型組比較,cP<0.05,dP<0.01;與別嘌醇組比較,eP<0.05,fP<0.01

    組別 動(dòng)物數(shù)(只)給藥劑量(mg/kg)血清中XOD活性(U/L)肝臟中XOD活性(U/g)空白組 10 - 14.47±2.58 83.19±6.18模型組 10 - 29.49±3.03b 133.31±10.49b藏黨參提取物低劑量組 10 76 27.66±2.11b f 150.83±19.21b f藏黨參提取物中劑量組 10 152 24.19±2.41b c e 109.25±9.76b c e藏黨參提取物高劑量組 10 304 17.14±1.65d 100.63±8.62a d別嘌醇組 10 5 17.55±1.43d 94.34±7.27a d F 73.904 55.772 P 0.003 0.000

    2.4 各組小鼠血液和尿液中尿酸、肌酐和尿素氮水平比較 與空白組比較,模型組小鼠SUA、SCr、BUN水平均明顯升高(P<0.01),UUA、UCr、UUN水平均明顯降低(P<0.01);與模型組比較,別嘌醇組、藏黨參提取物高劑量組小鼠SUA、SCr、BUN水平均明顯降低(P<0.01),UUA、UCr、UUN水平均明顯升高(P<0.01);與模型組比較,藏黨參提取物中劑量組小鼠UUA、UCr、UUN水平均明顯升高(P<0.05),SUA水平明顯降低(P<0.05);藏黨參提取物高劑量組小鼠SUA、BUN、UCr和UUN水平與空白組比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);藏黨參提取物低劑量組小鼠SUA、SCr、BUN、UUA、UCr、UUN水平與模型組比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。(見表4)

    表4 各組小鼠血液和尿液中尿酸、肌酐和尿素氮水平比較 (±s)

    表4 各組小鼠血液和尿液中尿酸、肌酐和尿素氮水平比較 (±s)

    注:與空白組比較,aP<0.05,bP<0.01;與模型組比較,cP<0.05,dP<0.01;與別嘌醇組比較,eP<0.05,fP<0.01

    組別 動(dòng)物數(shù)(只) 給藥劑量(mg/kg)SUA(mmol/L)SCr(μmol/L)BUN(mmol/L)UUA(μmol/L) UCr(μmol/L)UUN(mmol/L)空白組 10 - 76.35±4.02 24.33±2.35 5.67±0.76 232.17±22.81 234.41±18.78 1 159.06±102.58模型組 10 - 132.87±10.8b 35.01±2.31b 9.54±1.35b 179.89±14.38b 198.04±19.94b 632.87±21.53b藏黨參提取物低劑量組 10 76 134.30±9.24bf 35.52±2.66bf 9.52±0.88bf 174.63±9.64bf 204.62±22.32bf 645.14±33.41bf藏黨參提取物中劑量組 10 152 115.83±12.7bce 33.69±2.61ae 8.14±0.76b 191.20±13.85ac 223.23±8.45ac 749.61±39.41bce藏黨參提取物高劑量組 10 304 91.40±9.78ad 26.66±3.22d 6.54±0.54ad 211.97±9.43d 251.17±26.78ade 969.83±46.89ade別嘌醇組 10 5 81.46±6.16ad 27.26±3.55ad 7.37±0.79ad 197.61±11.96ad 232.36±20.23d 861.03±77.83ad F 36.368 243.183 117.264 21.782 538.286 446.914 P 0.000 0.000 0.002 0.000 0.001 0.000

    2.5 各組小鼠FEUA比較 與空白組比較,模型組小鼠FEUA值明顯降低(P<0.01);與模型組比較,別嘌醇組和藏黨參提取物高、中劑量組小鼠FEUA值均明顯升高(P<0.05或P<0.01);藏黨參提取物低劑量組小鼠FEUA值與模型組比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。(見表5)

    表5 各組小鼠FEUA比較 (±s,%)

    表5 各組小鼠FEUA比較 (±s,%)

    注:與空白組比較,aP<0.05,bP<0.01;與模型組比較,cP<0.05,dP<0.01;與別嘌醇組比較,eP<0.05,fP<0.01

    組別 動(dòng)物數(shù)(只)給藥劑量(mg/kg)FEUA空白組 10 - 31.56±2.41模型組 10 - 23.93±3.14b藏黨參提取物低劑量組10 76 22.57±2.17bf藏黨參提取物中劑量組10 152 27.25±2.21a c藏黨參提取物高劑量組10 304 32.61±2.06d別嘌醇組 10 5 28.46±2.71a d F 275.194 P 0.000

    2.6 各組小鼠尿酸轉(zhuǎn)運(yùn)體蛋白表達(dá)比較 與空白組比較,模型組小鼠腎臟尿酸轉(zhuǎn)運(yùn)體蛋白表達(dá)異常,其中URAT1和GLUT9蛋白表達(dá)均明顯升高(P<0.01),而OAT1、OAT3蛋白表達(dá)均明顯降低(P<0.01或P<0.05);與模型組比較,藏黨參提取物中劑量組URAT1和GLUT9蛋白表達(dá)水平均明顯降低(P<0.01或P<0.05),OAT1和OAT3蛋白表達(dá)水平均明顯升高(P<0.01或P<0.05);與模型組比較,藏黨參提取物高劑量組與別嘌醇組URAT1、GLUT9、OAT1和OAT蛋白表達(dá)均有明顯改善(P<0.01);藏黨參提取物低劑量組OAT3蛋白表達(dá)高于模型組(P<0.05),URAT1、GLUT9、OAT1蛋白表達(dá)與模型組比較,差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。(見圖1、表6)

    圖1 各組小鼠尿酸轉(zhuǎn)運(yùn)體蛋白表達(dá)的Westem blotting圖

    表6 各組小鼠尿酸轉(zhuǎn)運(yùn)體蛋白相對(duì)表達(dá)量比較 (±s,%)

    表6 各組小鼠尿酸轉(zhuǎn)運(yùn)體蛋白相對(duì)表達(dá)量比較 (±s,%)

    注:與空白組比較,aP<0.05,bP<0.01;與模型組比較,cP<0.05,dP<0.01;與別嘌醇組比較,eP<0.05,fP<0.01

    組別 動(dòng)物數(shù)(只)給藥劑量(mg/kg)URAT1 GLUR9 OAT1 OAT3空白組 10 - 100.00±4.59 100.00±8.71 100.00±6.23 100.00±5.83模型組 10 - 226.81±14.92b 183.28±10.66b 43.81±8.71b 73.44±10.57a藏黨參提取物低劑量組10 76 237.91±10.89bf 197.67±15.24bf 51.27±8.29be 83.22±8.55c藏黨參提取物中劑量組10 152 89.29±6.88d 147.39±8.77bce 119.29±9.44d 94.38±6.63c藏黨參提取物高劑量組10 304 81.48±6.78d 135.75±6.29ade 96.38±6.39d 115.93±7.63d別嘌醇組 10 5 93.29±7.91d 90.19±7.28d 93.88±6.72d 105.29±6.55d F 362.292 16.532 58.394 374.776 P 0.000 0.002 0.000 0.000

    3 討 論

    根據(jù)發(fā)病機(jī)制的不同,高尿酸血癥可分為原發(fā)性高尿酸血癥和繼發(fā)性高尿酸血癥,前者屬于遺傳性疾病,后者可由多種因素引起(如腎功能異常和藥物過度刺激等)[14-15]。目前,越來越多的證據(jù)顯示,飲食結(jié)構(gòu)的改變大大增加了高尿酸血癥的發(fā)病率,并呈現(xiàn)低齡化趨勢(shì)[16-17]。如畜肉類、水產(chǎn)品和豆類等富含嘌呤類食物的高攝入,大大增加了尿酸在體內(nèi)的代謝生成,從而加重腎臟的排泄負(fù)擔(dān)甚至誘發(fā)腎臟損傷[18]。酵母膏作為尿酸前體物質(zhì),可增加體內(nèi)尿酸生成;此方法模擬人們?nèi)粘o嬍持械泥堰矢邤z入,而同時(shí)氧嗪酸鉀作為尿酸酶抑制劑,能有效阻止尿酸的排泄,從而在體內(nèi)建立高尿酸環(huán)境。因此,本實(shí)驗(yàn)采用酵母膏聯(lián)合氧嗪酸鉀誘導(dǎo)小鼠高尿酸血癥模型。此方法操作簡(jiǎn)便,成功率高、穩(wěn)定性好,已廣泛適用于抗高尿酸血癥的藥物篩選評(píng)價(jià)及機(jī)制研究[19]。

    腎臟是機(jī)體排泄的主要器官,體內(nèi)約2/3的游離尿酸由腎臟排泄。而一旦腎臟功能出現(xiàn)異常,則會(huì)引起肌酐清除率和濾過功能下降;尿酸排泄率隨之下降,易導(dǎo)致HUA的發(fā)生[20]。SUA水平是評(píng)估高尿酸血癥最直接的指標(biāo)[21]。本實(shí)驗(yàn)中,與空白組比較,模型組小鼠SUA水平大幅升高,UUA水平明顯降低,這說明酵母膏聯(lián)合氧嗪酸鉀誘導(dǎo)小鼠高尿酸血癥模型建立成功。同時(shí),肌酐及尿素氮水平也是評(píng)價(jià)腎臟濾過功能的主要指標(biāo)。模型組小鼠SCr及BUN水平明顯升高,且UCr和UUN水平明顯降低,這說明酵母膏與氧嗪酸鉀的聯(lián)合誘導(dǎo)致使腎臟功能異常。而實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,藏黨參提取物能以劑量依賴性的方式有效恢復(fù)血液及尿液中尿酸、肌酐及尿素氮含量至正常水平。

    肝臟為嘌呤核苷酸合成反應(yīng)的主要器官。XOD為嘌呤代謝的限速酶,是調(diào)控尿酸必不可少的環(huán)節(jié)之一。黃嘌呤與次黃嘌呤經(jīng)過XOD的二次氧化進(jìn)而生成尿酸,呈現(xiàn)高尿酸血癥的癥狀,其活性檢測(cè)可反映尿酸的生成狀況[22]。與空白組比較,模型組小鼠肝臟XOD活性明顯升高,而藏黨參提取物顯著抑制了XOD活性,這與孫杰等[12]研究一致,即藏黨參提取物成分中可能含有XOD的抑制劑,通過抑制XOD的活性而減少嘌呤的代謝及尿酸的生成,最終改善高尿酸血癥。ALT與AST是評(píng)估肝臟損傷的重要指標(biāo)。肝細(xì)胞受到損傷,胞質(zhì)中的AST與ALT進(jìn)入血液,引起血液中含量增加[23],而藏黨參提取物有效降低了血清中ALT與AST水平;另外,與空白組比較,模型組小鼠肝臟指數(shù)明顯升高,表明其肝臟可能由于代謝大量嘌呤產(chǎn)物而受到損傷,從而引起肝臟水腫,因此肝臟指數(shù)上升。結(jié)合以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,藏黨參對(duì)酵母膏聯(lián)合氧嗪酸鉀引起的肝臟損傷具有一定的保護(hù)作用。

    除了評(píng)價(jià)藏黨參提取物降血尿酸水平和抑制XOD活性的作用,本研究還探討了其對(duì)腎臟尿酸轉(zhuǎn)運(yùn)體的影響。腎臟中的多種尿酸轉(zhuǎn)運(yùn)體共同維持著尿酸水平的動(dòng)態(tài)平衡[24-25]。URAT1作為尿酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)的主要蛋白之一,其功能主要為介導(dǎo)尿酸與近曲小管上皮細(xì)胞內(nèi)無機(jī)陰離子和有機(jī)陰離子的交換,從而將尿酸從管腔內(nèi)重吸收入細(xì)胞[26]。GLUT9是葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白家族的一員,其功能是將吸收到腎小球上皮細(xì)胞的尿酸轉(zhuǎn)運(yùn)到腎間質(zhì),參與近曲小管頂膜尿酸鹽的再吸收[27]。OAT1和OAT3是重要的尿酸轉(zhuǎn)運(yùn)體[28],其表達(dá)主要分布于腎臟。如OAT1和OAT3以α-酮戊二酸作為腎臟的交換底物,將有機(jī)陰離子和藥物泵入細(xì)胞,而OAT1主要介導(dǎo)尿酸的轉(zhuǎn)運(yùn)。OAT3的主要功能是通過基膜將有機(jī)陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)到近曲小管上皮細(xì)胞,并排泄到尿液中[29]。URAT1、GLUT9、OAT1和OAT3等轉(zhuǎn)運(yùn)體在腎臟共同介導(dǎo)尿酸鹽的轉(zhuǎn)運(yùn),維持體內(nèi)尿酸水平的穩(wěn)定[30]。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,模型組小鼠URAT1和GLUT9蛋白表達(dá)明顯升高,而OAT1和OAT3的蛋白表達(dá)明顯降低。藏黨參提取物能有效恢復(fù)上述轉(zhuǎn)運(yùn)體的表達(dá)水平,進(jìn)而調(diào)節(jié)血液中尿酸的水平,促進(jìn)尿酸排泄。

    綜上所述,藏黨參提取物可有效改善HUA小鼠的高血尿酸水平,而潛在機(jī)制或許不僅僅是通過抑制肝臟XOD的活性,同時(shí)也可能通過恢復(fù)相關(guān)尿酸轉(zhuǎn)運(yùn)體表達(dá)異常而起到保護(hù)作用。因此,藏黨參作為一種預(yù)防和治療高尿酸血癥的傳統(tǒng)藥物,具有進(jìn)一步研究與開發(fā)的價(jià)值。然而,本研究在藥物研究層面與深度上仍然有限,關(guān)于藏黨參的活性成分和具體分子機(jī)制還需要進(jìn)一步的研究與探討。

    猜你喜歡
    別嘌醇黨參尿酸
    喝茶能降尿酸嗎?
    茶道(2022年3期)2022-04-27 00:15:46
    芒果苷元對(duì)尿酸性腎病大鼠尿酸排泄指標(biāo)的影響
    尿酸真的能殺死泰國(guó)足療小魚嗎
    Anticancer Properties of Lobetyolin, an Essential Component of Radix Codonopsis (Dangshen)
    降尿酸——我是不是吃了假藥?
    復(fù)方黨參口服液免疫增強(qiáng)作用的配伍相關(guān)性
    中成藥(2018年4期)2018-04-26 07:12:58
    黨參中二氧化硫殘留量的測(cè)定
    中成藥(2018年1期)2018-02-02 07:20:31
    HPLC法同時(shí)測(cè)定黨參固本丸中7種成分
    中成藥(2017年10期)2017-11-16 00:50:06
    別嘌醇不良反應(yīng)分析
    非布司他治療痛風(fēng)的臨床效果研究
    国产精品九九99| 制服人妻中文乱码| 午夜日韩欧美国产| 建设人人有责人人尽责人人享有的| 久久久久久免费高清国产稀缺| 国产亚洲一区二区精品| 久久久精品区二区三区| 激情视频va一区二区三区| 热re99久久精品国产66热6| 欧美+亚洲+日韩+国产| 国产精品影院久久| 亚洲美女黄片视频| 国产主播在线观看一区二区| 国产精品久久电影中文字幕 | 精品熟女少妇八av免费久了| 亚洲欧美日韩高清在线视频 | 99香蕉大伊视频| 国产高清国产精品国产三级| 一二三四在线观看免费中文在| 欧美+亚洲+日韩+国产| 亚洲精品美女久久av网站| 天天操日日干夜夜撸| 国产精品亚洲av一区麻豆| 一区二区三区国产精品乱码| 午夜视频精品福利| 五月开心婷婷网| 两性夫妻黄色片| 高清在线国产一区| 亚洲精品成人av观看孕妇| 日韩精品免费视频一区二区三区| 国产免费福利视频在线观看| 亚洲精品国产一区二区精华液| 无限看片的www在线观看| 精品亚洲乱码少妇综合久久| 高清视频免费观看一区二区| 亚洲成人国产一区在线观看| 午夜福利一区二区在线看| www.999成人在线观看| 十八禁网站免费在线| 国产午夜精品久久久久久| 亚洲人成77777在线视频| 亚洲性夜色夜夜综合| 国产亚洲精品久久久久5区| 中亚洲国语对白在线视频| 欧美亚洲 丝袜 人妻 在线| 亚洲熟女精品中文字幕| 精品久久久久久电影网| 久久久国产一区二区| 国产精品 欧美亚洲| av一本久久久久| 精品高清国产在线一区| 成人永久免费在线观看视频 | 国产免费福利视频在线观看| 亚洲一卡2卡3卡4卡5卡精品中文| 中文字幕色久视频| 国产精品一区二区免费欧美| 黄色毛片三级朝国网站| 热99久久久久精品小说推荐| 久久毛片免费看一区二区三区| 国产午夜精品久久久久久| 亚洲性夜色夜夜综合| 叶爱在线成人免费视频播放| 国产免费福利视频在线观看| 啪啪无遮挡十八禁网站| 亚洲国产av影院在线观看| www.精华液| 两个人看的免费小视频| 丁香六月欧美| netflix在线观看网站| 午夜激情av网站| 一个人免费看片子| 亚洲av欧美aⅴ国产| 人妻久久中文字幕网| 不卡av一区二区三区| 少妇精品久久久久久久| 亚洲国产欧美一区二区综合| 国产精品一区二区免费欧美| av线在线观看网站| 满18在线观看网站| 搡老乐熟女国产| 成人特级黄色片久久久久久久 | 国产区一区二久久| 欧美日韩精品网址| 中文字幕人妻丝袜一区二区| 亚洲国产av新网站| 国产精品熟女久久久久浪| 日本欧美视频一区| 丝袜人妻中文字幕| 久久国产亚洲av麻豆专区| 女人被躁到高潮嗷嗷叫费观| 久久精品人人爽人人爽视色| 亚洲综合色网址| 亚洲一区中文字幕在线| 久久av网站| 成年人黄色毛片网站| 亚洲精品久久午夜乱码| 精品亚洲成a人片在线观看| 丝袜美腿诱惑在线| 国产精品亚洲av一区麻豆| 老司机亚洲免费影院| 波多野结衣av一区二区av| 中文字幕人妻丝袜制服| 国产aⅴ精品一区二区三区波| 亚洲精品中文字幕在线视频| 大陆偷拍与自拍| 99久久精品国产亚洲精品| 搡老熟女国产l中国老女人| 欧美av亚洲av综合av国产av| 久久精品成人免费网站| 脱女人内裤的视频| 国产日韩欧美亚洲二区| 一级,二级,三级黄色视频| 欧美精品av麻豆av| 国产深夜福利视频在线观看| 国产免费福利视频在线观看| 黄色a级毛片大全视频| 日韩免费av在线播放| 色94色欧美一区二区| 桃花免费在线播放| 少妇 在线观看| 日韩欧美三级三区| 18禁黄网站禁片午夜丰满| 色综合婷婷激情| 精品亚洲成国产av| 69av精品久久久久久 | 女人久久www免费人成看片| 老司机午夜十八禁免费视频| 不卡av一区二区三区| 久热这里只有精品99| 18在线观看网站| 亚洲色图综合在线观看| 新久久久久国产一级毛片| 亚洲av第一区精品v没综合| 国产成人啪精品午夜网站| 搡老岳熟女国产| 精品国产一区二区三区久久久樱花| 亚洲精品乱久久久久久| 国产亚洲一区二区精品| 国产av精品麻豆| 国产成人欧美在线观看 | av在线播放免费不卡| 精品免费久久久久久久清纯 | 侵犯人妻中文字幕一二三四区| 日本精品一区二区三区蜜桃| 18禁裸乳无遮挡动漫免费视频| 下体分泌物呈黄色| 岛国毛片在线播放| 多毛熟女@视频| 久久久精品区二区三区| 90打野战视频偷拍视频| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 亚洲精品成人av观看孕妇| 日韩三级视频一区二区三区| 高清av免费在线| 国产视频一区二区在线看| 中文字幕人妻丝袜一区二区| 精品午夜福利视频在线观看一区 | 国产免费福利视频在线观看| 脱女人内裤的视频| 一区二区日韩欧美中文字幕| 香蕉国产在线看| 亚洲中文日韩欧美视频| 日本欧美视频一区| 美女主播在线视频| 曰老女人黄片| 国产伦理片在线播放av一区| 18禁裸乳无遮挡动漫免费视频| 久热爱精品视频在线9| 亚洲熟妇熟女久久| 免费久久久久久久精品成人欧美视频| 天堂俺去俺来也www色官网| 国产精品一区二区在线观看99| 亚洲第一欧美日韩一区二区三区 | 日本a在线网址| 正在播放国产对白刺激| 嫩草影视91久久| 狠狠狠狠99中文字幕| 久久国产精品人妻蜜桃| 国产男靠女视频免费网站| 天天操日日干夜夜撸| 精品一区二区三区av网在线观看 | 国产欧美日韩一区二区精品| 色老头精品视频在线观看| 久久中文看片网| 人人妻人人澡人人看| 在线十欧美十亚洲十日本专区| 欧美黄色片欧美黄色片| 日韩一卡2卡3卡4卡2021年| 激情在线观看视频在线高清 | 青草久久国产| 王馨瑶露胸无遮挡在线观看| 黄片小视频在线播放| 久久这里只有精品19| 激情在线观看视频在线高清 | 麻豆国产av国片精品| 天天躁日日躁夜夜躁夜夜| 国产av一区二区精品久久| 成人黄色视频免费在线看| 一本综合久久免费| 99国产精品免费福利视频| 99久久精品国产亚洲精品| 侵犯人妻中文字幕一二三四区| 国产精品.久久久| 久久久国产一区二区| 999精品在线视频| 俄罗斯特黄特色一大片| 国产人伦9x9x在线观看| 欧美av亚洲av综合av国产av| 精品国产乱码久久久久久小说| 在线十欧美十亚洲十日本专区| 一本一本久久a久久精品综合妖精| 桃花免费在线播放| 亚洲中文字幕日韩| 亚洲七黄色美女视频| 人人妻人人添人人爽欧美一区卜| 日韩视频在线欧美| 欧美乱妇无乱码| 一本久久精品| a级片在线免费高清观看视频| 久久精品亚洲av国产电影网| 亚洲午夜精品一区,二区,三区| 黄色视频不卡| 国产精品一区二区在线不卡| tube8黄色片| tocl精华| 在线观看免费视频日本深夜| 久久精品人人爽人人爽视色| 我的亚洲天堂| av在线播放免费不卡| 国产极品粉嫩免费观看在线| 久热爱精品视频在线9| 亚洲男人天堂网一区| 成人黄色视频免费在线看| 日韩免费高清中文字幕av| 一个人免费看片子| 久久99一区二区三区| 久久ye,这里只有精品| av免费在线观看网站| 精品国产一区二区三区四区第35| 国产一区二区三区综合在线观看| cao死你这个sao货| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 国产精品免费大片| 亚洲熟女毛片儿| 99在线人妻在线中文字幕 | 波多野结衣一区麻豆| 人人妻人人添人人爽欧美一区卜| 精品福利观看| 久久久国产欧美日韩av| 国产伦人伦偷精品视频| 成人18禁在线播放| 高清欧美精品videossex| 丝袜在线中文字幕| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 亚洲天堂av无毛| 精品国产乱子伦一区二区三区| 亚洲欧美激情在线| 99精品欧美一区二区三区四区| 日韩有码中文字幕| 午夜福利视频精品| 涩涩av久久男人的天堂| 大香蕉久久网| 99久久精品国产亚洲精品| 九色亚洲精品在线播放| 人妻一区二区av| 男女边摸边吃奶| 人人澡人人妻人| 亚洲精品国产区一区二| 午夜福利免费观看在线| 女人精品久久久久毛片| 国产1区2区3区精品| 另类精品久久| 国产成人精品在线电影| 亚洲人成电影免费在线| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 黑人操中国人逼视频| 亚洲美女黄片视频| 国产精品 国内视频| 丰满迷人的少妇在线观看| 在线亚洲精品国产二区图片欧美| 久久久国产精品麻豆| 午夜激情久久久久久久| 一级a爱视频在线免费观看| 久久av网站| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 757午夜福利合集在线观看| 日韩视频在线欧美| av网站免费在线观看视频| 午夜成年电影在线免费观看| 五月天丁香电影| 久久久精品免费免费高清| 汤姆久久久久久久影院中文字幕| av国产精品久久久久影院| 久久精品国产a三级三级三级| 免费观看av网站的网址| 国产亚洲午夜精品一区二区久久| 亚洲精品成人av观看孕妇| 在线天堂中文资源库| 国产区一区二久久| 国产精品一区二区精品视频观看| 日本精品一区二区三区蜜桃| 午夜精品久久久久久毛片777| 久久精品国产综合久久久| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 久久精品亚洲av国产电影网| 99久久99久久久精品蜜桃| 亚洲第一av免费看| 久久午夜亚洲精品久久| 色婷婷久久久亚洲欧美| 亚洲久久久国产精品| 女警被强在线播放| 午夜视频精品福利| 在线观看免费午夜福利视频| 12—13女人毛片做爰片一| 99riav亚洲国产免费| 亚洲午夜精品一区,二区,三区| 亚洲性夜色夜夜综合| 黄色毛片三级朝国网站| 亚洲中文av在线| 人人妻人人添人人爽欧美一区卜| 中文字幕人妻丝袜一区二区| 黄色a级毛片大全视频| 欧美午夜高清在线| 伦理电影免费视频| 亚洲国产看品久久| 亚洲综合色网址| 免费黄频网站在线观看国产| 亚洲国产av影院在线观看| 女人被躁到高潮嗷嗷叫费观| 亚洲人成电影免费在线| 狠狠精品人妻久久久久久综合| 欧美亚洲 丝袜 人妻 在线| 99re6热这里在线精品视频| 亚洲伊人久久精品综合| 国产深夜福利视频在线观看| 午夜老司机福利片| 嫩草影视91久久| 99香蕉大伊视频| 热re99久久精品国产66热6| 最新的欧美精品一区二区| 欧美精品亚洲一区二区| 亚洲黑人精品在线| 激情在线观看视频在线高清 | 日韩一卡2卡3卡4卡2021年| 亚洲 国产 在线| 欧美日韩一级在线毛片| 国产欧美日韩一区二区三区在线| 一进一出抽搐动态| 在线观看www视频免费| 亚洲精品自拍成人| 一级黄色大片毛片| 亚洲精品自拍成人| 国产亚洲一区二区精品| 国产av又大| 精品一区二区三区视频在线观看免费 | 色综合欧美亚洲国产小说| 极品少妇高潮喷水抽搐| 亚洲成国产人片在线观看| 午夜免费成人在线视频| 色婷婷av一区二区三区视频| 丝袜喷水一区| 中文字幕色久视频| av在线播放免费不卡| 成人三级做爰电影| 免费少妇av软件| 首页视频小说图片口味搜索| 美女午夜性视频免费| 狂野欧美激情性xxxx| 涩涩av久久男人的天堂| 日韩中文字幕视频在线看片| 少妇精品久久久久久久| 成人三级做爰电影| 考比视频在线观看| 9色porny在线观看| 啦啦啦 在线观看视频| 久久99热这里只频精品6学生| 亚洲成av片中文字幕在线观看| 久久国产精品人妻蜜桃| 黄片小视频在线播放| av天堂久久9| 国产精品久久久人人做人人爽| √禁漫天堂资源中文www| 91成人精品电影| 亚洲成a人片在线一区二区| 新久久久久国产一级毛片| 桃花免费在线播放| 日韩视频在线欧美| 在线播放国产精品三级| 亚洲,欧美精品.| 久久久精品94久久精品| 午夜福利乱码中文字幕| 免费不卡黄色视频| 欧美日韩亚洲高清精品| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 可以免费在线观看a视频的电影网站| 亚洲精品国产一区二区精华液| 亚洲精品中文字幕在线视频| 亚洲av第一区精品v没综合| 精品少妇内射三级| 岛国毛片在线播放| 亚洲色图综合在线观看| 亚洲男人天堂网一区| www.熟女人妻精品国产| 国产淫语在线视频| 国产单亲对白刺激| 久久久国产欧美日韩av| 操出白浆在线播放| 久热爱精品视频在线9| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| 两个人看的免费小视频| 久热这里只有精品99| 国产区一区二久久| 中文字幕制服av| 99riav亚洲国产免费| 岛国在线观看网站| 久久中文字幕一级| 国产免费视频播放在线视频| 99精品欧美一区二区三区四区| av网站在线播放免费| 男女午夜视频在线观看| 亚洲一卡2卡3卡4卡5卡精品中文| 建设人人有责人人尽责人人享有的| 亚洲黑人精品在线| 国产在视频线精品| 老司机影院毛片| 男男h啪啪无遮挡| 天堂动漫精品| 国产一区二区 视频在线| 日韩欧美一区二区三区在线观看 | 亚洲七黄色美女视频| 搡老熟女国产l中国老女人| 老汉色av国产亚洲站长工具| 中文字幕最新亚洲高清| 女人精品久久久久毛片| 女人被躁到高潮嗷嗷叫费观| 中文欧美无线码| 在线观看免费视频日本深夜| 久久亚洲真实| 女性被躁到高潮视频| 欧美激情高清一区二区三区| 色综合婷婷激情| 女性生殖器流出的白浆| 黄色a级毛片大全视频| 国产精品国产av在线观看| 久久精品国产亚洲av香蕉五月 | 亚洲精品自拍成人| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频| 一区二区日韩欧美中文字幕| 国产精品久久电影中文字幕 | 91精品国产国语对白视频| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 精品午夜福利视频在线观看一区 | 久久av网站| 91大片在线观看| 他把我摸到了高潮在线观看 | 一个人免费看片子| 国产成人免费观看mmmm| 99国产极品粉嫩在线观看| 黄色片一级片一级黄色片| 国产亚洲一区二区精品| 视频在线观看一区二区三区| 女性被躁到高潮视频| 91av网站免费观看| 色综合婷婷激情| 国产亚洲欧美在线一区二区| 国产一区二区 视频在线| 久久亚洲精品不卡| 精品欧美一区二区三区在线| 精品亚洲乱码少妇综合久久| 操出白浆在线播放| 亚洲精品中文字幕在线视频| 嫁个100分男人电影在线观看| 欧美精品亚洲一区二区| 亚洲七黄色美女视频| 亚洲专区字幕在线| videosex国产| 国产99久久九九免费精品| 高清视频免费观看一区二区| 久久久精品94久久精品| 日韩视频在线欧美| 欧美黄色淫秽网站| 亚洲伊人色综图| 99香蕉大伊视频| 欧美亚洲日本最大视频资源| 日韩大码丰满熟妇| 免费日韩欧美在线观看| 亚洲精品国产精品久久久不卡| 9191精品国产免费久久| 日韩人妻精品一区2区三区| 另类精品久久| 在线av久久热| 热99久久久久精品小说推荐| 美女福利国产在线| 国产亚洲精品久久久久5区| 亚洲精品成人av观看孕妇| 女警被强在线播放| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 国产日韩一区二区三区精品不卡| 久久久国产精品麻豆| 老司机亚洲免费影院| 十八禁人妻一区二区| 999久久久国产精品视频| 婷婷丁香在线五月| 欧美午夜高清在线| 国精品久久久久久国模美| 免费观看人在逋| 亚洲专区国产一区二区| 午夜老司机福利片| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 久久青草综合色| 久久人妻福利社区极品人妻图片| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 亚洲一卡2卡3卡4卡5卡精品中文| 天天影视国产精品| 怎么达到女性高潮| 狠狠狠狠99中文字幕| 久久久精品区二区三区| 成人国语在线视频| 精品乱码久久久久久99久播| 女人爽到高潮嗷嗷叫在线视频| 亚洲一码二码三码区别大吗| 蜜桃国产av成人99| 亚洲精品乱久久久久久| 国产精品二区激情视频| 一区二区三区乱码不卡18| 最新的欧美精品一区二区| 亚洲av成人不卡在线观看播放网| 国产精品久久电影中文字幕 | 成在线人永久免费视频| 国产精品一区二区精品视频观看| 女警被强在线播放| h视频一区二区三区| 日日夜夜操网爽| 在线看a的网站| 老司机靠b影院| 精品午夜福利视频在线观看一区 | √禁漫天堂资源中文www| 国产一区二区激情短视频| 老熟妇乱子伦视频在线观看| 欧美日韩福利视频一区二区| 久久精品aⅴ一区二区三区四区| 国产免费视频播放在线视频| 久久免费观看电影| 国产在线一区二区三区精| 黄色丝袜av网址大全| 国产精品一区二区在线观看99| 久热爱精品视频在线9| 免费观看a级毛片全部| 无遮挡黄片免费观看| 青青草视频在线视频观看| 天天添夜夜摸| 国产亚洲一区二区精品| 老司机午夜福利在线观看视频 | av网站在线播放免费| 19禁男女啪啪无遮挡网站| 9热在线视频观看99| 欧美乱妇无乱码| 日本欧美视频一区| 日日爽夜夜爽网站| 天天操日日干夜夜撸| 男人舔女人的私密视频| av一本久久久久| 国产男女超爽视频在线观看| 少妇 在线观看| 夜夜夜夜夜久久久久| 91麻豆精品激情在线观看国产 | 在线播放国产精品三级| 成在线人永久免费视频| 丰满饥渴人妻一区二区三| 少妇的丰满在线观看| 欧美日本中文国产一区发布| 9热在线视频观看99| 日本wwww免费看| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 超碰成人久久| 操出白浆在线播放| 久久久欧美国产精品| 国产在视频线精品| 亚洲天堂av无毛| 欧美黑人精品巨大| 色播在线永久视频| 超色免费av| 亚洲欧美色中文字幕在线| 窝窝影院91人妻| 交换朋友夫妻互换小说| 亚洲伊人色综图| 91老司机精品| 欧美精品一区二区大全| 午夜免费成人在线视频| 久久久久久久久免费视频了| 国产成人精品无人区| 嫩草影视91久久| 久久热在线av| 男女下面插进去视频免费观看| 韩国精品一区二区三区| 久久热在线av| 欧美在线一区亚洲| 亚洲av成人不卡在线观看播放网| 9色porny在线观看| 人成视频在线观看免费观看| 精品人妻1区二区| 50天的宝宝边吃奶边哭怎么回事| 啪啪无遮挡十八禁网站| 97在线人人人人妻| 怎么达到女性高潮| 色精品久久人妻99蜜桃| 极品少妇高潮喷水抽搐| 久久99热这里只频精品6学生| 中亚洲国语对白在线视频| 无遮挡黄片免费观看| 日日爽夜夜爽网站| a在线观看视频网站| 精品一区二区三卡| 大片免费播放器 马上看|