• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    辣木籽多糖的超高壓輔助提取工藝及其抗氧化活性分析

    2022-11-11 02:42:12王標(biāo)詩(shī)黃澔楊譚文慧劉淑敏張世奇韓志萍彭元懷
    熱帶作物學(xué)報(bào) 2022年10期
    關(guān)鍵詞:辣木自由基多糖

    王標(biāo)詩(shī),黃澔楊,譚文慧,劉淑敏,張世奇,韓志萍,彭元懷

    辣木籽多糖的超高壓輔助提取工藝及其抗氧化活性分析

    王標(biāo)詩(shī)1,2,黃澔楊1,譚文慧1,劉淑敏1,2,張世奇1,2,韓志萍1,2,彭元懷1,2

    1. 嶺南師范學(xué)院食品科學(xué)與工程學(xué)院,廣東湛江 524048;2. 廣東省辣木資源開(kāi)發(fā)與利用工程技術(shù)研究中心,廣東湛江 524048

    超高壓輔助提取技術(shù)是一種天然產(chǎn)物新型綠色高效提取技術(shù),在保證提取效率的同時(shí)能最大限度保持天然產(chǎn)物的生物活性。為探究超高壓輔助提取技術(shù)對(duì)辣木籽多糖的提取效果及其抗氧化活性的影響,本研究以辣木籽為原料,通過(guò)超高壓輔助提取技術(shù)提取辣木籽中的水溶性多糖,以多糖得率為考察指標(biāo),以提取壓力、提取時(shí)間、料液比、粉碎度作為單因素,在單因素試驗(yàn)基礎(chǔ)上,采用正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)方法優(yōu)化辣木籽多糖的超高壓輔助提取工藝,并通過(guò)測(cè)定總抗氧化能力、清除DPPH自由基(DPPH?)和羥自由基(?OH)的能力來(lái)分析辣木籽水溶性多糖的抗氧化活性。結(jié)果表明,辣木籽多糖最佳的超高壓輔助提取工藝條件為:提取壓力100 MPa、保壓時(shí)間6 min、料液比(g/mL)1∶15、粉碎度100目篩,在最佳提取工藝條件下辣木籽多糖最大提取得率為0.346%;在測(cè)試范圍內(nèi)辣木籽多糖清除DPPH自由基能力隨多糖濃度的增加而增加,并有較好的線性關(guān)系,清除率達(dá)到50%時(shí)對(duì)應(yīng)的濃度(IC50)為0.0439 g/L,但是其抗氧化能力低于相同濃度的Vc,在測(cè)試范圍內(nèi)清除羥自由基能力也隨辣木籽多糖濃度的增加而增加,也有較好的線性關(guān)系,IC50為0.1666 g/L,其抗氧化能力與同濃度的Vc較接近,辣木籽多糖的總抗氧化能力為0.0482 mmol/L(以硫酸亞鐵的當(dāng)量濃度表示)。與熱水提取方法相比,超高壓輔助提取方法能夠縮短提取時(shí)間,提取溫度大大降低,提取效率顯著提高;而且提取的辣木籽水溶性多糖具有較好的抗氧化能力,可以作為天然抗氧化劑進(jìn)行開(kāi)發(fā)利用。本研究結(jié)果可為天然抗氧化劑的開(kāi)發(fā)、辣木資源的綜合開(kāi)發(fā)及高值化利用提供技術(shù)支持和參考。

    辣木籽;水溶性多糖;超高壓輔助提??;抗氧化活性

    辣木()屬被子門辣木科辣木屬植物,起源于印度,目前,辣木樹(shù)在非洲及世界熱帶、亞熱帶地區(qū)均有種植,被稱為“窮人的牛奶樹(shù)”“奇跡之樹(shù)”[1-2]。辣木樹(shù)渾身是寶,其葉子、花、嫩豆莢、籽均可直接食用。辣木被譽(yù)為植物中的“鉆石”,與西洋參、靈芝合稱為“世界三寶”,受到了醫(yī)學(xué)界、食品界以及營(yíng)養(yǎng)學(xué)界的高度重視。與普通的食品相比,辣木中蛋白質(zhì)、膳食纖維及鈣等礦物質(zhì)元素含量較高,營(yíng)養(yǎng)成分豐富[3]。辣木的種子即為辣木籽,辣木籽中除了含有豐富的蛋白質(zhì)、油脂及礦物元素,還有多糖等活性物質(zhì)[3-4],可用于食品、醫(yī)藥等方面,具有良好的開(kāi)發(fā)價(jià)值和應(yīng)用前景。

    近年來(lái),從天然植物中開(kāi)發(fā)利用活性多糖成為新的研究熱點(diǎn),常見(jiàn)的多糖提取方法有很多種,如醇提法、熱水浸提法、酶提法、微波法和超聲波法等,但是大多存在提取率低、耗時(shí)較長(zhǎng)和對(duì)多糖結(jié)構(gòu)和功能造成破壞等缺點(diǎn)[5]。而超高壓提取技術(shù)具有效率高、用時(shí)短和破壞性低等優(yōu)點(diǎn)。目前關(guān)于超高壓輔助提取多糖的研究比較少[6]。從天然產(chǎn)物中提取的多糖,在抗氧化、抗腫瘤、降血糖、降血脂等方面均有較好的效果[5]。

    對(duì)辣木葉和辣木籽中多糖的提取已有相關(guān)報(bào)道,如陳瑞嬌[7]和孫鳴燕[8]分別研究了辣木葉多糖的提取工藝條件;董成國(guó)[9]研究了熱水提取辣木籽多糖的工藝條件及其抗氧化活性;CHEN等[10]研究了微波輔助提取辣木葉水溶性多糖的工藝條件及其降糖活性,而利用超高壓輔助提取辣木籽多糖的研究尚無(wú)報(bào)道。

    本文以辣木籽為原料,對(duì)辣木籽多糖的超高壓輔助提取工藝進(jìn)行優(yōu)化,并研究辣木籽多糖的抗氧化活性??蔀槔蹦举Y源的綜合開(kāi)發(fā)和高值化利用提供技術(shù)支持。

    1 材料與方法

    1.1 材料

    1.1.1 植物材料 辣木籽購(gòu)于湛江市旭昇南藥種植專業(yè)合作社。

    1.1.2 主要試劑 1,1-二苯基苦基苯肼(DPPH自由基)分裝產(chǎn)品購(gòu)自Sigma公司;總抗氧化能力(T-AOC)測(cè)試盒購(gòu)自南京建成生物工程研究所;其他化學(xué)試劑均為分析純。

    1.1.3 主要設(shè)備 DFY-800搖擺式高速萬(wàn)能粉碎機(jī),購(gòu)自溫嶺市林大機(jī)械有限公司;FA1004N電子天平,購(gòu)自上海精密科學(xué)儀器有限公司;W1-400/1.0型超高壓試驗(yàn)殺菌機(jī),購(gòu)自天津華泰森淼生物工程技術(shù)股份有限公司;TU-1810DASPC紫外可見(jiàn)分光光度計(jì),購(gòu)自北京普析通用儀器有限公司;TGL16M高速冷凍離心機(jī),購(gòu)自鹽城市凱特實(shí)驗(yàn)儀器有限公司;RE-2000B旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀,購(gòu)自上海亞榮生化儀器廠;DHG-9240A電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱,購(gòu)自上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司;SHZ-D3循環(huán)水式真空泵,購(gòu)自鞏義市英峪儀器廠;HZS-HA水浴振蕩器,購(gòu)自哈爾濱東聯(lián)電子技術(shù)開(kāi)發(fā)有限公司;ELX808IU酶標(biāo)儀,購(gòu)自美國(guó)Bio-Tek公司。

    1.2 方法

    1.2.1 原料預(yù)處理 選擇色澤均勻、無(wú)蟲蛀、無(wú)霉變的辣木籽,置于55℃干燥箱中烘72 h,冷卻后用高速萬(wàn)能粉碎機(jī)進(jìn)行破碎;然后把辣木籽粉置于55℃的干燥箱中烘2 h,冷卻后用索氏抽提器脫脂處理,殘留物干燥過(guò)篩備用。

    1.2.2 辣木籽多糖測(cè)定 參考梁琰等[11]的方法。分別取0.1 g/L葡萄糖溶液0、0.20、0.40、0.60、0.80、1.00 mL,用蒸餾水補(bǔ)足至1.00 mL,分別加入5.00 mL濃硫酸及1.00 mL 5%苯酚,每根試管加完后一起放置在90℃熱水中水浴15 min,然后取出冷卻至室溫,于490 nm測(cè)吸光度。多糖得率的計(jì)算公式如下:

    式中,表示從標(biāo)準(zhǔn)曲線中求出的辣木籽多糖質(zhì)量(g),0表示辣木籽粉總質(zhì)量(g)。

    1.2.3 辣木籽多糖超高壓輔助提取工藝 參考奚灝鏘等[12]的方法。稱取預(yù)處理后的脫脂辣木籽粉3 g,按不同料液比加入一定體積的水,裝袋封口(盡量排出空氣),放入超高壓設(shè)備,按照不同壓力和保壓時(shí)間進(jìn)行超高壓處理。處理后進(jìn)行抽濾,取上清液與Sevage試劑混合(脫蛋白),振搖30 min后離心:3500 r/min離心15 min,取上清液在低溫下醇沉24 h,于20℃ 9000 r/min條件下離心10 min,沉淀物為辣木籽多糖,然后加蒸餾水溶解再定容至100 mL。

    單因素試驗(yàn)分別探討料液比、壓力、保壓時(shí)間和粉碎度對(duì)辣木籽多糖提取率的影響。料液比(g/mL)分別選取1∶15、1∶20、1∶25、1∶30、1∶35、1∶40;保壓時(shí)間分別選取0、2、4、6、8、10 min;壓力分別選取50、100、150、200、250、300、350、400 MPa;粉碎度分別選取過(guò)篩20、40、60、80、100目。

    在單因素試驗(yàn)結(jié)果的基礎(chǔ)上,選取對(duì)辣木籽多糖得率影響比較大的3個(gè)因素(料液比、提取壓力和保壓時(shí)間)作為考察因素,每個(gè)因素選取3個(gè)水平設(shè)計(jì)正交試驗(yàn),以多糖得率為試驗(yàn)指標(biāo),優(yōu)化提取工藝。正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)因素與水平如表1所示。

    表1 正交試驗(yàn)因素與水平

    1.2.4 辣木籽多糖熱水提取工藝 參考王麗波等[13]的方法,略有修改。稱取3 g辣木籽粉(精確到0.0001 g),量取45 mL水,在溫度為90℃下提取4 h;趁熱抽濾,取上清液與Sevage試劑混合(脫蛋白),振搖30 min后離心:3500 r/min離心15 min,取上清液醇沉24 h,于20℃ 9000 r/min離心10 min,棄上清液,取沉淀加蒸餾水定容至100 mL,以苯酚硫酸法測(cè)吸光度,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算多糖得率。

    1.2.5 辣木籽多糖清除DPPH自由基的測(cè)定 參考王麗波等[13]的方法。取多糖溶液2 mL于試管中,加入2 mL 0.3 mol/L DPPH,于暗處反應(yīng)30 min,在517 nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度(i);再取上述2 mL多糖液,加入無(wú)水乙醇2 mL,反應(yīng)30 min,在517 nm 波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度(j);取DPPH 2 mL,加入無(wú)水乙醇2 mL,反應(yīng)30 min測(cè)定吸光度(0)。每個(gè)濃度的樣品測(cè)定3次,然后取平均值。以VC作陽(yáng)性對(duì)照。DPPH自由基清除率計(jì)算公式如下:

    1.2.6 辣木籽多糖清除羥自由基的測(cè)定 參考WANG等[14]的方法。根據(jù)鄰二氮菲-鐵離子-過(guò)氧化氫體系,取2.0 mL pH為7.4的0.05 mol/L磷酸緩沖鹽溶液(PBS)于試管中,加1.5 mL 0.005 mol/L鄰二氮菲溶液后充分混合均勻,加1.0 mL 0.0075 mol/L硫酸亞鐵溶液,立刻混合均勻,再加1.0 mL 0.1%過(guò)氧化氫,最后用蒸餾水補(bǔ)定容至10 mL,反應(yīng)液置于37℃的水浴鍋中保溫1 h,于536 nm處測(cè)吸光度,按1.2.5方法,分別加入不同濃度多糖溶液,37℃水浴鍋中保溫1 h,測(cè)吸光度。羥自由基清除率計(jì)算公式如下:

    式中,損傷為加過(guò)氧化氫未加樣品所測(cè)得的吸光度,加樣為加過(guò)氧化氫和樣品所測(cè)得的吸光度,未損傷為未加過(guò)氧化氫和樣品所測(cè)得的吸光度。

    1.2.7 辣木籽多糖總抗氧化性(T-AOC)的測(cè)定 參照試劑盒說(shuō)明書及相關(guān)操作測(cè)定。FRAP法測(cè)定辣木籽水溶性多糖的總抗氧化能力的原理是在酸性條件下抗氧化物質(zhì)可以還原Fe3+-TPTZ產(chǎn)生藍(lán)色的Fe2+-TPTZ,在593 nm處讀取吸光度可以計(jì)算出樣品中的總抗氧化能力。首先把試劑1、試劑2、試劑3按10∶1∶1比例配成FRAP工作液,避光37℃保溫,現(xiàn)配現(xiàn)用。稱取27.8 mg的FeSO4·7H2O,溶解后定容至1 mL,此時(shí)濃度為100 mmol/L。取上述配好的FeSO4·7H2O溶液稀釋至0.15、0.30、0.60、0.90、1.20 mmol/L。最后按照說(shuō)明書添加試劑到96孔板,在37℃下孵育5 min,最后置于酶標(biāo)儀測(cè)定各孔值(即吸光度)。

    1.3 數(shù)據(jù)處理

    試驗(yàn)數(shù)據(jù)重復(fù)測(cè)定3次,結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)偏差表示。采用Excel軟件等對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理與分析。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 多糖標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作

    以吸光度為縱坐標(biāo),標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖溶液濃度為橫坐標(biāo),所得其線性回歸方程為=0.9221– 0.0029,相關(guān)系數(shù)為0.9992(圖1),說(shuō)明在測(cè)定的濃度范圍內(nèi),標(biāo)準(zhǔn)曲線線性關(guān)系較好、準(zhǔn)確度高,可以用于辣木籽多糖含量的測(cè)定。

    圖1 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線

    2.2 辣木籽多糖超高壓輔助提取單因素試驗(yàn)

    2.2.1 壓力對(duì)辣木籽多糖超高壓輔助提取的影響 由圖2可知,多糖提取得率在處理壓力為100 MPa時(shí)達(dá)到最高,在50~100 MPa時(shí)提取得率隨壓力的增大而增大;在100~400 MPa時(shí)提取得率隨壓力的增大而減小?;诔邏禾崛≡恚谛∮?00 MPa時(shí),壓力越大,超高壓提取的效果越顯著(<0.05);在大于100 MPa時(shí),由于壓力過(guò)大,辣木籽細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)有所損壞,再增加壓力,反而有部分水溶性雜質(zhì)被釋放出來(lái),同時(shí),辣木籽多糖黏度也會(huì)提高,從而使擴(kuò)散速率降低,在卸壓的時(shí)候無(wú)法隨著滲透壓將細(xì)胞內(nèi)的多糖物質(zhì)輸送出去,因此多糖得率有所下降。

    圖2 提取壓力對(duì)辣木籽多糖得率的影響

    2.2.2 時(shí)間對(duì)辣木籽多糖超高壓輔助提取的影響 由圖3可知,在前2 min內(nèi)隨著保壓時(shí)間的增加,辣木籽水溶性多糖的提取得率逐漸增加,2 min后隨時(shí)間的增加辣木籽多糖得率呈緩慢下降趨勢(shì),下降幅度不大,在2 min時(shí)提取得率最大,其余時(shí)間均高于保壓0 min(升壓后立即泄壓)的結(jié)果。其原因可能是隨著保壓時(shí)間的增加,在長(zhǎng)時(shí)間的超高壓處理下,辣木籽細(xì)胞膜通透性變差,影響了卸壓時(shí)多糖的滲透速度。

    圖3 時(shí)間對(duì)辣木籽多糖得率的影響

    2.2.3 料液比對(duì)辣木籽多糖超高壓輔助提取的影響 由圖4可知,辣木籽水溶性多糖的提取得率隨著料液比的增加呈先輕微增加而后逐漸降低的趨勢(shì),在1∶20時(shí)達(dá)到最高得率;而1∶20和1∶15兩個(gè)條件下的多糖得率相差不大,無(wú)明顯差異(<0.05),可能是在此范圍內(nèi)能提取到的多糖量基本上達(dá)到最大,多糖得率無(wú)明顯變化。料液比在1∶20~1∶40之間,隨著溶劑量的減少,卸壓時(shí)所提供的滲透壓增大,同時(shí),水溶性多糖基本完全溶出,如再繼續(xù)增加溶劑量,多糖量不變,而溶劑會(huì)增加,故其濃度反而會(huì)降低。

    圖4 料液比對(duì)辣木籽多糖得率的影響

    2.2.4 粉碎度對(duì)辣木籽多糖超高壓輔助提取的影響 由圖5可知,粉碎度在20~80目篩之間,超高壓提取辣木籽水溶性多糖得率基本無(wú)變化,100目篩粉碎度時(shí)辣木籽多糖得率最高,可能是由于在一定范圍內(nèi),高壓對(duì)多糖的溶出影響不大,超出范圍后樣品經(jīng)過(guò)過(guò)細(xì)粉碎后,增大了與溶劑的接觸面積,更有利于多糖的提取和溶出。

    圖5 粉碎度對(duì)辣木籽多糖得率的影響

    2.3 超高壓輔助提取辣木籽多糖工藝優(yōu)化

    單因素試驗(yàn)結(jié)果表明,粉碎度對(duì)超高壓提取辣木籽水溶性多糖的得率影響變化不大,基于單因素試驗(yàn)結(jié)果,采用三因素三水平L9(34)正交表設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)優(yōu)化方案,考察壓力、保壓時(shí)間和料液比對(duì)辣木籽多糖提取得率的影響,結(jié)果如表2所示。從表2的極差分析可知,影響辣木籽多糖提取率的因素主次順序?yàn)榱弦罕龋–)>保壓時(shí)間(A)>壓力(B),即對(duì)辣木多糖提取得率影響因素最大的是料液比,其次是時(shí)間,最后是壓力,根據(jù)正交試驗(yàn)結(jié)果得出最優(yōu)提取工藝參數(shù)組合為A3B2C1,即保壓時(shí)間6 min,料液比1∶15,提取壓力100 MPa。

    優(yōu)化后的最優(yōu)組合存在于正交試驗(yàn)組中,最優(yōu)條件下辣木籽多糖的得率為0.345%,在上述最優(yōu)工藝條件下經(jīng)驗(yàn)證得到辣木籽多糖得率為0.346%±0.005%,與正交試驗(yàn)方案的結(jié)果基本一致,所以可認(rèn)為該工藝條件為最優(yōu)工藝條件。

    表2 正交試驗(yàn)方案及結(jié)果

    2.4 辣木籽多糖超高壓輔助提取與熱水提取比較分析

    由圖6可知,辣木籽多糖通過(guò)熱水提取(料液比1∶15,90℃下提取4 h)得率為0.296%± 0.006%,而超高壓輔助提取在最優(yōu)條件下(料液比1∶15,保壓時(shí)間6 min,提取壓力100 MPa)的辣木籽多糖得率為0.345%±0.005%。通過(guò)比較可知,在相同的料液比下,超高壓輔助提取用時(shí)僅需6 min,提取結(jié)果明顯高于熱水提取4 h的結(jié)果(<0.05),可見(jiàn),超高壓輔助提取與熱水提取相比可大大縮短提取時(shí)間、提高提取效率,而且在常溫下提取對(duì)辣木籽多糖的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)影響相對(duì)較小。

    圖6 提取方法對(duì)辣木籽多糖的提取效果的影響

    2.5 辣木籽多糖的抗氧化活性測(cè)定

    2.5.1 辣木籽多糖清除DPPH自由基能力 辣木籽多糖對(duì)DPPH自由基的清除能力如圖7所示。由圖7可知,在0.02~1.00 g/L多糖濃度范圍內(nèi),辣木籽多糖對(duì)DPPH自由基的清除效果與濃度有較好的量效關(guān)系,多糖濃度()與清除率()的回歸線性方程為=748+16.566,相關(guān)系數(shù)為0.962。測(cè)得辣木籽多糖清除DPPH自由基的IC50值為0.0439 g/L,在相同濃度情況下,Vc對(duì)DPPH自由基的清除率均高于辣木籽多糖,VC清除DPPH自由基的IC50值為0.0088 g/L。以上結(jié)果表明,辣木籽多糖具備一定的DPPH自由基清除能力,但是低于相同濃度下VC對(duì)DPPH自由基的清除能力。

    圖7 辣木籽多糖對(duì)DPPH自由基的清除結(jié)果

    2.5.2 辣木籽多糖清除羥自由基能力 辣木籽多糖對(duì)羥自由基清除能力如圖8所示。由圖8可知,辣木籽多糖的清除率與濃度成正比,多糖濃度()與清除率()的回歸線性方程為=215.66+ 14.071,相關(guān)系數(shù)為0.9946。根據(jù)數(shù)據(jù)測(cè)得辣木籽多糖清除羥自由基的IC50約為0.1666 g/L,VC清除羥自由基的IC50約為0.1873 g/L,在低濃度條件下(<0.045 g/L),辣木籽多糖清除羥自由基能力高于同濃度的VC,高濃度條件下(>0.045 g/L),辣木籽多糖清除羥自由基能力低于同濃度的VC。

    2.5.3 辣木籽多糖總抗氧化能力 由圖9可知,標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性關(guān)系較好,其線性回歸方程為=0.1349+0.0805,相關(guān)系數(shù)為0.9983,說(shuō)明在測(cè)定的濃度范圍內(nèi),標(biāo)準(zhǔn)曲線線性關(guān)系較好。

    相同條件下測(cè)3次辣木籽多糖樣品,其吸光度為0.087,由公式求得,其值對(duì)應(yīng)的硫酸亞鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為0.0482 mmol/L,即辣木籽多糖溶液的總抗氧化能力為0.0482 mmol/L(以硫酸亞鐵的當(dāng)量濃度表示)。

    圖8 辣木籽多糖對(duì)DPPH自由基的清除結(jié)果

    圖9 試劑盒測(cè)定用硫酸亞鐵的標(biāo)準(zhǔn)曲線

    3 討論

    辣木多糖為辣木中重要的有效成分之一,目前,對(duì)辣木多糖的提取、分離和功能研究的相關(guān)報(bào)道較少,孫鳴燕[8]研究了辣木葉多糖的提取工藝條件,不同方法的辣木葉多糖提取率在17.10%~20.17%之間,其中超聲波提取法的多糖得率最高,水提法的多糖得率最低,5種方法提取的多糖量差異均達(dá)到極顯著水平;CHEN等[10]研究了微波輔助提取辣木籽葉多糖的工藝條件,該工藝條件下多糖提取率僅有2.96%。可見(jiàn),不同提取方法對(duì)辣木葉中的多糖提取效果差別較大。董成國(guó)[9]研究了辣木籽水溶性多糖的熱水提取工藝,其提取率比本研究結(jié)果高,可能與原料預(yù)處理方法及不同產(chǎn)地原料有關(guān)。

    辣木多糖具有較好的抗氧化活性,董成國(guó)[9]對(duì)提取的辣木籽多糖進(jìn)行純化后再測(cè)定其抗氧化活性,分離得到的3種多糖組分抗氧化活性(清除羥自由基IC50均大于10 g/L)低于本研究結(jié)果,可見(jiàn),超高壓輔助提取的辣木多糖抗氧化活性更高,超高壓技術(shù)對(duì)多糖活性影響較小,可以更好地保持多糖的抗氧化活性。本研究首次通過(guò)超高壓提取技術(shù)提取辣木籽多糖并對(duì)其抗氧化活性進(jìn)行分析,與熱水提取法相比,超高壓輔助提取的辣木籽多糖的得率更高,且具有較好的抗氧化活性,本研究為進(jìn)一步開(kāi)發(fā)利用辣木資源奠定基礎(chǔ),同時(shí)為辣木資源的高值化利用提供參考。

    [1] GOPALAKRISHNAN L, DORIYA K, UMARK D S.: a review on nutritive importance and its medicinal application[J]. Food Science and Human Wellness, 2016, 5(2): 49-56.

    [2] 虎虓真, 陶寧萍, 許長(zhǎng)華. 基于食藥價(jià)值的辣木籽研究進(jìn)展[J]. 食品科學(xué), 2018, 39(15): 302-309.

    HU X Z, TAO N P, XU C H. Research advances inseedsbased on the food-drug values[J]. Food Science, 2018, 39(15): 302-309. (in Chinese)

    [3] 樊建麟, 邵金良, 葉艷萍, 楊東順. 辣木籽營(yíng)養(yǎng)成分含量測(cè)定[J]. 中國(guó)食物與營(yíng)養(yǎng), 2016, 22(5): 69-72.

    FAN J L, SHAO J L, YE Y P, YANG D S. Determination of nutritional content ofseeds[J]. China Food Nutrition, 2016, 22(5): 69-72. (in Chinese)

    [4] BARAKAT H, GHAZAL G A. Physicochemical properties ofseeds and their edible oil cultivated at different regions in Egypt[J]. Food and Nutrition Sciences, 2016, 7(6): 472-484.

    [5] AL-DHABI N A, PONMURUGAN K. Microwave assisted extraction and characterization of polysaccharide from waste jamun fruit seeds[J]. International Journal of Biological Macromolecules, 2020, 152(1): 1157-1163.

    [6] 郭 淼, 宋江峰, 王傳凱. 火龍果莖多糖的超高壓提取及抗氧化活性研究[J]. 熱帶作物學(xué)報(bào), 2017, 38(7): 1371-1376.

    GUO M, SONG J F, WANG C K. Study on ultrahigh pressure extraction and antioxidant activity of polysaccharide from stem of[J]. China Journal of Trop Crops, 2017, 38(7): 1371-1376. (in Chinese)

    [7] 陳瑞嬌. 辣木葉多糖的提取及分離純化[J]. 中藥材, 2006, 29(12): 1358-1360.

    CHEN R J. Extraction, separation and purification of polysaccharide fromleaf[J]. Journal of Chinese Medicinal Materials, 2006, 29(12): 1358-1360. (in Chinese)

    [8] 孫鳴燕. 辣木黃酮和多糖提取方法及其含量影響因素的初步研究[D]. 呼和浩特: 內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué), 2008.

    SUN M Y. Preliminary study on extraction methods and content influencing factors of flavone and polysaccharide from[D]. Huhehaote: Inner Mongolia Agricultural University, 2008. (in Chinese)

    [9] 董成國(guó). 辣木籽水溶性多糖的分離純化、結(jié)構(gòu)表征及其抗氧化活性研究[D]. 哈爾濱: 哈爾濱工業(yè)大學(xué), 2016.

    DONG C G. Purification, structure characterization and antioxidant activity of water-soluble polysaccharides fromseeds[D]. Haerbin: Harbin Institute of Technology, 2016. (in Chinese)

    [10] CHEN C, ZHANG B, HUANG Q, FU X, LIU R H. Microwave-assisted extraction of polysaccharides fromLamleaves: characterization and hypoglycemic activity[J]. Industrial Crops and Products, 2017, 100: 1-11.

    [11] 梁 琰, 趙志國(guó), 張敏敏, 劉 倩, 程素盼, 耿巖玲, 王 曉, 趙恒強(qiáng). 超聲輔助提取苯酚-硫酸法測(cè)定野生平蓋靈芝多糖含量[J]. 食品研究與開(kāi)發(fā), 2018, 39(16): 125-129.

    LIANG Y, ZHAO Z G, ZHANG M M, LIU Q, CHENG S P, GENG Y L, WANG X, ZHAO H Q. Ultrasonic-assisted extraction of polysaccharide fromby phenol-sulfuric acid method[J]. Food Research and Development, 2018, 39(16): 125-129. (in Chinese)

    [12] 奚灝鏘, 袁根良, 杜 冰, 楊公明. 超高壓提取香菇多糖的研究[J]. 現(xiàn)代食品科技, 2010, 26(9): 991-993.

    XI H Q, YUAN G L, DU B, YANG G M. Study on extraction of polysaccharide from lentinan by ultra-high pressure[J]. Modern Food Science and Technology, 2010, 26(9): 991-993. (in Chinese)

    [13] 王麗波, 程 龍, 徐雅琴, 王泰恒, 李魯濱, 王瀚嵩. 南瓜籽多糖熱水提取工藝優(yōu)化及其抗氧化活性[J]. 農(nóng)業(yè)工程學(xué)報(bào), 2016, 32(9): 284-290.

    WANG L B, CHENG L, XU Y Q, WANG T H, LI L B, WANG H S. Extraction technology optimization and antioxidant activity of polysaccharides from pumpkin seeds[J]. Transactions of the Chinese Society of Agricultural Engineering, 2016, 32(9): 284-290. (in Chinese)

    [14] WANG B S, LI B S, ZENG Q X LIU H X. Antioxidant and free radical scavenging activities of pigments extracted from molasses alcohol wastewater[J]. Food Chemistry, 2008, 107(3): 1198-1204.

    Ultra-high Pressure Assisted Extraction and Antioxidant Activity of Polysaccharide fromSeeds

    WANG Biaoshi1,2, HUANG Haoyang1, TAN Wenhui1, LIU Shumin1,2, ZHANG Shiqi1,2, HAN Zhiping1,2, PENG Yuanhuai1,2

    1. School of Food Science and Engineering, Lingnan Normal University, Zhanjiang, Guangdong 524048, China; 2. Guangdong Engineering and Technology Research Center of Development and Utilization of,Zhanjiang, Guangdong 524048, China

    Ultra-high pressure assisted extraction (UHP) is a new green and high efficient extraction technology for natural products, and the biological activity of the natural products can be kept as much as possible. Withseeds powder as the experimental material, the water-soluble polysaccharide was extracted by a new ultra-high pressure assisted extraction technology. The antioxidant activities of the water-soluble polysaccharide fromseed were evaluated by the total antioxidant capacity and DPPH and hydroxyl radicals scavenging ability. Taking the yield of polysaccharide as an evaluation index, the effects of pulverization degree, pressure, pressure holding time and ratio of material to liquid on the yield of water-soluble polysaccharide fromseed were investigated by the single factor experiment method. The orthogonal experiment design method was used to get the optimum ultra-high pressure assisted extraction conditions of polysaccharide fromseed. The experiment results showed that the optimum technological conditions of the polysaccharide fromseed were determined as follows: holding pressure of 6 min, solid-liquid ratio of 1∶15 (g/mL), extraction pressure of 100 MPa and degree of pulverization of 100 mesh. The yield of the polysaccharide fromseed under this optimum condition was 0.346%. The experiment results also showed that the scavenging abilities for DPPH and hydroxyl radicals increased with the increase of concentration of the polysaccharide fromseed and there was a good linear relationship between concentration of the polysaccharide fromseed and the radical scavenging ability. The IC50(the concentration when the radical scavenging rate is 50%) of the polysaccharide fromseed for DPPH and hydroxyl radicals was 0.0439 g/L and 0.1666 g/L respectively, and the antioxidant ability was lower than that of Vc at the same concentration, which indicated that the water-soluble polysaccharide fromseed had certain antioxidant capacity within a certain concentration range. The total antioxidant capacity of the water-soluble polysaccharide fromseed was 0.0482 mmol/L (Expressed as the equivalent concentration of FeSO4). The water-soluble polysaccharide fromseedcan be extracted effectively in lower temperature and shorter time by ultra-high pressure assisted extraction technology compared with hot-water extraction method and the water-soluble polysaccharide fromseedhas good antioxidant activities and can be exploited and used as a natural antioxidant. The results of this study could provide technical support and reference for the exploration of natural antioxidant and the development and high value comprehensive utilization of.

    seeds; polysaccharide; ultrahigh pressure assisted extraction; antioxidant activity

    S202.1

    A

    10.3969/j.issn.1000-2561.2022.10.020

    2022-02-15;

    2022-03-12

    廣東省自然科學(xué)基金項(xiàng)目(No. 2022A1515010360);中央財(cái)政支持地方高校發(fā)展專項(xiàng)資金項(xiàng)目(No. 0003018015);嶺南師范學(xué)院自然科學(xué)基金項(xiàng)目(No. ZL1817)。

    王標(biāo)詩(shī)(1980—),男,博士,副教授,研究方向:農(nóng)副產(chǎn)品深加工及綜合利用。E-mail:hang_kong2002@163.com。

    猜你喜歡
    辣木自由基多糖
    自由基損傷與魚類普發(fā)性肝病
    自由基損傷與巴沙魚黃肉癥
    陸克定:掌控污染物壽命的自由基
    米胚多糖的組成及抗氧化性研究
    熟三七多糖提取工藝的優(yōu)化
    中成藥(2018年3期)2018-05-07 13:34:45
    眾耘牌辣木健康食品 人人喜愛(ài)成新寵
    辣木之歌
    辣木的抗腫瘤活性及作用機(jī)制研究進(jìn)展
    檞皮苷及其苷元清除自由基作用的研究
    酶法降解白及粗多糖
    中成藥(2014年11期)2014-02-28 22:29:50
    好男人电影高清在线观看| 成年人免费黄色播放视频| 大陆偷拍与自拍| 丝袜人妻中文字幕| 国产精品三级大全| 日韩 亚洲 欧美在线| 国产深夜福利视频在线观看| 99国产精品免费福利视频| 男女之事视频高清在线观看 | 国产成人啪精品午夜网站| 国产免费一区二区三区四区乱码| 亚洲精品国产av蜜桃| 1024香蕉在线观看| 日韩av不卡免费在线播放| 成人国产av品久久久| 日韩伦理黄色片| 欧美精品av麻豆av| 咕卡用的链子| 亚洲国产精品国产精品| 久久鲁丝午夜福利片| 亚洲一区二区三区欧美精品| 久久久久精品国产欧美久久久 | 亚洲三区欧美一区| 国产一卡二卡三卡精品| 又大又爽又粗| 国产日韩一区二区三区精品不卡| 久久久久国产精品人妻一区二区| 另类亚洲欧美激情| 亚洲精品日韩在线中文字幕| 欧美另类一区| 一级黄色大片毛片| 国产精品国产av在线观看| 性色av乱码一区二区三区2| 欧美日韩视频精品一区| 高潮久久久久久久久久久不卡| 久久国产精品影院| a级片在线免费高清观看视频| 久久精品人人爽人人爽视色| 精品久久久久久电影网| 精品卡一卡二卡四卡免费| 狠狠精品人妻久久久久久综合| 熟女av电影| 日韩人妻精品一区2区三区| 少妇的丰满在线观看| 中文字幕高清在线视频| 嫩草影视91久久| 十八禁网站网址无遮挡| 国产视频首页在线观看| 国产黄色视频一区二区在线观看| 考比视频在线观看| 伊人亚洲综合成人网| 成人三级做爰电影| 丝袜脚勾引网站| 久久国产精品男人的天堂亚洲| 成在线人永久免费视频| 女警被强在线播放| 国产在视频线精品| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 精品久久久久久久毛片微露脸 | 一本色道久久久久久精品综合| 精品少妇内射三级| 国产欧美日韩一区二区三区在线| 亚洲成色77777| 国产极品粉嫩免费观看在线| 国产99久久九九免费精品| 妹子高潮喷水视频| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 91国产中文字幕| 青春草亚洲视频在线观看| 97精品久久久久久久久久精品| 日本欧美视频一区| 男女之事视频高清在线观看 | 欧美 日韩 精品 国产| 国产成人一区二区在线| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 亚洲av电影在线观看一区二区三区| 欧美精品亚洲一区二区| 午夜福利一区二区在线看| 欧美xxⅹ黑人| 大码成人一级视频| 欧美精品亚洲一区二区| 宅男免费午夜| 免费看十八禁软件| 国产高清国产精品国产三级| 丝袜在线中文字幕| 五月开心婷婷网| 麻豆国产av国片精品| 50天的宝宝边吃奶边哭怎么回事| 久久久精品区二区三区| 亚洲中文av在线| 日韩伦理黄色片| 午夜福利视频精品| av在线老鸭窝| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 久久人人爽av亚洲精品天堂| 亚洲国产成人一精品久久久| 国产有黄有色有爽视频| 欧美国产精品一级二级三级| 国产黄色视频一区二区在线观看| 精品少妇黑人巨大在线播放| 18禁黄网站禁片午夜丰满| 精品少妇内射三级| 国产真人三级小视频在线观看| 男女之事视频高清在线观看 | www.自偷自拍.com| 你懂的网址亚洲精品在线观看| 一本色道久久久久久精品综合| 日本欧美国产在线视频| 赤兔流量卡办理| 男女边摸边吃奶| 精品一区在线观看国产| 晚上一个人看的免费电影| 欧美黑人欧美精品刺激| 国产色视频综合| 久久热在线av| 嫩草影视91久久| 夫妻性生交免费视频一级片| 国产精品免费大片| 亚洲av综合色区一区| 啦啦啦 在线观看视频| 一区二区av电影网| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 青春草视频在线免费观看| 1024视频免费在线观看| 国产av国产精品国产| 十八禁高潮呻吟视频| 51午夜福利影视在线观看| 国产亚洲欧美精品永久| 婷婷成人精品国产| 性色av乱码一区二区三区2| 欧美国产精品一级二级三级| 伊人久久大香线蕉亚洲五| 99国产综合亚洲精品| 色综合欧美亚洲国产小说| 亚洲欧美一区二区三区国产| 亚洲中文av在线| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片| 久久久久网色| 在线天堂中文资源库| 亚洲伊人久久精品综合| 下体分泌物呈黄色| 久久av网站| 视频区图区小说| 一本综合久久免费| 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频| 国产精品亚洲av一区麻豆| 777久久人妻少妇嫩草av网站| a级片在线免费高清观看视频| 99热国产这里只有精品6| av电影中文网址| 国产主播在线观看一区二区 | 极品少妇高潮喷水抽搐| 汤姆久久久久久久影院中文字幕| 真人做人爱边吃奶动态| 在线观看免费视频网站a站| 一级,二级,三级黄色视频| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 国产欧美日韩精品亚洲av| 婷婷色麻豆天堂久久| 男女边吃奶边做爰视频| 麻豆乱淫一区二区| 欧美日韩亚洲综合一区二区三区_| 女人精品久久久久毛片| 免费日韩欧美在线观看| 国产一区有黄有色的免费视频| 免费观看人在逋| 麻豆av在线久日| 最新在线观看一区二区三区 | 国产成人免费无遮挡视频| 老汉色∧v一级毛片| 久久精品国产亚洲av涩爱| 青草久久国产| 日日摸夜夜添夜夜爱| 国产一级毛片在线| 国产欧美亚洲国产| 一级片'在线观看视频| 亚洲一区中文字幕在线| 国产在线观看jvid| 美女主播在线视频| 亚洲国产欧美网| 99久久人妻综合| 久久精品国产亚洲av涩爱| 成人黄色视频免费在线看| 人妻人人澡人人爽人人| 搡老岳熟女国产| 久久精品国产亚洲av高清一级| 久久久久视频综合| 99国产精品一区二区三区| 国产成人系列免费观看| 一级,二级,三级黄色视频| svipshipincom国产片| 欧美成人精品欧美一级黄| 19禁男女啪啪无遮挡网站| 又大又黄又爽视频免费| 最近手机中文字幕大全| h视频一区二区三区| 高清黄色对白视频在线免费看| 又大又爽又粗| 黑人欧美特级aaaaaa片| 午夜福利视频在线观看免费| 久久99一区二区三区| 国产男女内射视频| 国产亚洲av高清不卡| 夫妻性生交免费视频一级片| 丰满人妻熟妇乱又伦精品不卡| 国产欧美日韩一区二区三区在线| 中文字幕另类日韩欧美亚洲嫩草| 欧美国产精品一级二级三级| 伊人久久大香线蕉亚洲五| 90打野战视频偷拍视频| 狂野欧美激情性xxxx| www日本在线高清视频| 青春草视频在线免费观看| 国产精品久久久久久人妻精品电影 | 免费日韩欧美在线观看| 免费少妇av软件| 日本av免费视频播放| 日日摸夜夜添夜夜爱| 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| av网站免费在线观看视频| 激情五月婷婷亚洲| 亚洲欧美精品自产自拍| 国产日韩一区二区三区精品不卡| 狠狠精品人妻久久久久久综合| 国产男女超爽视频在线观看| 中文精品一卡2卡3卡4更新| 久久精品久久久久久久性| 国产精品九九99| 国产成人免费观看mmmm| 九色亚洲精品在线播放| 日韩,欧美,国产一区二区三区| 在线观看免费午夜福利视频| 久久精品国产综合久久久| 赤兔流量卡办理| 国产精品一国产av| 欧美日韩国产mv在线观看视频| 免费少妇av软件| 日韩av在线免费看完整版不卡| av片东京热男人的天堂| 在现免费观看毛片| 国产精品av久久久久免费| 最新在线观看一区二区三区 | 国产又色又爽无遮挡免| 亚洲一码二码三码区别大吗| 两个人看的免费小视频| 丝瓜视频免费看黄片| 在线看a的网站| 国产精品一区二区在线不卡| av线在线观看网站| 久久久亚洲精品成人影院| 大片电影免费在线观看免费| videos熟女内射| 天天操日日干夜夜撸| 久久午夜综合久久蜜桃| 97在线人人人人妻| 欧美亚洲 丝袜 人妻 在线| 国产成人精品久久二区二区免费| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 18在线观看网站| 一区二区三区四区激情视频| 国产在线观看jvid| 大香蕉久久成人网| 狂野欧美激情性bbbbbb| 看免费成人av毛片| 久久久国产一区二区| 性色av一级| 午夜福利,免费看| 国产精品成人在线| 咕卡用的链子| 欧美黑人欧美精品刺激| 在线观看国产h片| 嫩草影视91久久| 满18在线观看网站| 啦啦啦中文免费视频观看日本| 丝瓜视频免费看黄片| 欧美在线一区亚洲| 中国国产av一级| 国产精品久久久av美女十八| 免费人妻精品一区二区三区视频| 黄色毛片三级朝国网站| 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| 国产黄色免费在线视频| 国产成人啪精品午夜网站| 91成人精品电影| 日韩av在线免费看完整版不卡| 国产av国产精品国产| 亚洲第一av免费看| 婷婷色综合大香蕉| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| www.av在线官网国产| 婷婷丁香在线五月| 免费看av在线观看网站| 免费女性裸体啪啪无遮挡网站| 国产片内射在线| 巨乳人妻的诱惑在线观看| 国产精品久久久久久人妻精品电影 | 美女脱内裤让男人舔精品视频| 免费久久久久久久精品成人欧美视频| 成年av动漫网址| 欧美精品一区二区大全| 男女高潮啪啪啪动态图| 精品一区二区三卡| 操出白浆在线播放| 一级a爱视频在线免费观看| 男女床上黄色一级片免费看| 丰满人妻熟妇乱又伦精品不卡| 国产欧美日韩一区二区三区在线| 日韩一本色道免费dvd| 久久 成人 亚洲| 国产成人一区二区在线| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片| 国产视频一区二区在线看| 亚洲av日韩精品久久久久久密 | 男人爽女人下面视频在线观看| 久久久精品免费免费高清| 亚洲成国产人片在线观看| 国产片特级美女逼逼视频| 久久精品人人爽人人爽视色| 欧美久久黑人一区二区| 精品亚洲成国产av| 亚洲成国产人片在线观看| 一区二区三区激情视频| 香蕉丝袜av| 国产高清videossex| 亚洲国产成人一精品久久久| 国产免费现黄频在线看| 一级毛片电影观看| 午夜福利视频在线观看免费| 美女主播在线视频| 精品高清国产在线一区| 捣出白浆h1v1| 欧美少妇被猛烈插入视频| 18禁观看日本| 欧美日韩成人在线一区二区| 亚洲精品久久午夜乱码| 免费少妇av软件| 婷婷色综合大香蕉| 秋霞在线观看毛片| 尾随美女入室| 中文字幕最新亚洲高清| 国产深夜福利视频在线观看| 这个男人来自地球电影免费观看| 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡 | 国产一区二区在线观看av| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 国产成人精品久久久久久| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 亚洲精品国产av蜜桃| 美女大奶头黄色视频| 丝袜美足系列| 男女床上黄色一级片免费看| 久久久久久亚洲精品国产蜜桃av| 韩国精品一区二区三区| 又大又爽又粗| 中文乱码字字幕精品一区二区三区| 国产欧美亚洲国产| 大片免费播放器 马上看| 宅男免费午夜| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 久久久久久人人人人人| 精品国产一区二区久久| 亚洲欧美激情在线| 国产精品 国内视频| 亚洲欧美一区二区三区久久| 国产伦人伦偷精品视频| 精品高清国产在线一区| 老汉色av国产亚洲站长工具| 十分钟在线观看高清视频www| 午夜免费成人在线视频| 免费观看a级毛片全部| 777久久人妻少妇嫩草av网站| 国产亚洲欧美在线一区二区| 国产成人精品久久二区二区免费| 欧美黑人欧美精品刺激| 精品一区在线观看国产| 国产精品久久久av美女十八| 午夜老司机福利片| 一二三四在线观看免费中文在| 肉色欧美久久久久久久蜜桃| 精品高清国产在线一区| 丁香六月天网| 少妇的丰满在线观看| www.自偷自拍.com| 欧美人与性动交α欧美精品济南到| 性色av一级| 男女边摸边吃奶| 精品国产国语对白av| 99re6热这里在线精品视频| 一边亲一边摸免费视频| 亚洲精品一区蜜桃| 精品国产一区二区久久| 狠狠精品人妻久久久久久综合| 视频区图区小说| 激情视频va一区二区三区| 国产精品久久久久久人妻精品电影 | 精品久久久久久久毛片微露脸 | 久久性视频一级片| 精品福利观看| 性色av乱码一区二区三区2| 老司机亚洲免费影院| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 黄色a级毛片大全视频| 国产精品香港三级国产av潘金莲 | 女人被躁到高潮嗷嗷叫费观| 亚洲av日韩在线播放| 亚洲国产最新在线播放| 久久久久精品人妻al黑| 久久ye,这里只有精品| 国产又爽黄色视频| 又大又黄又爽视频免费| tube8黄色片| 国产成人一区二区三区免费视频网站 | 色播在线永久视频| 国产伦理片在线播放av一区| 国产av国产精品国产| 黄片小视频在线播放| 啦啦啦在线观看免费高清www| 亚洲av成人不卡在线观看播放网 | 国产成人免费观看mmmm| 亚洲精品中文字幕在线视频| 婷婷色综合大香蕉| 久久精品久久久久久久性| av网站免费在线观看视频| 丝袜美足系列| 国产亚洲精品久久久久5区| 亚洲中文日韩欧美视频| 男女床上黄色一级片免费看| 2018国产大陆天天弄谢| 欧美日韩av久久| 亚洲av日韩在线播放| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 啦啦啦 在线观看视频| 久久久久精品国产欧美久久久 | 一区福利在线观看| 国产高清国产精品国产三级| www.av在线官网国产| 亚洲情色 制服丝袜| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 黑人欧美特级aaaaaa片| 1024香蕉在线观看| 国产亚洲午夜精品一区二区久久| 午夜免费成人在线视频| 丁香六月欧美| 久久精品国产亚洲av涩爱| 亚洲av电影在线观看一区二区三区| 男人添女人高潮全过程视频| 亚洲av电影在线观看一区二区三区| 精品人妻在线不人妻| 成人国产av品久久久| 久久av网站| 又大又黄又爽视频免费| 亚洲精品国产av蜜桃| 国产色视频综合| 丝袜脚勾引网站| 国产精品偷伦视频观看了| 一级a爱视频在线免费观看| 永久免费av网站大全| 美国免费a级毛片| 亚洲中文av在线| 高清欧美精品videossex| 亚洲人成77777在线视频| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频| 亚洲成av片中文字幕在线观看| 精品少妇内射三级| 波野结衣二区三区在线| 99久久99久久久精品蜜桃| 亚洲欧美精品自产自拍| 老司机亚洲免费影院| 性色av乱码一区二区三区2| 日日摸夜夜添夜夜爱| 一二三四社区在线视频社区8| 国产高清国产精品国产三级| 亚洲成人国产一区在线观看 | 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 777米奇影视久久| 搡老岳熟女国产| 狂野欧美激情性xxxx| 久久天堂一区二区三区四区| 国产精品欧美亚洲77777| 成年动漫av网址| 成人三级做爰电影| 午夜福利,免费看| 国产精品一区二区免费欧美 | 精品国产一区二区三区久久久樱花| 国产av国产精品国产| 看免费成人av毛片| 久久久久久久精品精品| 99国产综合亚洲精品| 一级毛片我不卡| 老司机影院毛片| 精品福利观看| 麻豆av在线久日| 国产精品99久久99久久久不卡| 国产一区二区三区av在线| 热re99久久精品国产66热6| 两性夫妻黄色片| 亚洲成人免费电影在线观看 | 每晚都被弄得嗷嗷叫到高潮| 两性夫妻黄色片| 99热全是精品| 少妇人妻 视频| 亚洲伊人色综图| 午夜老司机福利片| 久热这里只有精品99| 欧美精品av麻豆av| 波野结衣二区三区在线| 又黄又粗又硬又大视频| 欧美亚洲 丝袜 人妻 在线| 免费看av在线观看网站| 十分钟在线观看高清视频www| av在线老鸭窝| 高清av免费在线| 日韩,欧美,国产一区二区三区| 高清不卡的av网站| videosex国产| 九色亚洲精品在线播放| 十八禁人妻一区二区| 啦啦啦啦在线视频资源| 在线av久久热| 久久国产精品男人的天堂亚洲| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看 | 一边摸一边抽搐一进一出视频| 精品人妻熟女毛片av久久网站| 美国免费a级毛片| 成年美女黄网站色视频大全免费| www日本在线高清视频| 男女之事视频高清在线观看 | 亚洲欧美色中文字幕在线| av一本久久久久| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 国产极品粉嫩免费观看在线| 亚洲国产精品国产精品| 亚洲人成电影免费在线| 亚洲精品成人av观看孕妇| 国产黄频视频在线观看| www.自偷自拍.com| 七月丁香在线播放| 欧美变态另类bdsm刘玥| 国产成人av激情在线播放| 捣出白浆h1v1| 丝袜美足系列| 国产成人影院久久av| 亚洲精品在线美女| 黄色片一级片一级黄色片| avwww免费| 国产高清国产精品国产三级| 一二三四社区在线视频社区8| 国产精品熟女久久久久浪| 老鸭窝网址在线观看| 亚洲三区欧美一区| 久久久久久亚洲精品国产蜜桃av| 青春草视频在线免费观看| 精品一区在线观看国产| 精品国产一区二区三区久久久樱花| 热99国产精品久久久久久7| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 新久久久久国产一级毛片| 亚洲综合色网址| 国产xxxxx性猛交| 亚洲精品国产一区二区精华液| 性高湖久久久久久久久免费观看| 亚洲精品国产av成人精品| 天堂中文最新版在线下载| 每晚都被弄得嗷嗷叫到高潮| 性少妇av在线| 在线观看一区二区三区激情| 久久精品久久精品一区二区三区| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 一本久久精品| 亚洲熟女精品中文字幕| 成人国产一区最新在线观看 | 亚洲国产毛片av蜜桃av| 国产亚洲欧美精品永久| 亚洲第一青青草原| 黄色怎么调成土黄色| 国产免费福利视频在线观看| 一二三四在线观看免费中文在| 久久性视频一级片| 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| 国产精品一区二区在线不卡| 日韩,欧美,国产一区二区三区| 精品福利观看| 后天国语完整版免费观看| 亚洲av成人不卡在线观看播放网 | 国产精品欧美亚洲77777| 欧美黑人精品巨大| 99九九在线精品视频| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 欧美成人午夜精品| 国产精品亚洲av一区麻豆| 久久毛片免费看一区二区三区| 看免费av毛片| 亚洲av日韩精品久久久久久密 | 国产成人系列免费观看| 黑人猛操日本美女一级片| 十八禁网站网址无遮挡| 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡 | 一级,二级,三级黄色视频| 亚洲精品在线美女| 女人精品久久久久毛片| 国产主播在线观看一区二区 | 成人亚洲欧美一区二区av| 99国产精品一区二区三区| 一级毛片黄色毛片免费观看视频| 丝袜在线中文字幕| 久久久久视频综合| 看十八女毛片水多多多| 大片电影免费在线观看免费| 国产精品久久久人人做人人爽| 人人澡人人妻人| 国产精品 国内视频| 性色av一级| 日本一区二区免费在线视频| 亚洲国产毛片av蜜桃av| 国产成人啪精品午夜网站|