血小板/淋巴細(xì)胞比值聯(lián)合血清降鈣素原及淀粉樣蛋白A檢測在新生兒壞死性小腸結(jié)腸炎中的診斷價(jià)值

錢玉萍，劉光輝，趙鈺瑋，張 健

安徽省兒童醫(yī)院新生兒科，安徽合肥 230022

新生兒壞死性小腸結(jié)腸炎(NEC)是新生兒常發(fā)的一種胃腸道急癥。目前，對于該病的發(fā)病機(jī)制尚不清楚，有研究指出該病可能與缺氧、腸內(nèi)菌群失調(diào)等有一定的關(guān)系，常發(fā)病于出生兩周內(nèi)的新生兒[1]。其臨床表現(xiàn)主要為拒食、腹瀉、血便、嘔吐等，近年來NEC的發(fā)病率逐年上升，病死率高達(dá)50%，嚴(yán)重威脅新生兒的健康及生命，早期診斷及制訂治療方案顯得尤為重要[2]。目前，臨床診斷NEC常用的實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)包括血常規(guī)、C反應(yīng)蛋白等，但是這些指標(biāo)缺乏特異性，而病原學(xué)檢查又由于陽性率低、耗時(shí)長等缺點(diǎn)，早期診斷價(jià)值不高。因此，有學(xué)者提出采用炎癥標(biāo)志物聯(lián)合檢測的方法以提高臨床診斷價(jià)值[3]。血小板/淋巴細(xì)胞比值(PLR)是近幾年提出的能夠反映體內(nèi)炎癥狀況的敏感指標(biāo)，有研究稱PLR與感染、腫瘤等疾病有密切的關(guān)系[4]。降鈣素原(PCT)是反映機(jī)體炎癥狀況的降鈣素前肽物質(zhì)，機(jī)體感染細(xì)菌2～3 h異常上升，是臨床應(yīng)用較為方便的敏感指標(biāo)[5]。血清淀粉樣蛋白A(SAA)作為一種急性時(shí)相反應(yīng)蛋白，在身體發(fā)生炎癥或者處于感染急性期時(shí)會(huì)急速升高，恢復(fù)期時(shí)又會(huì)迅速下降，在兒童感染性疾病中有較高的診斷價(jià)值，但對NEC是否有預(yù)測價(jià)值尚不清楚。基于此，本研究選取2018年6月至2020年12月在本院新生兒科出生的90例NEC患兒為研究對象，探討PLR聯(lián)合PCT、SAA檢測在NEC診斷中的應(yīng)用價(jià)值。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2018年6月至2020年12月在本院新生兒科就診的90例NEC患兒為觀察組，其中男49例，女41例；日齡1～20 d，平均(6.56±3.48)d。按照Bell分期標(biāo)準(zhǔn)[6]進(jìn)行分期：Ⅰ期患兒25例，Ⅱ期患兒48例，Ⅲ期患兒17例。(1)納入標(biāo)準(zhǔn)：①住院時(shí)間大于24 h；②納入前未接受過任何形式的治療；③積極配合治療且資料完整；④所有患兒符合《實(shí)用新生兒學(xué)》[7]中的NEC診斷標(biāo)準(zhǔn)。(2)排除標(biāo)準(zhǔn)：①存在消化道畸形等先天性畸形；②合并臟器衰竭；③中途放棄治療。同期選擇健康新生兒80例為對照組，其中男49例，女31例，日齡1～21 d，平均(6.73±3.52)d。本研究所有新生兒家長了解本研究并簽署知情同意書，本研究經(jīng)本院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2儀器與試劑 M16RS低溫高速離心機(jī)購自上海邁皋科學(xué)儀器有限公司；—80 ℃立式超低溫冰箱購自賽默飛世爾科技(中國)有限公司；PCT酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)試劑盒、SAA ELISA試劑盒均購自上海酶聯(lián)生物科技有限公司；酶標(biāo)儀購自上海眾磊生物技術(shù)有限公司；DxH800血細(xì)胞分析儀購自貝克曼庫爾特商貿(mào)(中國)有限公司。

1.3方法

1.3.1標(biāo)本采集 兩組新生兒均于入組后空腹采集靜脈血標(biāo)本3 mL，3 000 r/min高速離心10 min，分離血清于EP管中，并記錄編號(hào)和日期，于—80 ℃冰箱中保存?zhèn)溆谩?/p>

1.3.2臨床資料收集 收集所有研究對象臨床資料，包括：(1)產(chǎn)前母親是否使用過糖皮質(zhì)激素、感染肺炎、存在感染性休克；生產(chǎn)方式、產(chǎn)時(shí)有無窒息；新生兒的性別、體質(zhì)量；出生后是否患有敗血癥、服用益生菌。(2)采用ELISA檢測新生兒血清PCT、SAA水平，其試驗(yàn)步驟嚴(yán)格遵循試劑盒說明書。使用DxH800血細(xì)胞分析儀進(jìn)行血常規(guī)分析，包括血小板計(jì)數(shù)(PLT)、淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)(L)，計(jì)算PLR。

2 結(jié) 果

2.1兩組新生兒基線資料比較 兩組新生兒體質(zhì)量、產(chǎn)時(shí)窒息發(fā)生情況、產(chǎn)前使用糖皮質(zhì)激素比例、敗血癥發(fā)生情況、服用益生菌比例、感染性休克發(fā)生情況等基線資料比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，而兩組新生兒性別、日齡、分娩方式、感染肺炎發(fā)生情況等資料比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表1。

2.2兩組新生兒PLR、PCT及SAA水平比較 觀察組PLR、PCT、SAA水平較對照組明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

表1 兩組新生兒基線資料比較[n(%)]

組別n產(chǎn)前使用糖皮質(zhì)激素是否敗血癥有無分娩方式自然分娩剖宮產(chǎn)觀察組9031(34.44)59(65.56)49(54.44)41(45.56)49(54.44)41(45.56)對照組8060(75.00)20(25.00)14(17.50)66(82.50)39(48.75)41(51.25)χ226.39723.2250.346P<0.001<0.0010.557

組別n服用益生菌是否感染性休克是否感染肺炎有無觀察組9040(44.44)50(55.56)50(55.56)40(44.44)35(38.89)55(61.11)對照組8056(70.00)24(30.00)6(7.50)74(92.50)40(50.00)40(50.00)χ210.23742.1281.694P0.001<0.0010.193

表2 兩組新生兒PLR、PCT及SAA水平比較

2.3不同分期NEC患兒PLR、PCT及SAA水平比較 不同分期NEC患兒PLR、PCT、SAA水平比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。Ⅲ期患兒PLR高于Ⅱ期患兒，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(q=5.697，P<0.05)；Ⅱ期患兒PLR、PCT、SAA水平均高于Ⅰ期患兒，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(q=11.292、0.029、0.025，P<0.05)；Ⅲ期患兒PLR、PCT、SAA水平均高于Ⅰ期患兒，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(q=10.741、5.022、3.597，P<0.05)。見表3。

2.4ROC曲線分析PLR、PCT、SAA及3項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合檢測對NEC的診斷價(jià)值 ROC曲線分析結(jié)果顯示，PLR、PCT、SAA 3項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合檢測診斷NEC的曲線下面積(AUC)為0.856，靈敏度為84.3%，特異度為87.5%，其AUC明顯大于3項(xiàng)指標(biāo)單獨(dú)檢測的AUC(P<0.05)。見表4。

表3 不同分期NEC患兒PLR、PCT及SAA水平比較

表4 ROC曲線分析PLR、PCT、SAA及3項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合檢測對NEC的診斷價(jià)值

2.5多因素Logistic回歸分析影響NEC的危險(xiǎn)因素 將2.1基線資料中體質(zhì)量、產(chǎn)時(shí)窒息、產(chǎn)前使用糖皮質(zhì)激素、敗血癥、服用益生菌、感染性休克、PLR、PCT、SAA作為因變量進(jìn)行多因素Logistic回歸分析，結(jié)果顯示敗血癥及PLR、PCT、SAA水平升高是新生兒發(fā)生NEC的獨(dú)立危險(xiǎn)因素(P<0.05)，服用益生菌是保護(hù)因素(P<0.05)。見表5。

表5 多因素Logistic回歸分析NEC的危險(xiǎn)因素

3 討 論

NEC是常發(fā)于早產(chǎn)兒且病死率較高的消化道疾病，該疾病的發(fā)生是由多方面的因素共同造成的。嚴(yán)重的NEC可引發(fā)一系列的并發(fā)癥，如腸穿孔、器官衰竭等，嚴(yán)重者甚至可導(dǎo)致患兒死亡[8]。但該病的早期癥狀并不典型，常與急性腸炎等腸道疾病混淆。因此，研究能早期準(zhǔn)確診斷NEC的敏感標(biāo)志物對該病的預(yù)防和治療有十分重要的意義。

PLR是一種反映機(jī)體炎癥的指標(biāo)，當(dāng)體內(nèi)PLR升高，預(yù)示著身體免疫功能遭到破壞，進(jìn)而引起炎癥反應(yīng)，促進(jìn)腸道疾病的發(fā)生[9]。勾熙等[10]研究發(fā)現(xiàn)，潰瘍性結(jié)腸炎臨床活動(dòng)組PLR明顯高于潰瘍性結(jié)腸炎臨床緩解組，且PLR與患者病情嚴(yán)重程度呈正相關(guān)。程迎迎等[11]指出，PLR在潰瘍性結(jié)腸炎患者外周血中明顯升高，PLR診斷潰瘍性結(jié)腸炎的效能優(yōu)于常用指標(biāo)PLT。PCT是無活性降鈣素前肽物質(zhì)，在體內(nèi)可以預(yù)測細(xì)菌感染狀況，其水平與感染程度呈正相關(guān)，對炎癥性疾病的判斷和預(yù)防有十分重要的作用[12]。尹琳琳等[13]的研究發(fā)現(xiàn)，NEC早產(chǎn)兒血清中PCT水平明顯高于健康早產(chǎn)兒，且提示血清中PCT水平預(yù)測NEC有一定的參考價(jià)值。李菲等[14]研究表明，NEC新生兒血清PCT水平明顯高于健康新生兒，且Ⅲ期患兒明顯高于Ⅱ期患兒，Ⅱ期患兒明顯高于Ⅰ期患兒。SAA是多基因編碼的多形態(tài)蛋白家族成員，在早期肝臟損傷或者感染時(shí)，由肝細(xì)胞分泌，屬于急性時(shí)相反應(yīng)蛋白，在感染性疾病中有一定的診斷價(jià)值。顏靈靜等[15]研究發(fā)現(xiàn)，NEC患兒血清SAA水平明顯高于健康對照者，且與患兒嚴(yán)重程度有關(guān)，劉欣等[16]研究結(jié)果也符合這一規(guī)律。

本研究中，觀察組PLR、PCT、SAA水平較對照組均明顯升高，且Ⅲ期患兒PLR高于Ⅱ期患兒，Ⅱ、Ⅲ期患兒PLR、PCT、SAA水平高于Ⅰ期患兒，提示PLR、PCT、SAA參與了該病的發(fā)生、發(fā)展，3項(xiàng)指標(biāo)可反映該病的嚴(yán)重程度。NEC的發(fā)病是由多種因素引起的，BORTOLIN等[17]研究表明，產(chǎn)前使用糖皮質(zhì)激素可以促進(jìn)腸黏膜發(fā)育成熟，從而減輕腸壞死程度。鄒耀明等[18]研究表明，產(chǎn)時(shí)窒息、敗血癥是NEC發(fā)生的危險(xiǎn)因素，而發(fā)病前口服益生菌是其保護(hù)因素，可減少NEC的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)。而本研究多因素Logistic回歸分析結(jié)果顯示，敗血癥及PLR、PCT、SAA水平升高是新生兒發(fā)生NEC的獨(dú)立危險(xiǎn)因素(P<0.05)，服用益生菌是保護(hù)因素(P<0.05)。這提示新生兒服用益生菌可減少NEC的發(fā)病率，且應(yīng)嚴(yán)格監(jiān)測有以上危險(xiǎn)因素新生兒的相關(guān)指標(biāo)，并采取一定干預(yù)措施。敗血癥是病原菌進(jìn)入血液而引起的全身性感染疾病，而新生兒腸道功能較弱，很容易發(fā)生腸道感染，從而造成腸道壞死。益生菌可以改善腸道正常菌群，增強(qiáng)殺菌力，改善腸道黏膜功能。ROC曲線分析結(jié)果顯示，PLR、PCT、SAA 3項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合檢測診斷NEC的AUC為0.856，靈敏度為84.3%，特異度為87.5%，其AUC明顯大于3項(xiàng)指標(biāo)單獨(dú)檢測的AUC，提示3項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合檢測對早期NEC具有更高的診斷價(jià)值，有被廣泛應(yīng)用于臨床的前景。

綜上所述，NEC患兒血清PLR、PCT及SAA水平上升，3項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合檢測對NEC的診斷效能優(yōu)于單獨(dú)檢測。