香港牡蠣幼蟲運(yùn)動(dòng)、耗氧率、攝食率及趨光性研究

張興志，官俊良，何蘋萍，張立，李蔚，馬元，韋嬪媛，彭金霞

（廣西水產(chǎn)科學(xué)研究院/廣西水產(chǎn)遺傳育種與健康養(yǎng)殖重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廣西南寧 530021）

0 引言

【研究意義】香港牡蠣（Crassostrea hongkongensis）俗稱大蠔，地方名“欽州大蠔”“北海生蠔”等，是我國(guó)牡蠣養(yǎng)殖的三大主導(dǎo)品種之一。香港牡蠣肉質(zhì)鮮美，營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高，其中鈣含量接近牛奶，素有“海中牛奶”之美稱，“欽州大蠔”是廣西著名的原產(chǎn)地理標(biāo)志產(chǎn)品。香港牡蠣目前年產(chǎn)量178.7萬(wàn)t，占全國(guó)牡蠣總產(chǎn)量的32.95%，產(chǎn)值170多億元（農(nóng)業(yè)農(nóng)村部漁業(yè)漁政管理局，2021）。香港牡蠣是我國(guó)華南沿海及越南、文萊等“一帶一路”國(guó)家主要養(yǎng)殖經(jīng)濟(jì)貝類品種，對(duì)漁民增收、脫貧致富作出了巨大的貢獻(xiàn)（張興志等，2019）。長(zhǎng)期以來(lái)，香港牡蠣苗種主要來(lái)自于海區(qū)自然采苗（鐘方杰等，2014），廣西欽州灣茅尾海曾是我國(guó)最大的香港牡蠣天然采苗區(qū)（王如才，2004），苗種供應(yīng)廣西、廣東及越南等東南亞國(guó)家。受場(chǎng)地老化、沿岸工業(yè)及城鎮(zhèn)化發(fā)展的影響，近十幾年來(lái)廣西傳統(tǒng)牡蠣采苗場(chǎng)苗種產(chǎn)量低（李堅(jiān)明和劉堅(jiān)紅，2008），且苗種質(zhì)量良莠不齊、養(yǎng)殖周期長(zhǎng)（2～3年），導(dǎo)致苗種長(zhǎng)期短缺。人工孵化苗種應(yīng)運(yùn)而生，但苗種產(chǎn)量較低，遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能滿足市場(chǎng)需求，急需開展生產(chǎn)過(guò)程可控且綠色高效的香港牡蠣苗種培育技術(shù)的研究與探索。因此，研究香港牡蠣幼蟲培育過(guò)程中的運(yùn)動(dòng)速度、耗氧率、攝食率及趨光性等關(guān)鍵參數(shù)，對(duì)牡蠣人工育苗的集約化、精準(zhǔn)化管理具有重要的指導(dǎo)意義。【前人研究進(jìn)展】明確幼蟲的生物學(xué)特點(diǎn)，實(shí)現(xiàn)貝類苗種高密度、集約化、高效率的苗種生產(chǎn)，是解決苗種緊缺的有效途徑。目前，學(xué)者們圍繞貝類幼蟲運(yùn)動(dòng)、攝食及趨光性等生物學(xué)特性開展了諸多研究。Wheeler等（2013）研究發(fā)現(xiàn)，牡蠣幼蟲傾向于向上游動(dòng)，即使是在非常湍急的水流中，幼蟲也會(huì)向上游動(dòng)，潛水反應(yīng)次數(shù)減少。Qiu等（2015）研究了福建牡蠣（Crassostrea angulata）幼蟲的攝食行為和運(yùn)動(dòng)特點(diǎn)，并測(cè)定單個(gè)幼蟲的游泳速度、攝食率等關(guān)鍵參數(shù)，以此，構(gòu)建了牡蠣苗種循環(huán)水高密度養(yǎng)殖設(shè)施。鄧正華等（2016，2018）描述了合浦珠母貝（Pinctada fucata）和珠母貝（Pinctada margaritifera）幼蟲的運(yùn)動(dòng)行為及攝食行為，并顯著提高了育苗效率。Wheeler等（2017）、Meyer等（2018）研究發(fā)現(xiàn)，在流水的環(huán)境中，光照會(huì)顯著影響東部牡蠣（Crassostrea virginica）幼蟲的游泳速度和游泳方向，同時(shí)會(huì)改變其螺旋游泳時(shí)的角度，且隨著其幼蟲年齡的增長(zhǎng)，幼蟲游泳能力降低，傾向于留在水體底部。Zhang等（2021a）研究發(fā)現(xiàn)，長(zhǎng)牡蠣（Crassostrea gigas）和熊本牡蠣（Crassostrea sikamea）雜交幼蟲對(duì)特定光強(qiáng)和波長(zhǎng)具有趨光性，這種能力不是眼點(diǎn)幼蟲所特有，在未發(fā)育出眼點(diǎn)的牡蠣幼蟲中也存在?！颈狙芯壳腥朦c(diǎn)】香港牡蠣幼蟲特性及人工育苗技術(shù)的研究較少，有學(xué)者從鹽度及培育密度等方面開展了人工育苗的研究（官俊良，2015），但缺少幼蟲培育時(shí)期的基礎(chǔ)數(shù)據(jù)，如幼蟲的運(yùn)動(dòng)、耗氧率、攝食率及光選擇性等，在育苗生產(chǎn)實(shí)踐中，無(wú)法實(shí)現(xiàn)精準(zhǔn)的餌料投喂、溶氧調(diào)控及環(huán)境調(diào)節(jié)，導(dǎo)致人工育苗產(chǎn)量始終較低。因此，目前鮮見有關(guān)香港牡蠣幼蟲運(yùn)動(dòng)、耗氧率、攝食率及趨光性的研究報(bào)道?！緮M解決的關(guān)鍵問(wèn)題】通過(guò)開展香港牡蠣幼蟲運(yùn)動(dòng)速度、面盤大小、耗氧率、攝食率及趨光性等方面的研究，將香港牡蠣幼蟲運(yùn)動(dòng)、耗氧率及攝食率等特征與生長(zhǎng)特性建立數(shù)量化關(guān)系，實(shí)現(xiàn)對(duì)單個(gè)幼蟲行為的定量化描述，對(duì)香港牡蠣人工育苗中幼蟲的精準(zhǔn)化培育管理、確定幼蟲最優(yōu)餌料投喂量具有指導(dǎo)意義，同時(shí)為設(shè)施化高密度育苗設(shè)施構(gòu)建提供數(shù)據(jù)支持。

1 材料與方法

1.1 幼蟲獲得及培育

2021年8月，挑選廣西北海廉州灣牡蠣養(yǎng)殖區(qū)性腺發(fā)育成熟的香港牡蠣雌雄親貝各5只，通過(guò)解剖獲得精卵后進(jìn)行人工授精，受精后在500 L養(yǎng)殖槽中孵化以備實(shí)驗(yàn)使用，孵化密度10～15 ind/mL，鹽度30‰，水溫28±1℃，孵化24 h后獲得幼蟲，即開始投喂餌料。試驗(yàn)所用水為經(jīng)過(guò)2級(jí)過(guò)濾的砂濾海水，每隔2 d更換一次。金藻最適于牡蠣幼蟲的營(yíng)養(yǎng)需求（Acarli and Lok，2011），因此，在培育期間，幼蟲飼喂球等鞭金藻（Isochrysis galbana）（細(xì)胞直徑4.42±0.60μm，n=30），每天投喂2次餌料，投餌量視幼蟲攝食情況而定。人工授精方法、卵的孵化、幼蟲收集及幼蟲培育參考張興志等（2019）的描述。

1.2 測(cè)定方法

1.2.1 運(yùn)動(dòng)速度測(cè)定隨機(jī)選取不同發(fā)育時(shí)期的幼蟲（D形幼蟲、前期殼頂幼蟲、中期殼頂幼蟲、后期殼頂幼蟲和眼點(diǎn)幼蟲）各30個(gè)。在幼蟲投喂2 h后，根據(jù)不同的規(guī)格，選擇相應(yīng)網(wǎng)目的篩絹網(wǎng)，收集幼蟲，用吸管將幼蟲置于直徑為45 mm表面皿中，靜置5 min待幼蟲適應(yīng)后，使用萊卡顯微鏡（DM750）和顯微數(shù)碼測(cè)量分析系統(tǒng)記錄幼蟲運(yùn)動(dòng)軌跡。使用視頻處理軟件逐幀播放，保存幼蟲瞬時(shí)運(yùn)動(dòng)照片，利用圖像處理軟件Photoshop CC測(cè)量幼蟲的大小和運(yùn)動(dòng)距離，計(jì)算運(yùn)動(dòng)速度（v）。

1.2.2 面盤直徑和殼高測(cè)量隨機(jī)選取4個(gè)發(fā)育時(shí)期的幼蟲（D形幼蟲、前期殼頂幼蟲、中期殼頂幼蟲和后期殼頂幼蟲）各30個(gè)。在盛有幼蟲的表面皿中滴入3～5滴50 g/L的MgCl2（終濃度約2～3 g/L），使運(yùn)動(dòng)中的幼蟲（面盤突出并完全伸展）瞬間麻醉，在40倍顯微鏡下拍照并測(cè)量其面盤直徑（d）和殼高。

1.2.3 耗氧率測(cè)定使用篩網(wǎng)收集不同發(fā)育時(shí)期的香港牡蠣幼蟲（D形幼蟲、前期殼頂幼蟲、中期殼頂幼蟲和后期殼頂幼蟲），將幼蟲密度稀釋至50～70個(gè)/mL，置于5000 mL呼吸瓶?jī)?nèi)，設(shè)3個(gè)平行。使用YSI professional水質(zhì)分析儀測(cè)定初始的溶解氧含量，用封口膜封口。呼吸瓶在室內(nèi)靜置，空調(diào)保持溫度在適宜范圍（28℃）內(nèi)，每隔1 h測(cè)定水中溶解氧。為保證幼蟲的正常生理活動(dòng)，試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，舍棄溶氧低于4.5 mg/L的試驗(yàn)組（Zhang et al.，2021b）。同時(shí)，設(shè)置1組海水對(duì)照組（不放置幼蟲），消除不可控環(huán)境因素產(chǎn)生的影響。單個(gè)幼蟲耗氧率計(jì)算公式：

式中，R為耗氧率（ng/h），V為試驗(yàn)海水的體積（mL），L為幼蟲密度（個(gè)/mL），DO0和DOt分別為試驗(yàn)開始和試驗(yàn)結(jié)束時(shí)水體中溶解氧濃度（mg/L），t為試驗(yàn)時(shí)間（h）。

1.2.4 攝食率測(cè)定在停飼4 h后，分別收集發(fā)育至不同時(shí)期的香港牡蠣幼蟲（D形幼蟲、前期殼頂幼蟲、中期殼頂幼蟲、后期殼頂幼蟲和眼點(diǎn)幼蟲），將其分別稀釋至5～10個(gè)/mL，置于1000 mL燒杯內(nèi)，每種規(guī)格設(shè)3個(gè)平行。投喂球等鞭金藻為餌料，測(cè)定攝食率，投喂密度8000～10000 cells/mL，每隔1 h取樣，使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)餌料密度。試驗(yàn)過(guò)程中微量充氣。同時(shí)，設(shè)置1組海水對(duì)照組（投放餌料但不放置幼蟲），消除餌料沉降產(chǎn)生的影響。幼蟲攝食率計(jì)算公式：

式中，F(xiàn)為攝食率（cells/h），V為試驗(yàn)海水的體積（mL），L為幼蟲密度（個(gè)/mL），C0和Ct分別為試驗(yàn)開始和試驗(yàn)結(jié)束時(shí)水體中餌料密度（cells/mL），t為實(shí)驗(yàn)時(shí)間（h）。

1.2.5 光色對(duì)香港牡蠣幼蟲的誘集效果測(cè)定使用自主設(shè)計(jì)組裝的LED光源和彩色紙板作為幼蟲誘集光源（圖1），光色設(shè)置白、紅、黃、藍(lán)、紫和綠色等6種，每個(gè)色塊設(shè)置3個(gè)重復(fù)。光照強(qiáng)度50 Lx（Zhang et al.，2021），將幼蟲放置在直徑為15 cm的培養(yǎng)皿中，通過(guò)不同光色誘集30 min后，用移液槍豎直在不同光色塊的中央位置各吸取水樣1 mL，計(jì)數(shù)幼蟲數(shù)量，然后將幼蟲放回培養(yǎng)皿中，旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)皿并攪動(dòng)水體，30 min后再次計(jì)數(shù)，重復(fù)3次取平均值。統(tǒng)計(jì)不同光色誘集幼蟲的數(shù)量，并計(jì)算幼蟲數(shù)量所占比例，以此判斷幼蟲的趨向性。試驗(yàn)測(cè)定了D型幼蟲（殼高66.75±4.49μm）、殼頂幼蟲（殼高195.43±20.25 μm）和眼點(diǎn)幼蟲（殼高302.39±22.38μm）3個(gè)時(shí)期香港牡蠣幼蟲的驅(qū)光效應(yīng)，試驗(yàn)設(shè)置幼蟲密度約20個(gè)/mL。為去除光線干擾，光色試驗(yàn)在20：00后進(jìn)行。

1.3 統(tǒng)計(jì)分析

用Photoshop CC處理圖像并繪制幼蟲運(yùn)動(dòng)軌跡示意圖。采用SPSS 19.0對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析及相關(guān)分析，用Excel 2016作圖。

2 結(jié)果與分析

2.1 香港牡蠣幼蟲的運(yùn)動(dòng)速度測(cè)量及其與殼高的相關(guān)分析結(jié)果

不同發(fā)育時(shí)期香港牡蠣幼蟲如圖2所示。幼蟲運(yùn)動(dòng)軌跡如圖3所示。幼蟲游泳時(shí)，雙殼張開，面盤凸出殼外，呈橢圓形或近圓形，面盤外周由纖毛組成，形成纖毛環(huán)，纖毛不斷擺動(dòng)帶動(dòng)面盤及幼蟲運(yùn)動(dòng)（圖3-A和圖3-B）。幼蟲運(yùn)動(dòng)俯視圖如圖3-C。通過(guò)幼蟲運(yùn)動(dòng)軌跡發(fā)現(xiàn)，在水平方向上，幼蟲朝著一定半徑的圓形進(jìn)行順時(shí)針游動(dòng)（圖3-D）。對(duì)不同發(fā)育時(shí)期的幼蟲運(yùn)動(dòng)視頻分析結(jié)果顯示，香港牡蠣幼蟲的運(yùn)動(dòng)速度為550～7500μm/s，對(duì)應(yīng)的殼高為68～318μm，幼蟲運(yùn)動(dòng)速度隨殼高增高而增加，但接近變態(tài)時(shí)，幼蟲的平均運(yùn)動(dòng)速度則下降。游泳速度（y）和幼蟲殼高（x）的相關(guān)方程為y=-0.0043x2+27.992x-1002.6，R2=0.9892（圖4）。

2.2 香港牡蠣幼蟲的面盤直徑測(cè)量及其與殼高的相關(guān)分析結(jié)果

不同發(fā)育時(shí)期香港牡蠣幼蟲的面盤大小如圖3-A和圖3-B。D形幼蟲面盤直徑最小，為64.34±2.15μm，后期殼頂幼蟲面盤直徑最大，為276.85±24.42μm。幼蟲面盤直徑與殼高呈正相關(guān)，殼高和面盤直徑之間的相關(guān)系數(shù)為0.98（P＜0.01）（表1），表明二者存在良好的線性關(guān)系。幼蟲面盤直徑（y）和殼高（x）的線性關(guān)系為y=0.7867x-11.412，R2=0.9519（圖5）。

表1 幼蟲殼高與面盤直徑的相關(guān)系數(shù)Table 1 Correlation coefficient between shell height and velum diameter of oyster larva

2.3 香港牡蠣幼蟲的耗氧率測(cè)定及其與殼高的相關(guān)分析結(jié)果

不同殼高的香港牡蠣幼蟲耗氧率如圖6所示。隨著幼蟲的生長(zhǎng)，其個(gè)體的耗氧率明顯增加，初孵D形幼蟲的耗氧率為0.67 ng/h，在即將變態(tài)時(shí)，單個(gè)幼蟲耗氧率6.45 ng/h，不同殼高的幼蟲耗氧率存在顯著差異（P＜0.05）。幼蟲耗氧率（y）與殼高（x）的相關(guān)方程為y=0.0297x-1.7967，R2=0.9833。

2.4 香港牡蠣幼蟲的攝食率測(cè)定及其與殼高的相關(guān)分析結(jié)果

不同殼高的香港牡蠣幼蟲的攝食率如圖7所示。香港牡蠣幼蟲的攝食率隨著生長(zhǎng)呈先上升后下降的變化趨勢(shì)。初孵的D形幼蟲攝食率最小，為35 cells/h，在進(jìn)入變態(tài)期前，隨著幼蟲生長(zhǎng)，攝食率升高，在平均殼高288μm時(shí)，攝食率最大，為660 cells/h。在即將變態(tài)時(shí)，香港牡蠣幼蟲攝食率呈現(xiàn)下降趨勢(shì)。幼蟲攝食率速度（y）與殼高（x）的相關(guān)方程為y=-0.0002x3+0.0831x2-10.376x+407.23，R2=0.9933。

2.5 光色對(duì)香港牡蠣幼蟲的誘集效果

白、紅、黃、綠、藍(lán)和紫色等不同光色對(duì)香港牡蠣幼蟲的誘集結(jié)果如表2和圖8。不同發(fā)育時(shí)期幼蟲對(duì)光色的趨向性不同。白光對(duì)D形幼蟲的誘集數(shù)量最多，即誘集效果最好，其次是藍(lán)光和紫光（表2）。D形幼蟲對(duì)不同色光趨向性依次為白光［（29.47±5.75）%］＞藍(lán)光［（20.24±7.21）%］＞紫光［（19.94±3.90）%］＞紅光（12.65±2.39%）＞綠光［（11.90±2.77）%］＞黃光［（5.80±1.63）%］（圖8）。白光、綠光和藍(lán)光對(duì)殼頂幼蟲誘集數(shù)量較多，誘集效果最好（表2），殼頂幼蟲對(duì)不同光色的趨向性依次為白光［（24.88±7.54）%］＞綠光［（24.10±8.31）%］＞藍(lán)光［（22.05±4.26）%］＞黃光［（10.42±3.25）%］＞紫光［（10.18±1.87）%］＞紅光［（8.43±0.74）%］（圖8）。藍(lán)光對(duì)眼點(diǎn)幼蟲的誘集效果數(shù)量最多，即誘集效果最好，其次為白光和綠光（表2），眼點(diǎn)幼蟲對(duì)不同色光的趨向性依次為藍(lán)光［（37.80±4.59）%］＞白光［（19.95±5.33）%］＞綠光［（15.85±2.17）%］＞紫光［（9.93±3.32）%］＞黃光［（9.38±1.25）%］＞紅光［（6.92±1.09）%］（圖8）。

表2 不同光色誘集不同發(fā)育時(shí)期牡蠣幼蟲的數(shù)量Table 2 Number of oyster larva trapped by different light colors

3 討論

面盤是由擔(dān)輪幼蟲口前纖毛環(huán)向外發(fā)展，形成具有長(zhǎng)纖毛的2個(gè)半圓形器官，是雙殼貝類幼蟲特有的器官（Qiu et al.，2015）。面盤呈近圓形，且可從殼內(nèi)凸出，其外邊緣有纖毛包被（Kraeuter and Castagna，2001）。Blake和Otto（1996）研究發(fā)現(xiàn)，福建牡蠣（C.angulata）面盤外周纖毛擺動(dòng)與鐘形蟲（Vorticella）類似，纖毛周期性地向同一方向擺動(dòng)，在帶動(dòng)面盤運(yùn)動(dòng)的同時(shí)也產(chǎn)生一定方向旋轉(zhuǎn)力，使幼蟲沿順時(shí)針?lè)较蛴蝿?dòng)。Le等（2017）研究發(fā)現(xiàn)，幼蟲通過(guò)面盤外周纖毛不斷擺動(dòng)從而形成水流，單胞藻隨水流方向運(yùn)動(dòng)到幼蟲口溝處，在口溝纖毛擺動(dòng)下部分被捕獲。因此，面盤是貝類幼蟲重要的運(yùn)動(dòng)和攝食器官（Blake and Otto，1996；Qiu et al.，2015）。本研究發(fā)現(xiàn)，初孵的香港牡蠣幼蟲面盤直徑最小，平均值為44.11μm，隨著幼蟲生長(zhǎng)，面盤直徑逐漸增加，其范圍為44.11～261.11μm，面盤直徑與殼高呈正相關(guān)關(guān)系，與Qiu等（2015）對(duì)福建牡蠣幼蟲的研究結(jié)果相似。面盤等功能器官的快速發(fā)育保證了個(gè)體早期攝食和運(yùn)動(dòng)能力的完善，從而使幼蟲獲得最適和最大生長(zhǎng)效能（賈瑞錦等，2014；高小強(qiáng)等，2018）。

本研究發(fā)現(xiàn)，香港牡蠣幼蟲通過(guò)調(diào)節(jié)纖毛擺動(dòng)頻率，實(shí)現(xiàn)不同的運(yùn)動(dòng)形態(tài)，包括邊攝食邊游動(dòng)、只攝食不游動(dòng)或快速游動(dòng)，與珠母貝（鄧正華等，2018）的運(yùn)動(dòng)形態(tài)相似。在本研究中，香港牡蠣幼蟲運(yùn)動(dòng)速度為550～7500μm/s，且隨著幼蟲生長(zhǎng)，其平均游泳速度逐漸增加，至變態(tài)前期有所下降。鄧正華等（2018）研究發(fā)現(xiàn)，珠母貝幼蟲的運(yùn)動(dòng)速度為250～3600μm/s。與香港牡蠣幼蟲相比，珠母貝幼蟲的運(yùn)動(dòng)速度更慢，其原因可能是二者幼蟲攝食狀態(tài)不同，雙殼貝類幼蟲運(yùn)動(dòng)狀態(tài)受攝食的影響（Blanco and Kamermans，2015；Qiu et al.，2015；鄧正華等，2018）。幼蟲攝食不飽滿時(shí)，主動(dòng)游動(dòng)并攝食，消化腺飽滿后，會(huì)進(jìn)行短時(shí)間休息，駐留在水底不游動(dòng)，殼口閉合（Qiu et al.，2015；鄧正華等，2018）。Qiu等（2015）研究認(rèn)為，在測(cè)定牡蠣幼蟲運(yùn)動(dòng)速度時(shí)，選擇投喂后1～2 h進(jìn)行測(cè)量，此時(shí)幼蟲既非饑餓狀態(tài)，也非飽食狀態(tài)，便于觀察。

貝類的耗氧率與其代謝活動(dòng)相關(guān)，直接反映機(jī)體的生活和生理狀況。因此，測(cè)定香港牡蠣的耗氧率，對(duì)其人工育苗及養(yǎng)殖具有重要的應(yīng)用價(jià)值。目前有關(guān)香港牡蠣耗氧率的研究主要集中在成貝（廖文崇等，2011；林麗華等，2012），關(guān)于其幼蟲的耗氧率尚未見報(bào)道。本研究發(fā)現(xiàn)，隨著香港牡蠣幼蟲的生長(zhǎng)，其耗氧率逐漸增加，單個(gè)幼蟲的耗氧率從0.67 ng/h增長(zhǎng)到即將變態(tài)時(shí)的6.45 ng/h，表明在空氣充氧的條件下，完全能夠保證牡蠣幼蟲對(duì)溶解氧的需求，溶解氧不構(gòu)成幼蟲培育的限制因素。以接近變態(tài)時(shí)期的幼蟲（殼高300μm）耗氧量計(jì)算，集約化養(yǎng)殖密度為10～20個(gè)/mL時(shí)，溶解氧從5.5 mg/L降低至5.0 mg/L需要3～4 h。該結(jié)論為香港牡蠣人工育苗時(shí)設(shè)置停氣自動(dòng)預(yù)警閾值提供數(shù)據(jù)支持，也為突發(fā)斷電斷氣事故援救提供時(shí)間參考。

對(duì)于雙殼貝類幼蟲的攝食行為，前人研究大多是針對(duì)養(yǎng)殖水體中餌料濃度或餌料種類（黎輝和金啟增，1997；閆喜武等，2010；趙越等，2011；周銀環(huán)等，2012），從個(gè)體角度開展貝類幼蟲攝食行為的研究較少。以個(gè)體為單位，開展牡蠣幼蟲的攝食行為研究，能夠更加直觀、深入地了解幼蟲的攝食速率，將有助于人工育苗時(shí)餌料精準(zhǔn)投喂，同時(shí)為貝類幼蟲高密度培育設(shè)施設(shè)計(jì)提供參考（Qiu et al.，2015）。本研究發(fā)現(xiàn)，香港牡蠣幼蟲的攝食速度呈現(xiàn)先增加后降低的趨勢(shì)，在接近變態(tài)時(shí)，幼蟲攝食率下降。這可能與幼蟲的器官發(fā)育相關(guān)，幼蟲在前期發(fā)育過(guò)程中，面盤以及外周纖毛不斷發(fā)育完善，促使面盤濾水速度增加，從而增加了幼蟲攝食速率（鄧正華等，2018）。幼蟲發(fā)育至后期接近變態(tài)時(shí)，器官結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，面盤和纖毛逐漸退化，逐步形成斧足和鰓，幼蟲由浮游狀態(tài)轉(zhuǎn)變?yōu)橘橘胗诘撞康呐佬袪顟B(tài)。因此，在面盤完全退化消失前幼蟲攝食率和運(yùn)動(dòng)速率會(huì)降低（Qiu et al.，2015；鄧正華等，2018）。本研究發(fā)現(xiàn)，香港牡蠣幼蟲攝食率的變化范圍為從D形幼蟲時(shí)期的35 cells/h到接近變態(tài)前期的660 cells/h。該數(shù)據(jù)將有效應(yīng)用于牡蠣的人工育苗，以剛孵化完成的D形幼蟲為例，若培育密度為10個(gè)/mL，每8 h投喂一次，則每次投喂需保證培育池內(nèi)金藻密度達(dá)2800 cells/mL。

光是一種直接或間接影響生物生長(zhǎng)和代謝的能量信號(hào)。在生物進(jìn)化的過(guò)程中，許多動(dòng)物逐漸形成了對(duì)光的節(jié)律性變化的生物鐘，這種節(jié)律性變化在很大程度上是由光敏器官的發(fā)生所介導(dǎo)（Naylor，2001；Gaston et al.，2017；Hobbs et al.，2021）。一般來(lái)說(shuō)，浮游動(dòng)物會(huì)在白天遷移到深海，以避免被捕食的威脅，并在夜間浮出水面進(jìn)食（Hobbs et al.，2021）。因此，大多數(shù)浮游動(dòng)物適應(yīng)低光照環(huán)境，而不能忍受高強(qiáng)度的光。據(jù)報(bào)道，長(zhǎng)牡蠣眼點(diǎn)幼蟲可有效吸收波長(zhǎng)為500～650 nm的光，特別是在色素區(qū)域（Kim et al.，2021）。水環(huán)境對(duì)可見光的折射產(chǎn)生了一個(gè)普遍的現(xiàn)象，即水生生物可感知并適應(yīng)穿透性的較強(qiáng)的藍(lán)光和綠光，對(duì)紅光反應(yīng)很少甚至沒(méi)有反應(yīng)（Fortunato et al.，2016），本研究得到相似的結(jié)果，香港牡蠣不同發(fā)育階段的幼蟲趨向于白光、藍(lán)光和綠光，趨向紅光的比例最低。Zhang等（2021a）對(duì)雜交牡蠣幼蟲的研究中也發(fā)現(xiàn)，綠光和藍(lán)光聚集的眼點(diǎn)幼蟲和無(wú)眼點(diǎn)的幼蟲數(shù)量最多，明顯高于其他顏色的光，推測(cè)紅色對(duì)眼點(diǎn)幼蟲具有沉降誘導(dǎo)的作用。Kim等（2021）在對(duì)長(zhǎng)牡蠣的研究中也提出用紅光促進(jìn)眼點(diǎn)幼蟲沉降的方法。眾所周知，自然海區(qū)及人工育苗中，牡蠣采苗效果不穩(wěn)定，很大程度上取決于環(huán)境因素（鐘方杰等，2014）。很多研究在試圖提高牡蠣的采苗效果（方琦等，2001；祁劍飛等，2013；范瑞良等，2020）。本研究結(jié)果表明，紅光具有誘導(dǎo)香港牡蠣幼蟲沉降的作用，白光、藍(lán)光和綠光則對(duì)幼蟲有一定的吸引作用，這對(duì)牡蠣的幼蟲培育和采苗具有重要的指導(dǎo)意義。

4 結(jié)論

香港牡蠣幼蟲的運(yùn)動(dòng)速度、耗氧率、攝食率與生長(zhǎng)性狀存在不同程度的相關(guān)性，白光、藍(lán)光和綠光光對(duì)香港牡蠣幼蟲有一定的吸引作用，紅光具有誘導(dǎo)香港牡蠣幼蟲沉降的作用，為香港牡蠣人工育苗過(guò)程中幼蟲的精準(zhǔn)化培育管理、確定幼蟲最優(yōu)餌料投喂量等提供依據(jù)，也為設(shè)施化高密度育苗設(shè)施構(gòu)建提供參考。