恒清Ⅱ號方聯(lián)合鹽酸多奈哌齊片對阿爾茨海默病病人血清硫氧還蛋白、褪黑素水平的影響

陳慧澤，孟勝喜，王 兵，李文濤，潘衛(wèi)東，張云云

阿爾茨海默病(AD)主要臨床表現(xiàn)是漸進性記憶力減退、認知功能下降及性格改變等。β-淀粉樣蛋白(Aβ)沉積及神經(jīng)元纖維纏結(jié)(NFT)形成是其病理特點。AD發(fā)病機制中，清除自由基能力減退、氧化損傷及神經(jīng)元丟失與凋亡是主要方面[1]。硫氧還蛋白(Trx)是一種重要的抗氧化蛋白，褪黑素(MT)是一種內(nèi)源性神經(jīng)激素。既往研究證實，Trx、MT與AD的發(fā)生和發(fā)展均有密切的聯(lián)系[2-3]。本研究觀察恒清Ⅱ號方聯(lián)合鹽酸多奈哌齊片對AD病人血清Trx、MT水平的影響。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2020年1月—2021年1月在上海市第六人民醫(yī)院就診的AD病人102例。診斷標準：參照2011年美國國家衰老研究所和阿爾茨海默病學會(NIA-AA)[4]的診斷標準。納入標準：符合AD的診斷標準；年齡45～75歲；性別不限；病人可配合完成相關(guān)的量表檢查；病人或家屬知情且簽署知情同意書；近3個月以來未參與過其他治療方案。排除標準：患有心、腦、腎等嚴重的器質(zhì)性病變；精神障礙、抑郁癥等不能配合相關(guān)檢查；依從性和耐受性差、無法配合相關(guān)治療；病人對本研究使用藥物過敏。將102例病人按照隨機數(shù)字表法分為治療組和對照組，各51例。

1.2 方法

1.2.1 常規(guī)治療 根據(jù)病人基礎(chǔ)疾病，采取控制血壓、血糖、調(diào)脂及抗血小板聚集等方法治療，同時囑其讀書、看報等，根據(jù)病人情況采取適當?shù)幕顒渝憻挘{(diào)整睡眠、情志、飲食等。

1.2.2 對照組 除了常規(guī)治療外，給予鹽酸多奈哌齊片[商品名：安理申，衛(wèi)材(中國)藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，國藥準字H20050978，批號1705080]治療，每日5 mg，睡前口服。治療3個月。

1.2.3 治療組 除了常規(guī)治療外，給予恒清Ⅱ號方聯(lián)合鹽酸多奈哌齊片治療。恒清Ⅱ號方組方：益智仁30 g，黃芪15 g，菟絲子10 g，川芎10 g，熟地黃15 g，桑寄生10 g，煅石決明10 g，杜仲10 g，地龍10 g，天麻10 g，鉤藤10 g，中藥由上海市第六人民醫(yī)院中藥房提供，水煎250 mL(將地龍10 g研細成粉狀，與水煎湯劑一起服用)，分早晚2次服用，每日1劑。鹽酸多奈哌齊片用法同對照組。治療3個月。

1.3 觀察指標

1.3.1 相關(guān)量表 ①阿爾茨海默病評定量表認知部分(Alzheimer′s Disease Assessment Scale-cognitive section，ADAS-cog)[5]評分：包括定向力、語言、結(jié)構(gòu)、觀念的運用、詞語即刻回憶和詞語再認等12項。②日常生活活動能力(Activities of Daily Living，ADL)評定量表[6]評分：包括軀體生活自理量表(6項)和工具性日常生活功能量表(8項)。③蒙特利爾認知評估量表(Montreal Cognitive Assessment，MoCA)[7]評分：認知領(lǐng)域8項，全部項目共11項。④神經(jīng)精神量表(Neuropsychiatric Inventory，NPI)[8]評分：評定癡呆病人精神行為癥狀，包括妄想、淡漠、失控、易激惹、不尋常舉動、夜間行為改變、食欲(進食)改變等，共12個項目。⑤簡易智力狀態(tài)檢查量表(Mini-mental State Examination，MMSE)[9]評分：包括7方面內(nèi)容，30道題目。

1.3.2 血清Trx和MT水平測定 抽取病人清晨空腹靜脈血5 mL，使用離心半徑為15 cm離心機離心10 min，離心速度為3 000 r/min。將離心后的上清液保存至-80 ℃的冰箱里。嚴格按照人硫氧還蛋白酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)試劑盒、人褪黑素硫酸鹽ELISA試劑盒操作說明書。試劑盒由上海撫生實業(yè)有限公司提供。

2 結(jié) 果

2.1 兩組一般資料比較 治療過程中，治療組2例病人因依從性差而退出，對照組1例因未完成試驗退出，故最終完成本研究病人共99例。兩組一般資料比較，差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，具有可比性。詳見表1。

表1 兩組一般資料比較

2.2 兩組ADAS-cog評分、ADL評分、MoCA評分比較 治療前，兩組ADAS-cog評分、ADL評分和MoCA評分比較，差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。兩組治療后ADAS-cog評分較治療前下降，ADL評分與MoCA評分較治療前升高，且治療組優(yōu)于對照組，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05或P<0.01)。詳見表2。

表2 兩組ADAS-cog評分、ADL評分、MoCA評分比較(±s) 單位：分

2.3 兩組NPI評分、MMSE評分比較 治療前，兩組NPI評分、MMSE評分比較，差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。兩組治療后NPI評分較治療前下降，MMSE評分較治療前升高，且治療組優(yōu)于對照組，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05或P<0.01)。詳見表3。

表3 兩組NPI評分、MMSE評分比較(±s) 單位：分

2.4 兩組血清Trx和MT水平比較 治療前，兩組Trx和MT水平比較，差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。與治療前比較，兩組治療后Trx和MT水平均升高，且治療組Trx和MT水平高于對照組，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05或P<0.01)。詳見表4。

表4 兩組血清Trx和MT水平比較(±s) 單位：ng/mL

2.5 兩組藥物不良反應(yīng)比較 治療過程中，對照組1例出現(xiàn)頭暈，1例出現(xiàn)頭痛；治療組1例出現(xiàn)頭暈，1例出現(xiàn)頭痛，1例出現(xiàn)惡心。對照組不良反應(yīng)發(fā)生率為4.00%，治療組為6.12%，兩組比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。詳見表5。

表5 兩組藥物不良反應(yīng)比較

3 討 論

AD發(fā)病相對隱匿，不易察覺，早期常出現(xiàn)記憶力下降、認知功能障礙等癥狀，后期可能出現(xiàn)長期臥床、生活無法自理甚至死亡等情況，發(fā)病機制與β淀粉蛋白生成和代謝紊亂、Tau蛋白異常磷酸化、神經(jīng)炎癥、膽堿能機制、氧化應(yīng)激機制等密切相關(guān)[10-14]。AD在中醫(yī)學中屬于“健忘”“郁證”“呆病”“善忘”等范疇。中醫(yī)學認為，AD病機關(guān)鍵是腎虛血瘀，其本是腎虛，標是血瘀，為本虛標實。中醫(yī)藥防治AD可多靶點、多途徑及多通路發(fā)揮作用，且副作用少，越來越受到醫(yī)學界的關(guān)注和重視。

本課題組經(jīng)過長期臨床觀察、反復(fù)實踐驗證，總結(jié)出防治AD臨床療效顯著的經(jīng)驗方——恒清Ⅱ號方。前期已進行相關(guān)的基礎(chǔ)研究和臨床探討[15-18]，申請發(fā)明專利并獲得了授權(quán)(專利號：ZL 2019 10371018.5)。恒清Ⅱ號方是由益智仁等11種藥物組成，具有補腎益氣、固精生髓之效。髓海得以充養(yǎng)，神智得到改善和恢復(fù)，因此，該方可治療AD?，F(xiàn)代藥理學研究顯示，恒清Ⅱ號方中的每味藥物在提高學習記憶能力、改善神經(jīng)細胞損傷等方面發(fā)揮一定的作用[19-30]。

Trx是一類廣泛存在的蛋白質(zhì)，參與基因的表達、信號的傳導(dǎo)、細胞的生長與凋亡等氧化還原相關(guān)的細胞過程中。Trx作為體內(nèi)抗氧化蛋白，不僅可清除過量的氧自由基，修復(fù)過氧化巰基蛋白，調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄因子活性，還可抑制細胞凋亡，調(diào)控細胞內(nèi)氧化還原，從而發(fā)揮保護神經(jīng)元的作用[31-33]。

MT為脂溶性吲哚類松果體激素和內(nèi)源性抗氧劑與自由基清除劑，可清除所有類型的自由基。MT可抑制AD病程中的過氧化亞硝酸離子、過氧化氫等，過氧化亞硝酸離子、過氧化氫等基團可能與AD病因密切相關(guān)。導(dǎo)致AD病理變化的原因之一可能是過氧化亞硝酸離子。MT可能通過阻止Aβ形成及抗氧化作用，從而抑制Aβ淀粉樣性變性。

本研究結(jié)果顯示，治療前，兩組ADAS-cog評分、ADL評分、NPI評分、MoCA評分與MMSE評分，血清Trx、MT水平比較，差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)；與治療前相比，治療后，兩組ADAS-cog評分與NPI評分下降，ADL評分、MoCA評分與MMSE評分均升高，血清Trx與MT水平均增加，且治療組優(yōu)于對照組，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05或P<0.01)。對照組不良反應(yīng)發(fā)生率為4.00%，治療組為6.12%，兩組比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。

綜上所述，恒清Ⅱ號方聯(lián)合鹽酸多奈哌齊片可改善AD病人認知功能，且安全性高，其作用機制可能與升高血清Trx與MT水平有關(guān)。