LPL、LMF1與重度高甘油三酯血癥相關(guān)性及魚油對其影響的分析

王越 張昕

高甘油三酯血癥（HTG）是臨床上最常見的血脂異常之一，空腹血清甘油三酯（TG）水平≥5.65 mmol/L（500 mg/dL）為重度HTG[1]。TG 升高會增加心血管疾病的風(fēng)險(xiǎn)，是心血管疾病的獨(dú)立危險(xiǎn)因素[1-2]，嚴(yán)重的HTG 會誘發(fā)急性胰腺炎，控制TG 的水平可以預(yù)防胰腺炎的發(fā)生[1，3]。根據(jù)文獻(xiàn)[1]《血脂異?；鶎釉\療指南（2019 年）》，對于重度HTG 患者，應(yīng)首先考慮使用主要降低TG 和極低密度脂蛋白（VLDL）的藥物，目前國內(nèi)用于治療重度HTG 的藥物僅有貝特類降脂藥，高純度魚油制劑在國內(nèi)尚未普及。相關(guān)臨床試驗(yàn)證實(shí)，處方級別的高純度魚油制劑有效劑量為2～4 g/d，主要含有二十碳五烯酸（EPA）和二十二碳六烯酸（DHA），可將血漿TG 水平降低約30%，并被證明可降低重度HTG患者發(fā)生胰腺炎的風(fēng)險(xiǎn)[4]。

脂蛋白脂肪酶（LPL）是TG 在血管內(nèi)降解過程的關(guān)鍵酶，其作用是降解TG 后為重要組織提供脂質(zhì)營養(yǎng)[5]。脂肪酶成熟因子1（LMF1）是一種分子伴侶蛋白，是LPL、肝脂肪酶和內(nèi)皮脂肪酶正確折疊和成熟所必需的因素。除了促進(jìn)LPL 的成熟，LMF1 還可穩(wěn)定同型二聚體，使LPL 在分泌之前不會在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中解體[6]。本研究分析了LPL、LMF1 與重度HTG 發(fā)生的相關(guān)性，觀察重度HTG 患者經(jīng)高純度魚油治療前后LPL、LMF1 的變化，并探討其中機(jī)制。

1 資料與方法

1.1 一般資料 入選2020 年9 月-2021 年10 月就診于包頭醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院門診的重度HTG 患者（60 例）及非HTG 患者（60 例），對其統(tǒng)一進(jìn)行4 周的飲食及生活習(xí)慣指導(dǎo)，復(fù)查仍符合標(biāo)準(zhǔn)者入選。入選標(biāo)準(zhǔn)：（1）重度HTG（SHTG）組：血清TG 值（空腹時(shí)）≥5.65 mmol/L 且＜22.60 mmol/L 的重度HTG 患者；（2）對照組：血清TG 值（空腹時(shí)）＜1.7 mmol/L 的 非HTG 患 者；（3）年 齡18～75 歲，性別不限，就診前未規(guī)律服用降脂藥。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）有糖尿病；（2）谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）或谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）大于正常值上限3 倍；（3）有不穩(wěn)定型心絞痛或心肌梗死既往史；（4）有甲狀腺功能減退；（5）存在胰腺炎既往史或合并癥或通過檢查等疑似患有胰腺炎；（6）目前使用他汀類降脂藥物治療；（7）既往或現(xiàn)在有酒精依賴、嗜酒；（8）既往或現(xiàn)在有吸煙史（連續(xù)或累計(jì)半年每天吸煙大于1支，現(xiàn)在仍吸煙）。

1.2 方法

1.2.1 收集入選者的一般臨床資料 包括年齡、性別、體重指數(shù)（BMI）、吸煙史、飲酒史、高血壓及其他既往病史等基礎(chǔ)臨床資料。吸煙史判斷標(biāo)準(zhǔn)為連續(xù)或累計(jì)半年每天吸煙大于1 支[7]；飲酒史判斷標(biāo)準(zhǔn)為男性平均每天飲用酒精≥61 g 或女性平均每天飲用酒精≥41 g 的飲酒行為[8]。

1.2.2 生化指標(biāo)檢測（1）所有入選者進(jìn)入研究后，清晨空腹采集靜脈血10 mL，靜置30 min 后，3 000×g離心5 min 后分離出血清，用于全自動生化分析儀檢測血脂。（2）SHTG 組入選者進(jìn)入研究后，口服高純度藥用魚油（生產(chǎn)廠家：四川國為制藥有限公司，批準(zhǔn)文號：國食健字G20140848，規(guī)格：1 g/粒）治療3 個(gè)月，3 g/d（早中晚各1 g），分別于用藥前、用藥后清晨空腹采集靜脈血10 mL，靜置30 min 后，3 000×g 離心5 min 后分離出血清，用于檢測血脂、肝腎功能。

1.2.3 ELISA 法檢測血清LPL、LMF1（1）所有入選者進(jìn)入研究后，清晨空腹采集靜脈血5 mL，靜置30 min 后，3 000×g 離心5 min 后分離出血清，用ELISA 試劑盒檢測血清中LPL 和LMF1 的水平。（2）SHTG 組入選者經(jīng)3 個(gè)月魚油治療后清晨空腹采集靜脈血5 mL，靜置30 min 后，3 000×g 離心5 min 后分離出血清，用ELISA 試劑盒檢測血清中LPL 和LMF1 的水平。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 應(yīng)用SPSS 26.0 軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。符合正態(tài)分布的計(jì)量資料使用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（）表示，組間比較采用獨(dú)立樣本t 檢驗(yàn)，SHTG 組內(nèi)比較用配對t 檢驗(yàn)，相關(guān)性分析采用Pearson 相關(guān)；非正態(tài)計(jì)量資料用中位數(shù)（四分位數(shù)間距）表示，組間比較采用Mann-Whitney U 檢驗(yàn)，SHTG 組內(nèi)比較用Wilcoxon 符號秩檢驗(yàn)。計(jì)數(shù)資料用率（%）表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)。重度HTG患者發(fā)病的危險(xiǎn)因素分析用logistic 回歸分析法。所有結(jié)果均以P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 SHTG 組與對照組的一般臨床資料比較 SHTG組 男32 例，女28 例；年 齡（50±8）歲；BMI（24.49±2.87）kg/m2；合并高血壓17 例（28.3%）。對照組男29 例，女31 例；年齡（46±10）歲，BMI（23.10±2.78）kg/m2；合并高血壓15 例（25.0%）。兩組年齡、性別、BMI 及高血壓病史比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。

2.2 SHTG 組與對照組的血脂指標(biāo)比較 SHTG 組的TG、總膽固醇（TC）、極低密度脂蛋白（VLDL）均高于對照組，低密度脂蛋白（LDL）、高密度脂蛋白（HDL）均低于對照組（P＜0.05），見表1。

表1 兩組血脂指標(biāo)比較（mmol/L）

2.3 SHTG 組與對照組的LPL、LMF1 比較 SHTG 組LPL 為（50.45±21.68）ng/mL，LMF1 為（48.17±10.97）ng/mL；對照組LPL 為（70.93±27.66）ng/mL，LMF1為（56.07±13.13）ng/mL。SHTG 組LPL、LMF1 均 低于對照組（t=3.087，P=0.003；t=2.450，P=0.017）。

2.4 LPL、LMF1 與TG 相關(guān)性分析 Pearson 相關(guān)分析結(jié)果顯示，LPL、LMF1 與TG 呈負(fù)相關(guān)（r=-0.318，P=0.016；r=-0.275，P=0.039）。LMF1 與LPL 呈 正相關(guān)（r=0.401，P=0.002）。

2.5 重度HTG 發(fā)病的影響因素logistic 回歸分析 單因素篩查LPL、LMF1 均為重度HTG 的保護(hù)因素（P＜0.05），多因素logistic 回歸分析結(jié)果顯示，LPL為重度HTG 的保護(hù)因素[OR=0.968，95%CI（0.941，0.996），P=0.026），LMF1 非重度HTG 的保護(hù)因素（P＞0.05）。

2.6 SHTG 組經(jīng)魚油治療前后血脂指標(biāo)比較 SHTG組經(jīng)魚油治療后與治療前的血脂指標(biāo)比較：TG、VLDL 降低、LDL 升高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），治療前后HDL 比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見表2。

表2 SHTG組60例經(jīng)魚油治療前后血脂指標(biāo)比較（mmol/L）

2.7 SHTG 組經(jīng)魚油治療前后肝臟及腎臟功能指標(biāo)比較 SHTG 組經(jīng)魚油治療前后的谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）、谷氨酰轉(zhuǎn)移酶（GGT）、肌酐（Scr）、尿酸（UA）水平比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），見表3、4。

表3 SHTG組60例經(jīng)魚油治療前后肝臟功能指標(biāo)比較[U/L，（）]

表3 SHTG組60例經(jīng)魚油治療前后肝臟功能指標(biāo)比較[U/L，（）]

表4 SHTG組60例經(jīng)魚油治療前后腎臟功能指標(biāo)比較[μmol/L，（）]

表4 SHTG組60例經(jīng)魚油治療前后腎臟功能指標(biāo)比較[μmol/L，（）]

2.8 SHTG 組經(jīng)魚油治療前后LPL、LMF1 比較 SHTG組經(jīng)魚油治療前的LPL 為（50.45±21.68）ng/mL，LMF1 為（48.17±10.97）ng/mL；經(jīng)魚油治療后 的LPL 為（63.94±19.31）ng/mL，LMF1 為（51.91±11.14）ng/mL。治療后的LPL 高于治療前（t=-6.970，P＜0.001），LMF1 有升高趨勢，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=-1.781，P=0.087）。

3 討論

3.1 重度HTG 患者的血脂特征 李蘇寧等[9]發(fā)現(xiàn)HTG 患者的TC、LDL 升高，HDL 降低。本研究同樣發(fā)現(xiàn)，SHTG 組的TC、VLDL 高于對照組，HDL低于對照組。與其研究結(jié)果不一致的是，本研究發(fā)現(xiàn)SHTG 組的LDL 低于對照組，考慮與SHTG 組的LPL 降低有關(guān)。LPL 水解富含TG 的VLDL，產(chǎn)生游離脂肪酸和中等密度脂蛋白（IDL）。一些IDL 顆粒可以通過LPL 介導(dǎo)的水解來產(chǎn)生LDL[10]，LPL 的降低減弱了VLDL 向LDL 的轉(zhuǎn)化，所以SHTG 組LPL的降低導(dǎo)致了SHTG 組LDL 的減少。

3.2 LPL、LMF1 與重度HTG 的相關(guān)性分析 以往的研究表明，LPL 是血漿脂質(zhì)代謝的限速酶，主要作用是水解乳糜微粒和VLDL 中的TG，為重要組織提供營養(yǎng)[11]。LPL 是清除TG 的關(guān)鍵因素，LPL 缺乏會導(dǎo)致嚴(yán)重的HTG[12]。本研究同樣發(fā)現(xiàn)，SHTG 組的LPL 低于對照組，LPL 與TG 呈負(fù)相關(guān)（P＜0.05），表明LPL 降低與重度HTG 發(fā)生有關(guān)。logistic 回歸分析結(jié)果顯示，LPL 為重度HTG 的保護(hù)因素（P＜0.05）。所以治療重度HTG 可以LPL 為新的治療靶點(diǎn)，提高LPL 水平，從而降低TG 水平。相關(guān)研究表明，肝素和胰島素可能通過增加LPL 活性，降低TG 水平，成為臨床治療高甘油三酯血癥相關(guān)性急性胰腺炎新的治療手段[13]。

LPL 的成熟關(guān)鍵依賴于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜上的一種分子伴侶，即LMF1。國外相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)，在重度HTG患者中有一些LMF1 基因變異會影響LPL 的活性，導(dǎo)致嚴(yán)重的HTG[14-16]。國內(nèi)尚無LMF1 與重度HTG的相關(guān)研究，筆者的研究發(fā)現(xiàn)SHTG 組的LMF1 低于對照組，LMF1 與LPL 呈正相關(guān)，與TG 呈負(fù)相關(guān)，表明LMF1 通過影響LPL 活性導(dǎo)致TG 升高，LMF1 降低與重度HTG 有關(guān)，這與國外文獻(xiàn)[14-16]報(bào)道相符。本研究發(fā)現(xiàn)，單因素篩查LMF1 為重度HTG 的影響因素（P＜0.05），而多因素logistic 回歸分析結(jié)果顯示，LMF1 為非重度HTG 的保護(hù)因素（P＜0.05），這是因?yàn)長MF1 通過影響LPL 活性引起重度HTG，表明LMF1 與重度HTG 間接相關(guān)。目前國內(nèi)外尚無以LMF1 為靶點(diǎn)來治療HTG 的藥物研究，這或許是未來治療HTG 的一個(gè)新的研究方向。

3.3 高純度魚油制劑治療重度HTG 的結(jié)果分析 高純度魚油制劑，也稱Omega-3 多不飽和脂肪酸，主要來源于深海魚類，活性成分主要包括EPA和DHA。Qi 等[17]研究表明，Omega-3 多不飽和脂肪酸對于TG 水平升高的中國患者是一種有效且耐受性良好的治療方法。本研究發(fā)現(xiàn)，魚油可以降低重度高甘油三酯血癥患者的血清TG、VLDL，升高LDL、LPL，HDL 水平無顯著變化，這與國內(nèi)近期一項(xiàng)隨機(jī)、雙盲、安慰劑對照臨床試驗(yàn)結(jié)果相符[18]。LPL 水解富含TG 的VLDL 是VLDL 向LDL 轉(zhuǎn)化的重要步驟[10]，LPL 的升高導(dǎo)致VLDL 更快地轉(zhuǎn)化為IDL 和LDL，這解釋了為什么魚油干預(yù)后受試者的VLDL 降低，LDL 升高。本研究發(fā)現(xiàn)治療后ALT、AST、GGT、Scr、UA 水平無顯著變化，據(jù)此可評估在此期間，服用該劑量的魚油對人體肝腎功能是安全的。

相關(guān)研究表明，深海魚油主要通過兩種機(jī)制降低血漿TG 水平：（1）通過減少肝臟VLDL、TG 的產(chǎn)生，可能與抑制甾醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白-1c 的表達(dá)、增加了脂肪酸的β 氧化、抑制肝臟TG 合成的關(guān)鍵酶（如磷脂酸磷酸酶和二酰甘油?；D(zhuǎn)移酶）有關(guān)[4，19]。（2）通過增加LPL 的活性：可能與抑制載脂蛋白C3（Apo C3）表達(dá)有關(guān)，Apo C3 對LPL有抑制作用[2，20]。筆者的研究同樣發(fā)現(xiàn)魚油通過提升LPL 水平來達(dá)到降低TG 水平的治療效果。本研究結(jié)果顯示，魚油對LMF1 水平有升高趨勢，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，魚油降低TG 的機(jī)制是否與增加LMF1 水平有關(guān)，仍需進(jìn)一步擴(kuò)大樣本量來驗(yàn)證。

綜上所述，LPL 是重度HTG 的保護(hù)因素，LPL及LMF1 降低與重度HTG 的發(fā)生有關(guān)。魚油可以有效降低重度HTG 患者的TG、VLDL 水平，升高LPL 水平。本研究的局限性樣本量偏小，LMF1 對重度HTG 發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)的影響還需要進(jìn)一步的前瞻性、大規(guī)模的數(shù)據(jù)研究來驗(yàn)證。