貴州省觀風(fēng)海鎮(zhèn)大型真菌資源調(diào)查初報(bào)

尚念杰， 桂 陽， 黃萬兵， 盧穎穎， 劉宏宇，楊通靜， 龔光祿， 劉傾城， 李 彪， 黃曉潤， 朱國勝

(1.貴州省農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)作物品種資源研究所， 貴陽 550006；2.貴州省食用菌育種重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，貴州省農(nóng)業(yè)科學(xué)院食用菌研究中心， 貴陽 550006)

觀風(fēng)海鎮(zhèn)位于貴州省威寧彝族回族苗族自治縣，地勢從東北向西南傾斜，地貌以山間盆地和丘陵為主，海拔1 120～1 520 m之間，屬亞熱帶季風(fēng)性濕潤氣候區(qū)。觀風(fēng)海鎮(zhèn)自然環(huán)境生態(tài)好，以其獨(dú)特的地理和氣候適宜大型真菌的生長。該地區(qū)年平均氣溫13.8～17.8 ℃，年降雨量1 100 mm，其氣候冬季寒冷、夏季溫涼、年溫差小、日溫差大[1]。自1985年以來，當(dāng)?shù)夭扇∪斯しN植馬尾松及封山育林等措施，森林生態(tài)環(huán)境得到了極大的改善，特別修復(fù)了動(dòng)植物的棲息環(huán)境，為大型真菌的生長創(chuàng)造了極好的生長條件。鄒方倫等[2]和張潔等[3]調(diào)查過畢節(jié)地區(qū)的大型真菌，但未對該地區(qū)作出深入的研究，當(dāng)?shù)匾吧镔Y源創(chuàng)新利用也未見報(bào)道。同時(shí)當(dāng)?shù)卮迕裼惺秤靡吧牧?xí)慣，但是對大型真菌了解甚少，誤食有毒蘑菇的現(xiàn)象時(shí)有發(fā)生[4]。普查當(dāng)?shù)匾吧镔Y源，了解當(dāng)?shù)厣鷳B(tài)改善對菌物資源的影響，提升野生菌物的認(rèn)知。

本研究以觀風(fēng)海鎮(zhèn)代表性林型馬尾松林中大型真菌為研究對象，采用樣線法對觀風(fēng)海鎮(zhèn)大型真菌種類進(jìn)行了調(diào)查，以期掌握該地區(qū)的野生菌物資源的多樣性，對其經(jīng)濟(jì)價(jià)值進(jìn)行評價(jià)。調(diào)查觀風(fēng)海鎮(zhèn)大型真菌資源現(xiàn)狀，不僅能夠系統(tǒng)了解生態(tài)系統(tǒng)修復(fù)過程中的野生菌物演替，還能夠?yàn)楫?dāng)?shù)靥厣吧镔Y源的創(chuàng)新利用和生物群落的穩(wěn)定性提供數(shù)據(jù)支撐。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本采集

通過前期走訪林業(yè)部門和市場調(diào)查，樣本調(diào)查地選擇在觀風(fēng)海鎮(zhèn)沙子坡林場(東經(jīng)104°2′25″，北緯27°7′32″，海拔2 364.7 m)。采集到的標(biāo)本及時(shí)編號(hào)并使用數(shù)碼相機(jī)(佳能G 1X Mark Ⅲ)拍攝大型菌物的生境、外觀、菌柄和菌褶等細(xì)節(jié)。使用Biotracks軟件詳細(xì)記錄菌物的外部形態(tài)特征、傷變色情況、海拔、生境等相關(guān)信息。取部分菌物組織用變色硅膠干燥做成分子標(biāo)本。其余部分放到小型烘箱在55℃溫度下烘干，制作成永久保存標(biāo)本存放于貴州省品種資源研究所真菌室標(biāo)本館內(nèi)。

1.2 標(biāo)本的分類鑒定

采集到的標(biāo)本鑒定采用形態(tài)學(xué)分類鑒定和分子生物學(xué)相結(jié)合的方法。對照相關(guān)的文獻(xiàn)資料，采用經(jīng)典的形態(tài)學(xué)方法，利用倒置顯微鏡(OLYMPUS IX 71)對標(biāo)本進(jìn)行顯微形態(tài)上的觀察[5-7]。大型真菌相關(guān)資料書籍查閱了涉及貴州地區(qū)的研究成果包括《中國大型真菌》[8]、《中國蕈菌》[9]、《中國梵凈山大型真菌》[10]和《中國大型菌物資源圖鑒》[11]等著作。對于少數(shù)難以鑒定的大型真菌采用分子生物學(xué)的方法進(jìn)行鑒定。使用DNA提取試劑盒(OMEGA,D 3195-02)提取分子標(biāo)本的DNA。PCR擴(kuò)增引物選擇ITS 1(5′-TCCGTAGGTGAACCTGCGG-3′)和ITS 4(5′-TCCTCCGCTTATTGATATGC-3′)PCR擴(kuò)增各野生菌物的ITS序列[8]。PCR產(chǎn)物送蘇州金唯智生物科技有限公司測序。

圖1 觀風(fēng)海鎮(zhèn)采集部分大型真菌

2 結(jié)果與分析

2.1 分類統(tǒng)計(jì)

根據(jù)本次的調(diào)查，觀風(fēng)海鎮(zhèn)采集到的大型菌物72個(gè)，分類學(xué)統(tǒng)計(jì)有2門，3綱，9目，18科，35屬，60種。其中，子囊菌門只采集到一株蛹蟲草，其余大型真菌均屬于擔(dān)子菌門，占總種數(shù)的98.57%。僅有1種大型真菌有7個(gè)科，分別為珊瑚菌科、層腹菌科、木耳科、雞油菌科、花耳科、皺孔菌科和小菇科，占總科數(shù)的38.89%。2～4種大型真菌有6個(gè)科，分別為絲膜菌科、絲蓋傘科、鬼傘科、乳牛肝菌科、多孔菌科和光柄菇科，占總科數(shù)的33.33%；5種及以上大型真菌有5個(gè)科，分別為傘菌科、口蘑科、牛肝菌科、紅菇科和軸腹菌科，占總科數(shù)的27.78%。在所有18科中，種類數(shù)量最多的是紅菇科，共16種，占全部種類數(shù)量的26.67%。傘菌科和牛肝菌科并列為第二大科，各7種，分別占全部種類數(shù)量的11.67%。口蘑科和軸腹菌科并列第三大科，各5種，分別占全部種類數(shù)量的8.33%(圖2)。

表1 觀風(fēng)海鎮(zhèn)大型真菌數(shù)量統(tǒng)計(jì)

圖2 大型真菌優(yōu)勢科的數(shù)量統(tǒng)計(jì)

觀風(fēng)海鎮(zhèn)本次調(diào)查的大型真菌共有60個(gè)屬，超過或等于3個(gè)種的屬有5個(gè)：紅菇屬、乳菇屬、乳牛肝菌屬、鵝膏屬和蠟?zāi)?，共有種類28種，占本次采集大型真菌全部種數(shù)的46.67%。其中紅菇屬和乳菇屬并列第一大屬，各有8種，分別占該地區(qū)大型真菌總數(shù)的28.50%。蠟?zāi)贋榈诙髮?，?種，占該地區(qū)大型真菌總數(shù)的10%。乳牛肝菌屬和鵝膏屬并列為第三大屬，各有3種，分別占該地區(qū)大型真菌總數(shù)的5%(圖3)。雖然該地區(qū)優(yōu)勢屬具有較多的種類，但觀風(fēng)海鎮(zhèn)林區(qū)的大型真菌還是多以單個(gè)種屬存在。

圖3 大型真菌優(yōu)勢屬的數(shù)量統(tǒng)計(jì)

通過對觀風(fēng)海鎮(zhèn)的大型真菌發(fā)生的統(tǒng)計(jì)，將該地區(qū)植物群落中的大型真菌的豐富度指數(shù)、香農(nóng)多樣性指數(shù)和均勻度指數(shù)進(jìn)行了數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析[13]。分析得知，該地區(qū)的大型真菌的豐富度指數(shù)為4.28，香農(nóng)多樣性指數(shù)為5.82。觀風(fēng)海鎮(zhèn)采取了長期封山育林的政策，人為干擾較少，當(dāng)?shù)刂参锝Y(jié)構(gòu)是以馬尾松林為主，森林郁閉度高，馬尾松與大型真菌具有相互適應(yīng)性，特別是創(chuàng)造了適宜菌根菌生長的環(huán)境，如乳菇屬、紅菇屬和鵝膏屬等與馬尾松形成了共生關(guān)系。該地區(qū)坡度較為緩和，土壤含水量高，腐殖層營養(yǎng)豐富，為該地區(qū)發(fā)現(xiàn)的大型真菌的生長提供了良好的條件。均勻度指數(shù)反映了各物種個(gè)體數(shù)目分配的均勻程度，從結(jié)果來看，該地區(qū)的均勻度不高，均勻度指數(shù)為0.94。采集時(shí)間恰逢雨季，紅菇、乳菇和牛肝菌等快速生長，又因地表的草木對大型真菌的遮蓋，造成均勻度指數(shù)較低。

2.2 大型真菌的經(jīng)濟(jì)價(jià)值多樣性

觀風(fēng)海鎮(zhèn)采集到的大型真菌中，食用真菌有46種，占總數(shù)的64.9%; 藥用真菌有22種，占總數(shù)的30.6%，毒菌有11種，占總數(shù)的15.3%?？墒秤玫拇笮驼婢嘁酝馍鸀橹?，其中不乏比較珍稀名貴的野生真菌品種，例如紅汁乳菇、多汁乳菇、松林小牛肝菌、粘蓋牛肝菌和堇紫紅菇等，不管是國內(nèi)還是國外，都是十分暢銷，具有很高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值。每年我國發(fā)生的蘑菇中毒事件多以誤食毒鵝膏造成[14]。但該地區(qū)居民有食用一種暗灰鵝膏的習(xí)慣，其毒性和營養(yǎng)成分可以做進(jìn)一步的分析，評估其經(jīng)濟(jì)價(jià)值并開發(fā)利用。直接作為藥用真菌的如蛹蟲草，有“益肺腎、補(bǔ)精髓，止血化痰”的功效[15]；紅汁乳菇等乳菇屬真菌既是食用菌，又是藥用菌，具有明顯的抗癌和抗病毒等功效[16]。

采集的毒菌毒理類型具有多樣性，根據(jù)其毒理類型可以將其分為：1)胃腸炎型，如臭紅菇，患者誤食后出現(xiàn)現(xiàn)劇烈惡心，嘔吐，腹瀉等；2)溶血型，如亞稀褶紅菇，患者誤食后出現(xiàn)急性溶血、小便醬油色等癥狀，最終導(dǎo)致急性腎衰竭[17]；3)神經(jīng)精神型，如毒蠅鵝膏菌、花褶傘、裂絲蓋傘等[18]。蠅蕈素發(fā)現(xiàn)于1869年的蠅蕈素，長期以來被認(rèn)為是毒蠅傘中有迷幻效果的藥劑[15]。毒蠅鵝膏菌中的毒蠅堿是一類神經(jīng)精神型毒素，毒性強(qiáng)，中毒潛伏期短。中毒癥狀主要表現(xiàn)為大量流汗、流涎、流淚、腹痛、腹瀉、嘔吐等[20]。從毒蠅鵝膏菌中提取的毒蠅堿可以作為高效的生物殺蟲藥劑。

3 討 論

畢節(jié)市觀風(fēng)海鎮(zhèn)的生態(tài)恢復(fù)對生態(tài)系統(tǒng)的物質(zhì)循環(huán)和生物多樣性發(fā)揮了重要的作用。該地區(qū)屬亞熱帶季風(fēng)性濕潤氣候區(qū)，氣候溫和，人為干擾的減少為馬尾松、麻櫟等植物的生長提供了良好的自然環(huán)境。與植物互利共生形成外生菌根菌是一些擔(dān)子菌門、子囊菌門和少部分接合菌門最為常見的共生關(guān)系[21]。他們與植物根系形成菌套、哈氏網(wǎng)等特殊結(jié)構(gòu)，對植被受到破壞地區(qū)的生態(tài)保護(hù)及恢復(fù)具有重要的意義，植物多樣性的豐富也同時(shí)為外生菌根大型真菌發(fā)育提供良好的條件[22]。通過對觀風(fēng)海鎮(zhèn)大型菌物資源的普查，可為后續(xù)貴州喀斯特地區(qū)生態(tài)恢復(fù)提供外生菌根資源及理論依據(jù)。

本次普查工作中，紅菇菌屬、乳菇屬、牛肝菌屬、鵝膏屬和蠟?zāi)俚姆N類最多，也是貴州省野生食用菌的主要類群?？墒秤玫拇笮驼婢嘁酝馍鸀橹鳎渲胁环t汁乳菇、多汁乳菇、松林小牛肝菌、粘蓋牛肝菌等名貴品種，對發(fā)展當(dāng)?shù)氐恼湎∈秤靡吧a(chǎn)業(yè)和建立野外撫育區(qū)提供了科學(xué)依據(jù)。另外，發(fā)展珍稀食用野生菌產(chǎn)業(yè)的同時(shí)，做好科普宣傳工作，采用多種途徑來預(yù)防誤食有毒野生菌也具有重要意義。