酸馬奶中抗結(jié)核菌功效成分研究進展

曹愷欣, 武俊瑞, 李煜, 韓琦, 于博, 祁姝旖, 烏日娜, 芒來

（1.沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)食品學(xué)院, 沈陽 110866；2.遼寧省食品發(fā)酵技術(shù)工程研究中心, 沈陽 110866；3.沈陽市微生物發(fā)酵技術(shù)創(chuàng)新重點實驗室, 沈陽 110866；4.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科學(xué)學(xué)院, 呼和浩特 010018）

0 引言

結(jié)核病是由結(jié)核分枝桿菌引起的一種嚴(yán)重威脅健康的疾病, 其傳播和發(fā)展的速度較快。19世紀(jì)的中葉, 有部分歐美國家利用異煙肼、利福平等抗生素治療結(jié)核病, 效果顯著[1]。然而抗生素雖具有抑菌或殺菌作用, 但長期用藥會使人體正常菌群系統(tǒng)紊亂, 產(chǎn)生耐藥性。因此, 尋找一種治療結(jié)核病的綠色療法逐漸成為趨勢。

酸馬奶（Koumiss）是一種古老的食療飲品, 具有養(yǎng)肺、清熱解毒、緩解咳嗽、抑制腐敗菌等優(yōu)良特性[2]。臨床經(jīng)驗表明, 酸馬奶對結(jié)核分枝桿菌有特異性免疫作用[3-4], 是輔助治療結(jié)核病最理想的天然藥物之一, 具有廣闊的醫(yī)療應(yīng)用前景。但其作用機理尚不明確, 本文主要從酸馬奶微生物間的相互作用總結(jié)酸馬奶治療結(jié)核病的研究進展并對其機理進行探索。

1 酸馬奶的營養(yǎng)成分及價值

酸馬奶又稱馬奶酒、策格, 在中亞地區(qū)也被稱為qymyz, 營養(yǎng)價值豐富。早在公元前5世紀(jì), 古希臘歷史學(xué)家希羅多德（Herodotus, 約前425～484年）就記載了塞西亞人制作和飲用酸馬奶[5]。在我國, 酸馬奶早在匈奴時期開始飲用[6], 因其富含多種對身體有益的成分, 能夠提高機體免疫力, 成為蒙醫(yī)的一種傳統(tǒng)療法。

1.1 酸馬奶的營養(yǎng)價值

如圖1所示, 酸馬奶是以新鮮馬乳為原材料, 經(jīng)乳酸菌和酵母菌等微生物共同發(fā)酵而成, 富含蛋白質(zhì)、脂肪、乳糖、維生素及礦物質(zhì)等多種營養(yǎng)物質(zhì)。與其他動物乳相比, 馬乳營養(yǎng)含量更高, 營養(yǎng)成分與人乳最為接近, 是人類母乳的最佳替代品[7]。馬乳蛋白質(zhì)是營養(yǎng)學(xué)上的完全蛋白質(zhì), 含有人體必需的9種氨基酸[5], 其含量約占總氨基酸的43 %；并且具有低膽固醇含量、低脂肪含量、高多不飽和脂肪酸含量的特點, 更有益于人體健康[8-9]。馬乳發(fā)酵制成的酸馬奶中的蛋白質(zhì)含量約在2 %, 其中酪蛋白與乳清蛋白比例接近于1∶1, 與牛乳相比, 含有更多的必需氨基酸；脂肪含量約為2 %, 不飽和脂肪酸種類豐富, 其中人體必需的亞油酸、亞麻酸含量較高[3-6]。酸馬奶中含有磷、鈣、銅、鐵、鋅等較豐富的礦物質(zhì), 以及大量豐富的維生素A、維生素B1、B2、B12、維生素C、D、E, 其中維生素C的含量極高；雖然酸馬奶中鈣的含量較低, 但鈣磷比例適宜, 利于人體吸收和消化[5-9]。

圖1 酸馬奶中的營養(yǎng)成分

1.2 酸馬奶的醫(yī)療價值

早在兩千多年以前, 《漢書·禮樂志》就記述了游牧民族飲用酸馬奶的習(xí)俗；到蒙元時代, 酸馬奶成為元朝宮廷和蒙古貴族府第的主要飲品, 并享有“塞北八珍”的美譽。長期飲用酸馬奶有助于消化, 能夠調(diào)節(jié)腸道健康菌群的平衡、抑制有害微生物的生長繁殖、消除腸道內(nèi)有害物質(zhì), 從而改善機體的健康狀態(tài)[10]。酸馬奶中所含豐富的營養(yǎng)物質(zhì), 有參與人體新陳代謝、降低血液中膽固醇水平、抗高血壓、提高人體免疫力及防治疾病的功效[11]。對動脈硬化、冠心病、高血壓心血管疾病、結(jié)核病以及壞血病等均有良好的治療效果[3-8]。蒙古民族在長期的遷徙游牧的生活過程中, 通過純天然防病、治病的經(jīng)驗, 形成了“酸馬奶療法”[12]。近年來內(nèi)蒙古、蒙古和俄羅斯等地區(qū)紛紛建立起“酸馬奶醫(yī)療中心”, 專門用于治療心血管系統(tǒng)疾病[5]、慢性萎縮性胃炎、肺結(jié)核、腸結(jié)核等消化系統(tǒng)疾病和慢性消耗性疾病[13-15]；蒙古用于治療結(jié)核病的酸馬奶已進入臨床試驗階段[8]。

2 酸馬奶中有益微生物及其抗結(jié)核菌作用機理

酸馬奶制品中微生物種類豐富, 是一個復(fù)雜的微生態(tài)環(huán)境。其中益生菌主要指乳酸菌和酵母菌[16]；除此之外, 還包括有明串球菌、醋酸菌、腸球菌等其它種類微生物[17]。在發(fā)酵過程中, 由于酵母菌和乳酸菌的作用使得酸馬奶的酸堿度降低, 不利于腐敗細(xì)菌和其他微生物的生長, 從而具有抗菌特性。酸馬奶中益生菌代謝產(chǎn)生的細(xì)菌素、有機酸等成分對結(jié)核分枝桿菌具有較強的抗菌活性。

2.1 酸馬奶中的微生物

自2000年開始, 酸馬奶得到了我國食品科研工作者的重視, 對其開展菌種篩選和微生物多樣性分析等諸多研究[18], 各種測序技術(shù)的發(fā)展也為傳統(tǒng)釀造食品中復(fù)雜微生物群的研究奠定了基礎(chǔ)。姚國強[19]等人利用單分子實時測序技術(shù)系統(tǒng)分析了酸馬奶樣品的細(xì)菌多樣性。結(jié)果表明, 單分子實時測序技術(shù)可以大大提高細(xì)菌多樣性檢測的準(zhǔn)確性和靈敏度, 特別是低豐度菌群。在蒙古國傳統(tǒng)酸馬奶中乳酸菌多樣性的研究中, 劉文俊[20]等人采用的PacBio三代測序技術(shù)（PacBio SMRT）, 可通過其特有的CCS測序模式對同一條序列多次重復(fù)測序的結(jié)果進行校正, 從而獲得測序高質(zhì)量的一致性序列。Xia[21]等人利用UPLCQ-TOF-MS的代謝組學(xué)方法確定了酸馬奶發(fā)酵過程中的7個關(guān)鍵代謝途徑。

受地域、自然環(huán)境、季節(jié)、制作方法、發(fā)酵時段等多種因素影響, 即使是同一地區(qū)的酸馬奶樣品, 其微生物組成和數(shù)量也會有所差別。Tang[22]等人在14份酸馬奶酒樣品中, 共鑒定出119種細(xì)菌和36種酵母菌, 城市和農(nóng)村的樣品間存在差異。宋凱[23]利用Illumina Miseq高通量測序?qū)鹘y(tǒng)酸馬奶的細(xì)菌多樣性進行分析。結(jié)果表明, 其優(yōu)勢細(xì)菌門為厚壁菌門（Firmicutes）和變形菌門（Proteobacteria）與Wurihan[24]等人的研究略有差別。使用Illumina miseQ平臺調(diào)查發(fā)現(xiàn)酸馬奶發(fā)酵過程中產(chǎn)生的連續(xù)細(xì)菌群落, 主要細(xì)菌種類是海爾維氏乳桿菌、parauberis鏈球菌（phylum Firmicutes）和巴氏醋桿菌（phylum Proteobacteria）。Meng[25]等人基于高通量測序(HTS)的微生物分析表明, 乳酸桿菌（Lactobacillus）、乳球菌（Lactococcus）、醋桿菌（Acetobacter）、鏈球菌（Streptococcus）、沙雷氏菌（Serratia）和明串珠菌（Leuconostoc）以及哈薩克斯坦菌屬（Kazachstania）、克魯維酵母（Kluyveromyces）、絲孢酵母科（Trichosporonaceae）、畢赤酵母（Pichia）和假絲酵母（Candida）是傳統(tǒng)發(fā)酵過程中的優(yōu)勢屬。在人工酸馬奶酒中, Guo[26]等人的研究證明了乳酸菌和酵母菌是優(yōu)勢菌屬。Khrisanfova[27]等對酸馬奶酒的微生物群進行研究發(fā)現(xiàn), 酸馬奶酒的乳酸酵母與酸馬奶酒的酒精發(fā)酵有關(guān), 能夠生成2%～3.5%的乙醇, 并且它們均有產(chǎn)生抗生素的能力, 是酸馬奶酒具有抗生素活性的主要原因之一[11]。

2.2 酸馬奶中的乳酸菌及其抑菌特性

酸馬奶的抑菌作用與其中的乳酸菌密切相關(guān)[28]。一方面, 酸馬奶中大量存在的乳酸菌本身具有占位性優(yōu)勢, 與有害菌有營養(yǎng)競爭作用；另一方面, 乳酸菌產(chǎn)生的細(xì)菌素等物質(zhì)抑菌物質(zhì)具有廣譜抑菌作用, 能夠很好的抑制革蘭氏陽性菌, 對部分革蘭氏陰性菌也有抑制作用[25]。姜晶[29]等人從酸馬奶中提取得到的植物乳桿菌DSM20174細(xì)菌素有較好的抑菌作用, 且pH越小時, 其抑菌活性越強。滿麗莉[28]等人研究發(fā)現(xiàn), 一株內(nèi)蒙古酸馬奶來源的植物乳桿菌MXG-68所產(chǎn)細(xì)菌素能抑制包括鼠傷寒沙門氏菌、金黃色葡萄球菌、大腸桿菌等在內(nèi)的20株致病菌。

乳酸菌的抑菌作用與很多因素相關(guān)。第一, 乳酸菌產(chǎn)生的有機酸如乳酸、乙酸、酒石酸和蘋果酸等, 能降低環(huán)境pH值, 從而使大多數(shù)不耐酸的致病菌和腐敗菌的生長繁殖受到抑制[30-31]。第二, 乳酸菌本身不含有過氧化氫酶, 但具有黃素蛋白氧化酶活性, 在有氧條件下能產(chǎn)生過氧化氫, 過氧化氫激活過氧化氫硫氰酸系統(tǒng), 可抑制或殺滅大多數(shù)有害菌[32]。第三, 乳酸菌產(chǎn)生抗生素或細(xì)菌素類物質(zhì)對有害菌具有殺菌作用[33]。乳酸菌產(chǎn)生的抑菌活性物質(zhì), 不僅破壞細(xì)菌的細(xì)胞壁和細(xì)胞膜結(jié)構(gòu), 可能還會產(chǎn)生孔洞[34], 影響細(xì)菌的細(xì)胞代謝, 導(dǎo)致細(xì)菌無法進行正常的生長和繁殖, 從而發(fā)揮抑菌作用[35]。如乳酸菌抗菌肽具有廣譜和高效的抗菌活性, 在體內(nèi)能夠抑制病原微生物的生長繁殖, 增強機體免疫功能。斯木吉德[36]等人從新鮮酸馬奶中篩選的1號菌株能夠產(chǎn)生抗菌蛋白類代謝物。

乳酸菌代謝過程中的中間產(chǎn)物二氧化碳, 其自身具有抑菌活性的同時, 能夠形成一個相對厭氧的環(huán)境, 抑制某些霉菌和革蘭氏陰性菌的生長[37]。佳木泰等人從內(nèi)蒙古牧區(qū)家庭手工制作的酸馬奶中篩選出的8株乳酸桿菌均對枯草芽孢桿菌（Bacillus subtilis）有抑制作用[38]。包科爾沁[33]等人從酸馬奶樣品中篩選得到一株乳酸菌SMN3-3, 其發(fā)酵乳上清液具有較好抑制腸道致病菌效果, 且對蛋白酶和熱均具有良好的穩(wěn)定性。賈燕等人分離到一株干酪乳桿菌XM-38可抑制大腸桿菌、鼠傷寒沙門菌、單增李斯特菌、枯草芽孢桿菌, 具有較強的抑菌活性[39]。

2.3 酸馬奶中的酵母菌及其抑菌特性

酵母菌是人類利用最早的微生物之一, 廣泛應(yīng)用于肉類發(fā)酵制品、谷類發(fā)酵制品及酒精飲料食品中。酸馬奶發(fā)酵成熟過程中, 酵母菌含量豐富, 能增進食欲、活化胰腺機能、促進消化；對慢性支氣管炎、胃腸道潰瘍、黏膜炎、重病后二次貧血等病癥都具有較高的醫(yī)療價值[14]。酸馬奶中的酵母菌分為乳糖發(fā)酵酵母、非乳糖發(fā)酵酵母和非糖發(fā)酵酵母等3種主要類型[17], 在代謝過程中能產(chǎn)生多種抗生素活性物質(zhì), 并能促進維生素B12的合成, 與酸馬奶特有的營養(yǎng)價值和醫(yī)療保健作用密不可分[40]。

酵母菌的抑菌活性一般認(rèn)為是通過代謝物如：乙醇、亞硫酸鹽、乳酸等具有殺菌作用的小分子物質(zhì)、肽類、吡嗪衍生物類及未知組成成分的抗菌素、殺菌毒素而產(chǎn)生的。酵母菌的殺菌系統(tǒng)是由一群能分泌毒素蛋白, 殺死敏感微生物的酵母菌組成。殺菌酵母菌對親緣關(guān)系密切的同種其它菌株、其它真核生物及需氧放線菌、革蘭氏陽性、陰性菌和生長緩慢的結(jié)核分枝桿菌都有抗性[15]。殺菌毒素是一種糖蛋白, 它由特定的質(zhì)粒編碼, 毒素效應(yīng)與敏感微生物的胞壁受體結(jié)合, 從而導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)pH值顯著下降、代謝抑制、細(xì)胞死亡[41]。李麗杰[42]等人的研究結(jié)果表明, 酵母菌發(fā)酵液可產(chǎn)生抑菌物質(zhì), 但不屬于標(biāo)準(zhǔn)六大類抗生素, 推測為是由蛋白質(zhì)和小分子物質(zhì)組成。趙美霞[43]等人從酸馬奶酒樣品篩選得到2株酵母菌的發(fā)酵液, 具有抑制結(jié)核分枝桿菌生長的功效, 這與國外試驗結(jié)果相似：酵母菌的發(fā)酵液可在體外明顯抑制結(jié)核分枝桿菌。

2.4 酸馬奶中乳酸菌與酵母菌的互生發(fā)酵協(xié)同抑菌作用

酵母菌和乳酸菌之間存在代謝物互補機制, 也就是說兩種菌可以互相利用代謝產(chǎn)物, 有一定的共生作用[44]。如圖2所示, 酵母菌為乳酸菌提供營養(yǎng)因子, 乳酸菌為酵母菌提供能量來源[45]。

圖2 酸馬奶中乳酸菌與酵母菌的共生發(fā)酵協(xié)同抑菌作用

在乳酸菌和酵母菌共生發(fā)酵過程中, 混菌發(fā)酵體系前中期產(chǎn)酸能力增加, 其內(nèi)在原因可能是：氨基酸類代謝產(chǎn)物是促進乳酸菌生長的重要因子[11]。共生發(fā)酵的抑菌效果優(yōu)于單獨乳酸菌發(fā)酵[35], 是因為乳酸菌和酵母菌發(fā)酵產(chǎn)生酒精和二氧化碳, 能聯(lián)合產(chǎn)生的低pH環(huán)境, 從而有效抑制不良微生物的活性[46]；并且酵母菌可產(chǎn)生各種酶類, 完成酒精發(fā)酵, 還能與乳酸菌共同產(chǎn)生大量活性代謝物：如抗生素和有機酸等, 共同抑制病原微生物的生長繁殖。

關(guān)于抗菌物質(zhì)抑菌機理, 一般認(rèn)為抑菌劑的主要作用途徑是膜攻擊、抑制細(xì)胞呼吸或者抑制蛋白質(zhì)的合成等[47]。Ishii[48]等研究發(fā)現(xiàn)：混合培養(yǎng)過程中酵母菌可以不斷中和代謝產(chǎn)物中的乳酸, 從而降低高濃度乳酸對乳酸菌生長的抑制, 從而使得產(chǎn)物Nisin不斷富集。Nisin作用于細(xì)胞壁, 通過阻止細(xì)胞壁中肽聚糖的合成, 使細(xì)胞壁質(zhì)膜與磷脂化的合成不能正常進行, 導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)的物質(zhì)和一些三磷酸腺苷滲漏到胞外, 最終使細(xì)胞破裂致死來達到抑菌目的。Osprenova[4]等人觀察發(fā)現(xiàn)酸馬奶對結(jié)核分枝桿菌有很高的抗菌活性, 與其中乳酸菌、乙酸菌和酵母菌等代謝過程中產(chǎn)生的有機酸和抑菌物質(zhì)有關(guān)。Khrisanfova[49]等報道, 馬奶中的3種主要酵母菌能產(chǎn)生抗生素物質(zhì), 其中乳酸酵母產(chǎn)生的抗生素對結(jié)核分枝桿菌有更強的抗菌活性；且酵母菌與乳酸菌共存時其抗菌活性最強, 對有害微生物的抗菌作用更明顯。酸馬奶中的乳酸菌和酵母菌等微生物能產(chǎn)生不同種類的抗生素和有機酸, 這些生物活性分子對結(jié)核分枝桿菌以及其他有害微生物有較高的抗菌活性[6]。

3 酸馬奶中有效成分治療結(jié)核病的作用機理

馬奶發(fā)酵成酸馬奶的過程中, 微生物菌群代謝產(chǎn)生多種抑菌活性物質(zhì), 已成為近年來研究的熱點。本課題組在Science Direct查詢檢索了關(guān)鍵詞為“酸馬奶”+各類主要抑菌活性物質(zhì)（包括乙醇、有機酸、乳酸、乙酸、丙酸、免疫球蛋白、抗菌肽、乳鐵蛋白、Nisin、溶菌酶、馬乳脂、過氧化氫、乳過氧化物酶、亞硫酸鹽、miRNA）, 1996-2022年間1 653篇酸馬奶中各抑菌物質(zhì)發(fā)表文章數(shù)如圖3所示。

由圖3可知, 酸馬奶中的抑菌物質(zhì)大致分為：乳酸、乙酸等有機酸類共867篇；蛋白及酶類337篇；酵母菌發(fā)酵產(chǎn)物乙醇198篇；馬乳中本身含有的馬乳脂、亞硫酸鹽等共248篇。其中乳酸為酸馬奶中研究最多的抑菌物質(zhì), 其次是各類有機酸及酵母菌代謝產(chǎn)物乙醇；早年關(guān)于馬乳脂抑菌的研究較多, 近年開始研究miRNA與免疫間關(guān)系。在發(fā)酵過程中, 酸馬奶中的有益微生物如乳酸菌和酵母菌等, 能夠降低環(huán)境的pH值, 產(chǎn)生不同種類的有機酸和抑菌活性物質(zhì), 從而對結(jié)核分枝桿菌以及其他有害微生物有較高的抗菌活性。

圖3 近年來發(fā)表的有關(guān)酸馬奶中各抑菌物質(zhì)的文章篇數(shù)

3.1 馬乳中的抑菌物質(zhì)

馬乳本身含有免疫球蛋白、乳鐵蛋白、溶菌酶、乳過氧化物酶等抗菌物質(zhì), 作用機理如表1所示。馬乳中C12：0和C18：3的含量分別為6.2%和12.6%, 其中α-亞麻酸和亞油酸均顯著高于牛乳等其他乳, 是馬乳具有殺菌作用的原因之一[50]。中亞地區(qū)由牛奶或馬奶制備的發(fā)酵食品qymyz具有相同的抗結(jié)核分枝桿菌的作用, 已證實其抗菌作用與發(fā)酵原材料無關(guān), 與微生物組成有關(guān)[51]。

表1 馬乳中的抑菌物質(zhì)及作用機理

3.2 馬乳脂

脂肪是酸馬奶重要組成成分之一, 其特點是低膽固醇含量和高多不飽和脂肪酸含量[9]；酸馬奶含有約80 %的甘油三酯、9%～10%的游離脂肪酸和5%～19 %的磷脂。馬乳脂具有抑制結(jié)核分枝桿菌的作用[50,52-54]。侯文通[52]等人通過體外實驗證實：馬乳脂能夠有效抑制結(jié)核分枝桿菌生長。孫惠平[50]等人研究發(fā)現(xiàn), 馬乳脂具有抑制結(jié)核分支桿菌生長的作用, 且馬乳脂大劑量組（0.5 mL）抑菌效果明顯優(yōu)于小劑量組（0.1 mL）。酸馬奶治療結(jié)核病的臨床效果表明, 其脂肪成分和酵母菌發(fā)酵液可以對抗結(jié)核病細(xì)菌[53]。孫健[54]等人進行了酸馬奶酒的抗結(jié)核成分的粗分離實驗, 發(fā)現(xiàn)馬奶和馬奶酒中粗脂肪對結(jié)核分枝桿菌具有抑菌作用, 但乳清沒有明顯作用。

3.3 有機酸

酸馬奶酒中檢測到的有機酸包括草酸、酒石酸、蘋果酸、乳酸、乙酸、檸檬酸和琥珀酸。在發(fā)酵過程中, 一些有機酸（乳酸和乙酸）的濃度增加, 而其他有機酸（檸檬酸等）的濃度減少[32]。酸馬奶中的乳酸起主要抑菌作用, 而醋酸和酒精的存在導(dǎo)致解離平衡向未解離乳酸方向移動, 提高了抑菌效果。通過對照酸馬奶酒與模擬酸馬奶酒中有機酸對枯草芽孢桿菌的抑菌作用發(fā)現(xiàn)：酸馬奶酒的抑菌作用大于模擬酸馬奶酒的抑菌作用, 這說明酸馬奶酒很可能存在其它抑菌物質(zhì)。孫健[54]等人的研究結(jié)果表明, 各因素對抑菌效果影響的大小順序為乳酸＞醋酸＞酒精, 與國外文獻報道的基本相一致。

3.4 酸馬奶外泌體

外泌體是細(xì)胞分泌并進入體液或細(xì)胞外環(huán)境的小囊泡, 可以介導(dǎo)腫瘤微環(huán)境中的腫瘤細(xì)胞、免疫細(xì)胞、基質(zhì)細(xì)胞和間充質(zhì)干細(xì)胞間的交流通訊, 在細(xì)胞間的通訊中發(fā)揮關(guān)鍵作用。馬奶和酸馬奶中存在大量的外泌體, 并具有不同的免疫調(diào)節(jié)作用。查干其其格[46]等人在培養(yǎng)實驗中發(fā)現(xiàn), 馬奶外泌體能夠促進小鼠巨噬細(xì)胞Raw264.7的腫瘤壞死因子（TNF-α）和白細(xì)胞介素（IL）-12p40以及IL-10分泌。IL-10是一種具有重要免疫調(diào)節(jié)功能的多效細(xì)胞因子, 可以影響免疫系統(tǒng)中許多細(xì)胞類型的活動, 與各種癌癥如伯基特淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤和非小細(xì)胞肺癌的生存、增殖和抗凋亡活性相關(guān)。酸馬奶外泌體則能夠促進抗炎因子IL-10的分泌, 具有免疫調(diào)節(jié)作用。

酸馬奶的外泌體內(nèi)含物中最為突出的是miRNA, 它以外泌體為載體, 到靶細(xì)胞和器官發(fā)揮降解信使RNA的作用, 參與機體發(fā)育、病毒防御、器官形成、細(xì)胞增殖和凋亡、以及免疫應(yīng)答等生物體多種生理過程。其中miRNA表達和疾病（腫瘤等）病理過程密切相關(guān), 可以作為疾病早期診斷、分型和預(yù)后判斷的生物學(xué)指標(biāo)。例如血液中的miR-25、miR-223可辨別非微細(xì)胞肺癌；外泌體來源的miRNAs可以通過調(diào)節(jié)肺癌細(xì)胞的免疫反應(yīng)影響肺癌的發(fā)生發(fā)展[56]。已經(jīng)有研究發(fā)現(xiàn), 在人乳和牛奶中存在大量的miRNA。從營養(yǎng)學(xué)角度來看, 馬奶的營養(yǎng)成分與其他畜種相比與人乳最相近[57]；因此, 馬奶和酸馬奶中也許有能夠調(diào)節(jié)免疫系統(tǒng)的特異性miRNAs, 從而具有治療高血脂、體弱病殘、高血壓、肺結(jié)核、腸結(jié)核、糖尿病等疾病的特殊療效。尹芳[58]等人研究表明, 細(xì)胞因子IL-2、IL-12及IL-18均能不同程度的增強結(jié)核分枝桿菌ESAT-6DNA疫苗的體液以及細(xì)胞免疫應(yīng)答水平, 并顯著提高其免疫保護效果。因此, 適當(dāng)攝入酸馬奶可以增強結(jié)核分枝桿菌疫苗的免疫保護作用, 從而輔助治療結(jié)核病。

4 酸馬奶在結(jié)核病治療的應(yīng)用

對于結(jié)核病等慢性疾病來說, 長期使用抗生素會使機體產(chǎn)生耐藥性且對健康產(chǎn)生不利影響, 因此, 尋求一種綠色健康的方法治療結(jié)核病尤為重要。酸馬奶營養(yǎng)豐富, 有亦醫(yī)亦食之效, 是治療結(jié)核病最理想的天然藥物之一[4]。在代謝產(chǎn)物方面, 酸馬奶中益生菌代謝產(chǎn)生的細(xì)菌素、有機酸等成分對結(jié)核分枝桿菌具有較強的抗菌活性。在活性物質(zhì)方面, 馬奶中富含乳鐵蛋白、馬乳脂、溶菌酶、不飽和脂肪酸、多種抗體等多種抑菌物質(zhì)；酸馬奶的外泌體則能夠促進抗炎因子IL-10的分泌, 具有免疫調(diào)節(jié)作用。此外, 酸馬奶中的蛋白質(zhì)、脂肪、糖類、礦物元素、維生素等也可為結(jié)核病患者補充營養(yǎng)。前蘇聯(lián)經(jīng)過長期研究, 也認(rèn)為發(fā)酵馬奶制品qymyz是一種治療性飲料, 具有治療和改善結(jié)核病的作用[51]。另外, 酸馬奶還對胃腸道疾病、支氣管肺炎、干燥性胸膜炎等有很好的治療效果[59]。

在中國, 蒙醫(yī)使用酸馬奶來治療肺結(jié)核, 歷史悠久, “酸馬奶療法”是蒙古族在長期的遷徙游牧生活過程當(dāng)中積累的純天然防病、治病的經(jīng)驗[12]。我國內(nèi)蒙古錫盟蒙醫(yī)研究所每年夏秋季用酸馬奶來治療肺結(jié)核等肺部疾病。紅綱[60]等人用酸馬奶結(jié)合蒙藥治療20名肺結(jié)核患者, 每天飲用酸馬奶3～4次, 150～200 mL/次, 飯前0.5 h飲用, 結(jié)合蒙藥治療, 30 d為1個療程。結(jié)果表明早期診斷患者酸馬奶結(jié)合蒙藥口服治療1～2療程緩解癥狀, 3個療程基本痊愈；晚期或慢性期復(fù)發(fā)性肺結(jié)核病患者酸馬奶結(jié)合蒙藥口服治療2～3療程緩解癥狀, 5個療程基本痊愈。查哈達等人對56例確診結(jié)核病的病人采用酸馬奶+蒙藥治療, 患者每天早、中、晚飲用酸馬奶, 250～450 mL/次, 外加蒙藥, 結(jié)果顯示, 56例中治愈51例[2]。蘇雅拉吉日嘎等人用酸馬奶治療31名肺結(jié)核患者及27名結(jié)核性胸膜炎患者。每天3次飲用酸馬奶, 500～1 000 mL/次。服用時間根據(jù)病程長短決定, 一般7～49 d。治療結(jié)果為痊愈占62%, 好轉(zhuǎn)占34.5%, 未愈占3.5%[61]。盧海鵬等發(fā)現(xiàn), 酸馬奶可促進脾臟淋巴細(xì)胞、全血中T、B細(xì)胞的增殖, 調(diào)節(jié)機體免疫狀態(tài)[62]；且肺氣腫患者飲用酸馬奶后呼吸輕松、食欲提高、氣色好轉(zhuǎn)、體重增加[6]。酸馬奶中含有的多種維生素及微量元素, 可以使患者營養(yǎng)得到充分補充, 進而增強機體免疫功能[63]。

青海省海洲蒙藏醫(yī)院的查哈達經(jīng)多年臨床研究證明, 酸馬奶對治療結(jié)核病有較好的效果；酸馬奶療法對肺部疾?。喝绶谓Y(jié)核, 肺氣腫等, 用有具有顯著的療效[2]。錫盟蒙醫(yī)醫(yī)院一直不斷開發(fā)與研究酸馬奶文化, 繼續(xù)傳承、推廣并充分的開發(fā)利用酸馬奶療法[64]。

5 結(jié)束語

肺結(jié)核是一種由結(jié)核分枝桿菌引起的慢性疾病, 由于抗生素藥物的大量使用, 結(jié)核分枝桿菌的耐藥性不斷增加, 結(jié)核病治療效果收效甚微, 因而尋找一種可持續(xù)的療法變得尤為關(guān)鍵。酸馬奶中含有大量營養(yǎng)物質(zhì)和有益成分, 作為一種綠色保健品用于輔助治療結(jié)核病, 具有廣泛的應(yīng)用前景。隨著下一代測序技術(shù)的出現(xiàn), UPLC-Q-TOF-MS/MS技術(shù)的普及與應(yīng)用, 可以更好探究酸馬奶的有效抑菌成分及其作用機理。臨床上現(xiàn)已使用酸馬奶中的部分乳脂輔助治療結(jié)核病, 未來有望培育高產(chǎn)量乳用型馬, 以用于大規(guī)模提取馬乳脂中的生物活性成分, 作為新型功能性食品或藥物用于結(jié)核病的治療。在不久的將來, 進一步深入探究酸馬奶中有益微生物的抑菌機理, 系統(tǒng)性開發(fā)酸馬奶療法和現(xiàn)代醫(yī)學(xué)相結(jié)合的模式, 從而更加精準(zhǔn)有效地治療結(jié)核病等疾病。