觀察血常規(guī)標本臨檢前混勻靜置時間對檢驗結(jié)果的影響

梁雅婷

西寧市第二人民醫(yī)院，青海 西寧 810003

0 引言

血常規(guī)指的是通過對血液檢驗對象血液中血細胞形態(tài)、數(shù)量和分布狀況等分析，判斷實際狀況，掌握血液具體狀況，從而診斷并分析疾病，該方法為臨床常用檢查方法。采用血常規(guī)檢查方法可對部分疾病進行診斷，同時也是輔助醫(yī)生診斷的主要方法，以血常規(guī)檢查結(jié)果為依據(jù)能夠初步了解患者身體狀況。血常規(guī)臨床檢驗過程中，檢驗結(jié)果往往存在一定誤差。據(jù)有關(guān)資料顯示，血常規(guī)檢驗結(jié)果影響因素有很多，包括血液靜置時間、患者情緒、采血方法、環(huán)境變化、采血位置等[1]。為減小血常規(guī)檢驗結(jié)果的誤差，提高檢驗結(jié)果的準確性，需要盡量將血常規(guī)檢驗結(jié)果影響因素排除，確保血液采集、檢驗的規(guī)范性。盡量避免誤差的發(fā)生，提高血常規(guī)檢驗準確性，以便后期實施相應(yīng)的治療及護理工作。因而，本次研究主要針對血常規(guī)標本臨檢前混勻靜置時間對檢驗結(jié)果的影響進行綜合分析，詳情如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

隨機抽選2019年1月-2019年12月前來本院進行常規(guī)體檢的80例體檢者，其中男43例，女37例；年齡5～82歲，平均（45.32±6.35）歲；文化水平：小學15例，初中17例，高中19例，大專及大專以上29例。

納入標準：體檢資料齊全、完整；溝通、理解、表達能力均正常；具有良好的依從性。

排除標準：具有先天性心臟病及精神疾病；存在凝血功能障礙；意識模糊；合并器官功能不全，包括心、腎、肝等；妊娠及哺乳期婦女；合并惡性腫瘤；存在黃疸者；存在溶血功能異常；具有傳染疾病史；存在免疫系統(tǒng)疾病或者遺傳疾病。

1.2 方法

所有受檢人員均在清晨空腹狀態(tài)下采集外周靜脈血，取2mL血液標本，通過EDTA K2抗凝管實施處理，混勻后放置10min、30min、1h和2h，于不同時間點實施血常規(guī)檢測，每個時間點實施3次檢測，選取平均值。通過全自動血細胞分析儀實施檢測，合理調(diào)整檢查濕度及溫度，檢查過程中，確保儀器正常運轉(zhuǎn)。

1.3 觀察指標

對比不同靜置時間下血常規(guī)指標及白細胞計數(shù)分類指標。

1.4 統(tǒng)計學分析

采取統(tǒng)計學軟件SPSS 21.0處理研究數(shù)據(jù)，計量資料以（）表示，以t檢驗；計數(shù)資料以率（%）表示，接受χ2檢驗；P用于兩組比較檢驗，P＜0.05說明差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 不同靜置時間下血常規(guī)指標比較

血常規(guī)標本靜置30min以內(nèi)，白細胞計數(shù)、血紅蛋白、血小板計數(shù)及紅細胞計數(shù)方面均未見顯著改變（P＞0.05）；但是隨著靜置時間的增加，血小板計數(shù)越來越高，且與靜置10min、30min對比，存在明顯差異（P＜0.05）；靜置1h與靜置2h血小板計數(shù)未見明顯差異（P＞0.05），見表1。

表1 不同靜置時間下血常規(guī)指標對比（）

表1 不同靜置時間下血常規(guī)指標對比（）

2.2 不同靜置時間下白細胞計數(shù)分類指標比較

淋巴細胞比值方面，靜置10min、30min、1 h 及2 h 均未見明顯差異（P ＞0.05）；靜置30min時，中性粒細胞水平最高，隨著靜置時間的增加，中性粒細胞水平逐漸降低，靜置10min、30min與靜置1h及2h對比，差異顯著（P＜0.05），見表2。

表2 不同靜置時間下白細胞計數(shù)分類指標比較（）

表2 不同靜置時間下白細胞計數(shù)分類指標比較（）

3 討論

血常規(guī)是當前臨床常見的一種檢驗項目，該檢查方法在疾病診斷及日常體檢中具有重要作用。利用血常規(guī)標本檢驗，能夠有效評估患者病情，以便更好判斷疾病，從而為患者制定科學、規(guī)范的治療方法，加快其康復(fù)速度。但是，血常規(guī)檢驗期間，極易因為諸多因素的作用，對血常規(guī)檢驗結(jié)果造成影響，比如標本臨檢前混勻靜置時間、血液標本采集不合理、未合理保存標本等，以上內(nèi)容均可能影響檢驗結(jié)果。而血液標本混勻靜置時間屬于隱匿因素，因為血液與機體分離后，血漿中的成分會受到破壞或者分解，所以血液標本混勻靜置時間與檢驗結(jié)果存在緊密聯(lián)系[2]。盡管血常規(guī)標本試管中放置了抗凝劑，但是在血液離開機體后，導(dǎo)致有些血液發(fā)生凝聚。標本放置時間的增加，則會導(dǎo)致凝聚的血小板慢慢分解。所以，標本放置時間直接影響血小板檢測結(jié)果，因此應(yīng)加強對標本放置時間的重視。要想血常規(guī)檢驗準確性提高，需要嚴格控制血液標本質(zhì)量，加強對臨檢前混勻靜置時間控制的重視。與此同時，嚴格控制血液檢測的每個階段，盡可能避免外界因素影響檢驗結(jié)果，同時合理控制檢驗結(jié)果的誤差。當前，血常規(guī)檢驗被廣泛應(yīng)用于臨床中，利用血常規(guī)檢驗方法能夠及時了解患者血細胞各個指標，從而更好地診治疾病。在醫(yī)學技術(shù)日益提高的背景下，血常規(guī)檢驗效果及檢驗質(zhì)量越來越高。針對當前有些疾病，血常規(guī)可以作為主要指標，以便判斷疾病狀況。與此同時，利用血常規(guī)檢驗方法，能夠?qū)颊呒t細胞、血小板及白細胞等諸多指標全面了解，以便準確判斷疾病。血細胞分析儀是血常規(guī)檢驗常用的一種設(shè)備，利用該設(shè)備能夠顯示血細胞各指標，具有較高的檢測率，根據(jù)血常規(guī)檢驗結(jié)果能夠?qū)颊卟∏槿媪私?，為臨床診治提供數(shù)據(jù)參考。利用檢驗設(shè)備開展檢驗過程中，需要對精密度高、檢測速度快的儀器進行選擇，以此減少檢測時間，促進檢測效果和檢測質(zhì)量的提高。血常規(guī)檢驗過程中，檢測試劑、溫度、標本保存時間、檢測技術(shù)等均影響著檢驗結(jié)果。與此同時，采集血液標本在血常規(guī)檢驗中具有關(guān)鍵性作用，抗凝處理血液標本且混勻靜置后實施檢測。

血常規(guī)檢測期間，應(yīng)及時檢驗混勻標本，但是混勻過程中，血液標本會發(fā)生氣泡，如果氣泡數(shù)量較多，且在該時間實施檢驗，則會降低血量，最終對檢驗結(jié)果造成影響，一般情況下，檢驗值要比靶值低。針對靜置一段的血液標本，氣泡慢慢上浮，與此同時，在達到穩(wěn)定階段后實施檢驗，可以提高檢驗準確性。但是，如果沒有合理控制靜置時間，同樣會影響檢驗結(jié)果[3]。因為血液中的紅細胞及白細胞會產(chǎn)生呼吸作用，進而加快細胞增殖速度，最終對檢驗結(jié)果造成影響。所以，需要有效控制混勻靜置時間。

本次研究中，血常規(guī)標本靜置30min以內(nèi)，白細胞計數(shù)、血紅蛋白、血小板計數(shù)及紅細胞計數(shù)方面均未見顯著改變（P＞0.05）；但是隨著靜置時間的增加，血小板計數(shù)越來越高，且與靜置10min、30min對比，存在明顯差異（P＜0.05）；靜置1h與靜置2h血小板計數(shù)未見明顯差異（P＞0.05）；原因如下[4]：血小板計數(shù)水平提高，主要是因為靜脈血與機體分離后，放置在抗凝管中，因為溫度等影響，使得血小板形態(tài)發(fā)生改變，血小板外膜產(chǎn)生微小管游離端，在其逐漸向外延伸后，則會產(chǎn)生絲狀偽足，進而形成血小板可逆聚集體。因為全自動血液分析儀以單個血細胞引起的電阻脈沖大小為依據(jù)，將血細胞數(shù)量顯示出來，電阻脈沖值同樣可以將血細胞體積顯示出來，進而計算血小板計數(shù)。淋巴細胞比值方面，靜置10min、30min、1h及2h均未見明顯差異（P＞0.05）；靜置30min時，中性粒細胞水平最高，隨著靜置時間的增加，中性粒細胞水平逐漸降低，靜置10min、30min與靜置1h及2h對比，差異顯著（P＜0.05）。原因如下：抗凝管中抗凝劑的組成以鹽屬羧螯合劑為主，其能夠與血液中的鈣離子結(jié)合進而產(chǎn)生相對平穩(wěn)的整合物，利用該物質(zhì)實施抗凝，與此同時，抗凝劑經(jīng)過30min左右的時間作用，離子濃度逐漸平衡，使得白細胞水平慢慢恢復(fù)正常[5-6]。根據(jù)以上結(jié)果分析，混勻靜置時間從一定程度上影響著血常規(guī)檢驗結(jié)果，所以應(yīng)加強對混勻靜置時間的重視，盡可能避免靜置時間對檢驗結(jié)果造成影響，促進檢驗結(jié)果準確性的提高。

血常規(guī)為臨床血液檢查中常見且基本的一種。血液分為液體與有形細胞兩種形態(tài)，而血常規(guī)檢查方法主要檢查的是血液中的細胞。血液細胞主要由血小板、白細胞和紅細胞組成，血常規(guī)檢查過程中，可以進一步觀察細胞數(shù)量改變狀況和形態(tài)分布等，進一步判斷病情變化，該方法是許多疾病診治的基礎(chǔ)。根據(jù)血常規(guī)檢查結(jié)果，可以對患者是否繼續(xù)采取抗病毒治療、是否發(fā)生再生障礙性貧血和細菌感染等分析，并進行相應(yīng)的判斷。但是，常規(guī)監(jiān)測過程中，由于檢測時間、采血位置和檢測環(huán)境等外界因素作用，對患者病情的判斷和治療方案的制定造成了影響，對于病情的判斷造成了一定阻礙。因此，臨床血常規(guī)檢測時，應(yīng)加強對各個方面控制的關(guān)注，包括檢測儀器、操作方法和檢測環(huán)境等，其影響著疾病的診斷[7]。

通過本次研究發(fā)現(xiàn)，PLT方面，靜置1h及2h與靜置10min和30min存在明顯差異。根據(jù)結(jié)果分析，血常規(guī)標本臨檢前混勻靜置時間從一定程度上影響著檢測結(jié)果。原因分析如下[8]：由于分離靜脈血后，局部接觸抗凝試管壁，因外界因素的作用，包括環(huán)境、溫度等，血小板自身形態(tài)變化明顯，血小板外膜伴有微小管的產(chǎn)生，慢慢向外延伸，由于諸多因素的作用最終形成PLT聚集體。細胞數(shù)量的反映以電解質(zhì)溶液單個細胞經(jīng)多個小孔產(chǎn)生的電阻脈沖，因此隨著標本靜置時間的增加，PLT聚集狀況并不能通常計數(shù)反映出來，進而影響了檢測結(jié)果。除此之外，因均勻后氣泡數(shù)量產(chǎn)生不同，提高了檢驗結(jié)果的變異計數(shù)。經(jīng)過研究發(fā)現(xiàn)，血液標本采集后放置時間從一定程度上影響著血液標本檢測結(jié)果，放置時間增加，因外界因素的作用，影響了血液標本的質(zhì)量和采集，包括溫度、溶血等。因此，血常規(guī)檢驗過程中，檢測人員除需要根據(jù)有關(guān)規(guī)定對采血規(guī)范，同時也要時刻關(guān)注標本混勻后靜置時間。臨床檢測過程中，血常規(guī)檢查是三大常規(guī)檢驗中的一種，通過檢測結(jié)果綜合評估血液有關(guān)參數(shù)和身體狀況，同時可以準確判斷是否合并全身系統(tǒng)疾病，或者血液系統(tǒng)疾病。因此，血常規(guī)檢查結(jié)果與醫(yī)生對疾病的判斷和治療方法的制定存在緊密聯(lián)系[9]。近幾年，臨床檢驗技術(shù)越來越高，加之醫(yī)療檢測設(shè)備應(yīng)用范圍的增加，進一步降低了誤診率、漏診率，但血常規(guī)檢驗依然存在一定不足。經(jīng)過本次研究發(fā)現(xiàn)，檢測樣本均勻混合后，靜置10～30min具有較高的穩(wěn)定性。要想獲得更加準確的檢測結(jié)果，為疾病的診治提供針對性數(shù)據(jù)參考，則需要在采集血液后，靜置一定時間后實施檢測，但需要控制靜置時間，防止外界環(huán)境等影響血常規(guī)檢測結(jié)果，從而確保良好的檢測結(jié)果。

隨著先進檢測儀器的推廣，全自動血液分析儀逐漸被應(yīng)用于血常規(guī)檢驗當中，該方法能夠減少人為因素對檢測結(jié)果的影響，提高工作效率。除此之外，檢測結(jié)果影響因素有很多，包括檢驗、采集、運送、保存和處理等，臨床上對諸多影響因素的關(guān)注度明顯提高。臨床上，針對部分相對顯著的因素，采用針對性方法盡可能控制外界因素。但是，部分較為隱匿的因素不易發(fā)現(xiàn)，例如：采集血液期間，采用抗凝劑。全自動檢測儀具備較高的可靠性和安全性。但是，抗凝劑混合血液標本后，不同靜置時間也會影響檢驗結(jié)果。進行血常規(guī)檢測前，血液標本的采集特別重要，在含有抗凝劑的試管中放置采集的血液，在兩者均勻混合后馬上送至檢查。但是混合期間，因為抗凝劑等作用，血液標本中氣泡含量較多，導(dǎo)致血量發(fā)生改變。靜置大約20s后，氣泡慢慢上浮，經(jīng)過適當時間的靜止，血液標本相對平穩(wěn)。但是，若靜置時間過長，很可能導(dǎo)致血細胞沉降現(xiàn)象，降低檢測結(jié)果。本次研究發(fā)現(xiàn)，靜置30min為中性粒細胞的峰值，之后隨著靜置時間的增加，該水平明顯降低，通過對比靜置10min及30min與靜置1h和2h發(fā)現(xiàn)，兩個時間段的中性粒細胞水平存在明顯差異，原因如下：因試管中的抗凝劑結(jié)合了靜脈血液，在此過程中，在外界因素的作用下，血小板自身結(jié)構(gòu)發(fā)生了改變，外膜形態(tài)和結(jié)構(gòu)也隨之變化，經(jīng)過長時間的發(fā)展，降低了血小板計數(shù)水平，特別是隨著時間的增加，這一現(xiàn)象越發(fā)顯著。中性粒細胞比值下降直接影響細胞生存時間，中性粒細胞死亡率與血液標本靜置時間呈正相關(guān)，抗凝劑試管的應(yīng)用，其中抗凝劑可以有效結(jié)合血液中的鈣離子，從而產(chǎn)生能夠保持形態(tài)平穩(wěn)的螯合物，避免血液形態(tài)發(fā)生改變，由于抗凝劑的強行結(jié)合，經(jīng)過一定時間后，血液中的白細胞為了適應(yīng)當前環(huán)境，自身水平越來越高，同時血小板絲狀偽足聚合體的出現(xiàn)，改變了WBC水平，進而提高了白細胞水平[10]。

據(jù)有關(guān)資料顯示[11]，血常規(guī)檢查期間，采集方法、患者藥物應(yīng)用狀況、采血操作規(guī)范、情緒狀態(tài)、抗凝劑放入比例、檢測儀器、患者情緒狀態(tài)等均影響著血常規(guī)檢測結(jié)果。因此，要想確保良好的檢測結(jié)果，則需要嚴格控制檢查中的任意環(huán)節(jié)，進一步探討對標本檢查結(jié)果造成影響的因素。針對同一批實施血常規(guī)的標準品研究發(fā)現(xiàn)，靜置時間不同，檢測檢測結(jié)果不同。靜置0s后發(fā)現(xiàn)，技術(shù)參數(shù)偏低。但是系數(shù)變化較為明顯。靜置大約10～20s發(fā)現(xiàn)，RBC檢測結(jié)果更加接近靶值，且變異系數(shù)變化較小。檢測30～40s的樣本發(fā)現(xiàn)，Hb和TBC水平慢慢提高，但是與靶值差異明顯。經(jīng)過調(diào)查研究發(fā)現(xiàn)，若靜置時間較短，抗凝試劑管中的起泡較多，空間小，并不能滿足足夠的血量標本，進而降低了檢測結(jié)果，且與靶值差異明顯。同時，空氣占據(jù)體積存在差異，檢測結(jié)果在變異系數(shù)、重復(fù)性等方面存在一定差異。靜置適當時間后，不僅可以獲得相對準確的檢測結(jié)果，而且變異系數(shù)波動較小。因此，通常在靜置10～20min后進行檢測。

綜上所述，血常規(guī)檢測期間，血常規(guī)標本靜置時間從一定程度上影響著檢測結(jié)果，長時間靜置使得檢測結(jié)果發(fā)生誤差，所以需要對檢測時間嚴格控制，以此促進檢測準確性的提高。