食品檢測(cè)機(jī)構(gòu)能力驗(yàn)證過程中的質(zhì)量控制

能力驗(yàn)證是檢驗(yàn)檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可活動(dòng)中不可缺少的一項(xiàng)重要內(nèi)容，不僅是針對(duì)個(gè)別檢驗(yàn)項(xiàng)目的考核，同時(shí)是對(duì)整個(gè)機(jī)構(gòu)質(zhì)量管理體系運(yùn)行情況的考核，筆者通過對(duì)能力驗(yàn)證的前期準(zhǔn)備、過程控制進(jìn)行分析，積累經(jīng)驗(yàn)，不斷總結(jié)和改進(jìn)，提升準(zhǔn)確性和可控性，提供準(zhǔn)確、可靠的檢驗(yàn)結(jié)果。

1 前期準(zhǔn)備

1.1 檢測(cè)儀器設(shè)備的準(zhǔn)備

分析測(cè)試前應(yīng)檢查確認(rèn)分析儀器是否處于正常工作狀態(tài)，儀器設(shè)備有無故障，能否正常開、關(guān)機(jī)，關(guān)鍵性能指標(biāo)如靈敏度和穩(wěn)定性等是否滿足測(cè)定方法要求，是否需要進(jìn)行檢定、校準(zhǔn)和期間核查以及相應(yīng)結(jié)果是否合格。多數(shù)測(cè)試結(jié)果異常與濾芯、進(jìn)樣墊、襯管、色譜柱等漏氣或者污染有關(guān)[1]。例如，筆者在參加食用油中黃曲霉毒素B1檢測(cè)能力驗(yàn)證計(jì)劃時(shí)出現(xiàn)黃曲霉毒素B1目標(biāo)峰出峰時(shí)間漂移的情況，經(jīng)排查后認(rèn)為該情況是液相濾芯污染所導(dǎo)致，更換濾芯后出峰時(shí)間正常。

1.2 關(guān)鍵性耗材及標(biāo)準(zhǔn)品

1.2.1 試劑材料采購(gòu)及盤點(diǎn)

根據(jù)分析方法中使用的關(guān)鍵試劑及耗材列明采購(gòu)種類和數(shù)量，隨后盤點(diǎn)采購(gòu)清單是否滿足分析測(cè)試要求。

1.2.2 小柱驗(yàn)收

針對(duì)實(shí)驗(yàn)所需要用到的免疫親和柱或固相萃取柱，需對(duì)小柱進(jìn)行驗(yàn)收。見表1、表2。

表1 小柱外觀驗(yàn)收表

表2 小柱性能測(cè)試驗(yàn)收表

1.2.3 質(zhì)控樣品購(gòu)置

提前購(gòu)置質(zhì)控樣品，質(zhì)控樣品的基質(zhì)和濃度應(yīng)盡可能接近能力驗(yàn)證考核樣品，通常應(yīng)在能力驗(yàn)證考核樣品分析測(cè)試時(shí)，空白對(duì)照、質(zhì)控樣品與考核樣品同時(shí)測(cè)定，以控制相對(duì)誤差[3]。

1.2.4 標(biāo)準(zhǔn)品選擇與購(gòu)置

標(biāo)準(zhǔn)品盡可能選擇有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，同時(shí)應(yīng)關(guān)注購(gòu)置的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的轉(zhuǎn)換系數(shù)與標(biāo)準(zhǔn)是否一致。例如，筆者在參加飲料中糖精鈉（以糖精計(jì)）能力驗(yàn)證計(jì)劃時(shí)發(fā)現(xiàn)GB 5009.28—2016所使用的糖精鈉標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)為固體標(biāo)樣，糖精鈉含結(jié)晶水，使用前需在120 ℃烘4 h，干燥器中冷卻至室溫后備用，糖精鈉轉(zhuǎn)化為以糖精計(jì)的轉(zhuǎn)換系數(shù)為0.887[4]，而筆者購(gòu)置的糖精鈉標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)為液體標(biāo)樣，經(jīng)查閱該標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)證書后確認(rèn)，該標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)直接以糖精定值，計(jì)算結(jié)果時(shí)無需考慮轉(zhuǎn)換系數(shù)。

標(biāo)準(zhǔn)品不僅可以用來定性和定量，也可用來進(jìn)行質(zhì)量監(jiān)控，如在日常檢驗(yàn)或能力驗(yàn)證過程的每一個(gè)分析批次中，按樣品量的5%插入標(biāo)準(zhǔn)溶液與在測(cè)樣品一起檢測(cè)，通過檢測(cè)結(jié)果與標(biāo)準(zhǔn)值的比較，可以評(píng)估此次檢測(cè)工作是否可以接受。

為測(cè)試關(guān)鍵性耗材及標(biāo)準(zhǔn)品是否滿足分析測(cè)試要求，應(yīng)在能力驗(yàn)證考核樣品分析測(cè)試前，按照指定標(biāo)準(zhǔn)的操作程序，先做實(shí)驗(yàn)室空白和標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)測(cè)試，以檢驗(yàn)試劑材料、樣品加標(biāo)回收率是否滿足要求。

2 過程控制

2.1 樣品的制備

樣品稱量前應(yīng)使樣品溫度穩(wěn)定至室溫后充分混勻。樣品取樣量應(yīng)按照標(biāo)準(zhǔn)或作業(yè)指導(dǎo)書的要求，樣品取樣量太少，容易造成前處理損失過多，測(cè)試結(jié)果偏離曲線線性范圍；取樣量過多，可能造成提取回收率過低或目標(biāo)物含量超出固相萃取柱或免疫親和柱柱容量，使結(jié)果產(chǎn)生偏離。

2.2 校準(zhǔn)曲線的設(shè)計(jì)

2.2.1 校準(zhǔn)曲線線性范圍的確定

取1份考核樣品先進(jìn)行定性和初步定量預(yù)實(shí)驗(yàn)，通過考核樣品、空白樣、質(zhì)控樣品確認(rèn)考核樣品目標(biāo)物的添加水平，在定性實(shí)驗(yàn)和初步定量實(shí)驗(yàn)結(jié)果確定后[1]，選取校準(zhǔn)曲線線性范圍，使得待測(cè)樣品濃度盡量在線性中間區(qū)域，以減小測(cè)量誤差。

2.2.2 校準(zhǔn)曲線的配制

工作曲線的稀釋溶液應(yīng)與流動(dòng)相一致以降低溶劑效應(yīng)，減少因色譜峰形差異導(dǎo)致的積分誤差；配制標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液與標(biāo)準(zhǔn)曲線應(yīng)選用經(jīng)校準(zhǔn)后的移液管和容量瓶，盡量減少轉(zhuǎn)移次數(shù)，降低標(biāo)準(zhǔn)曲線配制及稀釋過程帶來的不確定度；工作曲線還可通過由不同人員配制、逐級(jí)配制、隨用隨配等方式來消除誤差。

2.3 質(zhì)量控制

在考核過程中可以通過空白對(duì)照、質(zhì)控樣、質(zhì)控樣加標(biāo)以及考核樣品同時(shí)測(cè)定的方式進(jìn)行質(zhì)量控制。空白對(duì)照是指不加樣品，按整個(gè)樣品前處理流程進(jìn)行處理后所得溶液進(jìn)行上機(jī)測(cè)定?？瞻讓?duì)照是檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)過程中是否有污染，待測(cè)目標(biāo)物出峰時(shí)間處有沒有受到干擾的重要手段；質(zhì)控樣及質(zhì)控樣加標(biāo)則可用于評(píng)價(jià)考核過程的總體實(shí)驗(yàn)質(zhì)量水平。

除此之外，在條件允許的情況下，儀器比對(duì)、方法比對(duì)以及人員比對(duì)等方式也可以用于實(shí)驗(yàn)過程中的質(zhì)量控制。①儀器比對(duì)一般適用于原理相同的儀器，如相同廠家的相同型號(hào)或者不同型號(hào)儀器比對(duì)，或不同廠家生產(chǎn)的同類儀器比對(duì)。②方法比對(duì)是指當(dāng)檢測(cè)項(xiàng)目可由多種檢測(cè)方法進(jìn)行操作時(shí)，可選取不同方法進(jìn)行檢測(cè)。③人員比對(duì)可以通過安排具有代表性的不同層次的兩人或多人開展比對(duì)試驗(yàn)。儀器比對(duì)、方法比對(duì)以及人員比對(duì)等方式都可以用來評(píng)價(jià)其各自對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性、穩(wěn)定性和可靠性的影響。

2.4 定性與定量分析

（1）校準(zhǔn)曲線一般不少于5個(gè)濃度點(diǎn)，且校準(zhǔn)曲線的精確度可以從相關(guān)系數(shù)r，截距a和斜率b這3個(gè)緯度進(jìn)行評(píng)估。①相關(guān)系數(shù)r一般要≥0.999，基質(zhì)復(fù)雜的相關(guān)系數(shù)可以適度放寬，如果r不符合要求，校準(zhǔn)曲線不能用于定量分析。②截距a越接近于0，分析誤差就越小，若截距與0存在明顯差異，則該校準(zhǔn)曲線準(zhǔn)確度不高。③斜率b會(huì)隨著實(shí)際試驗(yàn)條件變化而變化，此時(shí)一般需要在一批處理的開始和結(jié)束各設(shè)置一組標(biāo)準(zhǔn)曲線以實(shí)際衡量各種試驗(yàn)條件的穩(wěn)定性。以上3個(gè)緯度若不滿足要求，則需查找原因并重新繪制曲線。

（2）在進(jìn)行定性分析時(shí)，如果存在干擾峰，可以通過改變流動(dòng)相比例、洗脫流速等方式來達(dá)到干擾峰與目標(biāo)峰分離的目的。例如，GB 5009.28—2016第一法中存在干擾峰或需要輔助定性時(shí)，采用甲酸作為流動(dòng)相來測(cè)定苯甲酸、山梨酸和糖精鈉。

（3）對(duì)目標(biāo)物做重復(fù)性測(cè)定，確認(rèn)目標(biāo)物的積分峰寬。筆者在參加一次山梨酸能力驗(yàn)證時(shí)，平行進(jìn)樣6次山梨酸，計(jì)算RSD，起初發(fā)現(xiàn)系統(tǒng)自動(dòng)積分的峰面積逐個(gè)減少，后來排查之后發(fā)現(xiàn)，系統(tǒng)自動(dòng)積分時(shí)，積分寬度有差異導(dǎo)致峰面積發(fā)生變化。筆者隨后固定目標(biāo)物積分的初始及結(jié)束時(shí)間，目標(biāo)物峰面積穩(wěn)定且正常。

3 結(jié)論與討論

從業(yè)者所在檢驗(yàn)單位管理體系運(yùn)作是否通暢，檢驗(yàn)?zāi)芰λ降母叩?，都可以在能力?yàn)證活動(dòng)中體現(xiàn)出來。除此之外，檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)還可通過與外部實(shí)驗(yàn)室的橫向比對(duì)，整改以及完善在平日隱藏或者被忽略的問題，以此提高檢測(cè)能力[5]。筆者總結(jié)多年的工作經(jīng)驗(yàn)，通過對(duì)能力驗(yàn)證活動(dòng)中人員、儀器、環(huán)境等因素的質(zhì)量控制，對(duì)能力驗(yàn)證的前期準(zhǔn)備、過程控制進(jìn)行分析，尋找影響因子及質(zhì)控技巧，提升準(zhǔn)確性和可控性，以此貼合新時(shí)代對(duì)實(shí)驗(yàn)室能力及發(fā)展的需求。