2型糖尿病患者血清胱抑素C水平與急性腎損傷的相關(guān)性分析

王 靜，張 鵬

（1.重慶市九龍坡區(qū)第二人民醫(yī)院檢驗科，重慶 402160；2.重慶市九龍坡區(qū)疾病預(yù)防控制中心宣傳信息科，重慶 400039）

2型 糖 尿 病（type 2 diabetes mellitus，T2DM）是內(nèi)分泌系統(tǒng)常見的疾病，T2DM患者由于長期高血糖狀態(tài)可對機(jī)體多個臟器造成損傷，其中較為常見的為急性腎損傷（acute kidney injury，AKI）[1]。AKI的發(fā)生與腎小球濾過率（eGFR）降低造成代謝物質(zhì)在腎臟蓄積、產(chǎn)生毒素，對腎臟的正常組織造成損傷有關(guān)[2]。此前，臨床多利用尿素、肌酐等指標(biāo)評估腎損傷病情，然而有學(xué)者指出，上述指標(biāo)的評估效果欠佳[3]。近年來，胱抑素C（CysC）作為一種新型血清標(biāo)記物，被臨床用于腎損傷的預(yù)測。CysC在體內(nèi)穩(wěn)定存在，不受年齡、藥物等影響，當(dāng)腎臟出現(xiàn)輕微損傷時，血清CysC水平明顯升高[4]。但目前關(guān)于三者關(guān)系的研究較少，本研究探討CysC與T2DM引起的AKI之間的關(guān)系，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2018年1月至2019年1月重慶市九龍坡區(qū)第二人民醫(yī)院收治的100例T2DM患者為研究對象進(jìn)行回顧性分析，根據(jù)患者是否發(fā)生AKI將其分為T2DM組（76例）和AKI組（24例）。T2DM組患者中男性53例，女性23例；年齡34～78歲，平均年齡（56.73±10.72）歲；體質(zhì)量指數(shù)（BMI）19～25 kg/m2，平均BMI（22.18±2.34）kg/m2；空腹血糖7.20～8.50 mmol/L，平 均 空 腹 血 糖（7.64±0.65）mmol/L；T2DM病 程 1～10年， 平 均 T2DM 病 程（6.89±2.30）年。AKI組患者中男性18例，女性6例；年齡35～80歲， 平 均 年 齡（57.12±9.98） 歲；BMI 20～26 kg/m2， 平 均 BMI（22.21±2.40）kg/m2；空腹血糖7.10～8.30 mmol/L，平均空腹血糖（7.50±0.79）mmol/L；T2DM 病程1.5～12年，平均T2DM病程（6.94±2.26）年。兩組患者一般資料比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），組間具有可比性。本研究經(jīng)重慶市九龍坡區(qū)第二人民醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準(zhǔn)。納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合《中國2型糖尿病防治指南（2013年版）》[5]中T2DM的診斷標(biāo)準(zhǔn)；②入組前未接受抗感染治療。排除標(biāo)準(zhǔn)：①近期服用免疫抑制劑、糖皮質(zhì)激素；②合并自身免疫性疾病或惡性腫瘤；③甲狀腺功能異常者；④既往合并慢性腎臟疾病，如慢性腎炎、腎功能不全等；⑤患有精神系統(tǒng)疾病或認(rèn)知功能障礙者。

1.2 研究方法 采集患者空腹外周靜脈血5 mL，以3 500 r/min轉(zhuǎn)速離心15 min，取上層血清，置于-20 ℃冰箱中保存。采用酶標(biāo)板包被的標(biāo)準(zhǔn)品孔中加入標(biāo)本及稀釋樣本，濃度依次設(shè)置為6.0、4.0、2.0、1.0、0.5 μg/L，設(shè)置空白孔?？瞻卓准尤?0 μL空白溶液（濟(jì)南千司生物技術(shù)有限公司），待測樣品孔先稀釋至40 μL，加入待測樣本10 μL。將酶標(biāo)板揭去封膜，37 ℃室溫下放置30 min，甩干，于酶標(biāo)孔內(nèi)加入洗滌液（海戴迪生物科技有限公司）10 μL，加入50 μL酶標(biāo)試劑（美國 R&D 公司），封膜，放置30 min，洗滌。隨后加入50 μL顯色劑（上?？道缮锟萍加邢薰荆?，室溫下避光反應(yīng)15 min，采用酶標(biāo)儀（美國賽默飛世爾，型號：MK3）測定其吸光度。采用肌酐酶法計算腎小球濾過率（eGFR）。男性eGFR=1.23×（140-年齡）×BMI/肌酐；女性eGFR=1.04×（140-年齡）×BMI/肌酐（肌酐單位為μmol/L)。

1.3 觀察指標(biāo) ①比較T2DM組和AKI組患者CysC水平。②分析CysC預(yù)測T2DM患者并發(fā)急性腎損傷的效能。③比較不同分期AKI患者CysC、肌酐及eGFR水平。根據(jù)AKI分期將AKI組患者分為1期組（9例）、2期組（8例）和3期組（7例）。AKI分期標(biāo)準(zhǔn)[6]：血肌酐水平高于26.4 μmol/L或超過基礎(chǔ)值的50%～100%，尿量低于0.5 mL/（kg·h），持續(xù)時間在6 h以上為1期；血肌酐水平高于基礎(chǔ)值的200%～300%，尿量低于0.5 mL/（kg·h），持續(xù)時間高于12 h，為2期；血肌酐水平高于基礎(chǔ)值的300%或血肌酐水平高于354 μmol/L，無尿時間在12 h以上或尿量低于0.3 mL/（kg·h），持續(xù)時間24 h以上為3期。比較3組患者的肌酐、CysC、eGFR水平。④分析AKI患者CysC與肌酐及eGFR相關(guān)性。

1.4 統(tǒng)計學(xué)分析 采用SPSS 21.0統(tǒng)計學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。計數(shù)資料以[例(%)]表示，組間比較采用χ2檢驗；計量資料以（）表示，組間比較采用獨立樣本t檢驗，多組間比較采用方差分析，兩兩比較采用LSD-t檢驗；采用受試者工作特征曲線（ROC）分析CysC預(yù)測T2DM患者并發(fā)AKI的效能；采用Pearson相關(guān)性分析CysC與肌酐及eGFR的關(guān)系。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 T2DM組和AKI組患者CysC水平比較 T2DM組患者血清CysC水平低于AKI組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），見表1。

表1 T2DM組和AKI組患者CysC水平比較（mg/L，）

表1 T2DM組和AKI組患者CysC水平比較（mg/L，）

注：CysC：胱抑素C；T2DM：2型糖尿??；AKI：急性腎損傷。

組別 例數(shù) CysC T2DM組 76 1.43±0.21 AKI組 24 2.68±0.47 t值 18.247 P值 ＜0.05

2.2 CysC預(yù)測T2DM患者并發(fā)AKI的效能分析 ROC分析結(jié)果顯示，CysC預(yù)測T2DM患者并發(fā)AKI的AUC、敏感度、特異度、最大約登指數(shù)及最佳截斷點分別為0.905、82.89%、91.67%、0.746、1.68 mg/L，見表2、圖1。

表2 CysC預(yù)測T2DM患者并急性腎損傷的價值分析

圖1 CysC預(yù)測T2DM患者并發(fā)AKI的ROC曲線

2.3 不同分期AKI患者CysC、肌酐及eGFR水平比較 1期組患者CysC、肌酐水平低于2期組及3期組，eGFR水平高于2期組及3期組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；2期組患者CysC、肌酐水平低于3期組，eGFR水平高于3期組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），見表3。

表3 不同分期AKI 患者CysC、肌酐及eGFR水平比較（）

表3 不同分期AKI 患者CysC、肌酐及eGFR水平比較（）

注：AKI：急性腎損傷；CysC：胱抑素C；eGFR：腎小球濾過率。

組別 例數(shù) CysC(mg/L) 肌酐(μmol/L) eGFR[mL/(min·1.73m2)]1 期組 9 1.97±0.40 138.92±56.36 90.85±9.20 2 期組 8 2.54±0.51 261.38±41.23 82.19±8.98 3 期組 7 3.64±0.48 524.36±44.26 73.17±7.05 F值 26.041 127.622 8.421 P值 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05

2.4 AKI患者CysC與肌酐及eGFR相關(guān)性 相關(guān)性分析顯示，AKI患者CysC水平與肌酐呈正相關(guān)（r=0.852，P＜0.05），與eGFR呈負(fù)相關(guān)（r=-0.563，P＜0.05），見表4。

表4 AKI患者CysC水平與肌酐、eGFR相關(guān)性（）

表4 AKI患者CysC水平與肌酐、eGFR相關(guān)性（）

注：AKI：急性腎損傷；CysC：胱抑素C；eGFR：腎小球濾過率。

指標(biāo) 肌酐 eGFR r值 P值 r值 P值CysC 0.852 ＜0.05 -0.563 ＜0.05

3 討論

研究發(fā)現(xiàn)，AKI患者的病死率較高，因此臨床應(yīng)重視對AKI的預(yù)防及治療。AKI是一種可逆性腎損傷，及時有效的治療可防止腎衰竭的發(fā)生，然而AKI患者的早期癥狀不明顯，診斷較為困難，導(dǎo)致患者錯失最佳治療時機(jī)[7]。隨著研究的深入，已有多種標(biāo)記物被用于AKI的診斷，如腎臟損傷分子-1、尿中性粒細(xì)胞相關(guān)載脂蛋白等，但均存在一定不足[8]。CysC是一種半胱氨酸蛋白酶抑制劑，由于其分子量小、電荷中性，可通過腎小球濾過膜，且在近端腎小管重吸收及降解，不重新進(jìn)入血液循環(huán)，故可靈敏反映腎損傷程度[9]。

既往研究發(fā)現(xiàn)，在T2DM合并AKI的診斷方面，CysC可準(zhǔn)確反映eGFR，其診斷效能優(yōu)于肌酐[10]。有學(xué)者發(fā)現(xiàn)，CysC在體內(nèi)不受炎癥、膽紅素等的影響，個體間差異較小，可準(zhǔn)確評估疾病[11]。CysC經(jīng)腎小球自由濾過，腎小管無CysC摁滅功能，腎臟為清除體內(nèi)循環(huán)中CysC的唯一器官。有報道指出，腎臟出現(xiàn)輕微損傷時，在血肌酐升高前1～2 d，血清CysC含量增加，并且隨腎臟損傷的加重其含量不斷增加[12]。CysC相較于血肌酐可更加敏感地反映eGFR在短時間內(nèi)由輕度至重度的損傷，并且CysC在診斷急性腎衰竭的準(zhǔn)確性方面高于血肌酐[13]。本研究結(jié)果顯示，T2DM組患者血清CysC水平低于AKI組，提示CysC可能參與AKI的發(fā)生，檢測CysC水平可能有助于診斷AKI。本研究結(jié)果顯示，CysC診斷AKI的AUC、敏感度及特異度分別為0.905、82.89%、91.67%，表明CysC診斷AKI的效能較高。進(jìn)一步比較不同分期AKI患者血清CysC、血肌酐及eGFR水平發(fā)現(xiàn)，隨著分期的增加，血清CysC、血肌酐水平升高，而eGFR水平降低，提示CysC、血肌酐及eGFR均與AKI的病情存在聯(lián)系。本研究結(jié)果顯示，CysC與肌酐呈正相關(guān)，而與eGFR均呈負(fù)相關(guān)，提示CysC水平升高，腎臟功能損傷加重，血清CysC水平可反映患者腎臟功能。本研究對AKI患者的隨訪時間較短，未能明確CysC水平與AKI患者預(yù)后的關(guān)系，并且未明確CysC在界定AKI分期中的價值，尚需進(jìn)一步的探究。同時需納入更多的樣本進(jìn)行分析，比較單純AKI患者中CysC的水平，明確機(jī)體的血糖因素是否對CysC水平存在影響。

綜上所述，T2DM并發(fā)AKI患者血清CysC水平升高，檢測CysC水平有助于評估AKI患者的病情。