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    Treg細(xì)胞水平在不同分期非小細(xì)胞肺癌患者中的表達(dá)及其臨床意義

    2022-10-17 14:25:38邢國(guó)慶劉冬梅
    實(shí)用癌癥雜志 2022年10期
    關(guān)鍵詞:期組腫瘤水平

    張 寧 邢國(guó)慶 劉冬梅

    目前,臨床診斷非小細(xì)胞肺癌(non small cell lung cancer,NSCLC)以肺穿刺、纖支鏡取活組織行病理檢查為主,可明確腫瘤分期、組織學(xué)分級(jí)、浸潤(rùn)程度,為臨床手術(shù)方案的制定提供參考依據(jù)[1]。但由于肺穿刺、纖支鏡取活組織行病理檢查屬于有創(chuàng)操作,檢查過(guò)程中不僅會(huì)對(duì)患者周圍血管、組織造成損傷,還會(huì)增加癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移風(fēng)險(xiǎn),不利于預(yù)后[2]。因此,尋找安全客觀的指標(biāo)鑒別NSCLC的臨床分期可對(duì)臨床治療、手術(shù)方案的制定提供依據(jù)。作為免疫抑制型T淋巴細(xì)胞亞群,調(diào)節(jié)性T(Regulatory T,Treg)細(xì)胞可通過(guò)調(diào)控自身免疫反應(yīng),抑制腫瘤細(xì)胞免疫反應(yīng),促使腫瘤細(xì)胞發(fā)生免疫逃逸,導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞增殖[3-4]。結(jié)合上述Treg細(xì)胞與腫瘤增殖的關(guān)系,推測(cè)Treg細(xì)胞水平與NSCLC不同臨床分期可能存在一定關(guān)系。基于此,本研究通過(guò)流式細(xì)胞術(shù)測(cè)定不同分期NSCLC患者Treg細(xì)胞水平,并對(duì)Treg細(xì)胞在不同分期NSCLC患者中的表達(dá)意義進(jìn)行分析。

    1 資料與方法

    1.1 一般資料

    經(jīng)醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn),選擇2019年10月至2021年5月醫(yī)院收治的105例NSCLC患者作為觀察組,另選取同期醫(yī)院收治的105例肺良性腫瘤患者作為對(duì)照組。患者或患者家屬簽署知情同意書(shū)。納入標(biāo)準(zhǔn):①符合NSCLC相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)[5];②肺良性腫瘤包括錯(cuò)構(gòu)瘤、平滑肌瘤、軟骨瘤等;③全部患者均經(jīng)肺穿刺活檢、纖支鏡活檢等病理檢查確診。排除標(biāo)準(zhǔn):①觀察組患者入組前接受過(guò)輔助性放化療治療;②合并其他部位惡性腫瘤,如消化系統(tǒng)、泌尿系統(tǒng)等;③合并自身免疫性疾病或嚴(yán)重感染;④近3個(gè)月內(nèi)使用過(guò)免疫調(diào)節(jié)藥物;⑤存在器官功能衰竭或惡病質(zhì)。觀察組中男性62例,女性43例;年齡40~62歲,平均年齡(52.64±4.15)歲;有吸煙史59例。對(duì)照組中男性66例,女性39例;年齡40~65歲,平均年齡(52.63±4.22)歲;有吸煙史53例。2組一般資料比較(P>0.05),有可比性。

    1.2 實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)

    Treg細(xì)胞水平:入院當(dāng)日或次日晨起,采集患者3 mL空腹靜脈血,經(jīng)抗凝處理后,取80 μL放入流式檢測(cè)管中,向管內(nèi)滴入CD4抗體-異硫氰酸熒光素(fluorescein isothiocyanate,F(xiàn)ITC)、CD25抗體-別藻藍(lán)蛋白熒光素(allophycocyaninfluorescein,APC)、CD127-藻紅蛋白熒光素(phycoerythrin fluorescein,PE),孵育30 min(20 ℃避光);隨后加入溶血素1.5 mL振蕩均勻后孵育20 min(20 ℃避光);加入磷酸鹽緩沖液洗滌3次,離心分離5 min(轉(zhuǎn)速1500 r/min),去上清液,將裂解后的紅細(xì)胞移出,并加入180 μL磷酸鹽緩沖液混勻;使用EasyCell 206M1型流式細(xì)胞儀(深圳唯公生物科技有限公司)測(cè)定Treg細(xì)胞水平(用CD4+CD25hiCD127low占CD4+T細(xì)胞%表示)。

    1.3 TNM分期標(biāo)準(zhǔn)及分組

    全部患者均經(jīng)肺穿刺活檢、纖支鏡活檢等病理檢查,且參照《中華醫(yī)學(xué)會(huì)肺癌臨床診療指南(2018版)》[6]中腫瘤分期標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行分期;并根據(jù)分期情況分為Ⅰ期組、Ⅱ期組、Ⅲ期組及Ⅳ期組。

    1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

    2 結(jié)果

    2.1 2組患者Treg細(xì)胞水平比較

    觀察組患者Treg細(xì)胞水平為(5.23±0.84)%,對(duì)照組為(4.52±0.50)%;觀察組患者Treg細(xì)胞水平高于對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(U=5.403,P<0.001)。

    2.2 觀察組患者TNM分期情況

    105例NSCLC患者中TNM分期Ⅰ期37例(35.24%),Ⅱ期25例(23.81%),Ⅲ期23例(21.90%),Ⅳ期20例(19.05%)。

    2.3 觀察組不同分期患者Treg細(xì)胞水平比較

    Ⅳ期組患者Treg細(xì)胞水平最高,其次為Ⅲ期組、Ⅱ期組,Ⅰ期組最低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);Ⅰ期組與Ⅱ期組Treg細(xì)胞水平比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見(jiàn)表1。

    表1 不同分期患者Treg細(xì)胞水平比較

    2.4 Treg細(xì)胞水平對(duì)NSCLC患者不同分期的診斷價(jià)值

    將Treg細(xì)胞水平作為檢驗(yàn)變量,將NSCLC不同分期分別作為狀態(tài)變量(1=Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期,0=肺良性腫瘤),繪制ROC曲線(見(jiàn)圖1),結(jié)果顯示,Treg細(xì)胞水平診斷NSCLC不同分期的AUC>0.70,具有一定的診斷價(jià)值。相關(guān)參數(shù)見(jiàn)表2。

    表2 Treg細(xì)胞水平對(duì)NSCLC患者不同分期的診斷價(jià)值

    圖1 Treg細(xì)胞水平診斷NSCLC分期的ROC曲線

    3 討論

    NSCLC不同臨床分期的治療方案均不同,早中期患者經(jīng)手術(shù)治療或術(shù)后結(jié)合放化療治療,預(yù)后較好;晚期患者雖然不能接受手術(shù)治療,但仍可經(jīng)放化療治療延長(zhǎng)生存期[7-8]。因此,尋找可鑒別NSCLC臨床分期的相關(guān)指標(biāo)對(duì)臨床治療方案的擬定,改善患者的預(yù)后具有重要意義。

    Treg細(xì)胞可維持機(jī)體內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定,對(duì)自身免疫性疾病的預(yù)防發(fā)揮重要作用[9]。Treg細(xì)胞包括自然性與誘導(dǎo)性兩種,前者是由胸腺天然生成的Treg細(xì)胞,可維持外周耐受;后者為外周組織中產(chǎn)生,具有免疫抑制作用[10-11]。近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn),Treg細(xì)胞還可通過(guò)抑制CD4+T細(xì)胞增殖,促使腫瘤細(xì)胞免疫逃逸的發(fā)生[12]。結(jié)合上述Treg細(xì)胞與腫瘤細(xì)胞增殖、免疫逃逸的關(guān)系,推測(cè)Treg細(xì)胞水平可能與NSCLC的發(fā)生及發(fā)展有關(guān)。本次研究結(jié)果顯示,觀察組患者Treg細(xì)胞水平顯著高于對(duì)照組,且觀察組中,Ⅳ期組Treg細(xì)胞水平最高,其次為Ⅲ期組、Ⅱ期組,Ⅰ期組最低。表明Treg細(xì)胞水平可顯示出不同臨床分期NSCLC的病變情況,且這些不同臨床分期對(duì)患者治療方案的制定具有一重要意義。究其原因,Treg細(xì)胞水平升高后,可通過(guò)分泌抑制性細(xì)胞因子,如白細(xì)胞介素(Interleukin,IL)-33、IL-35、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1等,抑制CD4+、CD8+T細(xì)胞等效應(yīng)細(xì)胞功能,負(fù)向調(diào)節(jié)機(jī)體免疫系統(tǒng),從而促使腫瘤增殖、轉(zhuǎn)移,不利于預(yù)后[13-14]。此外,腫瘤細(xì)胞不僅可通過(guò)促進(jìn)環(huán)氧合酶-2的合成,誘導(dǎo)Treg細(xì)胞生成;還可通過(guò)Toll樣受體9信號(hào)通路,促使?jié){細(xì)胞樣樹(shù)突細(xì)胞,進(jìn)而促進(jìn)Treg細(xì)胞分泌,引起Treg細(xì)胞水平升高[15-16]。廖明等[17]研究發(fā)現(xiàn),肺癌患者癌組織中Treg細(xì)胞水平與腫瘤TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移密切相關(guān),這與本研究結(jié)果一致。因此,Treg細(xì)胞與腫瘤細(xì)胞之間存在相互促進(jìn)的關(guān)系,腫瘤細(xì)胞可通過(guò)多種途徑誘導(dǎo)Treg細(xì)胞增多,同時(shí)Treg細(xì)胞又可為腫瘤細(xì)胞的免疫逃逸提供條件,進(jìn)而促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖,加速腫瘤進(jìn)展。因此,推測(cè)可通過(guò)檢測(cè)NSCLC患者Treg細(xì)胞水平來(lái)鑒別NSCLC的臨床分期。

    最后本研究繪制ROC曲線驗(yàn)證上述猜測(cè),結(jié)果顯示,Treg細(xì)胞水平診斷NSCLC不同分期的AUC>0.70,具有一定的診斷價(jià)值;且當(dāng)Treg細(xì)胞的cut-off值分別取4.673%、4.682%、4.801%、5.105%時(shí),可獲得最佳診斷價(jià)值,說(shuō)明Treg細(xì)胞水平可為NSCLC患者不同分期的診斷提供客觀依據(jù)。臨床可通過(guò)流式細(xì)胞術(shù)對(duì)肺部腫瘤患者Treg細(xì)胞水平進(jìn)行定量檢測(cè),進(jìn)而對(duì)NSCLC及其不同臨床分期進(jìn)行診斷,為臨床制定治療方案提供參考。但需要注意的是,Treg細(xì)胞水平也會(huì)受機(jī)體免疫功能的影響,因此,建議臨床在評(píng)估NSCLC患者的臨床分期時(shí)可結(jié)合患者的其他檢查指標(biāo)以提高其診斷價(jià)值。

    綜上所述,不同臨床分期NSCLC患者體內(nèi)Treg細(xì)胞水平不同,臨床可通過(guò)檢測(cè)Treg細(xì)胞水平鑒別NSCLC的臨床分期,以提高NSCLC臨床分期的診斷準(zhǔn)確率。

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