血清Dickkopf-1、血管內(nèi)皮生長因子水平對非小細胞肺癌的診斷效能及與患者臨床特征的關(guān)系

聶鳳英，焦曉寧，王偉

1 濮陽市中醫(yī)醫(yī)院檢驗科，河南 濮陽 457000

2 河南省胸科醫(yī)院檢驗科，鄭州 450000

非小細胞肺癌（non-small cell lung carcer， NSCLC）是常見的肺癌類型，因該病早期無特異性臨床癥狀，超過70%的患者確診時病情已進展至中晚期，術(shù)后復發(fā)和轉(zhuǎn)移風險隨病情進展逐漸升高，總生存率也逐漸降至20%，嚴重威脅患者的生命健康[1]。早期診斷NSCLC，明確疾病嚴重程度及轉(zhuǎn)移情況，并采取合適的措施有效控制，才能進一步提高治療效果，從而改善患者的預后[2]。目前，臨床主要通過檢測血清腫瘤標志物診斷NSCLC，但血清腫瘤標志物檢測存在靈敏度、特異度低等不足，在NSCLC的早期診斷中的效果不明顯[3]。因此，找到理想的NSCLC診斷、療效和預后評估的指標成為臨床研究的重點。血清Dickkopf-1（DKK1）為DKK家族成員之一，是臨床近年來發(fā)現(xiàn)的一種抑癌基因，可直接參與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展過程[4]。血管內(nèi)皮生長因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）是促腫瘤血管生成的因子之一，目前已有大量研究證實，VEGF與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)移和新生血管生成有關(guān)[5]?；诖耍狙芯刻接懷錎KK1、VEGF水平對NSCLC的診斷效能及與患者臨床特征的關(guān)系，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2019年10月至2021年10月濮陽市中醫(yī)醫(yī)院收治的NSCLC患者。納入標準：①符合《中國臨床腫瘤學會（CSCO）：非小細胞肺癌診療指南2020》[6]中關(guān)于NSCLC的診斷標準；②經(jīng)病理學檢查證實為NSCLC；③TNM分期為Ⅰ~Ⅳ期；④臨床資料完整。排除標準：①合并其他惡性腫瘤；②合并免疫性或代謝性疾?。虎垡驀乐鼐窦膊〈嬖谡J知功能障礙。根據(jù)納入和排除標準，本研究共納入136例NSCLC患者作為觀察組，其中男70例，女66例；年齡26~86歲，平均（53.87±5.34）歲；TNM分期：Ⅰ期42例，Ⅱ期38例，Ⅲ期36例，Ⅳ期20例；病理類型：鱗狀細胞癌60例，腺癌64例，腺鱗癌12例；分化程度：低分化50例，中分化42例，高分化44例。另選取同期濮陽市中醫(yī)醫(yī)院收治的100例肺部結(jié)節(jié)患者作為對照組，其中男52例，女48例；年齡25~87歲，平均（54.12±5.13）歲。兩組患者性別、年齡比較，差異均無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），具有可比性。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會批準通過，所有患者均知情同意并簽署知情同意書。

1.2 檢測方法

抽取兩組患者空腹肘靜脈血5 ml，靜置30 min后3000 r/min離心15 min，取上清液后-70℃保存待檢，采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測DKK1和VEGF水平，操作步驟嚴格遵守試劑盒說明書。DKK1水平＞119.56 pg/L判定為陽性，VEGF水平＞142 pg/ml判定為陽性。

1.3 統(tǒng)計學方法

采用SPSS 20.0軟件對所有數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析，正態(tài)分布計量資料以均數(shù)±標準差（±s）表示，組間比較采用兩獨立樣本t檢驗，組內(nèi)比較采用配對t檢驗；計數(shù)資料以例數(shù)和率（%）表示，組間比較采用χ2檢驗；繪制受試者工作特征（receiver operating characteristic，ROC）曲線，計算曲線下面積（area under the curve，AUC），評估血清DKK1、VEGF單獨及聯(lián)合檢測對NSCLC的診斷效能；以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 血清DKK1、VEGF陽性表達情況的比較

觀察組患者血清DKK1、VEGF陽性表達率均明顯高于對照組，差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.01）。（表1）

表1 兩組患者血清DKK1、VEGF陽性表達情況的比較[n（%）]

2.2 血清DKK1、VEGF單獨及聯(lián)合檢測對NSCLC的診斷效能

血清DKK1+VEGF檢測診斷NSCLC的AUC為0.832（95%CI：0.289~0.846），此時的靈敏度、特異度分別為98.21%、91.67%。（表2）

表2 血清DKK1、VEGF單獨及聯(lián)合檢測對NSCLC的診斷效能

2.3 不同臨床特征NSCLC患者血清DKK1、VEGF陽性表達情況的比較

不同性別、年齡、病理類型、腫瘤直徑NSCLC患者血清DKK1、VEGF陽性表達率比較，差異均無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。分化程度為低分化、TNM分期為Ⅲ~Ⅳ期、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、有骨轉(zhuǎn)移的NSCLC患者血清DKK1、VEGF陽性表達率分別明顯高于分化程度為中高分化、TNM分期為Ⅰ~Ⅱ期、無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和無骨轉(zhuǎn)移患者，差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.01）。（表3）

表3 不同臨床特征NSCLC患者血清DKK1、VEGF陽性表達情況的比較（n=136）

3 討論

中晚期NSCLC患者的5年生存率隨著病情進展而降低，這可能是因為中晚期NSCLC已出現(xiàn)侵襲轉(zhuǎn)移，而腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移主要由多種抑癌基因和致癌基因共同參與調(diào)控[7]。因此，尋找預測NSCLC侵襲轉(zhuǎn)移的分子標志物，明確NSCLC的發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)移機制，可有效抑制疾病進展，提高生存率。但癌胚抗原、細胞角質(zhì)蛋白19片段抗原21-1（cyto-keratin 19 fragment antigen 21-1，CYFRA21-1）等血清腫瘤標志物預測NSCLC發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)移的靈敏度和特異度均低于80%，預測結(jié)果可信度較低，無法滿足臨床需求[8-9]。

研究認為，腫瘤的生長對血管存在依賴性，VEGF作為促新生血管生成的細胞因子之一，逐漸成為臨床研究的熱點[10-11]。也有研究認為，DKK1在肺癌中高表達，有望為肺癌早期診斷、治療及預后的預測提供參考[12-13]。本研究結(jié)果顯示，觀察組患者血清DKK1、VEGF陽性表達率均明顯高于對照組，提示血清DKK1、VEGF陽性表達與NSCLC的發(fā)生存在一定關(guān)聯(lián)。與黃麗珍等[14]的研究結(jié)果一致，該研究顯示，NSCLC患者血清VEGF水平明顯高于肺部良性疾病患者，表明NSCLC的發(fā)生與新生血管生成有關(guān)。這可能是因為，VEGF可刺激血管內(nèi)皮細胞增殖和移行，促進血管內(nèi)皮細胞有絲分裂和轉(zhuǎn)移，重塑細胞外基質(zhì)，增加血管通透性，促使大量腫瘤血管新生，加速腫瘤的發(fā)生發(fā)展[15-16]。DKK1作為分泌型糖蛋白，可阻斷WNT/β-catenin信號轉(zhuǎn)導通路，調(diào)控細胞分化、增殖和遷移過程，促使腫瘤細胞迅速增殖[17-18]。

此外，TNM分期、分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和骨轉(zhuǎn)移情況等均與腫瘤進展密切相關(guān)，TNM分期越高、分化程度越低，腫瘤進展的越快，隨之出現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移或骨轉(zhuǎn)移，而腫瘤進展過程中常會分泌大量的細胞因子和促血管生成因子，導致腫瘤細胞異常增殖，且DKK1對WNT/β-catenin信號通路的阻斷可直接參與腫瘤細胞增殖和侵襲過程，因此NSCLC患者分期越高、分化程度越低、存在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和骨轉(zhuǎn)移等，均會導致血清DKK1、VEGF異常表達。本研究結(jié)果顯示，分化程度為低分化、TNM分期為Ⅲ~Ⅳ期、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、有骨轉(zhuǎn)移的NSCLC患者血清DKK1、VEGF陽性表達率分別明顯高于分化程度為中高分化、TNM分期為Ⅰ~Ⅱ期、無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和無骨轉(zhuǎn)移患者。與李銀鵬等[19]、王林輝等[20]的研究結(jié)果相似，李銀鵬等[19]研究發(fā)現(xiàn)，不同TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和骨轉(zhuǎn)移情況肺癌患者血清DKK1水平存在差異。王林輝等[20]研究發(fā)現(xiàn)，不同分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、器官轉(zhuǎn)移和臨床分期NSCLC患者的血清VEGF水平存在顯著差異。表明血清DKK1、VEGF水平與NSCLC嚴重程度、器官轉(zhuǎn)移情況密切相關(guān)，可通過檢測血清DKK1、VEGF水平對NSCLC患者的預后進行評估。但葉颯等[21]的研究發(fā)現(xiàn)，NSCLC高分化和中低分化患者的血清VEGF水平無明顯差異，與本研究結(jié)果相反，這可能與本研究納入的樣本量較少有關(guān)。

目前臨床對DKK1+VEGF聯(lián)合檢測對NSCLC診斷價值的研究較少，本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，血清DKK1+VEGF檢測 診 斷NSCLC的AUC為0.832（95%CI：0.289~0.846），此時的靈敏度、特異度分別為98.21%、91.67%，高于二者單獨檢測。提示血清DKK1、VEGF聯(lián)合檢測對NSCLC的診斷價值較高，可在一定程度上提高診斷準確度，在早期NSCLC中發(fā)揮十分重要的作用。

本研究尚存在一些不足，如樣本量較少，且為單中心回顧性研究。建議后續(xù)開展大樣本量、多中心的前瞻性研究，進一步驗證本研究結(jié)果。

綜上所述，NSCLC患者血清DKK1、VEGF的陽性表達率較高，且與NSCLC患者臨床分期、分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況和骨轉(zhuǎn)移情況有關(guān)，血清DKK1、VEGF聯(lián)合檢測對NSCLC患者的診斷價值較高。