安徽省臨泉地區(qū)羊幾種病毒抗體檢測

盧昌楊， 劉德義*， 張留君， 賀紹君， 馮 星， 辛洪雷

(1.安徽科技學院 動物科學學院，安徽 鳳陽 233100；2.臨泉縣中原牧業(yè)發(fā)展中心，安徽 臨泉 236400)

口蹄疫(FMD)、小反芻獸疫(PPR)、羊口瘡(CPD)和羊痘(SGP)分別是由口蹄疫病毒(FMDV)、小反芻獸疫病毒(PPRV)、羊口瘡病毒(ORFV)和羊痘病毒(SGPV)引起的高度接觸性傳染病[1-2],給世界養(yǎng)羊業(yè)造成重大經(jīng)濟損失,也是嚴重危害我國羊生產(chǎn)最常見的幾種重要疫病。其中,FMDV、ORFV和SGPV因能感染人類還具有重要的公共衛(wèi)生學意義[3-4]。FMD是一種偶蹄動物的高度傳染性疾病,傳染性極強、發(fā)病率較高,且幼齡動物感染后死亡率也較高,一旦暴發(fā)可給養(yǎng)殖業(yè)帶來巨大災(zāi)難,因此在許多國家一直被認為是畜牧業(yè)面臨的最大持續(xù)性挑戰(zhàn)[3]。PPR是一種小反芻動物的病毒性傳染病,主要影響山羊、綿羊和野生反芻動物,感染率及致死率均高達90%,已成為大規(guī)模養(yǎng)羊場首要防控的重大疫病之一[4]。CPD是一種高度傳染性的人畜共患病毒性疾病,嚴重威脅山羊、綿羊及養(yǎng)殖人員健康。該病在各年齡段的羊群中均具有較高的發(fā)病率,但成年羊感染后病死率不高,而羔羊感染后可引起大批死亡[5]。CPD的病原(ORFV)是副痘病毒屬的原型,對外界環(huán)境具有較強的適應(yīng)能力并具有很強的再次感染宿主能力,從而有助于ORFV在眾多物種間廣泛傳播和引發(fā)持續(xù)性感染,羊群中一旦存在該病原,將很難被清除[6]。SGP是一種在亞洲地區(qū)廣泛分布的人和多種動物共患的傳染病,不僅能夠通過空氣傳播,而且還可通過蚊蟲叮咬、直接或間接接觸傳播[7]。本病可導致羊產(chǎn)奶量嚴重下降和妊娠母羊早產(chǎn)、流產(chǎn)、死胎等,羔羊比成年羊更為易感且病死率較高,并且SGPV與PPRV在羊群中還可發(fā)生共感染[8]。

安徽臨泉地處皖西北,年均肉羊存欄量超過130萬只,是安徽省肉羊養(yǎng)殖重點區(qū)域之一。但是該地區(qū)羊群中上述幾種常見重大傳染病疫苗免疫情況及疫苗免疫后羊群血清中病毒抗體水平究竟如何并不清楚, 缺乏有效的、可用于指導生產(chǎn)實踐的免疫抗體檢測與監(jiān)測數(shù)據(jù)。對疫苗接種后的羊群進行病毒血清抗體水平檢測,了解羊群群體免疫狀況對傳染病免疫防控具有重要意義,對生產(chǎn)實踐具有一定的指導作用。鑒于此,本研究通過對2021-2022年隨機采集自臨泉縣部分養(yǎng)殖場羊群中的113份血液樣品進行血清學調(diào)查,旨在了解羊群中幾種常見重大傳染病病原的血清抗體水平及接種疫苗后的抗體水平,以期為該地區(qū)羊疫病防控提供參考與指導。

1 材料與方法

1.1 供試材料

1.1.1 樣品采集 113份羊血液樣品于2021-2022年隨機采集于臨泉縣瓦店鎮(zhèn)、鲖城鎮(zhèn)、長官鎮(zhèn)和張新鎮(zhèn)部分羊場,按照常規(guī)方法分離血清后于-80 ℃保存?zhèn)溆?。各羊場免疫情況見表1。

表1 各羊場免疫情況Table 1 Immunization status of sheep and goat farms

1.1.2 主要試劑和儀器 口蹄疫病毒O型和A型ELISA抗體檢測試劑盒和小反芻獸疫病毒ELISA抗體檢測試劑盒(深圳市綠詩源生物技術(shù)有限公司);羊口瘡病毒ELISA抗體檢測試劑盒和羊痘病毒ELISA抗體檢測試劑盒(江蘇晶美生物科技有限公司);Multiskan FC全波長酶標儀(美國Thermo Fhisher公司)。

1.2 實驗方法

參照各ELISA抗體檢測試劑盒說明書進行實驗操作及結(jié)果判定。

2 結(jié)果與分析

2.1 O型口蹄疫病毒抗體檢測結(jié)果

在113份受檢血清中,陽性共75份,總陽性率為66.4%,低于國家免疫防控要求。各鄉(xiāng)鎮(zhèn)的陽性率分別為瓦店75.0%,鲖城71.4%,長官60.7%,張新58.6%,其中瓦店和鲖城達到國家免疫防控要求(表2)。

表2 O型口蹄疫病毒抗體檢測結(jié)果Table 2 Detection results of antibody for FMDV type O

2.2 A型口蹄疫病毒抗體檢測結(jié)果

在113份受檢血清中,陽性共68份,總體陽性率60.2%,低于國家免疫防控要求。各鄉(xiāng)鎮(zhèn)的陽性率分別為瓦店60.7%,鲖城57.1%,長官71.4%,張新51.7%,其中長官達到國家免疫防控要求(表3)。

表3 A型口蹄疫病毒抗體檢測結(jié)果Table 3 Detection results of antibody for FMDV type A

2.3 小反芻獸疫病毒抗體檢測結(jié)果

在113份受檢血清中,陽性共79份,總體陽性率69.9%,低于國家免疫防控要求。各鄉(xiāng)鎮(zhèn)的陽性率分別為瓦店78.6%,鲖城64.3%,長官82.1%,張新55.2%,其中瓦店和長官達到國家免疫防控要求(表4)。

表4 小反芻獸疫病毒抗體檢測結(jié)果Table 4 Detection results of antibody for PPRV

2.4 羊口瘡病毒抗體檢測結(jié)果

在113份受檢血清中,陽性共78份,總體陽性率69%,存在廣泛感染。各鄉(xiāng)鎮(zhèn)的陽性率分別為瓦店71.4%,鲖城64.3%,長官64.3%,張新75.9%,均普遍遭受感染(表5)。

表5 羊口瘡病毒抗體檢測結(jié)果Table 5 Detection results of antibody for ORFV

2.5 羊痘病毒抗體檢測結(jié)果

在113份受檢血清中,陽性共42份,總體陽性率37.2%,明顯低于國家免疫防控要求。各鄉(xiāng)鎮(zhèn)的陽性率分別為：瓦店35.7%,鲖城42.9%,長官28.6%,張新41.4%,均未達到國家免疫防控要求(表6)。

表6 羊痘病毒抗體檢測結(jié)果Table 6 Detection results of antibody for SGPV

3 結(jié)論與討論

傳染病目前仍是嚴重阻礙養(yǎng)羊業(yè)健康可持續(xù)發(fā)展的重要因素之一,尤其是常見重大病毒性傳染病,如FMD、PPR、CPD、SGP等,一旦暴發(fā)可給養(yǎng)羊業(yè)帶來毀滅性打擊和巨大經(jīng)濟損失[9]。另外,FMD、CPD、SGP還是人和多種動物共患的傳染病,傳染性極強且傳播迅速,在嚴重威脅動物健康的同時還可在人與不同動物物種間循環(huán)傳播,從而引發(fā)重大公共衛(wèi)生學問題[10]。截至目前,尚無針對FMD、PPR、CPD和SGP的特效抗病毒藥物及有效治療方法,因此這幾種傳染病重在平時預(yù)防[11]。當前,在養(yǎng)羊生產(chǎn)實踐中,FMD、PPR和SGP的防控措施主要是基于以產(chǎn)生抗體為主的常規(guī)商品化疫苗免疫預(yù)防。但由于受飼養(yǎng)管理水平、疾病本身特征、疫苗自身問題、免疫程序、接種方式、接種途徑等諸多因素的影響,致使疫苗免疫接種無法總能達到令人滿意的防控效果[12-13]。況且,國內(nèi)尚無可供利用的商品化CPD疫苗用于CPD的免疫防控。同時,ORFV還具有免疫逃逸機制,誘發(fā)宿主體液免疫應(yīng)答后血液中抗體水平維持的時間很短,這勢必在一定程度上加大CPD的防控難度[14-15]。

安徽省位于華東地區(qū),是我國的畜牧業(yè)大省,養(yǎng)殖業(yè)體量龐大。而臨泉縣又是安徽省的養(yǎng)殖大縣,主要的肉羊集中飼養(yǎng)區(qū)域之一,其羊肉及其相關(guān)產(chǎn)品主要滿足“長三角”地區(qū)的市場需求,養(yǎng)羊業(yè)現(xiàn)已成為該縣區(qū)重要的經(jīng)濟支柱產(chǎn)業(yè)[16-17]。對疫苗接種前后的羊群進行血清抗體水平檢測,了解群體免疫狀況對傳染病免疫防控具有促進作用,進而有利于養(yǎng)羊業(yè)健康發(fā)展。然而,目前臨泉地區(qū)羊群中缺乏對常見重大病毒性傳染病病原的有效免疫抗體檢測與監(jiān)測。鑒于此,本研究對臨泉縣部分鄉(xiāng)鎮(zhèn)主要羊場羊群采集的113份血清樣品進行幾種常見病毒抗體水平的檢測與分析。結(jié)果顯示,已免疫羊群血清中O型口蹄疫病毒(Type O FMDV)、A型口蹄疫病毒(Type A FMDV)、小反芻獸疫病毒(PPRV)和羊痘病毒(SGPV)的抗體總體陽性率均低于70%,不符合國家規(guī)定的免疫防控要求,提示應(yīng)加強免疫接種,提高羊群的總體特異性免疫力。但是,瓦店和鲖城Type O FMDV血清抗體、長官Type A FMDV血清抗體、瓦店和長官PPRV血清抗體陽性率均高于70%,免疫效果較好。研究發(fā)現(xiàn)SGPV血清抗體總體陽性率(37.2%)及在各鄉(xiāng)鎮(zhèn)羊群中的陽性率均很低(瓦店35.7%、鲖城42.9%、長官28.6%、張新41.4%)?？赡苁且驗镾GP疫苗主要通過羊尾根內(nèi)側(cè)皮內(nèi)注射,而皮內(nèi)注射相對于肌肉或皮下等接種方式而言,需要接種人員具有更高的操作技術(shù),如若疫苗接種人員技術(shù)生疏或操作不當,則容易造成免疫失敗[18]。這也提示應(yīng)加強免疫接種人員專業(yè)技術(shù)培訓或開發(fā)新型SGP疫苗。研究還發(fā)現(xiàn)ORFV血清抗體總體陽性率(69%)及在各鄉(xiāng)鎮(zhèn)羊群中的陽性率均很高(瓦店71.4%、鲖城64.3%、長官64.3%、張新75.9%),表明該地區(qū)羊群普遍遭受ORFV感染,這與之前的報道相一致[19-20]。提示開發(fā)特效抗ORFV藥物或研制有效CPD疫苗對于國內(nèi)CPD防控刻不容緩。

綜上,研究表明安徽省臨泉地區(qū)養(yǎng)殖場羊群中Type O FMD、Type A FMD、PPR和SGP總體免疫效果較差,各鄉(xiāng)鎮(zhèn)不同疫病免疫效果存在差異較大,且羊群中還廣泛存在ORFV感染現(xiàn)象。這些數(shù)據(jù)為該地區(qū)羊常見重大疫病的進一步防控提供了參考和指導。