AIB1、PGRMC1蛋白在子宮內(nèi)膜癌中的表達及與Bcl-2蛋白的關(guān)系

魏家彬

河南省周口市中心醫(yī)院病理科 466000

子宮內(nèi)膜癌(EC)約占中國女性癌癥的7%和宮頸癌的20%～30%[1]，是威脅女性健康的惡性腫瘤。在許多發(fā)達國家，子宮內(nèi)膜癌的發(fā)病率高于宮頸癌，有文獻報道其為第一大子宮腫瘤[2]。子宮內(nèi)膜癌可分為雌激素依賴性組織Ⅰ型和雌激素非依賴性組織Ⅱ型，如子宮內(nèi)膜腺癌、漿液性癌和良性細胞癌。Ⅰ型子宮內(nèi)膜癌是最常見的癌癥類型，占比為70%～80%，且發(fā)病率呈上升趨勢。Ⅱ型子宮內(nèi)膜癌是一種罕見的未確診疾病，占比為20%～30%。乳腺癌擴增基因1(AIB1)是其核受體的核心，是第1個在遺傳性乳腺癌中發(fā)現(xiàn)和研究的癌基因。大量研究表明，AIB1基因的增殖和高表達與乳腺癌的病因和發(fā)病機制有關(guān)[3-4]。而孕激素膜受體1(PGRMC1)作為 MAPR 家族的一員，存在于所有真核生物中[5]。 B細胞淋巴瘤2(Bcl-2)是研究細胞凋亡的最重要基因之一[6]。因此，本文旨在探討子宮內(nèi)膜癌中AIB1、PGRMC1蛋白的表達及與Bcl-2蛋白關(guān)系。報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2019年6月—2021年6月我院收治的58例子宮內(nèi)膜癌患者為觀察組，另選取同期來我院體檢的42例健康女性為對照組。其中對照組年齡33～60歲，平均年齡(42.67±10.65)歲。觀察組年齡32～65歲，平均年齡(45.37±12.44)歲；分型：Ⅰ型48例，Ⅱ型10例；ER(+)40例，ER(-)18例；組織學(xué)分化：低分化19例，中分化19例，高分化20例；分期：Ⅰ～Ⅱ期44例，Ⅲ～Ⅳ期14例；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移：有8例，無50例；肌層浸潤：≥1/2肌層15例，<1/2肌層43例。兩組數(shù)據(jù)總量差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。所有觀察對象家屬均知情同意，本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)。

1.2 選擇標(biāo)準(zhǔn) (1)納入標(biāo)準(zhǔn)：①滿足子宮內(nèi)膜癌的診斷標(biāo)準(zhǔn)；②臨床資料完整；③均為原發(fā)腫瘤；④均未進行術(shù)前處理。(2)排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并其他腫瘤患者；②妊娠期、哺乳期婦女；③合并其他主要器官功能不全患者。

1.3 方法 免疫組化檢測：在5μm處連續(xù)解剖所有子宮內(nèi)膜組織，用SP免疫組化檢測AIB1、PGRMC1和Bcl-2的表達。實驗中，陽性對照組為乳腺癌組織，陰性對照組為PBS代替一抗。組織切片用二甲苯脫鹽，用濃乙醇脫水，室溫孵育10min，電烤箱煮沸，抗原固定，PBS洗滌，3% BSA封閉，室溫放置10min。滴加一抗，冰箱培養(yǎng)4d，PBS洗滌。加載第二個抗原，在室溫下孵育30min，然后用PBS洗滌。DAB染色、水洗、蘇木精染色、酒精梯度干燥、二甲苯清漆、中性橡膠密封。

1.4 觀察指標(biāo) 細胞核或細胞質(zhì)棕黃色顆粒被認為是陽性細胞，在沒有染色的情況下被認為是陰性的。使用改進的Sinicrope方法來確定陽性信號所占面積的百分比。<5%為(-)，5%～25%為(+)，25%～50%為(++)，>50%(+++)。由我院病理科的2名專家獨立閱讀影片，結(jié)果不同時，由第3名專家做出決定。

2 結(jié)果

2.1 兩組AIB1和PGRMC1蛋白陽性率比較 AIB1蛋白在子宮內(nèi)膜癌中的陽性率為51.72%，顯著高于在正常子宮內(nèi)膜中的4.76%；PGRMC1蛋白在子宮內(nèi)膜癌中的陽性率為77.59%，顯著高于在正常子宮內(nèi)膜中的4.76%，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

表1 兩組AIB1和PGRMC1蛋白陽性率比較

2.2 AIB1蛋白表達與子宮內(nèi)膜癌臨床病理特征的關(guān)系 AIB1蛋白在子宮內(nèi)膜癌的陽性表達與組織分化程度和肌層浸潤深度相關(guān)(P<0.05)，與組織學(xué)類型、ER陽性表達、臨床分期、淋巴結(jié)是否轉(zhuǎn)移不相關(guān)(P>0.05)。見表2。

表2 AIB1蛋白表達與子宮內(nèi)膜癌病理特征的關(guān)系

2.3 PGRMC1蛋白表達與子宮內(nèi)膜癌臨床病理特征的關(guān)系 PGRMC1蛋白在子宮內(nèi)膜癌的陽性表達與ER陽性表達相關(guān)(P<0.05)，與組織學(xué)類型、組織分化程度、臨床分期、淋巴結(jié)是否轉(zhuǎn)移和肌層浸潤不相關(guān)(P>0.05)。見表3。

表3 PGRMC1蛋白表達與子宮內(nèi)膜癌臨床病理特征的關(guān)系

2.4 AIB1、PGRMC1與 Bcl-2 在子宮內(nèi)膜癌表達的相關(guān)性分析 子宮內(nèi)膜癌患者AIB1蛋白、PGRMC1蛋白與Bcl-2蛋白表達量呈正相關(guān)(P<0.05)，相關(guān)系數(shù)分別為0.786、0.737。見表4、表5。

表4 AIB1與 Bcl-2 在子宮內(nèi)膜癌表達的相關(guān)性分析

表5 PGRMC1與 Bcl-2 在子宮內(nèi)膜癌表達的相關(guān)性分析

3 討論

根據(jù)生物學(xué)行為的病因和類型，EC可分為Ⅰ型和Ⅱ型。Ⅰ型最為常見，占80%～90%。Ⅱ型較少見，但通常預(yù)后較差[7]。陰道異常出血是EC的主要癥狀，常見于絕經(jīng)后婦女，子宮內(nèi)膜活檢是子宮內(nèi)膜癌的重要診斷工具。手術(shù)是早期(Ⅰ～Ⅱ期)子宮內(nèi)膜癌患者的首選治療方案，通常預(yù)后良好。 接受放療、化療或激素治療等復(fù)雜輔助治療的患者5年生存率可高達95%，適用于術(shù)后復(fù)發(fā)或晚期(Ⅲ～Ⅳ期)患者[8]。

AIB1屬于p160家族，是一種多功能蛋白，在乳腺癌、卵巢癌、宮頸癌等多種腫瘤中均有發(fā)現(xiàn)，并已被證實與腫瘤的發(fā)生、進展和轉(zhuǎn)移有關(guān)[9]。其他科學(xué)家認為，AIB1 是索拉非尼和藤黃酸等藥物癌癥治療的重要靶點，并且與腫瘤激素治療的敏感性有關(guān)[10]。研究表明，AIB1高表達可以提高ER效率，誘導(dǎo)子宮內(nèi)膜生長，促進腫瘤發(fā)生[11]。此外，AIB1表達與子宮內(nèi)膜癌的不良預(yù)后相關(guān)，并可能影響對激素治療的敏感性[12]。本文結(jié)果表明，AIB1在子宮內(nèi)膜癌組織中的表達高于健康子宮內(nèi)膜組織，且AIB1表達的陽性率與組織分化程度和有無肌層浸潤有關(guān)。許多研究表明，AIB1通過ErbB和Wnt/β-catenin信號通路促進癌細胞增殖、存活和侵襲。在乳腺癌、子宮內(nèi)膜癌和卵巢癌等雌激素敏感性腫瘤中，ER信號傳導(dǎo)在癌變過程中發(fā)揮重要作用[13]。

PGRMC1屬于與膜孕酮受體 (MAPR) 相關(guān)的蛋白質(zhì)家族，MAPR常見于細胞膜、微粒體膜和突觸組織膜中。PGRMC1是一種與腫瘤密切相關(guān)的小分子蛋白，是第1個從豬身上分離純化的跨膜結(jié)構(gòu)域，分子量為22～26kDa。其化學(xué)結(jié)構(gòu)包括1個N端跨膜結(jié)構(gòu)域和1個C端血紅素或細胞色素b5，已知PGRMC1的生化功能可結(jié)合來自同一細胞色素b5來源的血紅素，也就是說，它們都具有高度的同源性[14]。PGRMC1可能參與懷孕相關(guān)的幾個過程以及各種腫瘤的起源、發(fā)展和進展。PGRMC1存在于人體的各個器官中，其在肝臟或腎臟中高度表達，而在大腦、肺、心臟、胰腺和骨骼肌中表達可能較差。 研究表明，PGRMC1在各種腫瘤組織和相關(guān)細胞系(乳腺癌、肺癌、甲狀腺癌、結(jié)腸癌等)中呈高表達，且在宮頸癌細胞系和卵巢癌組織中均有表達，在晚期卵巢癌中也有高表達。PGRMC1參與子宮內(nèi)膜癌細胞的生長過程，增加PGRMC1的表達已被證明可以降低癌細胞對化療的敏感性。研究表明PGRMC1在子宮內(nèi)膜癌組織中表達最為強烈[15]。細胞增殖活性可以通過PGRMC1表達來調(diào)節(jié)。

本文結(jié)果表明，PGRMC1的陽性表達與子宮內(nèi)膜癌的病理形態(tài)有關(guān)；進一步分析表明，PGRMC1蛋白在子宮內(nèi)膜癌中的陽性表達與ER水平相關(guān)。ER和PR均與子宮內(nèi)膜癌的發(fā)病和發(fā)作密不可分。雌激素可以刺激子宮內(nèi)膜的生長，但孕酮通常會抑制子宮內(nèi)膜的生長，兩者有拮抗作用，但雌、孕激素對子宮內(nèi)膜的作用會影響腫瘤細胞，容易發(fā)生浸潤[16]。 本文還發(fā)現(xiàn)子宮內(nèi)膜組織中AIB1、PGRMC1和Bcl-2的表達存在相關(guān)性，三者可以協(xié)同作用，促進子宮內(nèi)膜癌的發(fā)展和進展，但具體機制仍有待進一步研究。

綜上所述，AIB1、PGRMC1蛋白與子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生相關(guān)。AIB1蛋白的過表達在子宮內(nèi)膜癌分化程度、浸潤過程中可能起一定的作用，PGRMC1蛋白的過表達與ER表達水平相關(guān)。AIB1、PGRMC1蛋白有可能協(xié)同Bcl-2促進子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生、發(fā)展。