微柱凝膠法直接抗球蛋白試驗(yàn)IgG 型陽性質(zhì)控品制作及臨床應(yīng)用

陳立龍，王厚芳，于俊峰

（1.北京和睦家京北婦兒醫(yī)院檢驗(yàn)科，北京 100101；2.北京和睦家醫(yī)院檢驗(yàn)科，北京 100015）

直接抗球蛋白試驗(yàn)（direct anti-globulin test，DAT），是用來檢測紅細(xì)胞（RBC）表面是否包被了免疫球蛋白或（和）補(bǔ)體的一項(xiàng)簡易試驗(yàn)[1]。該試驗(yàn)主要用來輔助診斷遲發(fā)性溶血性輸血反應(yīng)[2]、自身免疫溶血性貧血（AIHA）[3-4]、胎兒和新生兒溶血癥[5]、藥物所致的免疫性溶血[6]等，應(yīng)用十分廣泛。

目前DAT 的檢測方法主要有試管法、微柱凝膠法、U 型板法等。微柱凝膠技術(shù)具有敏感度高、操作簡便、結(jié)果易判讀的優(yōu)點(diǎn)[7]；而且全自動(dòng)儀器微柱凝膠法用于直接抗人球蛋白試驗(yàn)初篩具有操作標(biāo)準(zhǔn)化、結(jié)果清晰可保存、敏感度高的優(yōu)點(diǎn)[8]，所以微柱凝膠法應(yīng)用十分廣泛。為保證DAT 結(jié)果的準(zhǔn)確性，該試驗(yàn)需使用陽性質(zhì)控品來驗(yàn)證陰性結(jié)果的有效性[9-10]。目前臨床常用的DAT 檢測類型主要包括單抗IgG 型和單抗C3d 型及二者的混合型（多特異度），可輔助臨床診斷和治療[11]。目前試管法與U 型板法有商品化的IgG 型陽性質(zhì)控品，但尚無商品化的適合微柱凝膠法的質(zhì)控品。因此，我們通過以下試驗(yàn)，探索制備應(yīng)用于微柱凝膠法DAT 的IgG 型陽性質(zhì)控品。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本來源標(biāo)本來自北京市通州區(qū)中心血站的O 型供者血袋所附血辮中的全血標(biāo)本，標(biāo)本符合無溶血、無異常凝集[12]，血漿部分無明顯乳糜，采集時(shí)間為10 d 以內(nèi)。留取血辮中全血標(biāo)本，然后對標(biāo)本進(jìn)行多特異度（抗IgG&C3d） DAT 篩查試驗(yàn)，結(jié)果為陰性者可以使用。

1.2 試劑和儀器IgG 型抗D 試劑，上海血液生物醫(yī)藥有限公司，批次：20180626，測定抗體滴度為1∶256；DG Gel DC Scan 抗人球蛋白檢測卡，簡稱Scan 卡（包含單抗IgG、單抗C3d、多特異度IgG&C3d），Diagnostic Grifols，S.A.公司，批次：18002.01；DG Gel Coombs 抗人球蛋白檢測卡，簡稱Coombs 卡（只含有多特異度抗IgG&C3d），Diagnostic Grifols，S.A.公司，批次：18006.01；貝索配血專用離心機(jī)（臺(tái)灣貝索，型號(hào)：2005-2）、GRIFOLS 配血專用離心機(jī)（Diagnostic Grifols，S.A.公司）、全自動(dòng)配血及血型分析儀（Diagnostic Grifols，S.A. 公司，國械注進(jìn)20183401737，型號(hào)：WADiana Compact）、加樣槍、37 ℃水浴箱、4 ℃冰箱、一次性吸頭、吸管、試管、低離子液、生理鹽水等。

1.3 方法微柱凝膠法手工操作，嚴(yán)格按照Diagnostic Grifols，S.A.公司試劑說明書進(jìn)行。全血標(biāo)本1 000 r/min條件下離心3 min，取10 μL 壓積紅細(xì)胞到1 mL 配套低離子液（DG Gel Sol）中，配成1%紅細(xì)胞懸液，混勻，取1%紅細(xì)胞懸液50 μL 加到相應(yīng)微孔管中，在GRIFOLS 配血專用離心機(jī)心后判讀結(jié)果。結(jié)果判讀，以紅細(xì)胞留在微柱上端或分布在凝膠中為陽性[7]。

使用全自動(dòng)配血及血型分析儀操作，嚴(yán)格按照儀器操作手冊進(jìn)行。全血標(biāo)本1 000 g 離心3 min 后直接上機(jī)操作。結(jié)果判讀，以紅細(xì)胞留在微柱上端或分布在凝膠中為陽性[7]。

1.3.1 通過試驗(yàn)探索致敏紅細(xì)胞的方法累計(jì)挑選2018年5 月至2020 年2 月北京和睦家醫(yī)院血庫收到來自血站的O 型Rh(D)抗原陰性獻(xiàn)血員標(biāo)本20 例，挑選O 型Rh(D)抗原陽性獻(xiàn)血員標(biāo)本20 例，每例2 mL 全血。每份標(biāo)本中加入的IgG 型抗D 試劑400 μL，輕輕混勻，室溫放置20 min，1 000 g 條件下離心3 min。然后使用兩種抗球蛋白檢測卡手工加樣進(jìn)行試驗(yàn)。Scan 卡（包含單抗IgG、單抗C3d、多特異度IgG&C3d）和Coombs 卡（只含有多特異度抗IgG&C3d）。

1.3.2 設(shè)計(jì)三組試驗(yàn)，篩選制作陽性質(zhì)控品時(shí)最佳致敏條件（IgG 型抗D 試劑的最適加入量、最適反應(yīng)溫度、最適反應(yīng)時(shí)間）

1.3.2.1IgG 型抗D 試劑最適加入量試驗(yàn)挑選Rh(D)抗原陽性標(biāo)本20 例，每例2 mL 全血。把每例2 mL 全血平均分為10 份，每份0.2 mL。室溫條件下，在每份0.2 mL標(biāo)本中順序加入IgG 型抗D 試劑5 μL、10 μL、12.5 μL、15 μL、20 μL 、25 μL 、30 μL、 35 μL、40 μL、 45μL；相當(dāng)于每2.0 mL 標(biāo)本對應(yīng)加入IgG 型抗D 試劑50 μL、100 μL、125 μL、150 μL、200 μL 、250 μL 、300 μL、 350 μL、 400 μL、450 μL。然后輕輕混勻，放置20 min。1 000 g 條件下離心3 min。由于標(biāo)本量較少，然后使用Coombs 卡手工加樣進(jìn)行試驗(yàn)。

1.3.2.2IgG 型抗D 試劑最適反應(yīng)溫度選擇試驗(yàn)挑選Rh(D)抗原陽性標(biāo)本20 例，對每份標(biāo)本留取3 mL，再各自平均分為3 份，每份1.0 mL。把20 例標(biāo)本的3 份樣本，分別放置在4 ℃冰箱、室溫（約25 ℃）、37 ℃溫浴條件下1 h，然后在每份標(biāo)本中各加入IgG 型抗D 試劑62.5 μL（相當(dāng)于每2 mL 標(biāo)本對應(yīng)加入IgG 型抗D 試劑125 μL）。然后輕輕混勻，維持標(biāo)本所處溫度條件不變，放置20 min。1 000 g 條件下離心3 min。然后使用Coombs卡手工加樣進(jìn)行試驗(yàn)。

1.3.2.3IgG 型抗D 試劑最佳反應(yīng)時(shí)間試驗(yàn)挑選Rh(D)抗原陽性標(biāo)本20 例，每例2 mL 全血。室溫條件下，在每例標(biāo)本中各加入IgG 型抗D 試劑125 μL。然后輕輕混勻，1 000 g 條件下離心3 min。為保證反應(yīng)時(shí)間準(zhǔn)確，分別在反應(yīng)時(shí)間（從加入IgG 型抗D 試劑算起）為5 min、10 min、20 min、30 min、60 min、350 min，然后使用Coombs卡手工加樣進(jìn)行試驗(yàn)。

1.3.3 監(jiān)測質(zhì)控品的穩(wěn)定性陰陽性質(zhì)控品各20 例標(biāo)本連續(xù)監(jiān)測數(shù)據(jù)為北京和睦家京北婦兒醫(yī)院2018 年5 月至2020 年9 月每天進(jìn)行試驗(yàn)累計(jì)完成。使用全自動(dòng)配血及血型分析儀[Diagnostic Grifols, S. A，國食藥監(jiān)械械（進(jìn)）字2011 第3402485 號(hào)，型號(hào)：WADiana Compact GRIFOLS Compact，Coombs 卡]，進(jìn)行DAT 陰陽性質(zhì)控檢測。

1.3.3.1監(jiān)測陰性質(zhì)控品的穩(wěn)定性累計(jì)挑選2018 年5 月至2020 年9 月北京和睦家京北婦兒醫(yī)院收到的來自血站的O 型獻(xiàn)血員標(biāo)本20 例，每例2.0 mL，不添加任何試劑，在1 000 g 條件下離心3 min 后，保存在2～8 ℃冰箱，作為陰性質(zhì)控品。每天用全自動(dòng)配血及血型分析儀（GRIFOLS Compact）進(jìn)行多特異度（抗IgG&C3d）DAT 試驗(yàn)。做完后標(biāo)本立刻放入冰箱。每天進(jìn)行一次試驗(yàn)并進(jìn)行連續(xù)監(jiān)測，直到標(biāo)本由于保存時(shí)間變長紅細(xì)胞逐漸破壞，血漿層由清晰的黃色轉(zhuǎn)為輕微紅色時(shí)繼續(xù)試驗(yàn)，出現(xiàn)嚴(yán)重紅色時(shí)由于紅細(xì)胞破碎導(dǎo)致出現(xiàn)拖尾現(xiàn)象時(shí)（結(jié)果+/-）終止試驗(yàn)。每次儀器做完后在陰性微孔中手工加入1%陽性質(zhì)控品50 μL，離心后結(jié)果為陽性，說明陰性結(jié)果有效。

1.3.3.2監(jiān)測陽性質(zhì)控品的穩(wěn)定性累計(jì)挑選2018 年5 月至2020 年9 月北京和睦家京北婦兒醫(yī)院收到的來自血站的O 型Rh(D)抗原陽性標(biāo)本20 例，每例2.0 mL。在每例標(biāo)本中分別加入的IgG 型抗D 試劑125 μL，輕輕混勻，室溫放置20 min，1 000 g 條件下離心3 min 后，作為陽性質(zhì)控品。用全自動(dòng)配血及血型分析儀（GRIFOLS Compact）進(jìn)行多特異度（抗IgG&C3d）DAT 試驗(yàn)。每天進(jìn)行一次試驗(yàn)連續(xù)監(jiān)測，每次試驗(yàn)完畢標(biāo)本放回2～8 ℃冰箱保存，連續(xù)監(jiān)測60 d。血漿層由清晰的黃色轉(zhuǎn)為輕微紅色或加深時(shí)，仍繼續(xù)試驗(yàn)至60 d。

2 結(jié)果

2.1 探索致敏紅細(xì)胞方法的試驗(yàn)結(jié)果結(jié)果分析：①20份O 型Rh(D)抗原陰性標(biāo)本，加入IgG 型抗D 試劑后，所有類型的DAT 結(jié)果全部為陰性；20 份O 型Rh(D)抗原陽性標(biāo)本，加入IgG 型抗D 試劑后，單IgG 型和多特異度（抗IgG&C3d）DAT 結(jié)果全部為陽性，單C3d 型DAT結(jié)果全部為陰性，表明IgG 型抗D 試劑能夠致敏Rh(D)抗原陽性的紅細(xì)胞。使用IgG 型或含有IgG 型的直接抗球蛋白試劑檢測時(shí)，DAT 結(jié)果全部陽性。②微柱凝膠法單抗IgG 型與多特異度（抗IgG&C3d）DAT 結(jié)果之間無試驗(yàn)準(zhǔn)確性和凝集強(qiáng)度的差異，且致敏紅細(xì)胞的是IgG 型抗D，與C3d 無關(guān)。所以后續(xù)試驗(yàn)均采用多特異度（抗IgG&C3d）微柱凝膠卡（即Coombs 卡），見表1。

表1 O 型Rh(D)抗原陰性和陽性各20 份標(biāo)本加入IgG 型抗D試劑后的DAT 結(jié)果

2.2 設(shè)計(jì)三組試驗(yàn)，篩選最佳致敏條件包括IgG 型抗D 試劑的最適加入量、最適反應(yīng)溫度、最適反應(yīng)時(shí)間。

2.2.1 20 例標(biāo)本，按每2.0 mL 血標(biāo)本加入IgG 型抗D 試劑量計(jì)算結(jié)果分析：參照汪德清和于洋編寫的《輸血相容性檢測 試驗(yàn)室質(zhì)量控制與管理》，凝集強(qiáng)度為3+是理想的質(zhì)控品效果[12]。且IgG 抗體與RBC 表面的蛋白抗原反應(yīng)，雖然不像IgM 抗體那樣直接導(dǎo)致RBC 凝集，但是當(dāng)抗體黏附于細(xì)胞時(shí)，RBC 細(xì)胞膜發(fā)生物理性改變，可導(dǎo)致陽離子滲透性異常，破壞RBC 穩(wěn)定性[6]。所以制備凝集強(qiáng)度3+的陽性質(zhì)控品時(shí)，微柱凝膠法每2 mL 全血標(biāo)本加入IgG 型抗D 試劑最適當(dāng)加入量選擇125 μL，見表2。

表2 IgG 型抗D 試劑的最適加入量試驗(yàn)結(jié)果

2.2.2 選擇最適反應(yīng)溫度的試驗(yàn)結(jié)果20 例標(biāo)本，在4 ℃冰箱、室溫（約25 ℃）、37 ℃溫浴條件下，結(jié)果都是3+，無差異。雖然IgG 屬于溫抗體，最適反應(yīng)條件為37 ℃。但該試驗(yàn)的結(jié)果表明：3 種溫度下，反應(yīng)20 min，制作的陽性質(zhì)控品結(jié)果無差異。因此，為了方便，可以在室溫條件下制作質(zhì)控品，且使用前不需要先恢復(fù)至室溫。質(zhì)控品使用后要及時(shí)放回4 ℃冰箱保存。這樣可降低細(xì)菌污染概率，利于長期保存使用。

2.2.3 選擇最適最佳反應(yīng)時(shí)間試驗(yàn)結(jié)果20 例標(biāo)本，加入IgG 型抗D 試劑5 min 后，出現(xiàn)5 例3+w、15 例3+三種結(jié)果，可見并不穩(wěn)定。加入IgG 型抗D 試劑10 min 及以后，10 例標(biāo)本DAT 結(jié)果均為3+，試驗(yàn)結(jié)果能夠達(dá)到比較穩(wěn)定的狀態(tài)。為了保證反應(yīng)效果更加充分，在制作陽性質(zhì)控品時(shí)，選擇最佳反應(yīng)時(shí)間為20 min。

2.3 監(jiān)測質(zhì)控品的穩(wěn)定性

2.3.1 陰性質(zhì)控品的穩(wěn)定性20 例陰性質(zhì)控品標(biāo)本，DAT結(jié)果從陰性到由于紅細(xì)胞逐漸破壞而出現(xiàn)拖尾現(xiàn)象，都分布在50～60 d 內(nèi)。陰性標(biāo)本結(jié)果能夠穩(wěn)定50 d 以上。有12 例標(biāo)本在45 d 時(shí)標(biāo)本上部血漿層出現(xiàn)輕微紅色，但并不影響試驗(yàn)結(jié)果[13]。當(dāng)出現(xiàn)嚴(yán)重紅色時(shí)，說明紅細(xì)胞破壞嚴(yán)重，結(jié)果出現(xiàn)拖尾現(xiàn)象后，不能繼續(xù)使用。

2.3.2 陽性質(zhì)控品的穩(wěn)定性20 例陽性質(zhì)控品標(biāo)本，為期60 d 的連續(xù)監(jiān)測DAT 結(jié)果，紅細(xì)胞凝集強(qiáng)度都是3+。說明DAT 陽性質(zhì)控結(jié)果在60 d 內(nèi)穩(wěn)定性良好。有10 例標(biāo)本大約在45 d 時(shí)標(biāo)本上部血漿層開始出現(xiàn)輕微紅色，但并不影響試驗(yàn)結(jié)果[13]。有4 例標(biāo)本在50 d 時(shí)轉(zhuǎn)至紅色，直到60 d 試驗(yàn)結(jié)束，試驗(yàn)結(jié)果都是3+，結(jié)果未受影響。

3 討論

微柱凝膠試驗(yàn)明顯不同于傳統(tǒng)的試管法檢測技術(shù)，微柱凝膠試驗(yàn)提供了一個(gè)清晰的凝集強(qiáng)度判斷標(biāo)準(zhǔn)，各凝集強(qiáng)度之間可用肉眼鑒別，操作標(biāo)準(zhǔn)化，重復(fù)性好，試驗(yàn)結(jié)果清晰、穩(wěn)定、客觀，并可對結(jié)果進(jìn)行拍照，存入計(jì)算機(jī)，作為資料保存。而傳統(tǒng)的試管法，凝集強(qiáng)度的判定不易掌握，受主觀因素影響較大，試驗(yàn)結(jié)果重復(fù)性不理想，且結(jié)果不可保存；微柱凝膠法不需洗滌受檢細(xì)胞，敏感度高，對致敏紅細(xì)胞檢出率大大提高[14]，所以微柱凝膠法應(yīng)用廣泛。為了保證微柱凝膠試驗(yàn)的準(zhǔn)確性，質(zhì)控品的使用是十分必要的。

IgG 型抗體一般在體溫條件下與RBC 表面的蛋白抗原反應(yīng)，因此，將其稱為“溫凝集素”，IgG 型抗體很少直接導(dǎo)致RBC 凝集。IgG 型抗體引起的AIHA 原理比較復(fù)雜，簡單描述如下：IgG 分子可能與RBC 表面的抗原和細(xì)胞毒細(xì)胞上的Fc 受體結(jié)合。通過免疫黏附（尤其是IgG-FcR介導(dǎo)的免疫黏附）可刺激一系列反應(yīng)，導(dǎo)致吞噬作用，但發(fā)生反應(yīng)需較長時(shí)間的相互作用。免疫黏附導(dǎo)致的吞噬作用可完全吞食靶RBC，通過內(nèi)部的吞噬體破壞RBC。然而，這種吞噬常為部分吞噬，導(dǎo)致RBC 的表面積-體積比降低，使其變?yōu)榍蛐渭t細(xì)胞。球形紅細(xì)胞（由于其可變形性降低）無法穿過脾血竇壁上的小裂孔，因此在脾臟的Billroth 索中破壞[6]。血辮中的血為離開人體后的血液，不像人體中的血能在不斷循環(huán)流動(dòng)，所以被免疫黏附吞噬的幾率很小，只是結(jié)合了IgG 抗體，而不引起破壞；另外，也不會(huì)再經(jīng)過脾臟，所以能夠被完整地保存下來，只呈現(xiàn)致敏的狀態(tài)。所以制作的陽性質(zhì)控品中與IgG 型抗體結(jié)合的紅細(xì)胞可以保存較長的時(shí)間。

試驗(yàn)所用血液標(biāo)本來自血站的血袋小辮，為帶有保養(yǎng)液的全血標(biāo)本。原因及注意事項(xiàng)如下：①標(biāo)本容易得到，利用懸浮紅細(xì)胞發(fā)出后的血袋剩余血辮標(biāo)本就可完成；②作為獻(xiàn)血員標(biāo)本，在血站對傳染病項(xiàng)目已做過雙重檢測，可最大限度的保證其制作和使用安全[15]；③另外血站對獻(xiàn)血員做過貧血篩查，基本能夠保證標(biāo)本為正常的紅細(xì)胞和血漿比例；④獻(xiàn)血員全血標(biāo)本中已經(jīng)有適量的枸櫞酸鹽抗凝劑，磷酸鹽緩沖液，為紅細(xì)胞提供能量物質(zhì)的葡萄糖和腺嘌呤等物質(zhì)，有利于質(zhì)控品的長期保存；⑤為減少細(xì)菌污染，標(biāo)本保存在帶帽的潔凈無添加試管中；⑥對標(biāo)本進(jìn)行多特異度（抗IgG&C3d）DAT 篩查試驗(yàn)，結(jié)果為陰性者，可以使用；陽性者不能使用。因?yàn)閾?jù)統(tǒng)計(jì)，在正常獻(xiàn)血者中，Coombs 試驗(yàn)的陽性率為1∶36 000～1∶1 000[6]。另外，如果C3 也沉積于RBC 表面，那么IgG 抗體可固定補(bǔ)體，可加速標(biāo)本溶血[6]。也有文獻(xiàn)報(bào)道獻(xiàn)血員DAT 陽性率為0.008%[16]。

綜合以上試驗(yàn)及分析，得出適用于微住凝膠法IgG 型直接抗球蛋白試驗(yàn)質(zhì)控品制作的步驟及注意事項(xiàng)：①選擇標(biāo)本：按照上文提到的試驗(yàn)標(biāo)本篩選方法（來自血站O 型懸浮紅細(xì)胞血袋的血辮10 d 內(nèi)全血標(biāo)本，無溶血、無異常凝集、多特異度DAT 篩查結(jié)果陰性）；Rh(D)抗原陽性的標(biāo)本均為正常D。非正常D 抗原陽性標(biāo)本不建議使用。②制作步驟：各試驗(yàn)室可根據(jù)需要選擇是否配制陰性質(zhì)控品。陰性質(zhì)控品，選擇Rh(D)抗原陽性或陰性的標(biāo)本，留取2 mL 標(biāo)本保存在帶帽的無添加試管中。1 000 g 條件下離心3 min。陽性質(zhì)控品，選擇Rh(D)抗原陽性標(biāo)本，留取2 mL 標(biāo)本保存在帶帽的無添加試管中。加入IgG 型抗D 試劑125 μL，混勻，室溫放置20 min。1 000 g 條件下離心3 min。③制作完成后，使用常規(guī)檢測方法連續(xù)檢測3 次來確定相關(guān)靶值[12]：陰性質(zhì)控紅細(xì)胞凝集強(qiáng)度為0，陽性質(zhì)控紅細(xì)胞凝集強(qiáng)度為3+，且陽性質(zhì)控日常使用中的強(qiáng)度偏差最多為1+。④有效期：陰性質(zhì)控品的為45 d，陽性質(zhì)控品為60 d。而且微住凝膠法使用質(zhì)控品的量很少，如果每個(gè)月制作一次，可以滿足日常工作需求。⑤質(zhì)控品手工與上自動(dòng)化儀器結(jié)果無差異，離心后可以應(yīng)用在自動(dòng)化儀器上，手工方法使用時(shí)需先配制成1%紅細(xì)胞懸液。⑥質(zhì)控品可直接應(yīng)用在單抗IgG 型DAT 質(zhì)控試驗(yàn)和作為多特異度（抗IgG&C3d）DAT 的參考質(zhì)控品。⑦質(zhì)控品保存在2～8 ℃冰箱，建議在有效期內(nèi)使用。由于不受溫度影響，所以使用前不必等標(biāo)本恢復(fù)到室溫。每次使用前要認(rèn)真檢查質(zhì)控品外觀，不能出現(xiàn)嚴(yán)重溶血，輕度溶血不影響試驗(yàn)結(jié)果[13]；每次使用前不需要重復(fù)混勻和離心，減少對紅細(xì)胞的破壞；使用后及時(shí)放回2～8 ℃冰箱，降低細(xì)菌污染概率，利于其長期保存使用。⑧在制作和使用質(zhì)控品過程中，要對質(zhì)控標(biāo)本按照具有潛在的傳染物品對待。⑨各個(gè)試劑廠家的產(chǎn)品結(jié)果可能存在差異。如果應(yīng)用其他廠家試劑，需要做驗(yàn)證試驗(yàn)。通過調(diào)整制作陽性質(zhì)控品時(shí)IgG型抗D 試劑的加入量和驗(yàn)證靶值后再使用。

參照汪德清和于洋編寫的《輸血相容性檢測 試驗(yàn)室質(zhì)量控制與管理》，檢驗(yàn)室制作的室內(nèi)質(zhì)控品保存期達(dá)到40 d 以上[12]。試驗(yàn)室自制的質(zhì)控品保存期＞40 d，穩(wěn)定性良好，所以可以滿足日常使用。

在日常臨床試驗(yàn)中，如果需要驗(yàn)證DAT 陰性結(jié)果的有效性，把陽性質(zhì)控品配制成1%紅細(xì)胞濃度，加入到試驗(yàn)結(jié)果陰性孔中離心即可。通常DAT 只需要陽性質(zhì)控品，但是我們對自動(dòng)化儀器進(jìn)行室內(nèi)質(zhì)控時(shí)同時(shí)設(shè)置了陰性質(zhì)控品，認(rèn)為增加陰性質(zhì)控也是有必要的[17]。

通過試驗(yàn)室較長時(shí)間的探索和完善，所制備的質(zhì)控品可以滿足日常DAT 試驗(yàn)室內(nèi)質(zhì)控的需求。同時(shí)，制備原料來源途徑穩(wěn)定、易得，而且選擇的血液采集時(shí)間較短，可較大限度保證質(zhì)控品的使用時(shí)間，減少制備次數(shù)[18]，有助于完善DAT 檢測試驗(yàn)室的室內(nèi)質(zhì)量控制體系，適宜各試驗(yàn)室開展。各試驗(yàn)室可根據(jù)需要選擇是否配制陰性質(zhì)控品。