重慶市合川區(qū)5歲及以下兒童感染性腹瀉監(jiān)測(cè)結(jié)果研究*

劉莉莉，何臘梅△，劉柏林，段華安，彭雨崟，張 麗，王良鳳，秦先偉，秦曉紅

(重慶市合川區(qū)疾病預(yù)防控制中心：1.檢驗(yàn)科；2.辦公室，重慶 401520)

腹瀉是目前全球重要的公共衛(wèi)生問題[1-2]，是導(dǎo)致兒童營養(yǎng)不良、生長發(fā)育障礙的重要疾病。嬰幼兒由于自身免疫系統(tǒng)發(fā)育尚不完全，來自母體的免疫力維持時(shí)間較短，抵抗力較差，是腸道病毒感染的高危人群。每年全球約有17億例兒童腹瀉，約52.5萬例5歲以下兒童死于腹瀉病[3]。引起腹瀉因素很多，包括細(xì)菌、病毒、非感染性因素等，隨著人們生活水平提高和良好衛(wèi)生習(xí)慣的養(yǎng)成，細(xì)菌性腹瀉得到了有效控制，而病毒感染則越來越多地成為5歲以下兒童腹瀉的重要原因[4]。

病毒性腹瀉是一組廣泛存在并高發(fā)的腸道傳染病，其具有傳播速度較快、涉及范圍廣、發(fā)病率高、不合理治療或不及時(shí)治療可導(dǎo)致死亡等特點(diǎn)[3]。2012年以來，諾如病毒已成為我國其他感染性腹瀉病暴發(fā)的優(yōu)勢(shì)病原體，病毒性腹瀉尤以諾如病毒和輪狀病毒的檢出居多，札如病毒、星狀病毒和腸道腺病毒也有不同程度檢出[5]。2016—2019年合川區(qū)感染性腹瀉的報(bào)告數(shù)分別為1 384、1 841、2 176、1 795例，其中5歲及以下感染性腹瀉報(bào)告病例數(shù)分別為776、1 338、1 692、1 377例。病例報(bào)告主要集中在合陽城、南津街、釣魚城等3個(gè)地區(qū)。近年來，合川區(qū)中小學(xué)和托幼機(jī)構(gòu)兒童群體性腹瀉暴發(fā)疫情也時(shí)有發(fā)生。因此，調(diào)查分析合川區(qū)5歲及以下兒童感染性腹瀉病的常見病原體及流行病學(xué)特征，采取有效的防控措施勢(shì)在必行。本研究主要針對(duì)本中心3個(gè)辦事處所在的3個(gè)兒童集中就診醫(yī)院，即合川區(qū)婦幼保健院、合川區(qū)人民醫(yī)院和合川區(qū)宏仁醫(yī)院進(jìn)行調(diào)查。共采集316例0～5歲組兒童腹瀉糞便及肛拭子標(biāo)本，并針對(duì)輪狀病毒、諾如病毒、軋如病毒、星狀病毒、腸道腺病毒、新型冠狀病毒等6種病毒進(jìn)行檢測(cè)分析，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2020年6月1日至2021年5月31日到合川區(qū)宏仁醫(yī)院(合陽城街道)、合川區(qū)婦幼保健院(南津街街道)、合川區(qū)人民醫(yī)院(釣魚城街道)以腹瀉癥狀為主就診的0～5歲兒童作為研究對(duì)象，通過所在地區(qū)疾控中心辦事處調(diào)取患者相關(guān)資料。腹瀉病例為24 h內(nèi)排便大于或等于3次，并伴有大便性狀的改變(呈稀便、水樣便、膿血便或黏液便等)。本研究主要針對(duì)病毒引起的腹瀉，要求采集的大多為水樣便。

1.2方法

1.2.1儀器與試劑 核酸提取儀：中元全自動(dòng)核酸提取儀EXM6000；實(shí)時(shí)熒光聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)儀：ABI Quant Studio TM7Flex,伯樂CFX96 DeepWeel；核酸提取試劑：zybio核酸提取試劑盒(96人份/盒，重慶中元匯吉生物技術(shù)有限公司，試劑批號(hào)5107017，渝食藥監(jiān)械生產(chǎn)備20180001號(hào))。核酸檢測(cè)試劑：輪狀病毒A組、諾如病毒GⅠ/GⅡ型病毒重?zé)晒釶CR檢測(cè)試劑盒(48T/盒，試劑批號(hào)20061304/1、20111804/1)，札如病毒、星狀病毒、腺病毒三重?zé)晒釶CR檢測(cè)試劑盒(48T/盒，試劑批號(hào)20060511/1，20121903/1)均采用深圳生科原生物科技股份有限公司生產(chǎn)的核酸檢測(cè)試劑盒(粵食藥監(jiān)械生產(chǎn)許20051134號(hào))；新型冠狀病毒核酸檢測(cè)試劑盒(50人份/盒，上海伯杰醫(yī)療科技有限公司，國械注準(zhǔn)20203400065)。上述試劑均在有效期內(nèi)使用。

1.2.2標(biāo)本采集、保存和運(yùn)送 兒科醫(yī)生采集0～5歲組腹瀉兒童大便5 g或5 mL直接放置于裝有3 mL病毒采樣液(非滅活型)的病毒采樣管中，確實(shí)不好留存糞便的，可采集患兒肛拭子，肛拭子上應(yīng)有可見的糞便，采集后立即放入病毒采樣管中。完成患兒的流行病學(xué)調(diào)查并把標(biāo)本凍存于-20 ℃或以下的冰箱里，盡快集中送到疾控中心開展檢測(cè)。

1.2.3檢測(cè)方法 采用實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR方法對(duì)輪狀病毒、諾如病毒Ⅰ型、諾如病毒Ⅱ型、札如病毒、星狀病毒、腸道腺病毒和新型冠狀病毒核酸進(jìn)行檢測(cè)。反應(yīng)體系、反應(yīng)條件按照深圳生科原生物股份有限公司核酸檢測(cè)試劑盒說明書和上海伯杰醫(yī)療科技有限公司核酸檢測(cè)試劑盒說明書。輪狀病毒、諾如病毒、札如病毒、星狀病毒和腺病毒PCR擴(kuò)增循環(huán)參數(shù)設(shè)置均為：50 ℃ 30 min，95 ℃ 3 min，再按95 ℃ 10 s，55 ℃ 60 s，循環(huán)45次，熒光檢測(cè)在55 ℃；新型冠狀病毒PCR擴(kuò)增循環(huán)參數(shù)設(shè)置均為：50 ℃ 10 min，95 ℃ 5 min，再按95 ℃ 10 s，55 ℃ 40 s，循環(huán)45次,熒光檢測(cè)在55 ℃。反應(yīng)體系均為25 μL。病毒熒光通道選擇FAM、VIC、ROX。

1.2.4判讀方法 按照深圳生科原生物股份有限公司核酸檢測(cè)試劑盒說明書和上海伯杰醫(yī)療科技有限公司核酸檢測(cè)試劑盒說明書中的結(jié)果判讀要求進(jìn)行判讀。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用Excel2010和SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行數(shù)據(jù)整理和統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)數(shù)資料以率或構(gòu)成比表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1病毒核酸檢測(cè)基本情況 共檢測(cè)了316份0～5歲腹瀉兒童糞便及肛拭子標(biāo)本，檢出了腸道腺病毒、諾如病毒Ⅱ型、輪狀病毒、札如病毒、星狀病毒共133例，總檢出率為42.09%，其中腸道腺病毒檢出率為8.54%(27/316)，諾如病毒Ⅱ型檢出率為8.23%(26/316)，輪狀病毒檢出率為13.92%(44/316)，札如病毒檢出率為5.70%(18/316)，星狀病毒檢出率為5.70%(18/316)，見表1。99份標(biāo)本中只有1種病毒感染，16份標(biāo)本有混合感染，單病原感染(單感)和混合感染(混感)數(shù)量比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=73.23,P<0.05)。未檢出新型冠狀病毒。見表2。

表1 病毒核酸檢測(cè)基本情況

表2 單感和混感情況比較

2.2不同地區(qū)病毒核酸檢測(cè)情況 本研究主要針對(duì)合陽城街道、南津街街道、釣魚城街道以腹瀉癥狀為主就診的0～5歲兒童。病毒檢出率最高的是釣魚城街道(60.0%)，其次是南津街街道(44.4%)，最后是合陽城街道(26.2%)，不同地區(qū)檢出病原陽性率比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=27.55,P<0.05)。見表3。

表3 不同地區(qū)病毒核酸檢測(cè)情況[n(%)]

2.3不同月份不同地區(qū)病毒核酸檢測(cè)情況 合川區(qū)不同月份0～5歲組兒童腹瀉患者病毒核酸陽性率不同。輪狀病毒與諾如病毒流行特點(diǎn)皆為冬春季多見，夏秋季少見。2021年1-5月輪狀病毒陽性率高于諾如病毒，2020年7-12月諾如病毒陽性率高于輪狀病毒。見表4。

表4 不同月份病毒核酸檢測(cè)情況(n)

2.4不同性別病毒核酸檢測(cè)情況 合川區(qū)316 例0～5歲兒童腹瀉病例中，男童190例，女童126例，男女性別比為1.51∶1。男童各種病毒感染率均略高于女童，但總感染率兩者差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

表5 不同性別病毒核酸檢測(cè)情況[n(%)]

3 討 論

除霍亂、細(xì)菌性和阿米巴性痢疾、傷寒和副傷寒以外的感染性腹瀉是我國法定傳染病丙類傳染病之首[6]。本研究主要檢測(cè)合川區(qū)5歲及以下兒童感染性腹瀉的病原，其中輪狀病毒是優(yōu)勢(shì)病原,這和其他地區(qū)研究結(jié)果一致[7]；其次是諾如病毒，腸道腺病毒、星狀病毒和札如病毒也有檢出。輪狀病毒是引起5歲及以下兒童腹瀉的常見病原體，可經(jīng)糞-口、呼吸道和接觸等多種途徑傳播，主要通過糞口途徑傳播[8]。諾如病毒是導(dǎo)致腹瀉的第二大病因，常在冬季引起一個(gè)發(fā)病高峰。近年來，國內(nèi)外研究發(fā)現(xiàn)，諾如病毒已成為引發(fā)感染性腹瀉的主要原因，消化道傳播是最重要的傳播途徑，也有接觸傳播和氣溶膠傳播[9]。諾如病毒疫情發(fā)生的場(chǎng)所主要集中在中小學(xué)校和托幼機(jī)構(gòu)，疾病負(fù)擔(dān)嚴(yán)重[10],本研究整理患兒的流行病學(xué)資料分析，檢出的諾如病毒感染患兒多集中在同一托幼機(jī)構(gòu)，且為關(guān)聯(lián)病例。因此，加強(qiáng)5歲及以下兒童良好衛(wèi)生習(xí)慣教育，教導(dǎo)正確的洗手方法，監(jiān)督學(xué)校、幼兒園、幼兒集中的娛樂場(chǎng)所做好飲食、飲用水、玩具、玩樂設(shè)施和衛(wèi)生間衛(wèi)生防治工作,能夠有效地防止病毒傳播。由于不同病原導(dǎo)致的腹瀉癥狀相似，雙重或者多重感染情況下無法區(qū)別具體是哪種病原引起的相應(yīng)臨床癥狀，病毒間的相互組合是否會(huì)增加疾病的嚴(yán)重程度尚無定論。在今后的監(jiān)測(cè)中，應(yīng)重視混合感染的臨床及病原學(xué)監(jiān)測(cè)[11]。

本研究中，3家醫(yī)療機(jī)構(gòu)就診腹瀉兒童病原陽性檢出率比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=27.55,P<0.05)，醫(yī)療機(jī)構(gòu)對(duì)感染性腹瀉兒童的篩選和大便標(biāo)本采集質(zhì)量可能是造成統(tǒng)計(jì)學(xué)差異的原因。諾如病毒、輪狀病毒、札如病毒在不同醫(yī)療機(jī)構(gòu)間陽性率比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，可能與諾如病毒傳播能力較強(qiáng)，目前仍無特效藥物和特別有效防控手段有關(guān)。

本研究中，輪狀病毒和諾如病毒引起的感染性腹瀉多發(fā)生在冬春季節(jié)，夏秋較少，具有明顯的季節(jié)性，這與有關(guān)研究報(bào)道結(jié)果一致[12-13]。主要是因?yàn)樵摬《揪哂心屠洳荒蜔岬奶匦裕杭竟?jié)溫度較低，室內(nèi)開窗通風(fēng)較少，病毒存活時(shí)間較長，會(huì)污染餐具、飲用水、玩具等，容易造成兒童聚集的學(xué)校和托幼機(jī)構(gòu)發(fā)生輪狀病毒或諾如病毒聚集性/暴發(fā)性疫情，引起社會(huì)層面的廣泛關(guān)注。病毒對(duì)所有人群普遍易感，不同性別檢出率比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

綜上所述，在0～5歲兒童病毒性腹瀉的防控工作中，應(yīng)當(dāng)針對(duì)不同季節(jié)和主要致病病原采取相應(yīng)的防疫控制措施。加強(qiáng)兒童衛(wèi)生習(xí)慣教育，落實(shí)學(xué)校晨午檢，對(duì)發(fā)現(xiàn)的首例病例應(yīng)立刻做停課處理，及時(shí)控制好傳染源；注重對(duì)家長的健康教育和宣傳，要求家長主動(dòng)配合病童停課管理和復(fù)課要求。疾控中心應(yīng)加強(qiáng)對(duì)學(xué)校規(guī)范消毒指導(dǎo)，要求學(xué)校做好日常消毒、開窗通風(fēng)。輪狀病毒疫苗能有效預(yù)防輪狀病毒引起的腹瀉，醫(yī)療機(jī)構(gòu)和學(xué)校應(yīng)加強(qiáng)宣傳推廣，提高0～5歲兒童輪狀病毒疫苗的接種覆蓋率。諾如病毒傳播能力很強(qiáng)，需要對(duì)重點(diǎn)人群開展腸道傳染病知識(shí)的宣傳教育，提高人群的防病意識(shí)及能力。疾控中心也應(yīng)連續(xù)、系統(tǒng)、科學(xué)地開展相關(guān)病原學(xué)監(jiān)測(cè)，掌握相關(guān)病原變化趨勢(shì)，做好疾病風(fēng)險(xiǎn)研判，采取科學(xué)合理的防控措施，有效降低0～5歲組兒童病毒性腹瀉的發(fā)病率。