王 娟, 侯玉漂, 趙志強, 史國翠, 謝建國,徐風蒼, 陳立功, 魏忠華*, 王學靜,*
(1.河北省畜牧獸醫(yī)研究所,河北保定 071000;2.石家莊工程職業(yè)學院,河北石家莊 050204;3.河北省畜牧總站,河北石家莊 050081;4.唐山市畜牧技術推廣站,河北唐山 063000;5.滄州市畜牧技術推廣站,河北滄州 061014;6.河北農(nóng)業(yè)大學動物醫(yī)學院,河北保定 071001)
環(huán)二肽(DKPs),又名2,5二氧哌嗪或2,5二酮哌嗪,由兩個氨基酸通過肽鍵環(huán)合形成,是自然界中普遍存在的最小的環(huán)肽,是一組從細菌到人類進化保守的類激素分子(Bellezza等,2014)。環(huán)二肽由于其重要的生物和藥理活性而日益受到重視,在治療和生物材料等領域有著廣泛的應用。環(huán)二肽的種類繁多且功能各異,據(jù)統(tǒng)計其90%由革蘭氏陰性菌產(chǎn)生(Fenical等,2006),它們也分離自革蘭氏陽性菌、真菌、植物和動物(Zhu等,2018),其中含有脯氨酸(Pro)的DKPs在發(fā)酵食品中含量較多(Otsuka等,2020)。基于此,本試驗擬通過研究韓國泡菜源環(huán)二肽對肉雞生長性能、屠宰性能、生產(chǎn)性能及效益影響,為肉雞健康養(yǎng)殖保健產(chǎn)品的篩選及應用提供思路與借鑒。
1.1 試驗材料 環(huán)二肽口服液:主要成分由韓國泡菜分離出的細菌篩選后發(fā)酵而成,其中環(huán)二肽含量125 mmol/μL,購自北京路克希德生物科技有限公司。鑒定含有17種活性成分(L-Tyr-LPro、L-Ser-L-Pro、L-Leu-L-Pro、L-Leu-L-Pro、LVal-L-Pro、L-Tyr-L-Pro、L-Val-L-Pro、L-Leu-L-Hyp、L-Ser-L-Pro、L-Phe-L-Ala、L-Tyr-LPro、L-Leu-L-Pro、L-Leu-L-Pro、L-Leu-L-Pro、L-Met-L-Pro、DL-3-phenyllactic acid、L-Phe-LPro、L-Phe-L-Pro)。
1.2 試驗設計與飼養(yǎng)管理 選用360只0日齡羅斯308肉雞,按飼養(yǎng)試驗要求隨機分為3組,每組設6個重復,每個重復20只雞,公母各半,利用飲水方式添加環(huán)二肽,處理Ⅰ0~7 d添加量為2 L/t,8~14 d添加量為1 L/t;處理Ⅱ0~14 d添加量為2 L/t,后期均不添加;對照組全程不添加,營養(yǎng)水平見表1。飼養(yǎng)試驗42 d。飼養(yǎng)密度為19.05只/m2,試驗組均不添加任何保健、促生長用藥、抗大腸桿菌藥。
表1 營養(yǎng)水平(風干基礎)%
1.3 指標測定
1.3.1 日增重、料重比、成活率 試驗期間以重復為單位每周記錄料耗料、死淘只數(shù)、空腹體重,飼養(yǎng)試驗結束時,計算試驗雞的日增重、料重比、成活率。
日增重(ADG)/g=(末體重-初體重)/試驗天數(shù);
料重比(F/G)=飼養(yǎng)期采食量/全期增重;
死淘率/%=[1-(死淘雞數(shù)/試驗雞總數(shù))]×100。
1.3.2 養(yǎng)分表觀利用率 試驗結束前以重復為單位連續(xù)收集三天新鮮糞便(測蛋白樣品需用10%濃度鹽酸進行氮固定),并進行混合,同時收集該階段飼料,測定飼料和糞便樣本中粗蛋白質、粗脂肪、鈣、磷含量,測定方法分別參照GB/T6432-2018(肖志明等,2018)、GB/T6433-2006(張?zhí)K等,2006)、GB/T 6436-2018(高麗紅等,2018)(高錳酸鉀法)、GB/T 6437-2018(商軍等,2018)執(zhí)行,并進行營養(yǎng)物質消化率的計算。消化試驗采用內(nèi)源指示劑酸不溶灰分法測定,測定方法參照國標(GB/T 23742-2009)(李麗蓓等,2002)。營養(yǎng)物質消化率計算公式為:
某養(yǎng)分的消化率/%=100-100×(b×c)/(a×d);
式中:a為飼料中某養(yǎng)分含量,%;b為糞中該成分含量,%;c為飼料中鹽酸不溶灰分含量,%;d為糞中鹽酸不溶灰分含量,%。
1.3.3 屠宰性能指標 飼養(yǎng)試驗結束后,從每個重復中隨機抽取公母肉雞各1只,共36只,在禁食(自由飲水)空腹6 h后進行屠宰。參照《家禽生產(chǎn)性能名詞術語和度量統(tǒng)計方法》(NY/T 823-2004)對胴體進行稱重,記錄屠體重、半凈膛重、全凈膛重、胸肌重、腿肌重、翅膀重、腹脂重,并計算屠宰率、半凈膛率、全凈膛率、胸肌率、腿肌率、翅膀率、腹脂率。
1.3.4 效益指標 根據(jù)市場毛雞、飼料價格及化學藥品節(jié)省等情況,對雞群健康與疾病情況下生產(chǎn)指標及效益分別進行分析比較,計算歐洲效益指數(shù)(簡稱歐指)及單只效益。毛雞、飼料價格分別按照10、2.7元/kg計算,各試驗組雛雞價格、常規(guī)預防用藥及其他管理等費用因各試驗組一致,未計入單只效益。
歐洲效益指數(shù)=[(體重×成活率)/(料肉比×出欄日齡)]×10000;
單只效益/元=成活率×(均重×毛雞價格-料重比×均重×飼料價格-環(huán)二肽費用+節(jié)省化學藥品費用)。
1.4 數(shù)據(jù)的統(tǒng)計分析 結果以“平均值±標準差”表示,數(shù)據(jù)處理與分析采用SPSS 17.0軟件進行單因素方差(ANOVA)分析,利用Duncan’s法進行多重比較。以P<0.05為顯著性差異性判斷標準。
2.1 環(huán)二肽對肉雞體重和日增重的影響 從表2可以看出,不同組的初生重(0 d)之間無顯著性差異條件下,處理組與對照組相比,在環(huán)二肽飲用期(即14 d內(nèi)),處理Ⅰ、處理Ⅱ14 d內(nèi)的體重均偏高,且處理Ⅱ更明顯,但均無顯著性差異(P>0.05);非飲用期(14 d后),僅處理Ⅱ28、42 d體重有所提高,分別提高34.54、90.13 g,亦無顯著性差異(P>0.05)。處理Ⅰ與處理Ⅱ各日齡體重相比,處理Ⅱ體重均偏高,但差異不顯著(P>0.05)。
表2 環(huán)二肽對肉雞體重的影響結果 g
從表3可以看出,處理組與對照組日增重相比,0~7 d內(nèi)處理Ⅱ較對照組略高,處理Ⅰ略低;7~14 d處理組均略高于對照組,處理Ⅱ較明顯;14~21 d兩處理組均低于對照組;21~28 d兩處理均高于對照組,處理Ⅱ較明顯;28~42 d兩處理均高于對照組,處理Ⅰ略明顯。從全期來看(0~42 d),處理組均略高于對照組,處理Ⅱ略明顯,但總體不同組各階段日增重之間及全期日增重之間均無顯著性差異(P>0.05)。
表3 環(huán)二肽對肉雞日增重的影響結果g
2.2 環(huán)二肽對肉雞營養(yǎng)物質消化率的影響 從表4可以看出,不同處理組粗蛋白質、粗脂肪、鈣、磷的消化率均明顯高于對照組(P<0.05),處理Ⅰ分別較對照組高2.74、7.07、4.4、1.46個百分點(P<0.05),處理Ⅱ分別較對照組高3.81、9.10、6.75、2.03個百分點(P<0.05),處理Ⅱ均略高于處理Ⅰ(P>0.05)。
2.3 環(huán)二肽對肉雞屠宰性能的影響 從表5可以看出,從屠宰性能各指標整體來看,除處理Ⅱ腹脂率較對照組低0.55個百分點,呈顯著性差異(P<0.05)外,其他指標各處理組與對照組之間,處理組之間均無顯著性差異。通過數(shù)據(jù)比較計算,處理Ⅱ屠體重、半凈膛重、全凈膛重、胸肌重、腿肌重、翅膀重均一定程度高于對照組,分別高125.30、105.60、102.30、49.60、29.40、18.80 g,腹脂重低8.60 g;處理Ⅰ屠體重、半凈膛重、全凈膛重、胸肌重、翅膀重分別較對照組高77.70、31.30、25.10、35.60、2.80 g,腿肌重、腹脂重分別低0.20、1.60 g;處理Ⅱ屠宰率、半凈膛率、全凈膛率較對照組分別低2.67、2.65、1.81個百分點,胸肌率、腿肌率、翅膀率分別高1.12、0.52、0.38個百分點;處理Ⅰ屠宰率、半凈膛率、全凈膛率、腿肌率較對照組分別低0.41、1.83、1.63、0.20個百分點,胸肌率與翅膀率分別高5.98、0.01個百分點。
2.4 環(huán)二肽對肉雞生產(chǎn)性能及經(jīng)濟效益的影響
2.4.1 環(huán)二肽對生產(chǎn)性能的影響 從表6可以看出,同為42 d出欄肉雞,雞群健康情況下各處理組與對照組之間、各處理組之間的成活率、均重均無顯著性差異,處理Ⅰ、處理Ⅱ較對照組料重比分別降低0.05、0.06,歐指分別提高9.16、10.30。從表7可以看出,在發(fā)生支氣管堵塞疾病情況下,各指標均呈現(xiàn)不同程度差異,處理Ⅰ、處理Ⅱ較對照組成活率分別提高4.51、7.58個百分點,歐指分別高25.60、29.47;處理Ⅰ、處理Ⅱ較對照組均重分別低0.21、0.10 kg;料重比方面,處理Ⅰ、處理Ⅱ較對照組分別低0.14、0.04。
表6 正常生產(chǎn)情況下生產(chǎn)性能結果
表7 疾病生產(chǎn)情況下生產(chǎn)性能結果
從圖1中可以看出,雞群健康情況下,處理Ⅰ、處理Ⅱ成活率變化曲線與對照組相比是一致的;從圖2中可以看出,當雞群發(fā)生支氣管堵塞(20 d開始發(fā)病)時,20 d之前各處理組與對照組曲線基本是一致的,發(fā)病后處理Ⅰ、處理Ⅱ明顯比對照組死亡率偏低。
圖1 健康情況下肉雞成活率變化趨勢圖
圖2 疾病情況下肉雞成活率變化趨勢圖
2.4.2 環(huán)二肽對經(jīng)濟效益的影響 按照表6~9數(shù)據(jù)計算,不同環(huán)二肽水平對肉雞健康與疾病條件下經(jīng)濟效益的影響差異。在雞群正常即健康情況下,處理I與處理II與對照組相比單只效益未見優(yōu)勢;在疾病情況下,處理I與處理II分別較對照組高0.14、1.66元。
表8 正常生產(chǎn)情況下經(jīng)濟效益分析結果元
表9 疾病生產(chǎn)情況下經(jīng)濟效益分析結果元
3.1 環(huán)二肽對生產(chǎn)性能的影響 環(huán)二肽已被證明具有抗真菌、抗細菌、抗腫瘤、抑制毒素、鎮(zhèn)痛;增強免疫和抗炎癥 (Balachandra等,2021;Ferro等,2015)等多種重要的生物活性,并顯示明顯的抗酶水解(Scarel等,2021),以及能夠作為潛在載體幫助穿透血腦屏(Scarel等,1997)等其他潛在用途。另外,環(huán)二肽抗菌機制呈現(xiàn)多樣性和復雜性,更不易導致致病菌耐藥性,被認為是極具前景的新型抗菌物質之一(楊子娟等,2009)。隨著對環(huán)二肽研究的不斷深入,其應用價值將不斷被發(fā)現(xiàn)。劉衛(wèi)東等(2019)通過在于肉雞日糧中添加復合小肽制劑,使肉雞終末體重和日均增重得到顯著或極顯著提高的報道。本研究發(fā)現(xiàn),不同水平環(huán)二肽對肉雞體重、0~42 d全期平均日增重均有一定程度提高,0~14 d添加量為2 L/t的處理組更明顯,但均未達顯著性水平,料重比、歐指亦無顯著性變化,而粗蛋白質、粗脂肪、鈣、磷的消化率處理組明顯高于對照組(P<0.05),表明環(huán)二肽有提高肉雞生長性能的潛質。營養(yǎng)物質消化率高,但體重、日增重等生產(chǎn)性能指標未呈顯著性差異,可能與肉雞高密度,采食量受限(賀衛(wèi)華等,2019),肉雞生長性能未能正常發(fā)揮有關。另外,鄧華彬(2019)報道稱小肽具有促進動物腸道生長發(fā)育,協(xié)調(diào)各種養(yǎng)分的利用,提高動物生產(chǎn)性能的作用。黃冠慶等(2009)研究結果表明,三種濃度的小肽均能提高黃羽肉雞平均日增重,顯著降低料重比,環(huán)二肽屬于小肽,在發(fā)揮其活性的同時,可能具有提高生產(chǎn)性能的作用。在不同階段日增重的變化趨勢來看,14~21日齡段處理組較對照組均有所偏低,可能與環(huán)二肽停止飲用或階段性換料有關,造成暫時的增重降低。
3.2 環(huán)二肽對肉雞屠宰性能的影響 從環(huán)二肽對肉雞屠宰性能結果可以發(fā)現(xiàn),兩處理組對屠體重、半凈膛重、全凈膛重、胸肌重、翅膀重有提高的趨勢,尤其是處理Ⅱ較明顯,但均無顯著性差異(P>0.05);屠宰率、半凈膛率、全凈膛率等指標無規(guī)律性變化;處理Ⅱ腹脂率較對照組顯著降低(P<0.05)?,F(xiàn)代商業(yè)肉雞品種絕大多數(shù)脂肪并非生理所需,不但浪費飼料,還會直接影響肉產(chǎn)品的加工,而且會降低屠宰率和經(jīng)濟效益(郎倩倩等,2019)。黃冠慶等(2009)在1 d黃羽肉雞的基礎日糧中分別添加0.1%、0.5%和1.0%三種不同濃度的植物小肽,結果表明三種濃度的小肽均能顯著降低腹脂率和皮下脂肪厚度。王志江(2014)研究表明,環(huán)二肽可通過調(diào)控脂肪酸和膽固醇代謝,實現(xiàn)降血脂功效。本研究結果表明一定水平環(huán)二肽對脂肪代謝可能有一定影響,與前人研究結果相近。
3.3 環(huán)二肽對不同生產(chǎn)情況下經(jīng)濟效益的影響肉雞生產(chǎn)性能的充分發(fā)揮跟經(jīng)濟效益有直接關系。本研究表明,在雞群健康時,各處理組成活率、均重與對照組相比均無顯著性差異,但料重比、歐指有一定程度改善;而在疾病發(fā)生的雞群處理組成活率、歐指明顯提高,但均重與料重比未呈優(yōu)勢,這可能與環(huán)二肽的抗菌、抗病毒、提高免疫力等功效的發(fā)揮,雞只發(fā)病時間、死淘率差異,導致后期雞只密度改變,進而降低高密度對雞群采食量的限制等因素有關。劉衛(wèi)東等(2019)研究發(fā)現(xiàn)日糧中添加復合小肽制劑,料重比、腹瀉率、呼吸道病發(fā)病率和死亡率得到顯著或極顯著降低,與本研究結果一致。通過經(jīng)濟效益的對比,雞群發(fā)生支氣管堵塞疾病時比雞群健康時效果更明顯,尤其是處理Ⅱ,表明環(huán)二肽的添加與否及劑量均和生產(chǎn)性能、經(jīng)濟效益有直接關系。
本試驗結果表明:(1)0~14 d添加量為2 L/t的處理組在白羽肉雞飼養(yǎng)密度為19.05只/m2、代替部分抗生素的情況下,可提高肉雞抵御疾病的能力,降低養(yǎng)殖過程死淘率。因發(fā)揮效果與添加劑量有直接關系,可根據(jù)疾病流行發(fā)生情況,酌情添加。(2)環(huán)二肽能有效提高營養(yǎng)物質的表觀消化率,具有提高生長性能的潛力。