基于熵權(quán)-層次分析法及反向傳播神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)多指標(biāo)優(yōu)化地黃水提物提取工藝

祝子喻，謝雨欣，俞月婷，張 梅

（省部共建西南特色中藥資源國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，成都中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，四川成都 610000）

地黃（Libosch），玄參科植物的新鮮或干燥塊根，具有清熱涼血、養(yǎng)陰生津等功效?！渡褶r(nóng)本草經(jīng)》中記載地黃有“久服，輕身不老”的作用，主要含有環(huán)烯醚萜類、苯乙醇苷類、糖類、核苷類等成分。中國國家衛(wèi)生部于2002 年將其列入可用于保健食品的名單。地黃常以水煎的形式用于臨床和生活中，研究表明地黃水提物對糖尿病、糖尿病性肌萎縮、抑郁癥、骨質(zhì)流失等疾病有潛在治療效果，具有開發(fā)利用價(jià)值和研究意義。

目前地黃提取工藝研究多數(shù)僅以多糖、梓醇等單個(gè)成分含量作為評價(jià)指標(biāo)，而以多項(xiàng)指標(biāo)開展綜合評價(jià)的工藝研究鮮見報(bào)道。研究表明，環(huán)烯醚萜苷類為地黃主要功效成分，其中梓醇、地黃苷D 和益母草苷不僅為地黃原型入血成分，還具有廣泛的生理活性，如降糖、抗炎、抗腫瘤等，故本研究將這三種成分確立為評價(jià)指標(biāo)。地黃多糖類成分具有抗炎、抑制血管鈣化等作用，因此和水溶性浸出物一起被納入評價(jià)指標(biāo)。此外，相較于回流、浸提等傳統(tǒng)提取方法，超聲提取憑借其快速便捷，提取效率高等優(yōu)勢在地黃提取工藝中得到廣泛使用。

多指標(biāo)多因素提取工藝研究常采用正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)，具有高效經(jīng)濟(jì)的優(yōu)勢，但存在取樣點(diǎn)有限，不夠全面的問題?？陀^賦權(quán)法熵權(quán)法（Entropy Weight Method，EWM）和主觀賦權(quán)法層次分析法（Analytic Hierarchy Process，AHP）常應(yīng)用于多指標(biāo)問題研究，將兩者結(jié)合，既能通過主觀經(jīng)驗(yàn)對指標(biāo)重要性進(jìn)行排序分配，又能客觀反映指標(biāo)信息，使權(quán)重系數(shù)更加科學(xué)合理。反向傳播神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)（Back Propagation Neural Network,BPNN）對此類多維非線性問題展現(xiàn)出良好解決能力，利用BPNN 建立模型，可以模擬范圍內(nèi)多個(gè)點(diǎn)，彌補(bǔ)正交試驗(yàn)的不足，從而進(jìn)行全局尋優(yōu)，更好地反映不同因素不同水平對提取物質(zhì)量的影響。

因此，本研究以梓醇、地黃苷D、益母草苷、多糖含量及水溶性浸出物為評價(jià)指標(biāo)，引入EWM 和AHP 確定權(quán)重系數(shù)，利用BPNN 在正交試驗(yàn)基礎(chǔ)上建立模型，從而多維度評價(jià)并優(yōu)化地黃水提物提取工藝，為相關(guān)研究提供新思路和新案例。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

地黃藥材 2021 年7 月購于四川省成都市荷花池市場，經(jīng)成都中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院裴瑾教授鑒定為玄參科植物地黃（Libosch.）的干燥根莖，生產(chǎn)批號(hào)：20 210703；梓醇對照品（批號(hào)MUST-18103011，純度≥98%）成都曼思特生物科技有限公司；地黃苷D 對照品（批號(hào)DSTDD010701，純度≥98%）、益母草苷對照品（批號(hào)DSTDY016301，純度≥98%）樂美天醫(yī)藥德思特生物有限公司、D-葡萄糖對照品（批號(hào)PS1231-0100，純度≥98%）成都普思生物科技股份有限公司；乙腈 色譜純，美國fisher 公司。

TU-1901 型雙光束紫外可見分光光度計(jì) 北京普析通用儀器有限責(zé)任公司；DHG-9023A 型電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱 上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司；JY-10 型超聲波清洗機(jī) 湖北鼎泰生化科技設(shè)備制造有限公司；BT25S 型十萬分之一電子天平 北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 HPLC 法測定梓醇、地黃苷D、益母草苷含量

1.2.1.1 色譜條件 根據(jù)參考文獻(xiàn)[24]，色譜柱為中譜AQ-C柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），流動(dòng)相為乙腈-水，梯度洗脫：0～10 min，1%乙腈；10～13 min，1%～4%乙 腈；13～31 min，4%乙 腈；31～34 min，4%～1%乙腈；波長：203 nm；流速0.8 mL/min，進(jìn)樣量10 μL，理論塔板數(shù)不低于5000。

1.2.1.2 對照品溶液的制備 分別取梓醇、地黃苷D 和益母草苷對照品適量，精密稱定，置于5 mL 量瓶中，加水溶解并定容至刻度，搖勻，得梓醇、地黃苷D 和益母草苷濃度為3.045、0.580、1.750 mg/mL 的對照品溶液。

1.2.1.3 供試品溶液的制備 綜合參考文獻(xiàn)[11,25-26]，取粉碎后過60 目篩的細(xì)粉，取約1 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入25 mL 水，稱定重量，在超聲功率40 kHz，超聲溫度60 ℃下提取1 h，室溫下放冷，再稱定重量，用純水補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，精密量取濾液1 mL，即得。

1.2.1.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 精密吸取“1.2.1.2”項(xiàng)下的對照品溶液，將其分別稀釋0、2、4、8、16、32 倍，再分別吸取10 μL 于高效液相色譜儀測定，以各待測成分的峰面積（y）對進(jìn)樣濃度（x，μg/mL）繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

1.2.1.5 方法學(xué)考察 結(jié)合參考文獻(xiàn)[24]，對HPLC法進(jìn)行精密度、重復(fù)性、穩(wěn)定性、加樣回收率的方法學(xué)考察。

1.2.1.6 含量測定 取各提取物溶液，在上述所建立色譜條件下進(jìn)行HPLC 測定，記錄峰面積。根據(jù)線性回歸方程，采用外標(biāo)法根據(jù)下方公式計(jì)算3 個(gè)成分的含量。

式（1）中，：指標(biāo)成分含量，mg/g；C：通過線性回歸方程得到的指標(biāo)成分質(zhì)量濃度，mg/mL；D：各指標(biāo)成分供試品的稀釋倍數(shù)；m：各供試品稱樣量，g。

1.2.2 紫外分光光度法測定多糖含量 采用苯酚-硫酸法測定多糖含量，取D-葡萄糖對照品適量，精密稱定并定容至25 mL，得每1 mL 含D-葡萄糖119.2 μg的對照品溶液。精密量取對照品溶液0.1、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 mL，加水至2 mL，加入5 %苯酚溶液1 mL，搖勻，迅速加入濃硫酸5 mL，放冷至室溫，再置90 ℃水浴中加熱15 min，取出，冷卻5 min。以相應(yīng)試劑為空白，參照紫外-可見分光光度法，在490 nm 的波長處測定吸光度，以濃度（X）對吸光度（Y）作線性回歸。根據(jù)參考文獻(xiàn)[25]制備供試品溶液，取1.2.1.3 項(xiàng)下濾液1 mL，加入4 倍量的無水乙醇，在4 ℃冰箱中醇沉12 h，5000 r/min 離心過濾10 min，將得到的多糖沉淀加50 ℃熱水溶解，定容至5 mL 即得。同時(shí)根據(jù)上述條件進(jìn)行精密度、重復(fù)性、穩(wěn)定性、加樣回收率的方法學(xué)考察。

取供試品溶液適量，依法測定吸光度，供試品多糖含量按照下式計(jì)算。

式（2）中，：多糖成分含量，mg/g；C：通過多糖線性回歸方程得到的多糖質(zhì)量濃度，mg/mL；D：多糖的稀釋倍數(shù)；m：各供試品稱樣量，g。

1.2.3 水溶性浸出物得率測定 精密吸取各提取液，置烘干恒重的蒸發(fā)皿中，水浴蒸干后，置烘箱105 ℃干燥3 h，取出后置干燥器中冷卻30 min 迅速稱重。水溶性浸出物的質(zhì)量和原藥材質(zhì)量的比即為水溶性浸出物得率，按照下式計(jì)算。

式（3）中，：水溶性浸出物得率，g/g；M：水溶性浸出物質(zhì)量，g；m：各供試品稱樣量，g。

1.2.4 地黃水提物提取工藝單因素實(shí)驗(yàn) 因?yàn)殍鞔己投嗵菫榈攸S常見有效成分，因此單因素考察選擇梓醇、多糖含量作為評價(jià)指標(biāo)，固定因素水平為提取溫度為60 ℃，提取1.0 h，料液比1:25 g/mL，在進(jìn)行單因素考察時(shí)，保持其他固定水平不變，分別考察不同料液比（1:10、1:25、1:50、1:100 g/mL）、超聲溫度（50、55、60、65、70 ℃）、提取時(shí)間（0.5、1、1.5、2、2.5 h）對梓醇、多糖含量的影響。

1.2.5 地黃水提物提取工藝正交試驗(yàn)優(yōu)化 基于單因素考察結(jié)果，確定地黃正交工藝考察因素水平，以梓醇、地黃苷D、益母草苷3 種指標(biāo)成分含量，地黃多糖含量，水溶性浸出物得率為綜合評分指標(biāo)，設(shè)計(jì)正交試驗(yàn)（表1）。制備提取液供試品，按“1.2.1.6”“1.2.2”“1.2.3”項(xiàng)下方法測定各部分指標(biāo)。

表1 地黃提取工藝正交試驗(yàn)因素水平Table 1 Factors level of orthogonal test of Rehmannia glutinosa extraction process

1.3 數(shù)據(jù)處理及實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證

每個(gè)實(shí)驗(yàn)均平行3 次；數(shù)據(jù)繪圖采用Origin 2022學(xué)生版軟件；方差分析使用SPSS 25 軟件；EWM、AHP法以及EWM-AHP 法使用Microsoft Excel 2016 計(jì)算；BPNN 模型采用MATLAB R2016b 建立并分析。

1.3.1 EWM 法確定權(quán)重 EWM 法確定權(quán)重需要經(jīng)過標(biāo)準(zhǔn)化（式4），歸一化（式5），計(jì)算信息熵（式6），最后得到指標(biāo)權(quán)重（式7）。

式中，Y表示第i 次實(shí)驗(yàn)時(shí)第j 個(gè)評價(jià)指標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)化后的值，Y表示第i 次試驗(yàn)時(shí)第j 個(gè)評價(jià)指標(biāo)的歸一化值，n 表示試驗(yàn)次數(shù)，S表示第j 個(gè)評價(jià)指標(biāo)的信息熵值，W表示第j 個(gè)評價(jià)指標(biāo)的熵權(quán)值。

1.3.2 AHP 法確定權(quán)重 AHP 根據(jù)各指標(biāo)重要性主觀賦予數(shù)值，將復(fù)雜多指標(biāo)系統(tǒng)層次化后再通過逐層比較進(jìn)行分析。在計(jì)算中，一致性比值（Consistency Ratio,CR）小于0.1 表明矩陣具有一致性，數(shù)值設(shè)置以及權(quán)重系數(shù)可靠。按照常見指標(biāo)成分及其重要性進(jìn)行排序：梓醇=多糖＞地黃苷D＞益母草苷＞水溶性浸出物，并賦值組成判斷矩陣A（表2）。根據(jù)參考文獻(xiàn)[30]，先將判斷矩陣每一列歸一化（式8），隨后按行相加（式9），再將得到的結(jié)果歸一化（式10）可得所求的權(quán)重向量。通過計(jì)算判斷矩陣的最大特征根（式11）進(jìn)而求出CR 值（式12）。

表2 指標(biāo)成對比較的判斷優(yōu)先矩陣Table 2 Judgment precedence matrix for paired comparison of indicators

式中，a表示判斷矩陣A 中第i 行第j 個(gè)指標(biāo)的值；a表示判斷矩陣A 第j 個(gè)指標(biāo)所在第K 列的求和值；K 表示列數(shù)；m 表示指標(biāo)成分個(gè)數(shù)；q表示a 矩陣中第i 行第j 個(gè)指標(biāo)的按列歸一化后的值；r表示將q 矩陣第i 行相加的值；r表示將q 矩陣第j 行列相加的值；r 表示所求的權(quán)重值；λ表示判斷矩陣A 的最大特殊根；CR 表示一次性比值；1.12 為常數(shù)，表示m=5 時(shí)的平均隨機(jī)一致性指標(biāo)。

1.3.3 EWM-AHP 法確定權(quán)重及綜合得分計(jì)算 按下式計(jì)算EMW-AHP 法復(fù)合權(quán)重，并通過復(fù)合權(quán)重計(jì)算提取物綜合得分。

式中：r 和w分別為EWM 及AHP 法所得權(quán)重系數(shù)；F表示各個(gè)相應(yīng)指標(biāo)的EWM-AHP 復(fù)合權(quán)重。

式中，Z 代表EWM-AHP 復(fù)合評分，F(xiàn)代表各指標(biāo)相對應(yīng)的EWM-AHP 復(fù)合權(quán)重。

1.3.4 BPNN 優(yōu)選工藝 使用MATLAB R2016b 軟件進(jìn)行BPNN 建模以及工藝尋優(yōu)，本實(shí)驗(yàn)使用3 層結(jié)構(gòu)BPNN，輸入節(jié)點(diǎn)為正交考察工藝因素，輸出節(jié)點(diǎn)為EWM-AHP 法綜合得分，構(gòu)建網(wǎng)絡(luò)并訓(xùn)練，以實(shí)測值和網(wǎng)絡(luò)預(yù)測值進(jìn)行回歸分析評價(jià)模型性能。根據(jù)正交考察因素，設(shè)置不同的輸入，通過建立的BPNN映射關(guān)系進(jìn)行評分預(yù)測，選擇最高評分為BPNN 優(yōu)選工藝。

1.3.5 提取工藝驗(yàn)證 以BPNN 優(yōu)選工藝及正交試驗(yàn)優(yōu)選工藝為基礎(chǔ)，分別平行提取3 份，篩選最佳提取工藝。

2 結(jié)果與分析

2.1 梓醇、地黃苷D、益母草苷以及多糖含量測定

2.1.1 梓醇、地黃苷D、益母草苷、多糖線性關(guān)系“1.2.1.1”項(xiàng)色譜條件下對照品及樣品的色譜圖顯示梓醇、地黃苷D、益母草苷在檢測波長下分離良好，與對照品保留時(shí)間相同，見圖1。

圖1 地黃供試品溶液（A）與混合對照品溶液（B）HPLC 色譜圖Fig.1 HPLC chromatograms of test solution (A) and mixed reference solution (B) of Rehmannia glutinosa注：1.梓醇；2.地黃苷D；3.益母草苷。

“1.2.1.4”以及“1.2.2”項(xiàng)下分別得到梓醇、地黃苷D、益母草苷、多糖的回歸方程、相關(guān)系數(shù)（）及線性范圍，見表3，顯示梓醇、地黃苷D、益母草苷分別在0.034～1.047、0.037～1.141、0.048～1.390 mg/mL范圍內(nèi)與色譜峰面積呈良好的線性關(guān)系，多糖在0.005096～0.05960 mg/mL 范圍內(nèi)與吸光度值呈良好的線性關(guān)系。

表3 線性關(guān)系考察結(jié)果Table 3 Linear relationship examination results

2.1.2 梓醇、地黃苷D、益母草苷、多糖方法學(xué)考察結(jié)果 “1.2.1.5”以及“1.2.2”項(xiàng)下測得梓醇、地黃苷D、益母草苷、多糖的精密度、重復(fù)性、穩(wěn)定性和加樣回收率結(jié)果見表4。結(jié)果表明梓醇、地黃苷D、益母草苷以及多糖含量測定方法的精密度和重復(fù)性良好，供試品溶液在12 h 內(nèi)穩(wěn)定，加樣回收率合格，方法可靠，符合定量分析的要求。

表4 精密度、重復(fù)性、穩(wěn)定性和加樣回收率結(jié)果Table 4 Precision,repeatability,stability and recovery results

2.2 單因素實(shí)驗(yàn)

如圖2A 所示，隨著料液比的增加，梓醇和多糖含量均呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢，推測可能是料液比增加到一定程度后，二者物質(zhì)溶出達(dá)到限量，而當(dāng)料液比過高時(shí)，物質(zhì)與溶出的雜質(zhì)充分接觸，結(jié)構(gòu)發(fā)生變化，從而導(dǎo)致含量下降。梓醇在料液比1:50 g/mL時(shí)達(dá)到峰值，多糖在料液比1:25 g/mL 的時(shí)候達(dá)到峰值，由于梓醇含量變化趨勢較大，多糖含量變化趨勢較小，選擇1:25、1:50、1:100 g/mL 進(jìn)行后續(xù)考察。

如圖2B 所示，隨著時(shí)間的增加，提取物中梓醇含量呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢，在1 h 時(shí)梓醇含量達(dá)到峰值，結(jié)合田春蓮等的研究，推測可能是因?yàn)殍鞔疾环€(wěn)定，超聲時(shí)間越長越容易破壞結(jié)構(gòu)。多糖含量隨時(shí)間變化略有上升，在2 h 達(dá)到峰值后下降，與張駱琪等的結(jié)果一致，但其含量波動(dòng)不明顯，綜合考慮，選擇0.5、1、1.5 h 進(jìn)行后續(xù)考察。

如圖2C 所示，提取物中梓醇含量隨溫度增加而上升，60 ℃后趨于下降，梓醇對熱不穩(wěn)定，超聲溫度過高可能會(huì)導(dǎo)致梓醇分解，這一現(xiàn)象與熊輝等研究結(jié)果一致，而多糖含量在這幾個(gè)溫度下無較大差異。因此，選擇50、55、60 ℃進(jìn)行后續(xù)考察。

圖2 單因素實(shí)驗(yàn)結(jié)果Fig.2 Results of single factor study

2.3 正交試驗(yàn)優(yōu)化工藝

EWM 最大優(yōu)點(diǎn)是避免了主觀因素，得到的權(quán)重更具客觀性。AHP 法優(yōu)勢在于定量表達(dá)評價(jià)人員的主觀判斷?；趩我蛩乜疾旖Y(jié)果，提取溫度（A）、提取時(shí)間（B）、料液比（C）為考察因素，D 項(xiàng)為設(shè)置的誤差項(xiàng)。正交試驗(yàn)各指標(biāo)含量結(jié)果見表5。EWM 法、AHP 法以及EWM-AHP 法所得多指標(biāo)權(quán)重系數(shù)見表6。比較EWM 法、AHP 法以及EWM-AHP 法三者得到的權(quán)重系數(shù)值發(fā)現(xiàn)，EWM 法雖避免了人為影響因素，但地黃苷D 權(quán)重?cái)?shù)值過大，忽視了指標(biāo)間的輕重關(guān)系；AHP 法中梓醇和多糖的權(quán)重遠(yuǎn)高于水溶性浸出物，可能是因?yàn)榫仃囍械摹暗箶?shù)”賦值而出現(xiàn)的“意見放大”現(xiàn)象。二者結(jié)合以后，降低了單一方法帶來的分析偏差，使評分更全面、公正、符合實(shí)際。

表5 地黃提取工藝L9(34)正交試驗(yàn)結(jié)果Table 5 Orthogonal test results of extraction technology L9(34)of Rehmannia glutinosa

表6 EWM、AHP、EWM-AHP 法權(quán)重系數(shù)Table 6 EWM,AHP and EWM-AHP weight coefficient

表7 顯示，運(yùn)用EWM-AHP 復(fù)合評分結(jié)果分析C＞A＞B，即各因素對EWM-AHP 復(fù)合評分的影響為料液比＞提取溫度＞提取時(shí)間。由A＞A＞A，B＞B＞B，C＞C＞C可知最佳工藝為ABC，即每1 g 地黃粉末，用25 mL 純水提取，在提取溫度50 ℃條件下提取1 h。方差結(jié)果（表8）表明，各因素對EWM、AHP 法以及EWM-AHP 法中綜合評分影響程度較小，無顯著性差異＞0.05。

表7 EWM -AHP 法復(fù)合評分的正交結(jié)果Table 7 Orthogonal results of EWM-AHP composite scoring method

表8 方差分析Table 8 Analysis of variance

2.4 BPNN 數(shù)據(jù)分析

2.4.1 BPNN 模型建立 本實(shí)驗(yàn)采用3 層結(jié)構(gòu)的BPNN 建立模型，輸入節(jié)點(diǎn)數(shù)為3 個(gè)，即超聲溫度（A）、超聲時(shí)間（B）、料液比（C），輸出節(jié)點(diǎn)數(shù)為1 個(gè)，即綜合評分。原理見圖3。

圖3 BPNN 結(jié)構(gòu)示意圖Fig.3 Schematic diagram of BPNN structure

2.4.2 BPNN 網(wǎng)絡(luò)訓(xùn)練及參數(shù) 采用上述確定的BP 網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)，使用MATLAB R2016b 軟件的神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)工具包，建立工藝參數(shù)矩陣為輸入，綜合評分矩陣為輸出，其余采用默認(rèn)設(shè)置，成功建立一個(gè)隱含層為10 的BP 模型，得到各因素水平與地黃多指標(biāo)評分的映射關(guān)系。網(wǎng)絡(luò)的訓(xùn)練均方誤差曲線見圖4，正交數(shù)據(jù)實(shí)測值與預(yù)測值的比較見圖5，表明該網(wǎng)絡(luò)模型性能良好，能夠有效預(yù)測不同工藝下地黃提取物的綜合得分。

圖4 BPNN 均方差Fig.4 Mean square error of BPNN

圖5 BPNN 可靠性驗(yàn)證Fig.5 Reliability verification of BPNN

2.4.3 BPNN 預(yù)測最佳工藝 BPNN 應(yīng)用廣泛，具有優(yōu)良的映射能力，可對多維非線性因素進(jìn)行仿真模擬以及篩選優(yōu)化，將其與傳統(tǒng)正交試驗(yàn)結(jié)合，基于少量實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)即可準(zhǔn)確預(yù)測范圍內(nèi)的所有條件，簡單便捷。在正交試驗(yàn)參數(shù)基礎(chǔ)上，設(shè)置地黃提取物提取溫度50～60 ℃（步長5 ℃），提取時(shí)間30～90 min（步長10 min），料液比0.04（1:25 g/mL）～0.01（1:100 g/mL）（步長0.01），通過所建立的模型計(jì)算復(fù)合評分，預(yù)測評分結(jié)果見表9，將分?jǐn)?shù)從低到高排列。從表中可以看到，三種因素的交互影響導(dǎo)致預(yù)測評分變化的復(fù)雜性，選擇表7 EWM-AHP 復(fù)合評分中的最高評分94.71 為最小值進(jìn)行篩選后分析（表9 序號(hào)78～84），可以看出，隨著超聲溫度的上升，超聲時(shí)間也隨之延長才能保持分?jǐn)?shù)穩(wěn)定；當(dāng)料液比為0.03（1:33 g/mL）時(shí)，分?jǐn)?shù)數(shù)值穩(wěn)定且高分?jǐn)?shù)量明顯多于其他參數(shù)。BPNN 預(yù)測最佳工藝為料液比1:33 g/mL，在60 ℃下超聲70 min。

表9 BPNN 預(yù)測數(shù)據(jù)Table 9 Prediction data of BPNN

2.5 工藝驗(yàn)證

正交試驗(yàn)所得最佳工藝參數(shù)為提取溫度50 ℃，加25 倍水，提取1 h；BPNN 優(yōu)化工藝為在60 ℃下，加33 倍水，提取70 min。二者驗(yàn)證結(jié)果見表10，比較發(fā)現(xiàn)BPNN 優(yōu)化工藝評分最高，表明BPNN 預(yù)測結(jié)果較為可靠，可用于提取工藝優(yōu)化。

表10 工藝驗(yàn)證結(jié)果（,n=3）Table 10 Process verification results (,n=3)

3 結(jié)論

本研究選擇地黃中三種有效成分梓醇、地黃苷D、益母草苷以及多糖、水溶性浸出物為評價(jià)指標(biāo)，在單因素考察基礎(chǔ)上進(jìn)行正交試驗(yàn)，通過EWMAHP 法得到各指標(biāo)對應(yīng)權(quán)重，計(jì)算綜合得分，再利用BPNN 在正交結(jié)果上進(jìn)行建模。比較BPNN 以及正交試驗(yàn)優(yōu)選工藝，結(jié)合驗(yàn)證發(fā)現(xiàn)BPNN 優(yōu)選工藝最優(yōu)，即在60 ℃下，加33 倍水，提取70 min，綜合得分為97.74。研究結(jié)果表明，BPNN 模型預(yù)測可靠，可有效優(yōu)化提取工藝，為提取物工藝優(yōu)化提供了新的研究思路。