長(zhǎng)春地區(qū)血漿凝血酶激活纖溶抑制物參考區(qū)間的建立

張 勤，姚瀚鑫，劉玲玲，劉 娟

(吉林大學(xué)第一醫(yī)院 檢驗(yàn)科，吉林 長(zhǎng)春130021)

凝血酶激活纖溶抑制物(TAFI)是一種由肝臟合成的，具有羧肽酶活性的單鏈糖蛋白，分子量60 kD，于1989年被Hendrik等發(fā)現(xiàn)及報(bào)道[1]。TAFI以酶原的形式存在于血漿中，可被凝血酶、纖溶酶、凝血酶-血栓調(diào)節(jié)蛋白等物質(zhì)激活，激活的TAFI具有內(nèi)在的不穩(wěn)定性。1995年Bajzar等人發(fā)現(xiàn)TAFI可使凝血塊的纖溶時(shí)間延長(zhǎng)，具有抑制纖維蛋白溶解的作用[2]。在凝血和纖溶的過(guò)程中，活化的TAFI通過(guò)剪切纖維蛋白羧基端賴氨酸殘基阻止纖維蛋白降解，抑制纖溶酶的活化[3]。因此，人血漿中TAFI含量的監(jiān)測(cè)，對(duì)反映體內(nèi)凝血及纖溶系統(tǒng)是否異常具有重要的臨床意義。本研究旨在建立符合本地區(qū)實(shí)驗(yàn)室健康人TAFI的參考區(qū)間，為臨床疾病的早期診斷、治療監(jiān)測(cè)、預(yù)后判斷提供客觀依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 一般資料收集2018年10月—2019年7月在吉林大學(xué)第一醫(yī)院體檢中心體檢的健康成年人。體檢項(xiàng)目：包括內(nèi)科檢查，CT檢查，超聲檢查，胸片檢查，心電圖，肝功能、腎功能、血脂、血糖檢查，血常規(guī)，尿常規(guī)，腫瘤標(biāo)志物檢查等。臨床排除標(biāo)準(zhǔn)：無(wú)家族遺傳疾病史，無(wú)心腦血管疾病，組織或器官?zèng)]有嚴(yán)重的出血癥狀，所有體檢項(xiàng)目均正常，體檢確診為健康者。篩選出符合臨床標(biāo)準(zhǔn)的246例個(gè)體，年齡20-60歲，其中男124例，女122例。樣本無(wú)溶血、脂血、黃疸或混濁現(xiàn)象。

1.2 標(biāo)本采集受試者使用EDTA-K2抗凝的真空采血管采集靜脈血3 ml，上下顛倒混勻8次。樣本收集后應(yīng)盡快分離血漿以避免溶血。血漿樣本應(yīng)及時(shí)檢測(cè)，如不能及時(shí)測(cè)定，在2-8℃冷藏保存1天；超過(guò)1天者在-20℃保存。

1.3 質(zhì)量控制本實(shí)驗(yàn)室在2012年通過(guò)中國(guó)國(guó)家合格評(píng)定委員會(huì)醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量與能力認(rèn)可。所使用標(biāo)準(zhǔn)品與質(zhì)控品均為配套試劑所提供，每次進(jìn)行試驗(yàn)前，均做定標(biāo)和質(zhì)控，確保試驗(yàn)的準(zhǔn)確性。

1.4 方法與試劑TAFI測(cè)定采用遼寧邁迪生物科技股份有限公司生產(chǎn)的TAFI定量檢測(cè)試劑盒，檢測(cè)方法為免疫比濁法，使用日立全自動(dòng)生化分析儀7600-210進(jìn)行測(cè)定。

2 結(jié)果

2.1 正態(tài)性檢驗(yàn)采用Dixon法判斷TAFI的D/R值均小于1/3，故無(wú)離群值；根據(jù)TAFI檢測(cè)數(shù)據(jù)進(jìn)行Kolmogorov-Smirnov正態(tài)性檢驗(yàn)，結(jié)果無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)，為正態(tài)分布。

2.2 TAFI在不同性別組間的結(jié)果比較經(jīng)t檢驗(yàn)，男女性別組之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，因此無(wú)需按照男女分組建立TAFI參考區(qū)間，見(jiàn)表1。

表1 不同性別組TAFI結(jié)果的比較

2.3 TAFI在不同年齡組間的結(jié)果比較經(jīng)單因素方差分析，TAFI在年齡組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=0.449，P=0.718)，因此無(wú)需按照年齡分組建立TAFI參考區(qū)間，見(jiàn)表2。

表2 不同年齡組TAFI結(jié)果的比較

2.4 TAFI參考區(qū)間的建立TAFI無(wú)需按照性別和年齡建立參考區(qū)間，對(duì)整體數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析，TAFI水平為27.54±3.92；采用95%置信區(qū)間(95%CI)表示，長(zhǎng)春地區(qū)健康成年人 TAFI參考區(qū)間為19.86-35.22 μg/mL。

3 討論

在正常機(jī)體內(nèi)，凝血和纖溶系統(tǒng)保持一種動(dòng)態(tài)平衡狀態(tài)，而TAFI 作為一種新的纖溶抑制物,在凝血和纖溶之間的平衡調(diào)節(jié)過(guò)程中扮演著重要的角色。TAFI是近十年來(lái)國(guó)內(nèi)外醫(yī)學(xué)界研究凝血及纖溶調(diào)控的熱點(diǎn)分子之一。活化的TAFI具有切除部分降解的纖維蛋白C端Arg或Lys殘基的能力，抑制纖溶酶原的激活，從而降低纖溶酶形成和導(dǎo)致凝血塊溶解延遲，在維護(hù)血液凝固和纖維蛋白溶解的平衡中發(fā)揮著重要作用。

目前，血栓性疾病是威脅人類(lèi)健康的常見(jiàn)疾病，而研究發(fā)現(xiàn)TAFI與血栓性疾病密切相關(guān)，尤其是心腦血管疾病。還有研究表明，TAFI還與其他疾病相關(guān)，如甲狀腺疾病、糖尿病、肝臟疾病、腎臟疾病等[5-7]，因此TAFI含量的測(cè)定在臨床疾病的診斷和治療監(jiān)測(cè)中尤為重要。由于參考區(qū)間受種族、性別、年齡、地域、氣候、飲食等因素的影響[8]，所以建立本地區(qū)TAFI參考區(qū)間可以更好的為相應(yīng)疾病的臨床診治提供客觀依據(jù)。

本研究分析了長(zhǎng)春地區(qū)246名健康成年人的血漿TAFI結(jié)果，并初步建立了適合本地區(qū)的TAFI參考區(qū)間：19.86-35.22 μg/mL，與試劑廠家提供的TAFI參考區(qū)間24.0-35.0 μg/mL，參考下限明顯有差距，這可能與長(zhǎng)春地區(qū)的氣候、飲食、生活習(xí)慣等因素有關(guān)，所以不同地區(qū)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)建立本地區(qū)的TAFI參考區(qū)間。

本研究結(jié)果顯示，TAFI水平在性別和年齡組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，可能與樣本量偏少，地區(qū)差異有關(guān)，此參考區(qū)間初步建立后，將加大樣本量進(jìn)一步證實(shí)。

本研究建立的TAFI參考區(qū)間適用于長(zhǎng)春地區(qū)，為臨床疾病的診斷提供可靠依據(jù)。