硫辛酸對慢性熱應(yīng)激肉雞血清生化指標(biāo)的影響

金永燕， 李 雪， 宋 凱， 吳明明， 賀紹君*

(1.廣東海洋大學(xué) 濱海農(nóng)業(yè)學(xué)院，廣東 湛江 524000；2.安徽科技學(xué)院 動物科學(xué)學(xué)院，安徽 鳳陽 233100)

近年來我國養(yǎng)雞業(yè)大多采用高密度、集約化的籠養(yǎng)模式。高溫高濕成為影響肉雞生產(chǎn)的重要不利因素。肉雞的新陳代謝旺盛,沒有汗腺,羽毛隔熱性能好,容易導(dǎo)致體溫升高,因而其對高溫高濕環(huán)境特別敏感,當(dāng)溫度達(dá)到28 ℃時肉雞就可能發(fā)生熱應(yīng)激。臨床上根據(jù)熱暴露時間長短分為急性熱應(yīng)激(<7 d)和慢性熱應(yīng)激(≥7 d)。在我國中、南部,夏秋時節(jié)環(huán)境溫度常達(dá)30 ℃以上,面對長期的高溫天氣,肉雞就易發(fā)生慢性熱應(yīng)激反應(yīng),不利于其生長,帶來極大的經(jīng)濟(jì)損失。因此如何緩解慢性熱應(yīng)激造成的損失已經(jīng)成為當(dāng)前的研究熱點(diǎn)之一。

已有研究表明熱應(yīng)激會導(dǎo)致機(jī)體血清生化指標(biāo)發(fā)生改變,破壞機(jī)體氧化系統(tǒng)和抗氧化系統(tǒng)之間的平衡,誘發(fā)機(jī)體發(fā)生氧化應(yīng)激。硫辛酸(LA)作為兼具脂溶性和水溶性的抗氧化劑,具有很強(qiáng)的抗氧化活性,它可以清除自由基,減緩或修復(fù)氧化損傷。在日糧中添加250 mg/kg的硫辛酸能夠提高種雞高熱應(yīng)激時卵巢的臟器指數(shù),增加血清中FSH和LH的含量,有助于提高熱應(yīng)激時種雞的繁殖性能。白兆鵬等研究證明,在熱應(yīng)激環(huán)境下向蛋雞飼料中添加50～100 mg/kg LA可以使蛋雞已經(jīng)下降的產(chǎn)蛋量得到顯著緩解,同時增強(qiáng)機(jī)體抗氧化能力。從前人研究的對象及結(jié)果來看,研究方向大多集中于LA對肉、蛋雞生產(chǎn)性能及抗氧化能力的影響。為拓展研究領(lǐng)域緩解慢性熱應(yīng)激給養(yǎng)殖業(yè)造成的損失,本實(shí)驗(yàn)在前人研究的基礎(chǔ)上,以養(yǎng)殖廠普遍飼養(yǎng)的大快型肉雞(科寶肉雞)為研究對象,以血清中糖、脂、蛋白質(zhì)的含量來反映機(jī)體基礎(chǔ)代謝情況,在肉雞飼料中添加250 mg/kg LA,通過測定肉雞血清中糖、脂、蛋白質(zhì)指標(biāo)的變化,來揭示硫辛酸在慢性熱應(yīng)激過程中所起的作用,進(jìn)而為生產(chǎn)實(shí)踐中抗熱應(yīng)激飼料添加劑的生產(chǎn),以及密集化肉雞飼養(yǎng)防治應(yīng)熱激提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動物及其飼養(yǎng)管理

從商品化肉雞場采購1d健康科寶肉用雛雞160只。采用籠養(yǎng)方式,不限制雞的采食及飲水,每天早晚安排人員打掃室內(nèi)衛(wèi)生,清除雞糞,并消毒。試驗(yàn)人員在進(jìn)入飼養(yǎng)室前需要進(jìn)行嚴(yán)格的消毒。

1.2 主要器材及日糧

DL-5-B離心機(jī)(上海安亭科學(xué)儀器廠);BS-200全自動生化分析儀(邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司);IFH04-30A工業(yè)暖風(fēng)機(jī)(功率為5 kW,購自吉毅電器有限公司)。

硫辛酸采購自廣州盛瑄食品添加劑有限公司(食品添加劑生產(chǎn)許可證號:SC20233048102620,CAS:1077-28-7,貨號:7878)。硫辛酸性狀(含量:99%):淡黃色粉末狀,幾乎無味。干燥失重≤5%,水分≤5%,灰分≤5%,重金屬≤10.0 ppm。

飼養(yǎng)試驗(yàn)中所用基礎(chǔ)日糧的主要組成成分為:玉米、豆粕、大豆油、魚粉、磷酸氫鈣、氯化鈉、預(yù)混料等。具體基礎(chǔ)日糧的營養(yǎng)水平見表1。

表1 基礎(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)水平

1.3 試驗(yàn)設(shè)計

將160只1日齡科寶肉雞雛雞放在適宜環(huán)境中飼養(yǎng)至21 d,然后將其隨機(jī)分成常溫+基礎(chǔ)日糧組(CON+BD)、常溫+硫辛酸組(CON+LA)、熱應(yīng)激+基礎(chǔ)日糧組(HS+BD)、熱應(yīng)激+硫辛酸組(HS+LA)總共4組,每組有4個重復(fù),每個重復(fù)10只雞。試驗(yàn)溫度由空調(diào)和工業(yè)暖風(fēng)機(jī)共同控制,肉雞成長至28 d時試驗(yàn)開始,試驗(yàn)HS+BD組及HS+LA組,模擬夏季高溫天氣循環(huán)變溫,每日08:00-18:00打開暖風(fēng)機(jī)使室溫上升至(33±1) ℃,18:00-08:00期間關(guān)閉暖風(fēng)機(jī)使室內(nèi)溫度恢復(fù)到(26±1) ℃。試驗(yàn)CON+BD、CON+LA組全天飼養(yǎng)溫度均為(26±1) ℃。試驗(yàn)CON+BD組及HS+BD組全部飼喂基礎(chǔ)日糧,試驗(yàn)CON+LA組及HS+LA組全部飼喂添加250 mg/kg硫辛酸的基礎(chǔ)日糧。試驗(yàn)期間各試驗(yàn)組空氣濕度保持一致(50%～60%)。

1.4 血清糖、脂及蛋白質(zhì)含量的測定

分別在35及42 d進(jìn)行采樣。每組隨機(jī)選取8只肉雞(每個重復(fù)2只),提前禁食12 h以上,對肉雞進(jìn)行翅下靜脈采血,取5 mL血液。4 ℃靜置12 h后,進(jìn)行離心,3 000 r/min離心10 min,取血清于-20 ℃冰箱內(nèi)冷凍保存。使用邁瑞制造的全自動生化分析儀(型號:BS-200)測定血清中葡萄糖(GLU)、甘油三脂(TG)、總膽固醇(TC)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、總蛋白(TP)及白蛋白(ALB)的含量

1.5 試驗(yàn)數(shù)據(jù)處理及分析

將試驗(yàn)測得的有關(guān)血清中糖、脂及蛋白質(zhì)的數(shù)據(jù),利用SPSS 18.0軟件中一般線性模型程序,以環(huán)境溫度和硫辛酸作為影響因素,采用2×2雙因子排列對數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。若兩種處理之間存在交互作用,則進(jìn)行簡單效應(yīng)分析,進(jìn)行多重比較評估,試驗(yàn)結(jié)果用平均值和標(biāo)準(zhǔn)誤表示。

P

<0

.

01差異極顯著;

P

<0

.

05差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 硫辛酸對慢性熱應(yīng)激肉雞血清中葡萄糖含量的影響

由表2可知,35 d時,與常溫處理組相比,熱應(yīng)激使肉雞血清中GLU含量顯著升高(

P

<0.05)。與基礎(chǔ)日糧組相比,添加LA對血清中GLU含量無顯著影響(

P

>0.05)。溫度和添加劑的交互作用不顯著(

P

>0.05)。

表2 慢性熱應(yīng)激肉雞血清中葡萄糖含量的測定

42 d時,與常溫處理組相比,熱應(yīng)激使肉雞血清中GLU含量顯著升高(

P

<0.05)。與基礎(chǔ)日糧組相比,添加LA對血清中GLU含量無顯著影響(

P

>0.05),溫度和添加劑的交互作用不顯著。

2.2 硫辛酸對慢性熱應(yīng)激肉雞血清脂類代謝物的影響

由表3可知,35 d時,與常溫處理組相比,熱應(yīng)激組血清中TG含量無顯著差異(

P

>0.05),TC、HDL-C及LDL-C含量顯著升高(

P

<0.05)。與基礎(chǔ)日糧組相比,添加LA使血清中TG和HDL-C含量顯著降低(

P

<0.05),而TC和LDL-C含量無顯著差異(

P

>0.05)。僅在HDL--C指標(biāo)中溫度和添加劑的交互作用不顯著(

P

>0.05)。

表3 慢性熱應(yīng)激肉雞血清中脂類代謝物含量的測定

42 d時,與常溫處理組相比,熱應(yīng)激對TG、TC、HDL-C及LDL-C指標(biāo)影響均不顯著(

P

>0.05)。與基礎(chǔ)日糧組相比,添加LA對血清中TG、TC、HDL-C及LDL-C指標(biāo)的影響均不顯著(

P

>0.05),溫度和添加劑的交互作用均不顯著(

P

>0.05)。

2.3 硫辛酸對慢性熱應(yīng)激肉雞血清蛋白質(zhì)類代謝物的影響

由表4可知,35 d時,與常溫處理組相比,熱應(yīng)激使血清中TP、ALB顯著降低(

P

<0.05)。與基礎(chǔ)日糧組相比,添加LA對血清中TP、ALB含量影響不顯著(

P

<0.05)。溫度和添加劑的交互作用顯著(

P

<0.05)。42 d時,與常溫處理組相比,熱應(yīng)激對血清中TP、ALB指標(biāo)均無顯著影響(

P

>0.05)。與基礎(chǔ)日糧組相比,添加LA對TP、ALB指標(biāo)影響不顯著(

P

>0.05)。溫度和添加劑的交互作用不顯著(

P

>0.05)。

表4 慢性熱應(yīng)激肉雞血清蛋白質(zhì)類代謝物含量的測

3 結(jié)論與討論

3.1 硫辛酸對慢性熱應(yīng)激肉雞血清葡萄糖含量的影響

熱應(yīng)激狀態(tài)下動物體內(nèi)糖代謝發(fā)生改變,能反映熱應(yīng)激對機(jī)體的影響。本試驗(yàn)結(jié)果可知在35和42 d分別測得CON+BD組血糖值為17.57 mmol/L和14.64 mmol/L,即血糖的基地值略高于正常值。但不同資料報道的血糖指標(biāo)也同樣存在略微差異,這可能與試驗(yàn)中雞禁食時間的長短、飼養(yǎng)模式、日齡及品種等因素有關(guān)。在熱應(yīng)激狀態(tài)下,王曉霞等試驗(yàn)表明熱應(yīng)激能導(dǎo)致血清中GLU含量升高,并認(rèn)為是糖皮質(zhì)激素促使機(jī)體蛋白質(zhì)分解代謝加快以及糖異生作用加快造成的。郭沛艷等研究證明在小鼠糖尿病早期抗氧化劑α-LA可以減輕機(jī)體的氧化應(yīng)激水平,在一定程度上降低血糖濃度。在本試驗(yàn)中兩次均測得熱應(yīng)激下肉雞血清中GLU含量顯著升高(

P

<0.05)。即熱應(yīng)激使得肉雞體內(nèi)糖異生作用增強(qiáng),導(dǎo)致血清中GLU含量上升,且機(jī)體糖代謝對于熱應(yīng)激的反應(yīng)比較敏感?；A(chǔ)日糧中添加LA與不添加LA相比較,肉雞血清中葡萄糖的含量無顯著變化,溫度和LA的交互作用雖然不顯著,但在42 d測定時兩者有交互作用的趨勢(

P

=0.075)。表明在本試驗(yàn)條件下,慢性熱應(yīng)激會導(dǎo)致肉雞血清中GLU含量顯著升高,導(dǎo)致糖代謝紊亂,添加LA影響了慢性熱應(yīng)激下肉雞體內(nèi)糖的代謝。LA是線粒體內(nèi)的輔酶,作為抗氧化劑可以緩解熱應(yīng)激時肉雞機(jī)體內(nèi)產(chǎn)生的氧化應(yīng)激,此外它還參與胰島素的生成,可以改善肌肉組織對胰島素的抵抗性和敏感性,調(diào)節(jié)機(jī)體糖代謝紊亂的現(xiàn)象。但是在42 d時才出現(xiàn)交互影響的趨勢,即LA對慢性熱應(yīng)激肉雞血清GLU的影響可能有一個累積過程,或與LA劑量的高低有關(guān)。

3.2 硫辛酸對慢性熱應(yīng)激肉雞血清脂類代謝物含量的影響

甘油三酯、膽固醇、類固醇、糖脂及類脂等均屬于血清中脂類代謝物,它們也是生命的基礎(chǔ)代謝物質(zhì),在一定程度上反應(yīng)了機(jī)體的對于外界環(huán)境的適應(yīng)情況。李葉涵等研究證明熱應(yīng)激可以導(dǎo)致肉雞血清中TC含量顯著升高。肉雞日糧中添加一定劑量的LA,可降低血液中甘油三酯和膽固醇的含量。由本試驗(yàn)結(jié)果可知,試驗(yàn)進(jìn)行7 d時,熱應(yīng)激會使血清中TC、HDL-C及LDL-C含量顯著上升,與前人研究結(jié)果相同,說明熱應(yīng)激會導(dǎo)致機(jī)體脂代謝紊亂血脂升高。添加LA使得血清中TG及HDL-C含量顯著降低,且與熱應(yīng)激間交互影響顯著,即在基礎(chǔ)日糧中添加LA顯著降低了慢性熱應(yīng)激肉雞血清中甘油三脂及膽固醇含量的含量,改善機(jī)體脂質(zhì)代謝。LA既是水溶性又是脂溶性的,在體內(nèi)的代謝時肝臟對它有較好的攝取能力,研究顯示LA能夠促進(jìn)瘦素分泌,使得體脂含量有明顯下降,同時外周血TC、TG含量也有所下降。即LA具有較好的降脂作用能夠影響機(jī)體脂質(zhì)合成與代謝,緩解肉雞熱應(yīng)激。試驗(yàn)進(jìn)行到第14天測得CON+BD組、CON+LA組、HS+BD組及HS+LA組肉雞的血清中TG、TC、HDL-C及LDL-C指標(biāo)均無顯著差異(

P

>0.05),且LA與慢性熱應(yīng)激的交互作用均不顯著。間隔7 d測試結(jié)果卻不同,Jin等研究證明,機(jī)體的抗氧化能力會因?yàn)槭艿綗釕?yīng)激的影響而有所下降,但是隨著試驗(yàn)時間的延長,機(jī)體會逐步建立新的氧化還原平衡,以此來緩解熱應(yīng)激帶來的不利影響。說明隨著時間的延長,肉雞對熱應(yīng)激環(huán)境適力有所應(yīng)增強(qiáng),導(dǎo)致熱應(yīng)激后期機(jī)體各項(xiàng)指標(biāo)可能較熱應(yīng)激前期有所改善。

3.3 硫辛酸對慢性熱應(yīng)激肉雞血清蛋白質(zhì)的影響

血清中總蛋白主要包括白蛋白和球蛋白,總蛋白的含量可以反映機(jī)體蛋白質(zhì)的合成與代謝狀況。白蛋白在肝臟中合成,具有維持血液膠體滲透壓,清除自由基及抗凝血等生理功能。李東紅等人研究顯示熱應(yīng)激會導(dǎo)致肉雞血清中糖異生作用增強(qiáng),蛋白質(zhì)分解代謝加快,TP含量降低。而何世山等研究表明高溫會導(dǎo)致AA肉雞血清總蛋白含量升高。程志學(xué)等則證明,LA對開產(chǎn)階段蛋雞血清中TP及ALB含量無顯著影響。在本實(shí)驗(yàn)中,試驗(yàn)第7天測得慢性熱應(yīng)激會使得肉雞血清中TP、ALB含量比常溫時顯著下降,表明慢性熱應(yīng)激可以使科寶肉雞體內(nèi)蛋白質(zhì)代謝加快。這與前人的研究結(jié)果不完全相同,可能與試驗(yàn)條件、動物及方法等有關(guān)。添加LA較不添加LA,對血清中TP、ALB含量無顯著影響,與前人研究結(jié)果相同。溫度和添加劑的相互作用顯著影響血清TP、ALB的指標(biāo)(

P

<0.05),即LA的添加可以顯著抑制慢性熱應(yīng)激對肉雞血清中TP、ALB含量的降低作用(

P

<0.05)。熱應(yīng)激導(dǎo)致機(jī)體內(nèi)產(chǎn)生大量的自由基,可以誘發(fā)機(jī)體出現(xiàn)氧化應(yīng)激導(dǎo)致氧化損傷,氧化應(yīng)激可以使蛋白質(zhì)發(fā)生氧化損傷。而LA作為抗氧化劑,可以通過增強(qiáng)機(jī)體的抗氧化能力,減少氧化應(yīng)激對蛋白質(zhì)造成的損傷,緩解熱應(yīng)激給肉雞蛋白質(zhì)代謝帶來的不利影響。試驗(yàn)第14天測得CON+BD組、CON+LA組、HS+BD組及HS+LA組肉雞的血清中TP、ALB指標(biāo)均無顯著差異(

P

>0.05),且溫度與添加劑的交互作用不顯著(

P

>0.05)。時隔7天再次測量血清中TP、ALB含量,結(jié)果與7 d前不同,這與上文提到的脂代謝情況相同,可能是隨著慢性熱應(yīng)激時間的推移肉雞對熱應(yīng)激的適應(yīng)力增強(qiáng)所致。

綜上所述,在日糧中添加250 mg/kg LA能夠在慢性熱應(yīng)激初期約(≤7 d)內(nèi),降低肉雞血清中TG、HDL-C含量,并升高TP、ALB濃度,改善脂質(zhì)和蛋白質(zhì)代謝。提示在集約化養(yǎng)殖肉雞的過程中,可以在日糧中添加硫辛酸,增強(qiáng)其對于慢性熱應(yīng)激的耐受力,降低經(jīng)濟(jì)損失。