酒炒地黃炮制工藝研究

鄭鑫杰，王 蘋，張靜澤，劉岱琳

（天津現(xiàn)代創(chuàng)新中藥科技有限公司，天津 300384）

地黃為玄參科植物地黃Rehmannia glutinosa Libosch.的新鮮或干燥塊根。秋季采挖，除去蘆頭、須根及泥沙，鮮用；或?qū)⒌攸S緩緩烘焙至約八成干。前者習(xí)稱“鮮地黃”，后者習(xí)稱“生地黃”。鮮地黃味甘、苦，性寒，歸心、肝、腎經(jīng)。功效清熱生津，涼血，止血。用于熱病傷陰，舌絳煩渴，溫毒發(fā)斑，吐血，衄血，咽喉腫痛。生地黃味甘，性寒，歸心、肝、腎經(jīng)。功效清熱涼血，養(yǎng)陰生津。用于熱入營(yíng)血，溫毒發(fā)斑，吐血衄血，熱病傷陰，舌絳煩渴，津傷便秘，陰虛發(fā)熱，骨蒸勞熱，內(nèi)熱消渴。地黃在我國(guó)具有悠久的用藥歷史，始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，列為上品。其味甘、苦，性寒，歸心、肝、腎經(jīng)［1］。

地黃基原植物塊根和葉中含有大量的環(huán)烯醚萜類成分，還有苯乙醇苷、紫羅蘭酮、三萜、黃酮、酚酸、木脂素、糖及其他類化合物，對(duì)心腦血管系統(tǒng)、中樞神經(jīng)系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)、臟腑系統(tǒng)均有顯著的藥理作用，并具有細(xì)胞毒活性、抗糖尿病及其并發(fā)癥、抗骨質(zhì)疏松、抗炎、抗電離輻射等藥理作用［2］。

按照2015版《中國(guó)藥典》記載，熟地黃的制備方法一共有兩種，一種為酒燉法，一種為蒸法，其味甘，性微溫，歸肝、腎經(jīng)。功效為補(bǔ)血滋陰，益精填髓。用于血虛萎黃，心悸怔忡，月經(jīng)不調(diào)，崩漏下血，肝腎陰虛，腰膝酸軟，骨蒸潮熱，盜汗遺精，內(nèi)熱消渴，眩暈，耳鳴，須發(fā)早白。

地黃的道地產(chǎn)區(qū)位于河南古懷慶府（今焦作市沁陽(yáng)、溫縣、武陟、博愛(ài)等沿沁河一帶）［3］，在山西、陜西、山東、河北、甘肅等地也都有較大的種植面積。從1917年文獻(xiàn)記載開(kāi)始地黃品種選育以來(lái)，迄今有100余年，已育成的地黃品種超過(guò)60個(gè)［4］。

在中醫(yī)藥古代典籍中，關(guān)于熟地黃的制法，也多為蒸制，例如《湯液本草》記載：“地黃假火力蒸九數(shù)，故能補(bǔ)腎中元?dú)狻??！独坠谥扑幮越狻酚涊d：“采得生地黃，去白皮，磁鍋上柳木甑蒸之，攤令氣歇，拌酒，再蒸，又出令干，勿令犯銅鐵，令人腎消，并白發(fā)，男損營(yíng)，女損衛(wèi)也。”而炒制方法和蒸制對(duì)于炮制品的影響，筆者分析如下：炒制溫度分為文火或者武火，其最高溫度在120℃左右，而蒸制溫度一般在100℃左右，且炒制的炮制時(shí)間應(yīng)大大短于蒸制的炮制時(shí)間，故其對(duì)藥性的改變也相應(yīng)更加劇烈，酒炒地黃藥性相比于其他炮制品也較緩和，更加適用于婦科類疾病的治療。

經(jīng)典名方《傅青主女科》（清·傅山）記載兩地湯處方使用的地黃為大生地一兩（酒炒）。其中地黃使用酒炒進(jìn)行炮制，因酒制后藥物可借酒力行散，起到行藥勢(shì)、通血脈的作用，更利于補(bǔ)血，使地黃補(bǔ)而不膩［5］，而炒制后地黃藥性也更加平緩，更增加本方滋陰清熱功效。

本文設(shè)計(jì)單因素考查試驗(yàn)及正交試驗(yàn)，擬通過(guò)梓醇、毛蕊花糖苷含量及收率為指標(biāo)綜合考查確定酒炒地黃的炮制工藝。

1 儀器與試藥

1.1 儀器SQP型十萬(wàn)分之一電子天平（賽多利斯），SQP型萬(wàn)分之一天平（賽多利斯，SQP），移液槍（賽默飛），Cascada PT LWFS32701型純水機(jī)（PALL），AS20500BT型超聲波清洗器（奧特塞恩斯），滾筒式炒藥機(jī)（南京海善制藥機(jī)械設(shè)備有限公司），UTP3000高效液相色譜（賽默飛），粉碎機(jī)（溫嶺市林大機(jī)械有限公司）TW20通用水浴系統(tǒng)（JULABO）。

1.2 試藥 甲醇（天津渤化化學(xué)試劑有限公司，批號(hào)190520），乙腈（天津渤化化學(xué)試劑有限公司，批號(hào)190621），磷酸（天津市華東試劑廠，批號(hào)20180606），醋酸（天津康科德科技有限公司，批號(hào)181011），梓醇對(duì)照品（中國(guó)食品藥品檢定研究院，批號(hào)110808-201711），毛蕊花糖苷對(duì)照品（中國(guó)食品藥品檢定研究院，批號(hào)111530-201713）。

1.3 藥材 地黃（產(chǎn)地：河南武陟縣，批號(hào)DH20181001），經(jīng)中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥用植物所郭寶林研究員鑒定為玄參科植物地黃Rehmannia glutinosa Libosch.的干燥塊根。黃酒（紹興女兒紅釀酒有限公司，批號(hào)20171212B）。

2 方法與結(jié)果

2.1 單因素考查 設(shè)計(jì)單因素試驗(yàn)，對(duì)地黃片制備的凈選、悶潤(rùn)、切厚片、干燥進(jìn)行關(guān)鍵工藝參數(shù)摸索。

2.1.1 凈選 將生地黃塊置于瓷盤中挑揀，揀去簸不出、篩不下且不能入藥的雜質(zhì)，并將生地黃塊按大小，粗細(xì)分開(kāi)。將清水350 ml注入燒杯中（七成滿），倒入挑揀過(guò)的藥材約50 g，清洗兩次，揉搓洗凈，瀝干水分，進(jìn)行悶潤(rùn)。

2.1.2 悶潤(rùn) 將地黃依照直徑大小分為2組，為大于2 cm和小于2 cm，分別悶潤(rùn)1 h。檢測(cè)悶潤(rùn)后地黃水分。分析結(jié)果顯示，兩組地黃均用0.75倍水（即20 g地黃加入15 ml水）悶潤(rùn)1 h即可達(dá)到切制要求，故均選取0.75倍水進(jìn)行悶潤(rùn)，悶潤(rùn)時(shí)間為1 h。

2.1.3 切厚片、干燥 將悶潤(rùn)后地黃切厚片，置于鼓風(fēng)干燥箱中在不同溫度下進(jìn)行干燥（50、70和90℃），干燥至地黃飲片性狀、水分均符合2015版《中國(guó)藥典》要求，考查并記錄干燥時(shí)間，依據(jù)2015版《中國(guó)藥典》進(jìn)行水分、浸出物及含量等指標(biāo)檢測(cè)。

2.2 地黃干燥工藝水分及含量測(cè)定結(jié)果 依據(jù)2015版《中國(guó)藥典》，對(duì)根據(jù)“2.1”項(xiàng)下方法制備的地黃飲片進(jìn)行水分、浸出物及主要成分含量測(cè)定，結(jié)果見(jiàn)表1。由圖1和圖2可知，地黃中梓醇和毛蕊花糖苷含量在50℃下干燥1.5 h后含量高于70℃下干燥1 h及90℃下干燥0.5 h，表明梓醇和毛蕊花糖苷在50℃下穩(wěn)定性要高于70℃及90℃。而梓醇含量70℃下干燥1 h相比90℃下干燥0.5 h要低一倍左右，判斷梓醇含量在高于70℃時(shí)隨著干燥溫度升高，其含量受干燥時(shí)間影響較大，故選取50℃下干燥1.5 h為地黃飲片干燥工藝，經(jīng)檢測(cè)，其水分及浸出物含量也符合2015版《中國(guó)藥典》要求。

圖1 梓醇含量變化折線圖

圖2 毛蕊花糖苷含量變化折線圖

表1 地黃干燥后浸出物及指標(biāo)成分含量分析

2.3 正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)

2.3.1 方法 試驗(yàn)選取20 g根據(jù)“2.1”項(xiàng)下方法制備地黃飲片，以文火炒制溫度（80~120℃）為炮制溫度，以黃酒用量（A）、悶潤(rùn)時(shí)間（B）、炒制時(shí)間（C）、炒制溫度（D）為考查因素，以梓醇和毛蕊花糖苷含量、性狀得分、收率為評(píng)價(jià)指標(biāo)，計(jì)算綜合得分。選取L9（34）正交試驗(yàn)，試驗(yàn)因素水平、正交試驗(yàn)結(jié)果和方差分析分別見(jiàn)表2-5。

表2 正交試驗(yàn)因素水平表

2.3.2 水分、浸出物及含量測(cè)定 依據(jù)2015版《中國(guó)藥典》，對(duì)根據(jù)正交試驗(yàn)制備的地黃飲片進(jìn)行水分、浸出物及含量測(cè)定，色譜圖見(jiàn)圖3和圖4，結(jié)果見(jiàn)表3。

表3 正交試驗(yàn)結(jié)果

圖3 對(duì)照品（A）酒炒地黃飲片（B）HPLC色譜圖

圖4 對(duì)照品（A）酒炒地黃飲片（B）HPLC色譜圖

2.4正交試驗(yàn)綜合評(píng)分標(biāo)準(zhǔn) 加權(quán)處理（梓醇和毛蕊花糖苷含量均為40分，收率為20分，水分和浸出物均按照地黃《中國(guó)藥典》標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行判定，不計(jì)入加權(quán)評(píng)分中）。各評(píng)價(jià)指標(biāo)加權(quán)處理如下：梓醇評(píng)分＝樣品中梓醇含量×40/9個(gè)樣品中梓醇最高含量；毛蕊花糖苷評(píng)分＝樣品中毛蕊花糖苷含量×40/9個(gè)樣品中毛蕊花糖苷最高含量；收率評(píng)分=樣品收率×20/9個(gè)樣品最高收率；綜合評(píng)分＝梓醇評(píng)分＋毛蕊花糖苷評(píng)分＋收率評(píng)分。以加權(quán)后綜合評(píng)分為評(píng)價(jià)指標(biāo)，對(duì)酒炒地黃工藝進(jìn)行分析。

2.5 綜合評(píng)分結(jié)果 地黃正交試驗(yàn)綜合評(píng)分結(jié)果見(jiàn)表4和表5。

表4 不同炒制條件下樣品評(píng)分

表5 正交試驗(yàn)評(píng)分計(jì)算結(jié)果

2.6 分析 由正交試驗(yàn)L9（34）計(jì)算表極差（R）可以看出：在該正交試驗(yàn)設(shè)定的因素、水平條件下，對(duì)綜合評(píng)分影響的大小依次是D＞A＞B＞C，即D因素（炒制溫度）影響最大，A因素（黃酒用量）次之，B、A因素（悶潤(rùn)時(shí)間、炒制時(shí)間）最小；對(duì)A因素有對(duì)B因素有對(duì)C因素有K1＞對(duì)D因素有因此對(duì)于酒炒地黃綜合評(píng)分而言，最佳炮制工藝應(yīng)為A1B2C1D1，即地黃飲片加入黃酒10 g，悶潤(rùn)45 min，在85~95℃下炒制50 min。

3 討論

酒作為炮制用輔料在我國(guó)使用歷史已經(jīng)長(zhǎng)達(dá)數(shù)千年，第一部炮制專著《雷公炮炙論》中記載使用酒作為輔料進(jìn)行炮制的品種共有38種。傳統(tǒng)醫(yī)藥學(xué)表明，酒味甘、辛，性熱，入心、脾經(jīng)，能暢通血脈，活血祛瘀，祛風(fēng)散寒，消冷飲，除胃寒，健脾胃，矯味矯臭，還能引藥上行，助藥力，行藥勢(shì)，振精神［6］。古代炮制酒炒地黃較難控制工藝參數(shù)，且古籍中記載酒炒地黃工藝較為簡(jiǎn)單，《世醫(yī)得效方》中記載“酒洗，拌炒”［7］，本文依據(jù)現(xiàn)代炮制工藝流程中的關(guān)鍵控制點(diǎn)，首次對(duì)酒炒地黃從藥材到飲片進(jìn)行了系統(tǒng)的工藝研究，通過(guò)含量及收率等一系列指標(biāo)確定酒炒地黃的炮制工藝，總結(jié)出溫度對(duì)梓醇及毛蕊花糖苷在地黃炮制中的變化規(guī)律，根據(jù)單因素試驗(yàn)結(jié)果，溫度及置于高溫中的時(shí)間對(duì)于地黃中的指標(biāo)性含量成分有較大的影響，而通過(guò)正交試驗(yàn)的結(jié)果分析，在較低的溫度下炒制較短的時(shí)間能夠得到指標(biāo)成分含量較高的酒炒地黃，同時(shí)也支持了單因素的試驗(yàn)結(jié)果。

故綜上所述，酒炒地黃的最佳炮制工藝應(yīng)為：取地黃片，加入10 g量的黃酒進(jìn)行悶潤(rùn)，悶潤(rùn)時(shí)間為45 min，后炒制50 min，炒制時(shí)物料溫度控制在85~95℃為最佳炮制工藝。