大口黑鱸對(duì)六種非糧蛋白源的表觀消化率

時(shí)于惠 祝書杰 譚北平 張文兵 周小秋 郜衛(wèi)華* 遲淑艷*

(1. 長(zhǎng)江大學(xué)澇漬災(zāi)害與濕地農(nóng)業(yè)湖北省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室, 荊州 434024; 2. 廣東海洋大學(xué)水產(chǎn)經(jīng)濟(jì)動(dòng)物養(yǎng)殖廣東南海重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,湛江 524088; 3. 中國(guó)海洋大學(xué)教育部海洋培養(yǎng)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室, 青島 266003; 4. 四川農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)研究所, 成都 611130)

隨著生活水平的提高, 人們對(duì)優(yōu)質(zhì)蛋白源——水產(chǎn)品的需求不斷增加, 這促進(jìn)了水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)迅猛發(fā)展。水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展使我國(guó)對(duì)魚粉和豆粕的進(jìn)口依存度達(dá)到80%以上[1], 且隨著人口增長(zhǎng)和耕地面積的減少, 出現(xiàn)了水產(chǎn)養(yǎng)殖與食用糧競(jìng)爭(zhēng)耕地資源的現(xiàn)象[2]。為了降低我國(guó)對(duì)魚粉和豆粕的進(jìn)口依賴度、保障國(guó)家糧食安全, 尋找不與人爭(zhēng)糧的非糧蛋白源是解決這一問題的重要途徑之一。我國(guó)非糧蛋白種類豐富, 但在水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)中的應(yīng)用并未得到充分挖掘[1], 因此充分開發(fā)利用本土的新型非糧蛋白源作為水產(chǎn)養(yǎng)殖的飼料源尤為迫切。

本研究中所使用的非糧蛋白源分別為莢膜甲基球菌蛋白、乙醇梭菌蛋白、黃粉蟲粉、酶解大豆、小球藻和棉籽濃縮蛋白。莢膜甲基球菌蛋白是利用氧、氮、甲烷和礦物質(zhì)發(fā)酵產(chǎn)生的細(xì)菌蛋白粉[3]。乙醇梭菌蛋白是以一氧化碳等廢氣為碳源、以氨為氮源、通過(guò)細(xì)菌發(fā)酵產(chǎn)生的新型微生物蛋白[4]。小球藻是以無(wú)機(jī)碳源為養(yǎng)料培養(yǎng)的微藻[5]。三者均屬于單細(xì)胞蛋白, 來(lái)源廣泛、可工業(yè)化大規(guī)模培養(yǎng)[6]。單細(xì)胞蛋白中蛋白質(zhì)含量為40%—80%, 不僅富含多種維生素、碳水化合物、脂類、礦物質(zhì)、酶類和生物活性物質(zhì)[7,8], 還富含動(dòng)物生長(zhǎng)所需的多種氨基酸, 尤其是包括蛋氨酸和賴氨酸等在內(nèi)的必需氨基酸[9]。黃粉蟲粉是活蟲經(jīng)處死、滅菌、干燥后進(jìn)一步加工制得的, 屬于昆蟲蛋白, 可高度持續(xù)供給[10]。黃粉蟲粉中蛋白質(zhì)含量高, 且最高蛋白質(zhì)含量接近魚粉、高于豆粕、氨基酸比例較為均衡、不飽和脂肪酸和礦物元素等含量水平也較為豐富[11—13]。酶解大豆是利用現(xiàn)代生物技術(shù)將大豆蛋白通過(guò)蛋白酶酶解為可溶性蛋白和小分子多肽的混合物[14]。不僅有效降低了豆粕中抗?fàn)I養(yǎng)因子和大分子蛋白的含量, 而且提高了豆粕中的多肽和游離氨基酸的水平[15]。棉籽濃縮蛋白是用軟化軋胚、低溫烘干的過(guò)程取代了棉粕高溫蒸炒的過(guò)程, 且通過(guò)萃取和脫酚得到的產(chǎn)物。與棉粕相比, 棉籽濃縮蛋白較為徹底地去除了棉酚等有害物質(zhì)且氨基酸含量有大幅度的提高[1]。

大口黑鱸(Micropterus salmoides), 又稱加州鱸,是一種肉質(zhì)鮮美的食肉性魚類, 因養(yǎng)殖周期短、抗病力強(qiáng)、適溫性廣、易捕撈、肉質(zhì)鮮美和營(yíng)養(yǎng)豐富, 在水產(chǎn)養(yǎng)殖中有良好的發(fā)展前景[16]。過(guò)去, 大口黑鱸依靠投喂野雜魚或其他肉食性魚類飼料進(jìn)行養(yǎng)殖, 其專用配合飼料應(yīng)用不久。為了縮短養(yǎng)殖周期, 提高經(jīng)濟(jì)效益, 現(xiàn)階段大口黑鱸商品飼料中魚粉仍處于一個(gè)較高的水平, 一般在40%—50%[17],導(dǎo)致大口黑鱸養(yǎng)殖成本較高。因此本實(shí)驗(yàn)以肉食性淡水養(yǎng)殖代表魚類大口黑鱸為研究對(duì)象, 通過(guò)體內(nèi)消化率實(shí)驗(yàn), 探討大口黑鱸對(duì)莢膜甲基球菌蛋白、乙醇梭菌蛋白、黃粉蟲粉、酶解大豆、小球藻和棉籽濃縮蛋白6種非糧蛋白源干物質(zhì)、蛋白質(zhì)、脂肪、能量和氨基酸的表觀消化率, 為大口黑鱸飼料選擇成本低且營(yíng)養(yǎng)均衡的蛋白源提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)魚

實(shí)驗(yàn)用大口黑鱸購(gòu)自荊州市鴻昌水產(chǎn)科技有限公司, 在長(zhǎng)江大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院室內(nèi)水循環(huán)系統(tǒng)中進(jìn)行。實(shí)驗(yàn)開始前, 在室內(nèi)暫養(yǎng)兩周。正式實(shí)驗(yàn)開始前, 選取630尾[初始體重約(19.28±0.10) g]健康、規(guī)格均一的魚體, 饑餓24h后, 隨機(jī)分到21個(gè)實(shí)驗(yàn)養(yǎng)殖桶中, 每個(gè)處理3個(gè)重復(fù), 每個(gè)重復(fù)30尾。實(shí)驗(yàn)期間水溫22—25℃, pH為7.5—8.0, 溶解氧≥6 mg,氨氮<0.10 mg/L, 亞硝酸鹽<0.2 mg/L。

1.2 實(shí)驗(yàn)飼料的設(shè)計(jì)與配制

基礎(chǔ)飼料以魚粉和豆粕為主要蛋白源, 添加0.1%的Y2O3為外源指示劑, 基礎(chǔ)飼料配方見表 1。6種待測(cè)原料分別為莢膜甲基球菌蛋白[愷勒司(上海)商務(wù)信息咨詢有限公司]、乙醇梭菌蛋白(河北首朗新能源有限公司)、黃粉蟲粉(廣州澤和誠(chéng)生物科技有限公司)、酶解大豆(江蘇富海生物科技有限公司)、小球藻(武漢德默特生物科技有限公司)和棉籽濃縮蛋白(新疆金蘭植物蛋白有限公司), 其原料的營(yíng)養(yǎng)成分見表 2和表 3。6種實(shí)驗(yàn)飼料由70%的基礎(chǔ)飼料和30%的待測(cè)原料(莢膜甲基球菌蛋白、乙醇梭菌蛋白、黃粉蟲粉、酶解大豆、小球藻和棉籽濃縮蛋白)組成。按照配方將各成分研磨粉碎后過(guò)60目篩網(wǎng), 從小到大, 依次混勻, 用TSE-65雙螺桿制粒機(jī)(北京現(xiàn)代洋工機(jī)械科技有限公司)制成粒徑為2 mm的顆粒, 60℃烘干后保存于–20℃冰箱備用。

表1 基礎(chǔ)飼料的原料組成Tab. 1 Ingredient compositions of reference diets (%)

表2 實(shí)驗(yàn)原料近似組成和總能的含量Tab. 2 Proximate and gross energy compositions of ingredients (%)

表3 實(shí)驗(yàn)原料氨基酸的含量(n=3 % 干物質(zhì)基礎(chǔ))Tab. 3 Amino acid compositions of ingredients (n=3 % dry-matter basis)

1.3 飼養(yǎng)管理及糞便收集

正式實(shí)驗(yàn)持續(xù)42d。7組實(shí)驗(yàn)魚, 其中1組投喂基礎(chǔ)飼料, 另外6組投喂實(shí)驗(yàn)飼料, 整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程均定時(shí)(8:00和18:00)定點(diǎn)飽食投喂, 30min后清除殘餌, 5—6h后用虹吸法收集包膜完整的糞便, 冷凍干燥機(jī)干燥后–20℃保存待測(cè)。

1.4 樣品分析及計(jì)算

原料、飼料和糞便的水分采用105℃干燥恒重法檢測(cè); 粗蛋白采用凱氏定氮儀(GB/T 5009.5-2016)檢測(cè); 粗脂肪采用索氏抽提法(GB/T 5009.6-2016)檢測(cè); 灰分采用550℃灼燒法(GB/T 5009.4-2016)檢測(cè); 能量采用氧彈儀(6200Isoperibol Calorimeter, Illinois, USA)檢測(cè); 外源指示劑采用電感耦合等離子體質(zhì)譜法(PE avio 500)檢測(cè); 原料、飼料和糞便用冷凍干燥機(jī)(SCIENTZ-10N)進(jìn)行處理后,氨基酸采用氨基酸自動(dòng)分析儀(L-8900, 日立)檢測(cè)。

實(shí)驗(yàn)飼料營(yíng)養(yǎng)成分表觀消化率計(jì)算公式為:

飼料干物質(zhì)表觀消化率(%)=(1?飼料中Y2O3%/糞便中Y2O3%)×100

營(yíng)養(yǎng)成分表觀消化率(%)= [1?(飼料中Y2O3%×糞便營(yíng)養(yǎng)成分%)/(糞便中Y2O3%×飼料營(yíng)養(yǎng)成分%)]×100

實(shí)驗(yàn)原料營(yíng)養(yǎng)成分表觀消化率計(jì)算公式為:

實(shí)驗(yàn)原料營(yíng)養(yǎng)成分表觀消化率=測(cè)定飼料營(yíng)養(yǎng)成分表觀消化率+[(測(cè)定飼料營(yíng)養(yǎng)成分表觀消化率–基礎(chǔ)飼料營(yíng)養(yǎng)成分表觀消化率)×(0.7×基礎(chǔ)飼料中營(yíng)養(yǎng)成分含量)/(0.3×實(shí)驗(yàn)原料中營(yíng)養(yǎng)成分含量)]

1.5 數(shù)據(jù)分析與處理

所有數(shù)據(jù)都由SPSS20.0進(jìn)行單因素方差分析(One-way ANOVA)并用Turkey檢驗(yàn)進(jìn)行多重比較,P<0.05表示顯著性差異, 最終結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差(mean±SD)表示。

2 結(jié)果

2.1 大口黑鱸對(duì)6種實(shí)驗(yàn)原料干物質(zhì)、蛋白質(zhì)、脂肪和總能的表觀消化率

如表 4所示, 實(shí)驗(yàn)原料的各營(yíng)養(yǎng)成分和總能的表觀消化率受原料類型的影響顯著(P<0.05)。大口黑鱸對(duì)6種實(shí)驗(yàn)原料干物質(zhì)的表觀消化率為37.27%—86.43%, (莢膜甲基球菌蛋白>乙醇梭菌蛋白>酶解大豆>黃粉蟲粉>小球藻>棉籽濃縮蛋白)莢膜甲基球菌蛋白和乙醇梭菌蛋白干物質(zhì)的表觀消化率顯著高于其他實(shí)驗(yàn)原料(P<0.05); 其次是黃粉蟲粉、酶解大豆和小球藻; 棉籽濃縮蛋白干物質(zhì)的表觀消化率顯著低于其他實(shí)驗(yàn)原料(P<0.05)。

表4 大口黑鱸對(duì)6種實(shí)驗(yàn)原料干物質(zhì)、粗蛋白、粗脂肪和能量的表觀消化率(n=3, % 干物質(zhì)基礎(chǔ))Tab. 4 Apparent digestibility coefficients (ADCs) of dry matter, crude protein, crude lipid and gross energy in the test ingredients of largemouth bass (n=3, % dry-matter basis)

大口黑鱸對(duì)6種實(shí)驗(yàn)原料蛋白質(zhì)的表觀消化率為79.97%—88.45%, (莢膜甲基球菌蛋白>乙醇梭菌蛋白>黃粉蟲粉>酶解大豆>小球藻>棉籽濃縮蛋白)莢膜甲基球菌蛋白和乙醇梭菌蛋白的蛋白質(zhì)表觀消化率顯著高于棉籽濃縮蛋白、酶解大豆和小球藻(P<0.05); 棉籽濃縮蛋白蛋白質(zhì)表觀消化率顯著低于其他實(shí)驗(yàn)原料(P<0.05)。

大口黑鱸對(duì)6種實(shí)驗(yàn)原料脂肪的表觀消化率為51.19%—97.48%, (乙醇梭菌蛋白>莢膜甲基球菌蛋白>酶解大豆>小球藻>黃粉蟲粉>棉籽濃縮蛋白)莢膜甲基球菌蛋白和乙醇梭菌蛋白的脂肪消化率顯著高于其他實(shí)驗(yàn)原料(P<0.05); 其次是酶解大豆, 均顯著高于棉籽濃縮蛋白、黃粉蟲粉和小球藻(P<0.05); 棉籽濃縮蛋白脂肪表觀消化率顯著低于其他實(shí)驗(yàn)原料(P<0.05)。

大口黑鱸對(duì)6種實(shí)驗(yàn)原料能量的表觀消化率為43.25%—85.43%, (莢膜甲基球菌蛋白>乙醇梭菌蛋白>酶解大豆>黃粉蟲粉>小球藻>棉籽濃縮蛋白)乙醇梭菌蛋白和莢膜甲基球菌蛋白的能量消化率顯著高于其他實(shí)驗(yàn)原料(P<0.05); 其次是酶解大豆, 均顯著高于棉籽濃縮蛋白、黃粉蟲粉和小球藻(P<0.05); 棉籽濃縮蛋白能量的表觀消化率顯著低于其他實(shí)驗(yàn)原料(P<0.05)。

2.2 大口黑鱸對(duì)6種實(shí)驗(yàn)原料氨基酸的表觀消化率

如表 5所示, 實(shí)驗(yàn)原料的氨基酸表觀消化率受原料類型的影響顯著(P<0.05), 且與蛋白質(zhì)表觀消化率的變化趨勢(shì)相似。大口黑鱸對(duì)6種實(shí)驗(yàn)原料水解總氨基酸的表觀消化率為70.52%—90.51%(莢膜甲基球菌蛋白>乙醇梭菌蛋白>黃粉蟲粉>酶解大豆>小球藻>棉籽濃縮蛋白), 且莢膜甲基球菌蛋白、乙醇梭菌蛋白和黃粉蟲粉的水解總氨基酸顯著高于棉籽濃縮蛋白和小球藻(P<0.05); 棉籽濃縮蛋白水解總氨基酸的表觀消化率顯著低于其他實(shí)驗(yàn)原料(P<0.05); 其余各組均無(wú)顯著性差異。在6種實(shí)驗(yàn)原料中精氨酸的表觀消化率普遍較高為82.69%—93.99%。纈氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸和精氨酸的表觀消化率在乙醇梭菌蛋白、莢膜甲基球蛋白和黃粉蟲粉中均是最高的, 9種必需氨基酸的表觀消化率在棉籽濃縮蛋白中是最低的。組氨酸的表觀消化率在酶解大豆中最高。精氨酸的表觀消化率在小球藻中最高。

表5 大口黑鱸對(duì)6種實(shí)驗(yàn)原料氨基酸的表觀消化率(n=3, % 干物質(zhì)基礎(chǔ))Tab. 5 Apparent digestibility coefficients (ADCs) of amino acid in the test ingredients of largemouth bass (n=3, % dry-matter basis)

賴氨酸的表觀消化率最高的是莢膜甲基球蛋白。其次是乙醇梭菌蛋白、黃粉蟲粉和酶解大豆,三者無(wú)顯著性差異, 均顯著高于棉籽濃縮蛋白和小球藻(P<0.05)。

蛋氨酸的表觀消化率從高到低依次為黃粉蟲粉、莢膜甲基球蛋白、乙醇梭菌蛋白、小球藻、酶解大豆和棉籽濃縮蛋白, 其中棉籽濃縮蛋白和酶解大豆的蛋氨酸表觀消化率均顯著低于黃粉蟲粉、莢膜甲基球蛋白和乙醇梭菌蛋白(P<0.05)。

3 討論

實(shí)驗(yàn)采用虹吸法收集糞便, 避免了解剖、剝離方法的壓力和魚體的應(yīng)激[18]。采用7﹕3的方式制作實(shí)驗(yàn)飼料, 能較好地滿足實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的營(yíng)養(yǎng)需要, 使所得實(shí)驗(yàn)結(jié)果更接近魚類營(yíng)養(yǎng)消化需求[19]。

3.1 單細(xì)胞蛋白的表觀消化率

莢膜甲基球菌蛋白是利用氧、氮、甲烷和礦物質(zhì)發(fā)酵產(chǎn)生的細(xì)菌蛋白粉, 乙醇梭菌蛋白是一種以一氧化碳制廢氣為碳源、以氨為氮源、通過(guò)細(xì)菌發(fā)酵產(chǎn)生的新型微生物蛋白, 二者均屬于單細(xì)胞蛋白中的細(xì)菌蛋白[3,4]。在本研究中大口黑鱸對(duì)莢膜甲基球菌蛋白干物質(zhì)、蛋白質(zhì)、氨基酸和脂肪的表觀消化率分別為86.43%、88.45%、72.27%—96%和94.79%, 對(duì)乙醇梭菌蛋白干物質(zhì)、蛋白質(zhì)、氨基酸和脂肪的表觀消化率分別為82.77%、87.44%、75.74%—91.72%和97.48%。草魚(Ctenopharyngodon idellus)[20]、大黃魚(Pseudosciaena crocea)[21]、花鱸(Lateolabrax japonicus)[22]、黃顙魚(Peltobagrus fulvidraco)[19]、麥瑞加拉鯪(Cirrhinus mrigala)[23]、青魚(Mylopharyngodon piceu)[24]、吉富羅非魚(Oreochromis niloticus)[25]、大口黑鱸(Micropterus salmoides)[26]、紅鰭東方鲀(Takifugu rubripes)[27]和團(tuán)頭魴(Megalobrama amblycephala)[28]等對(duì)國(guó)產(chǎn)魚粉或進(jìn)口魚粉的干物質(zhì)表觀消化率略低于莢膜甲基球菌蛋白和乙醇梭菌蛋白, 蛋白質(zhì)、氨基酸和脂肪的表觀消化率與大口黑鱸對(duì)莢膜甲基球菌蛋白和乙醇梭菌蛋白蛋白質(zhì)、氨基酸和脂肪的表觀消化率基本一致。這說(shuō)明對(duì)于大口黑鱸來(lái)說(shuō)莢膜甲基球菌蛋白和乙醇梭菌蛋白是兩種可以替代魚粉的優(yōu)質(zhì)蛋白源, 這與細(xì)菌蛋白(乙醇梭菌蛋白和莢膜甲基球菌蛋白)抗?fàn)I養(yǎng)因子、沙門氏菌和生物胺含量較低且蛋白質(zhì)含量水平較高、氨基酸組成較平衡有關(guān)[4,29,30]。有研究表明, 莢膜甲基球菌蛋白與豆粕相比蛋氨酸含量較高, 與魚粉相比賴氨酸含量較低[31]。在本研究中莢膜甲基球菌蛋白蛋氨酸含量為1.73%, 在以往研究中豆粕的蛋氨酸含量?jī)H為0.48%[32]。莢膜甲基球菌蛋白的賴氨酸含量為3.78%, 而劉翠等[19]表明國(guó)產(chǎn)魚粉和進(jìn)口魚粉賴氨酸分別為3.62%和3.85%。這說(shuō)明本研究中莢膜甲基球菌蛋白的蛋氨酸和賴氨酸含量已處于一個(gè)較高水平。Utturkar等[30]表明乙醇梭菌蛋白具有和魚粉相似的氨基酸譜, 且本研究中證實(shí)乙醇梭菌蛋白的必需氨基酸均比劉翠等[19]研究中國(guó)產(chǎn)魚粉和進(jìn)口魚粉的必需氨基酸含量高。作為水產(chǎn)動(dòng)物的限制性氨基酸, 乙醇梭菌蛋白中蛋氨酸和賴氨酸分別為2.29%和8.70%, 這與Song等[33]表明乙醇梭菌蛋白氨基酸均衡且富含蛋氨酸和賴氨酸一致。

小球藻屬于微藻, 富含蛋白質(zhì)和多不飽和脂肪酸[34]。本實(shí)驗(yàn)中大口黑鱸對(duì)小球藻干物質(zhì)的表觀消化率為78.25%, 遠(yuǎn)高于歐洲鱸[35]對(duì)小球藻干物質(zhì)的表觀消化率(41.2%)?？赡苁潜緦?shí)驗(yàn)中所使用的小球藻經(jīng)異氧發(fā)酵及破壁處理后, 碳水化合物的含量及細(xì)胞壁的破碎情況得到改善, 營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)更容易被消化吸收所致[34]。以往的研究表明, 一般植物性蛋白, 比如菜粕的必需氨基酸總量在18.65%[27]。本研究所用的武漢德默特生物科技有限公司提供的小球藻必需氨基酸總量(33.64%)接近魚粉, 高于一般植物性蛋白[36], 而最終的總氨基酸消化率83.68%的結(jié)果也證明了小球藻氨基酸組成和含量的優(yōu)越性。含硫氨基酸(蛋氨酸和胱氨酸)是小球藻的第一限制性氨基酸[36], 在小球藻的氨基酸譜中, 蛋氨酸和胱氨酸含量水平最低, 分別為1.17%和0.41%。若將小球藻投入到實(shí)際生產(chǎn)中, 建議配合蛋氨酸和胱氨酸含量高的原料, 通過(guò)氨基酸互補(bǔ)作用提高其營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。

3.2 黃粉蟲粉的表觀消化率

黃粉蟲粉屬于昆蟲蛋白, 通過(guò)各種現(xiàn)代生物科技提取技術(shù)(堿提取法、鹽提取法和蛋白酶提取法)制作而成, 粗蛋白含量可達(dá)50%—70%[37,38]。在本研究中, 黃粉蟲粉的蛋白含量為68.82%, 大口黑鱸對(duì)黃粉蟲粉干物質(zhì)、蛋白質(zhì)和氨基酸的表觀消化率分別為79.57%、83.98%和73.45%—91.83%。程云旺等[39]實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明, 花鱸對(duì)黃粉蟲粉的干物質(zhì)、蛋白質(zhì)和氨基酸的表觀消化率分別為68.74%、74.51%和40.60%—83.07%, 稍低于大口黑鱸。大口黑鱸對(duì)黃粉蟲粉的利用率高于花鱸, 可能有兩方面原因。一方面本實(shí)驗(yàn)所使用的黃粉蟲粉是經(jīng)過(guò)酶解發(fā)酵的[40,41], 可被水生動(dòng)物更好地吸收利用。另一方面黃粉蟲粉經(jīng)酶解發(fā)酵后, 甲殼素含量可能降低了。以往的研究表明甲殼素含量高可能會(huì)阻礙其他營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)(尤其是脂肪)的消化吸收[42,43]。黃粉蟲粉的含硫氨基酸較低[44,45], 且在黃粉蟲粉對(duì)凡納濱對(duì)蝦的研究中發(fā)現(xiàn)蛋氨酸是黃粉蟲粉的第一限制性氨基酸[43]。經(jīng)工藝改良后生產(chǎn)的黃粉蟲粉氨基酸譜中蛋氨酸的含量水平為1.59%, 高于黃顙魚[19]和花鱸[39]實(shí)驗(yàn)中黃粉蟲粉蛋氨酸的含量水平(1.03%和1.28%), 且接近或高于魚粉蛋氨酸的含量水平[19,24,27,28,32]。因此, 黃粉蟲粉可在大口黑鱸配合飼料中使用。

3.3 酶解大豆的表觀消化率

豆粕是大豆提取豆油后得到的一種副產(chǎn)物[46],酶解大豆是將大豆進(jìn)行預(yù)處理后, 利用現(xiàn)代生物技術(shù)將大豆通過(guò)蛋白酶酶解降解為可溶性蛋白和小分子多肽的混合物。大口黑鱸[26]、大黃魚[21]、青魚[24]和吉富羅非魚[25]等對(duì)豆粕干物質(zhì)、蛋白質(zhì)、和脂肪的表觀消化率分別為68.28%、80.12%和81.18%; 68.20%、84.50%和90%; 78.68%、93.49和97.38%; 71.34%、88.70%和97.49%。在本實(shí)驗(yàn)中大口黑鱸對(duì)酶解大豆的干物質(zhì)、蛋白質(zhì)和脂肪的表觀消化率為79.76%、81.15%和88.95%。相較于普通豆粕干物質(zhì)的表觀消化率, 酶解大豆干物質(zhì)的表觀消化率更高。干物質(zhì)的消化率反映了魚類對(duì)飼料原料整體的消化水平, 是評(píng)判飼料原料可消化物質(zhì)的指標(biāo), 與粗纖維、灰分含量以及蛋白質(zhì)、脂肪、碳水化合物等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收密切相關(guān)[23,47]。因此, 與單一營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化率相比, 干物質(zhì)消化率可以更好地估計(jì)飼料中不可消化物質(zhì)的數(shù)量[48]。這說(shuō)明本研究酶解大豆中不可消化的物質(zhì)數(shù)量較少, 可能與陳創(chuàng)前等[15]發(fā)現(xiàn), 經(jīng)過(guò)酶處理后的豆粕不但有效地降低了豆粕中抗?fàn)I養(yǎng)因子和大分子蛋白的含量, 而且提高了豆粕中的多肽、游離氨基酸的水平有關(guān)。Cervantes-Pahm等[49]也表明經(jīng)過(guò)酶處理得到的酶解大豆和經(jīng)過(guò)高溫、膨化等加工方法得到的豆粕相比, 避免了因高溫過(guò)度引起的美拉德反應(yīng)造成的對(duì)豆粕中氨基酸的破壞, 從而使酶解大豆的抗?fàn)I養(yǎng)因子含量顯著低于常規(guī)豆粕。本實(shí)驗(yàn)酶解大豆水解氨基酸總的表觀消化率為87.19%, 在必需氨基酸中, 組氨酸和精氨酸的表觀消化率最高分別為91.51%和91.60%, 蛋氨酸的表觀消化率較低為79.48%。與此結(jié)果類似, 在鳙(Aristichthys nobilis)[32]和花鱸[39]實(shí)驗(yàn)的豆粕和大豆?jié)饪s蛋白中也出現(xiàn)蛋氨酸的表觀消化率比組氨酸和精氨酸的表觀消化率低的情況。

3.4 棉籽濃縮蛋白的表觀消化率

棉籽濃縮蛋白是經(jīng)過(guò)萃取提油和脫酚后的產(chǎn)物[1]。目前, 棉籽濃縮蛋白在水產(chǎn)動(dòng)物方面的應(yīng)用鮮有報(bào)道。吉富羅非魚[25]、團(tuán)頭魴[28]、青魚[24]、花鱸[39]、麥瑞加拉鯪[23]和鳙[32]等對(duì)棉粕或脫酚棉籽蛋白干物質(zhì)的表觀消化率在45.44%—81.20%。與以上結(jié)果不同, 大口黑鱸對(duì)棉籽濃縮蛋白干物質(zhì)的表觀消化率僅為37.27%, 原因可能與實(shí)驗(yàn)用魚規(guī)格過(guò)小有關(guān)(19.28 g), 特小規(guī)格大口黑鱸消化系統(tǒng)尚未完善, 對(duì)棉籽濃縮蛋白消化吸收能力較差造成的, 建議后續(xù)還需繼續(xù)研究不同生長(zhǎng)階段下大口黑鱸對(duì)棉籽濃縮蛋白的消化率實(shí)驗(yàn), 同時(shí)尚需觀察腸道排空時(shí)間的差異, 驗(yàn)證不同蛋白源在大口黑鱸消化道中的停留時(shí)間是否是其對(duì)干物質(zhì)消化率產(chǎn)生差異的原因。本實(shí)驗(yàn)中大口黑鱸對(duì)棉籽濃縮蛋白的氨基酸表觀消化率結(jié)果(56.59%—82.69%)與花鱸[39]的結(jié)果(67.41%—91.97%)相對(duì)一致。棉籽濃縮蛋白中低賴氨酸含量和高精氨酸含量可能是造成棉籽濃縮蛋白氨基酸表觀消化率低于本研究中其他幾種非糧蛋白源的原因, 過(guò)多的精氨酸會(huì)限制賴氨酸的消化利用[50]。將棉籽濃縮蛋白應(yīng)用到水產(chǎn)飼料時(shí), 需注意要避開精氨酸特別高的原料。

綜上所述, 根據(jù)表觀消化率數(shù)據(jù), 從可靠供應(yīng)商處獲得的乙醇梭菌蛋白、莢膜甲基球菌蛋白、小球藻、酶解大豆和黃粉蟲粉是大口黑鱸比較理想的蛋白質(zhì)來(lái)源, 可作為大口黑鱸飼料中替代魚粉的候選物。這些數(shù)據(jù)將有助于為大口黑鱸制定經(jīng)濟(jì)高效的飼料配方。此外, 應(yīng)進(jìn)行比較喂養(yǎng)實(shí)驗(yàn),以估計(jì)這些成分在大口黑鱸飼料中的最佳使用量。