妊娠期高血壓疾病患者血清硒及內(nèi)皮祖細胞檢測的意義及與妊娠結(jié)局的關(guān)系

李 麗,張艷賞,鄭 雅

(河北省人民醫(yī)院,河北 石家莊 050051)

妊娠期高血壓疾病(hypertensive disorder complicating pregnancy，HDCP)是妊娠20周后常見的并發(fā)癥之一，孕婦臨床表現(xiàn)為頭痛、頭暈、血壓升高、蛋白尿、昏迷、抽搐等，對孕婦和胎兒造成不利影響。HDCP的發(fā)病可能與遺傳、免疫、營養(yǎng)成分缺乏、胎盤缺氧缺血、氧化應(yīng)激等因素有關(guān)[1]，HDCP孕婦一般伴有血管內(nèi)皮細胞功能障礙，血管內(nèi)皮細胞損傷，而血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)有利于修復(fù)血管內(nèi)皮細胞[2]。微量元素作為人體必需的金屬元素，參與機體新陳代謝，其中微量元素硒作為谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)的活化中心，可調(diào)控GSH-Px活力，而GSH-Px又可使過氧化氫(H2O2)還原至H2O，從而清除H2O2，減輕氧化應(yīng)激所致的血管內(nèi)皮損傷，故機體微量元素含量可能與妊娠結(jié)局有關(guān)[3-4]。本研究以健康孕婦為對照，觀察了HDCP孕婦體內(nèi)微量元素硒及VEGF、外周血內(nèi)皮祖細胞變化情況，分析了這些指標與不良妊娠結(jié)局的關(guān)系，旨在為臨床早期診療HDCP及預(yù)測妊娠結(jié)局提供參考。

1 資料與方法

1.1納入和排除標準

1.1.1HDCP孕婦 納入標準：①符合HDCP診斷標準；②無語言溝通障礙；③臨床資料完整。排除標準：①具有高血壓、糖尿病等疾病史者；②嚴重的心肝腎功能障礙者；③甲狀腺功能亢進者；④伴有免疫系統(tǒng)、血液系統(tǒng)疾病者。

1.1.2正常妊娠孕婦 納入標準：①無飲酒、服藥及長期吸煙史；②無肝、心、腎等重要臟器功能障礙；③無自身免疫系統(tǒng)疾病及家族遺傳史；④無陰道出血、胎盤前置及早剝等并發(fā)癥；⑤近期無急慢性感染病史；⑥無高血壓、糖尿病、蛋白尿。

1.2一般資料 選取2016年10月—2018年10月在河北省人民醫(yī)院產(chǎn)科門診就診的HDCP孕婦60例為HDCP組，另取同期就診的正常妊娠孕婦60例為正常組，2組孕婦孕周、年齡、孕次及BMI比較差異均無統(tǒng)計學意義(P均>0.05)。見表1。本研究經(jīng)河北省人民醫(yī)院倫理委員會批準后開展(K-2019-289)。

表1 2組孕婦孕周、孕齡、孕次及BMI比較[M(P25，P75)]

1.3研究方法 比較2組孕婦血清硒、VEGF水平及外周血內(nèi)皮祖細胞百分比和不良妊娠結(jié)局，Logistic回歸分析血清硒、VEGF水平及外周血內(nèi)皮祖細胞百分比與不良妊娠結(jié)局(包括胎膜早破、產(chǎn)后出血、產(chǎn)褥感染、胎兒窘迫、巨大兒、早產(chǎn)兒)的關(guān)系。

1.3.1血清硒、VEGF水平檢測方法 于孕32～33周采集2組孕婦外周靜脈血，采用電解質(zhì)分析儀測定血清硒離子水平，采用ELISA法檢測血清 VEGF 水平(試劑盒購自美國 Abcam 公司)，操作按照說明書進行。

1.3.2外周血內(nèi)皮祖細胞百分比檢測方法 于孕32～33周采集2組孕婦外周靜脈血10 mL，用肝素抗凝、PBS 緩沖液稀釋后，將稀釋液按照1∶2 比例均勻鋪到淋巴細胞分離液上，經(jīng)離心、PBS 洗滌、再次離心去上清后，用 EGM-2MV 培養(yǎng)基重懸細胞，然后放入培養(yǎng)瓶中常規(guī)培養(yǎng)，培養(yǎng)鑒定分化正常后，分離靶標細胞，流式細胞儀檢測。

1.4統(tǒng)計學方法 采用SPSS 25.0統(tǒng)計軟件對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析，計量資料均呈非正態(tài)分布，采用中位數(shù)及四分位數(shù)[M(P25，P75)]表示，組間比較采用非參數(shù)檢驗；計數(shù)資料采用頻數(shù)及百分比表示,組間比較采用連續(xù)性校正卡方檢驗或費希爾確切概率法。相關(guān)性分析采用Logistic回歸分析。P<0.05表示差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié) 果

2.12組孕婦血清硒、VEGF水平及外周血內(nèi)皮祖細胞百分比比較 HDCP組孕婦血清硒、VEGF水平及外周血內(nèi)皮祖細胞百分比均明顯低于正常組，差異均有統(tǒng)計學意義(P均<0.05)。見表2。

表2 2組孕婦血清硒、VEGF水平及外周血內(nèi)皮祖細胞百分比比較[M(P25，P75)]

2.22組孕婦不良妊娠結(jié)局比較 HDCP組胎兒窘迫及早產(chǎn)發(fā)生率均明顯高于正常組(P均<0.05)，2組產(chǎn)后感染、產(chǎn)后出血、胎膜早破發(fā)生率比較差異均無統(tǒng)計學意義(P均>0.05)。見表3。

表3 2組孕婦不良妊娠結(jié)局比較 例(%)

2.3血清硒、VEGF水平及外周血內(nèi)皮祖細胞百分比與妊娠結(jié)局的相關(guān)性 Logistic回歸分析顯示，血清硒水平與胎兒窘迫、早產(chǎn)的發(fā)生無明顯相關(guān)性(P均>0.05)，血清VEGF水平是發(fā)生胎兒窘迫和早產(chǎn)的保護因素(OR分別為0.976和0.974，P均<0.05)；外周血內(nèi)皮祖細胞百分比是發(fā)生胎兒窘迫的保護因素(OR為0.807,P<0.05),與早產(chǎn)的發(fā)生無明顯相關(guān)性(P>0.05)。見表4。

表4 血清硒、VEGF水平及外周血內(nèi)皮祖細胞百分比與不良妊娠結(jié)局的Logistic回歸分析相關(guān)性

3 討 論

HDCP發(fā)病機制尚未完全明確，病因?qū)W較多，其中內(nèi)皮細胞損傷所致的血管舒縮功能異常是其發(fā)病機制之一[5]。一般情況下，血管收縮異常會引起組織缺氧缺血，導(dǎo)致內(nèi)皮損傷，血管內(nèi)皮細胞會分泌一系列細胞因子，促進內(nèi)皮祖細胞動員，發(fā)揮修復(fù)內(nèi)皮作用。VEGF是一種功能性糖蛋白，能促進血管內(nèi)皮細胞增殖、遷移，可以顯著提高血液循環(huán)中大分子的滲透性，直接或間接誘導(dǎo)新血管形成和提高血管通透性[6-7]。Adu-Bonsaffoh等[8]研究結(jié)果顯示子癇前期孕婦血清 VEGF 水平明顯低于正常妊娠孕婦。邊英新等[9]研究發(fā)現(xiàn)，妊娠高血壓綜合征孕婦循環(huán)內(nèi)皮祖細胞數(shù)量較正常孕婦明顯減少。Dymara-Konopka等[10]研究發(fā)現(xiàn)VEGF的高表達能促進內(nèi)皮祖細胞遷移，在血管內(nèi)皮細胞的修復(fù)中與內(nèi)皮祖細胞共同發(fā)揮作用。本研究結(jié)果顯示，HDCP組孕婦血清VEGF水平及外周血內(nèi)皮祖細胞百分比均明顯低于正常組。這說明血清VEGF水平、外周血內(nèi)皮祖細胞數(shù)量與 HDCP有關(guān)，二者降低導(dǎo)致受損血管內(nèi)皮無法及時修復(fù)，從而促進HDCP的進一步發(fā)展，但HDCP孕婦血清VEGF 水平降低及外周血內(nèi)皮祖細胞數(shù)量減少的原因還不完全清楚。

隨著對HDCP的不斷深入研究，發(fā)現(xiàn)孕婦體內(nèi)微量元素水平異常在HDCP的發(fā)生發(fā)展過程中起到關(guān)鍵作用[11]。相關(guān)研究報道，微量元素鋅可通過調(diào)控核因子κB(NF-κB)信號通路抑制炎癥反應(yīng)[12]；銅可參與鐵代謝與造血等生理過程，銅藍蛋白對胎兒的生長發(fā)育有保護作用，當孕婦體內(nèi)銅含量降低時，會引起細胞呼吸障礙、結(jié)締組織功能異常等，對胎盤厚度、彈性和韌性造成直接影響[13]。硒能夠通過多種細胞信號通路調(diào)節(jié)機體免疫功能，其參與超氧化物酶、谷胱甘肽等Ⅱ相解毒酶的合成，可提高超氧化物歧化酶活性，有利于清除自由基，減輕H2O2過量聚集所致的氧化應(yīng)激損傷，改善血管內(nèi)皮功能；可提升外周血內(nèi)皮祖細胞數(shù)量，促進受損細胞內(nèi)皮修復(fù)、新生[14]；還可以減輕缺血再灌注導(dǎo)致的水腫，抑制腫瘤壞死因子釋放，減少中性粒細胞浸潤，抑制炎癥反應(yīng)[15]。劉洋等[16]報道，妊娠期高血壓疾病孕婦存在微量元素缺乏及機體氧化還原失衡現(xiàn)象。國外的相關(guān)研究也證實，母體硒水平與子癇前期發(fā)病關(guān)系密切，硒缺乏會使GSH-Px合成減少，機體抗氧化能力下降，引起血管內(nèi)皮細胞氧化損傷，適當補充硒元素，可以增加內(nèi)皮祖細胞的活性，有利于內(nèi)皮細胞修復(fù)[17-18]。本研究結(jié)果顯示，HDCP組孕婦血清硒水平明顯低于正常組，說明微量元素硒水平與HDCP發(fā)生有關(guān)。

本研究進一步分析了血清硒、VEGF水平及外周血內(nèi)皮祖細胞百分比與不良妊娠結(jié)局的關(guān)系，結(jié)果顯示VEGF水平是發(fā)生胎兒窘迫和早產(chǎn)的保護因素，外周血內(nèi)皮祖細胞百分比是發(fā)生胎兒窘迫的保護因素，提示提高HDCP孕婦血清VEGF水平及外周血內(nèi)皮祖細胞百分比可改善妊娠結(jié)局；而血清硒水平與胎兒窘迫、早產(chǎn)的發(fā)生無明顯相關(guān)性，其原因尚不明確，可能與樣本數(shù)較少有關(guān)。

綜上所述，HDCP孕婦血清硒、VEGF水平及外周血內(nèi)皮祖細胞百分比明顯低于正常妊娠孕婦，血清VEGF水平和外周血內(nèi)皮祖細胞百分比與不良妊娠結(jié)局有相關(guān)性，這些指標的監(jiān)測可輔助HDCP的防治，可以預(yù)測不良妊娠結(jié)局發(fā)生情況，值得進一步深入探究。

利益沖突：所有作者均聲明不存在利益沖突。