UF-5000 聯(lián)合UC-3500 檢測尿液有形成分應(yīng)用價值

曹圓圓 魏秀雲(yún)

尿沉渣是尿有形成分經(jīng)離心沉淀。在顯微鏡下見到的尿有形成分，包括尿紅細(xì)胞、白細(xì)胞、管型、結(jié)晶、上皮細(xì)胞等。多以尿干化學(xué)法進行檢驗，結(jié)果尚可，但誤差較大，容易出現(xiàn)誤診、錯診問題[1]。尿沉渣檢查可以彌補尿理化檢查不足造成的漏診，對輔助泌尿系統(tǒng)疾病的診斷，尤其對腎臟疾病診斷與鑒別起著重要作用，是腎臟疾病實驗診斷的最常用手段[2]。目前，尿液有形成分分析方法主要有光學(xué)顯微鏡人工鏡檢以及各種自動化分析儀。而尿液中紅細(xì)胞的檢驗，有助于了解泌尿系統(tǒng)各部位的病理變化，對泌尿系統(tǒng)疾病的診斷、鑒別診斷和預(yù)后判斷等有重要意義。實驗室對尿紅細(xì)胞的檢查常聯(lián)合尿干化學(xué)和沉渣進行分析，二者之間相輔相成、互相印證[3]。但由于現(xiàn)有的常規(guī)檢查方法均存在一定的局限性，因此，我們對UF-5000 和UC-3500 檢測尿紅細(xì)胞和白細(xì)胞的結(jié)果與顯微鏡的檢測結(jié)果進行比較，并對二者聯(lián)合應(yīng)用的價值進行探討，現(xiàn)報道如下。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本來源 用一次性潔凈塑料杯采集杭州市腫瘤醫(yī)院2021 年1 月至2021 年9 月門診、住院患者隨機新鮮中段尿液樣本共2870 份，男1321 例，女1549 例，年齡2～80 歲。樣本采集后立即送檢，于2 h 內(nèi)完成檢測。

1.2 儀器與試劑 SYSME 公司UF-5000 全自動尿有形成分分析儀、UC-3500 尿干化學(xué)分析儀及配套試劑、質(zhì)控品及試紙條。OLYMPUS CX21 光學(xué)顯微鏡、離心機、尿液刻度離心管。

1.3 檢測方法 檢測前對UF-5000 和UC-3500 進行質(zhì)控測試，確保質(zhì)控通過后再進行標(biāo)本檢測。所有送檢標(biāo)本均使用一次性清潔尿杯收集晨尿20 mL，分成兩組，每份10 mL 尿液標(biāo)本：一組立即以UC-3500干化學(xué)和UF-5000 尿有形成分檢測，儀器檢測嚴(yán)格按照儀器SOP 進行操作。另一組將尿液進行均勻混合，以轉(zhuǎn)速1500 r/min，離心5 min，將清液去除后留取0.2 mL 尿沉渣進行混勻，取20 μL 滴入載玻片內(nèi)。由2 名有經(jīng)驗的檢驗人員用OLYMPUS CX21 光學(xué)顯微鏡進行鏡檢，兩次結(jié)果取平均值為最終結(jié)果。檢測完畢后，將檢測結(jié)果進行詳細(xì)記錄。儀器和顯微鏡檢查操作人員均為固定的檢驗人員。

1.4 結(jié)果判斷 UC-3500 干化學(xué)法檢測結(jié)果以±、＋、＋＋、＋＋＋為陽性。UF-5000 以紅細(xì)胞>32.6 個/μL 為陽性，白細(xì)胞>33.8 個/μL 為陽性。顯微鏡鏡檢紅細(xì)胞>3 個/HP 為陽性；白細(xì)胞＞5 個/HP 為陽性。聯(lián)合檢測陽性界定標(biāo)準(zhǔn)：UF-5000 或UC-3500 任一檢測結(jié)果為陽性。

1.5 統(tǒng)計學(xué)方法 應(yīng)用SPSS 21.0 統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計分析。計數(shù)資料以率（%）表示，組間差異采用配對χ2檢驗。使用受試者工作特征（ROC）曲線分析UF-5000、UC-3500 的診斷價值。P<0.05 表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 UF-5000 與顯微鏡檢測尿紅細(xì)胞結(jié)果比較2870 份尿液標(biāo)本中，UF-5000 與顯微鏡檢測尿液紅細(xì)胞結(jié)果比較，假陽性率4.56%，假陰性率32.46%。UF-5000 檢測尿液紅細(xì)胞陽性數(shù)517 例（18.01%），陰性2353 例（81.99%）；顯微鏡檢測尿液紅細(xì)胞陽613 例（21.36%），陰性2257 例（78.64%）。UF-5000方法和顯微鏡檢測診斷結(jié)果一致性為89.48%（Kappa=0.668，P <0.001）；UF -5000 診斷陽性率為18.01%，明顯低于顯微鏡檢測診斷（21.36%），且差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.001）。UF-5000 方法的敏感度67.53%，特異度95.43%。ROC 曲線下面積為0.815，95%CI：0.792～0.838，P<0.001。見表1、圖1。

2.2 UC-3500 尿干化學(xué)分析儀與顯微鏡檢測尿紅細(xì)胞結(jié)果比較 2870 份尿液標(biāo)本中，UC-3500 與顯微鏡檢測尿液紅細(xì)胞結(jié)果比較假陽性率17.46%，假陰性率9.62%。UC-3500 干化學(xué)分析紅細(xì)胞陽性948例（33.03%），陰性1922 例（66.97%），顯微鏡檢測尿液紅細(xì)胞陽675 例（21.36%），陰性2195 例（78.64%）。UC-3500 方法和顯微鏡檢測診斷結(jié)果一致性為84.21%（Kappa=0.608，P<0.001）；UC-3500 診斷陽性率33.03%，明顯高于顯微鏡檢測診斷（21.36%），且差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.001）。敏感度為90.37%，特異度為82.54%，ROC 曲線下面積為0.865，95%CI：0.865～0.893，P<0.001。見表1、圖1。

2.3 UF-5000 和UC-3500 聯(lián)合檢測與顯微鏡檢測尿液紅細(xì)胞結(jié)果比較 聯(lián)合檢測紅細(xì)胞陽性數(shù)1033例（35.99%），陰性數(shù)1837 例（64.01%），與顯微鏡檢測結(jié)果比較，假陽性率19.81%，假陰性率4.4%（與單獨UF-5000 比較，P<0.001），聯(lián)合法和顯微鏡檢測診斷結(jié)果一致性為85.37%（Kappa=0.607，P<0.001）；聯(lián)合診斷陽性率35.99%，明顯高于顯微鏡檢測診斷（21.36%），差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.001）。敏感度95.59%，特異度80.19%，ROC 曲線下面積0.879，95%CI：0.865～0.893，P<0.001。見表1、圖1。

表1 UF-5000 自動化尿沉渣分析儀與顯微鏡檢測尿液紅細(xì)胞結(jié)果[例（%）]

圖1 UF-5000、UC-3500 分析儀單獨及聯(lián)合檢測尿紅細(xì)胞的ROC 曲線

2.4 UF-5000 與顯微鏡檢測尿白細(xì)胞結(jié)果比較UF-5000 與顯微鏡檢測結(jié)果比較，假陽性率3.74%，假陰性率11.91%。UF-5000 檢測尿液白細(xì)胞陽性610 例（21.25%），陰性2260 例（78.75%）；顯微鏡檢測尿液白細(xì)胞陽性620 例（21.60%），陰性2250 例（78.40%）。UF-5000 方法和顯微鏡檢測診斷結(jié)果一致性為94.84%（Kappa=0.836，P<0.001）；UF-5000 診斷陽性率21.25%，與顯微鏡檢測診斷（21.60%）比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P=0.085）。敏感度88.09%，特異 度96.26%。ROC 曲線下面積為0.922，95%CI：0.906～0.938，P<0.001。見表2、圖2。

2.5 UC-3500 與顯微鏡檢測尿白細(xì)胞結(jié)果比較UC-3500 白細(xì)胞陽性523 例（18.22%），陰性2347 例（81.78%），與顯微鏡檢測結(jié)果比較，假陽性率2.51%，假陰性率21.82%。UC-3500 方法和顯微鏡檢測診斷結(jié)果一致性為93.48%（Kappa=0.793，P<0.001）；UF-3500 診斷陽性率18.22%，低于顯微鏡檢測診斷（20.77%），且差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.001）。敏感度78.18%，特異度97.47%。ROC 曲線下面積為0.878，95%CI：0.858～0.899，P<0.001。見表2、圖2。

2.6 UF-5000 和UC-3500 聯(lián)合檢測與顯微鏡檢測尿液白細(xì)胞結(jié)果比較 UF-5000 聯(lián)合UC-3500 檢測白細(xì)胞陽性699 例（24.36%），陰性2171 例（75.64%）；與顯微鏡檢測結(jié)果比較，假陽性率為7.34%，假陰性率10.74%（與單獨UC-3500 比較，P<0.001），聯(lián)合法和顯微鏡檢測診斷結(jié)果一致性為92.99%（Kappa=0.770，P<0.001）；聯(lián)合診斷陽性率24.36%，高于顯微鏡檢測診斷（22.51%），且差別有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.001）。敏感度89.26%，特異度92.66%。ROC 曲線下面積0.910，95%CI：0.894～0.925，P<0.001。見表2、圖2。

圖2 UF-5000、UC-3500 分析儀單獨及聯(lián)合檢測尿白細(xì)胞的ROC 曲線

表2 UF-5000 自動化尿沉渣分析儀與顯微鏡檢測尿液白細(xì)胞結(jié)果[例（%）]

3 討論

尿常規(guī)檢查是一項用來進行多種疾病初步檢查的常見檢查方法，傳統(tǒng)的檢驗方式是顯微鏡檢測法。聯(lián)檢驗技術(shù)的發(fā)展，臨床上出現(xiàn)了多種檢驗儀器和檢驗試劑盒，并被廣泛地應(yīng)用于尿常規(guī)檢查[4]。

在尿液分析中，尿液有形成分是重要的檢測內(nèi)容，采用自動化分析儀能有效提高工作效率，減輕工作強度。UF-5000 尿液有形成分分析儀采用熒光染色流式細(xì)胞術(shù)，針對有核和無核成分分別染色，提高了檢測正確性。鏡下血尿是一系列泌尿系病理變化的初始信號，無癥狀血尿的檢測對疾病的早期診斷十分重要[5]。UF-5000 具有以下幾點優(yōu)點：標(biāo)本不需要離心、操作簡單快速，同時樣本重復(fù)性好，在臨床上應(yīng)用廣泛。盡管尿有形成分檢測最有效的方法就是顯微鏡檢測法，其缺點是操作復(fù)雜，無法滿足臨床大量樣本的需求。但對于自動尿液分析儀的基本性能需要采用人工顯微鏡檢對其進行評估，以使自動尿液分析儀發(fā)揮最大的功效，在提高工作效率基礎(chǔ)上確保結(jié)果的正確可靠。干化學(xué)分析儀UC-3500 采用傳統(tǒng)的尿液干化學(xué)分析技術(shù)和原理，其優(yōu)點是不僅能檢測完整的紅細(xì)胞，還能檢測被破壞的紅細(xì)胞（隱血試驗），同時還可以通過白細(xì)胞酯酶間接檢測白細(xì)胞量[6-7]。然而，臨床實踐證實，干化學(xué)分析存在較高的假陽性和假陰性，其原因可能與尿液中存在不穩(wěn)定過氧化物酶、尿液被氧化劑污染、尿路感染時某些細(xì)菌產(chǎn)生過氧化物酶或尿液中存在游離的血紅蛋白或肌紅蛋白等有關(guān)[8-9]；此外，當(dāng)尿中有肌紅蛋白、氧化劑、易熱性觸酶或大量細(xì)菌時，可使干化學(xué)出現(xiàn)紅細(xì)胞假陽性；而當(dāng)尿中白細(xì)胞為非中性粒細(xì)胞時可能出現(xiàn)白細(xì)胞假陰性。

表3 UF-5000、UC-3500 分析儀檢測檢測白細(xì)胞、紅細(xì)胞的敏感度和特異度

由于尿液檢測干擾因素很多，部分臨床醫(yī)生對檢驗數(shù)據(jù)缺乏分析能力，不清楚檢測數(shù)據(jù)假陽性、假陰性問題，單純依賴檢驗數(shù)據(jù)可能會由于一個錯誤的數(shù)據(jù)而引起誤診[10-11]。假陽性率和假陰性率是評估檢驗方法或檢驗系統(tǒng)的主要指標(biāo)，分別代表誤診率和漏診率，尤其是假陰性率（漏診率）最為重要。根據(jù)ISO15189 評審要求，尿液分析假陰性率應(yīng)低于5%。本研究發(fā)現(xiàn)，當(dāng)UF-5000 和UC-3500 單獨檢測應(yīng)用時，與顯微鏡手工鏡檢法相比較，均具有較高的敏感性和檢出率，但同時均具有較高的假陰性率，總體上均高于規(guī)定的要求，但兩者假陰性率差異較大。UF-5000 檢測RBC 的假陰性率較高，達(dá)到32.5%，而UC-3500 檢測WBC 的假陰性率較高，達(dá)到21.8%；表明二者單獨檢測的漏診率均較高，一定程度不符合臨床診療的要求。當(dāng)兩者聯(lián)合檢測應(yīng)用時，紅細(xì)胞和白細(xì)胞檢測的假陰性均顯著降低，紅細(xì)胞為6.65%，白細(xì)胞為11.46%；表明聯(lián)合應(yīng)用UF-5000 和UC-3500 檢測可顯著降低漏診率。檢測符合率是評估檢測系統(tǒng)或方法整體一致性的基本指標(biāo)，整合了陽性和陰性一致性。在本研究中，UF-5000 和UC-3500 聯(lián)合檢測比單獨檢測的整體符合率略有降低，可能是聯(lián)合檢測敏感性或特異性增高而特異性或敏感性降低不一致所致，但兩者結(jié)果基本相當(dāng)，吻合率較高，提示檢測系統(tǒng)的組合模式并不明顯影響結(jié)果的正確度，表明其總體檢測效率接近。

由于假陰性率（漏診率）是臨床和實驗室重點關(guān)注的指標(biāo)，UF-5000 和UC-3500 聯(lián)合應(yīng)用不僅可顯著降低漏診率，還提高了尿液檢測的敏感性，更適用于尿液檢驗常規(guī)篩查工作，可大大地減少手工鏡檢法給檢驗工作人員帶來的工作量。盡管UF-5000 和UC-3500 聯(lián)合檢測仍不能完全達(dá)到臨床實驗室的性能要求，但在日常的工作中，我們可結(jié)合實際情況，基于聯(lián)合檢測結(jié)果制定合適的顯微鏡復(fù)檢規(guī)則，針對可疑結(jié)果使用顯微鏡對樣本進行復(fù)檢，既可以最大程度提高工作效率，更能有效降低漏診、誤診，為臨床提供更加準(zhǔn)確的診斷依據(jù)。通過檢測結(jié)果可制定合理的臨床治療方案，對預(yù)后評估具有重要參考價值，可為臨床用藥提供有效支持[12]。